文摘
大多数研究在寻常天疱疮(PV)发病机理关注其活跃的阶段,我们旨在评估血清TNF -的浓度、il - 1、il - 6在PV患者临床缓解。研究小组由19个PV患者的血清在活跃的阶段,从24例临床缓解。19日血清取自健康者作为对照组。血清il - 6浓度PV活跃和PV缓解组相比明显高于对照组。在PV的活跃阶段,患者血清il - 1和il - 6浓度之间的显著相关性被发现()。我们还发现TNF -之间的负相关水平和天疱疮抗体效价在缓解期的患者组()。我们的数据表明,il - 6和TNF -可能参与维持免疫障碍缓解阶段PV。
1。介绍
天疱疮是一种自身免疫性的疾病,特点是严重和长期的过程。根据临床情况和概要文件的循环天疱疮疾病的抗体,两种截然不同的形式是有区别的:寻常天疱疮(PV)和天疱疮foliaceus (PF)。跨膜desmosomal蛋白质:desmoglein 1 (Dsg1)和desmoglein 3 (Dsg3)天疱疮抗原目标。在PF病人血清,anti-Dsg1抗体检测在PV patients-antibodies针对Dsg3。但是,在大约50%的情况下,还anti-Dsg1抗体可能被发现。绑定的天疱疮到目标抗原的抗体会导致失败的胶粘剂desmogleins的函数,和后果破坏细胞桥粒,因此皮肤棘层松解发展(1]。尽管世界各地执行多项调查,皮肤棘层松解的确切机制尚未完全阐明。最近的研究指出在促炎细胞因子如TNF -、il - 1、il - 6强选手参与这个过程。此外,实验研究表明,协同合作天疱疮抗体与Fas-L和TNF -导致皮肤棘层松解。增加了TNF - mRNA的表达和增强血清中细胞因子水平的PV患者观察到许多作者(2- - - - - -4]。此外,实验模型表明,小鼠缺乏TNF -天疱疮受体不太敏感的被动转移后发展天疱疮抗体(2]。上面的数据至少部分解释在寻常天疱疮anti-TNF-alpha抗体治疗的治疗效果(5,6]。
尽管有广泛的研究,完成治疗的客观标准光伏到目前为止尚未定义。直接免疫荧光(DIF)测试检测体内免疫球蛋白沉积绑定在表皮的细胞间隙和间接免疫荧光法(IIF)测试表明循环免疫球蛋白在天疱疮抗体是常规的检查诊断和消极结果可能表明治疗停止。在某些情况下,然而,尽管长期治疗和缺乏临床症状,要么都免疫检查仍然是积极的,或者DIF测试是负的,但仍循环抗体检测。似乎有争议,特别是因为大多数皮肤科医生承担的滴定度之间很强的相关性天疱疮抗体和疾病活动。在PV发病机理的研究大多是集中在免疫疾病的干扰在活跃的阶段。
因此,我们的研究的目的是评估血清TNF -的浓度、il - 1、il - 6在PV患者在疾病和临床缓解的活跃阶段,评估其潜在影响的疾病。我们也评估了相关细胞因子之间的血清水平和效价pemphigu年代抗体。
2。材料和方法
19血清的研究小组由来自PV患者在疾病和24的活跃阶段血清从患者获得临床缓解。从活跃的PV患者血清收集了免疫抑制治疗前;(强的松+环磷酰胺)。19日血清来自健康主题无关,年龄和性别匹配作为控制。寻常天疱疮的诊断是根据临床和组织学和免疫学检查的结果。所有患者的血清和个人从对照组进行国际商用衬底的猴食道(Euroimmune、Lubeka、德国),使用一个标准的过程(7]。相同的血清样本检测ELISA (MESACUP Desmoglein测试Dsg1 Dsg3;MBL有限公司、日本名古屋)根据制造商的指示。ELISA指数评估高于截止时积极(Dsg 1 - 14;Dgs 3 - 7)。
所有病人的直接免疫荧光(DIF)测试显示体内免疫球蛋白和/或C3存款在表皮细胞间隙。活动阶段的疾病被认为是当所有的考试都积极、水泡和侵蚀粘膜和/或皮肤。在引入免疫抑制治疗前血清采集标本。临床缓解期被认为是当病人服用强的松(20 - 40毫克每隔一天)和环磷酰胺(50毫克每隔一天)和证明缺乏临床病变至少六个月,而DIF和IIF仍然给了积极的结果。
相同的血清样本被用来测量肿瘤坏死因子、il - 1和il - 6水平使用商用ELISA试剂盒(R & D,明尼阿波利斯,明尼苏达州,美国),根据制造商的过程。
3所示。统计分析
统计分析了使用Statistica v.0.5 GraphPad棱镜v.4.03。实验室根据Shapiro-Wilk数据不符合高斯分布测试,结果都表示为(50)中位数和四分位范围(25 th - 75)和非参数测试用来测试统计显著性。为了避免错误固有的重复应用Mann-Whitney U测试,克鲁斯卡尔-沃利斯测试是执行同时从每组试验数据的比较,并确定是否存在显著差异的中位数组分析。如果这实现了95%的意义,邓恩的多重比较后续测试被用来比较一组的试验结果。皮尔森相关或相关性研究斯皮尔曼等级相关的使用。在所有的计算,被认为是具有统计学意义。
4所示。结果
间接免疫荧光试验揭示了循环天疱疮在所有PV患者的抗体。在疾病的受试者从活跃的阶段,抗体滴度范围从接触到1:2560(1:640中值),而患者缓解期组从1:20 1:1280(平均接触)。
平均血清浓度il - 1、il - 6和TNF -在所有的检查病人展示在表1和数字1- - - - - -3。il - 1血清浓度PV患者积极缓解组没有显著不同于控制。PV缓解组的il - 1浓度高于光伏活性基团,然而,这并没有达到统计学意义。血清il - 6浓度PV活跃和PV缓解组相比明显高于对照组。il - 6水平提出了更高的活性基团中的值缓解组相比,但也没有达到统计学意义的差异。血清肿瘤坏死因子-光伏活性基团之间的水平没有显著差异,PV缓解组和控制。获得的值也没有PV活跃和PV缓解组之间不同。
之间的显著相关性患者血清il - 1和il - 6浓度呈现活跃的PV阶段被发现(见图4)。没有类似的关系观察患者在缓解期阶段的PV。我们也没有发现任何重要的血清il - 1、TNF浓度之间的相关性il - 6和TNF -在所有的研究团体。
在分析循环的效价之间的相关性天疱疮抗体和血清检测细胞因子的浓度,我们发现TNF -之间的负相关水平和缓解的病人组抗体效价。
5。讨论
寻常天疱疮是一种危及生命的疾病的自体免疫背景。过去几十年,其发病机制已被广泛研究和新的见解机制引发疾病开发和生产的抗体已被认可。尽管检测循环和体内免疫球蛋白天疱疮抗体是主要的免疫特性,指出在当前知识的参与不仅体液还在天疱疮发展细胞免疫反应。结果表明:Dsg3-specific desmoglein 3下T淋巴细胞增殖刺激释放Th2-dependent细胞因子il - 4和il - 10和演示等调节B细胞的活动能力(8,9]。虽然很明显,自身免疫反应在PV是T细胞,这些细胞的确切作用皮肤棘层松解开发尚未阐明。2是T淋巴细胞的主要催化剂之一。值的增加可溶性受体2 (sIL-2R)在天疱疮患者的血清,发现这些值与活动相关的疾病。然而,他们在水疱液浓度显著高于建议的激活T细胞在PV皮肤损伤10]。也证明,孤立的PV患者所需的诱导的T淋巴细胞组织学和免疫现象在天疱疮的动物模型11]。被动转移天疱疮抗体到无毛小鼠胸腺基因缺陷引起的表皮细胞间的空间绑定,但是泡在地下室的表皮层形成在不到20%的情况下被观察到。它是一个重要的角色的另一个证据的T淋巴细胞在皮肤棘层松解开发12]。
角化细胞刺激血清从PV患者提出更高的mRNA表达il - 1肿瘤坏死因子-,尿激酶纤溶酶原激活物(uPA)和发达的皮肤棘层松解。当这些蛋白质抗体被用于这些实验,作者观察到显著抑制皮肤棘层松解(2,13]。Alecu et al。14)发现ICAM-1水平上升,TNF -,血清中il - 6和泡流体从PV患者。上面的结果似乎至少部分确认这些蛋白质在光伏发展的作用。D 'Auria等人也获得了类似的调查结果和Lopez-Robles et al。3,4)显示增加血清水平和原位表达il - 6和TNF -。在实验模型,它也表明,il - 1和肿瘤坏死因子-能够激活C3 mRNA在角化细胞文化刺激天疱疮从PV患者获得的抗体。这一现象强烈抑制后续孵化后的角化细胞anti-TNF -和anti-IL1抗体(15]。
D 'Auria et al。3)也显示这些细胞因子阳性血清浓度之间的相关性和皮肤损伤。在我们的研究中,我们试图评估TNF -、il - 1和il - 6 PV患者的血清浓度在主动阶段的疾病或在临床缓解。在患者疾病的活跃阶段,只有血清il - 6浓度明显高于对照组相比。il - 1、TNF -血清水平没有差异病人在活动阶段和控制。在患者临床缓解,我们发现类似的结果。只有血清il - 6水平更高,而其余的检测细胞因子提出了类似的值来控制。缓解的il - 6水平下降阶段的PV活跃的患者相比(统计微不足道)可能导致的免疫抑制治疗管理。在许多报道,指出,强的松和环磷酰胺影响促炎细胞因子的水平,包括il - 6水平(16,17]。我们的结果证实il - 6在PV发病机理中的作用,不仅在疾病的初期发展而且病理生理过程的维护。在大多数发表的研究,作者发现肿瘤坏死因子水平的增加在天疱疮的活跃的阶段4]。肿瘤坏死因子-是一种细胞因子参与大多数的炎症过程,及其增加活动中发现许多皮肤病包括牛皮癣,系统性红斑狼疮,系统性硬化症(18- - - - - -20.]。肿瘤坏死因子-不同刺激下释放的细胞包括细菌感染或紫外线辐射。它在许多生物过程中发挥作用,提高吞噬作用,细胞毒性,调节活动的其他细胞因子il - 1和il - 4 (21]。我们没有确认TNF -浓度增加PV患者相比,控制。然而,它的负相关天疱疮抗体效价和相对增加的值相比,控制(无统计学意义)可能表明其参与维护病理机制。免疫抑制剂治疗足以减少皮肤损伤形成和减少抗体生产,然而它可能并不影响干扰细胞反应。这些数据也部分解释为什么anti-TNF -耐火PV患者的治疗是成功的。
只有数据稀缺的PV患者血清细胞因子的水平临床缓解。Bhol et al。22显示显著降低il - 1和il - 1同时增加血清的IL-1R水平的患者在临床缓解。静脉注射免疫球蛋白(丙种球蛋白)治疗引起类似的效果从而表明其疗效可能取决于调制摘要意思亚型及其受体水平。加勒et al。23)和Keskin et al。17)还透露,丙种球蛋白产生anti-IL-6属性因此在某种程度上,解释机制的PV患者的活动。血清中il - 10浓度也显著降低临床缓解的病人相比,积极的和它的值与天疱疮抗体滴度(24]。我们所知,没有数据在PV患者血清il - 6浓度在临床缓解。我们的数据表明,il - 6的作用在缓解免疫干扰维护阶段的PV,即在病人谁,尽管缺乏临床病变,抗体仍生产和具有角质细胞表面抗原结合的能力。我们相信,这项观察表明临床anti-IL-6抗体在耐火材料中的应用例寻常天疱疮。
确认
这项研究是由波兰罗兹大学科学委员会和医学研究项目。2 p05b07727也没有。503-1019-1。