摘要据/h4>
客观的据/i>.先天免疫细胞的激活与心脏外科手术密不可分。本研究的目的是评估动力学,以表达FC,FC的FC部分据svg height="9.9375" id="M2" style="vertical-align:-2.34499pt;width:8.0625px;" version="1.1" viewbox="0 0 8.0625 9.9375" width="8.0625" xmlns="http://www.w3.org/2000/svg">
1.介绍据/h4>
在心脏手术过程中,会诱发许多可能产生炎症反应的事件。其中,手术损伤、对心脏的机械操作、血液成分与体外循环人工表面的接触、短暂内毒素血症和心脏和肺的缺血-再灌注损伤的结合都是相关的[据a href="#B1">1据/a>].炎症反应是多种体液因子和炎症细胞底物复杂相互作用的结果。在参与这一过程的细胞中,特别的作用是先天免疫单核细胞-巨噬细胞和粒细胞。单核-巨噬细胞活化后是多能促炎细胞因子最丰富的来源,活化的粒细胞通过白细胞表面的粘附分子与炎症内皮细胞腔面表达的相应受体的逐步相互作用被招募到组织中[据a href="#B2">2据/a>].持续持续的努力,鉴定各种刺激患者患者的血液中的活化的单核细胞和中性粒细胞,以鉴定患者患者患者,这些炎症患者可能与多个器官失败综合征(MOF)或其有关牵引这种炎症反应的致病剂,例如细菌感染[据a href="#B3">3.据/a>].据/p>
通过各种生理和实验刺激激活骨髓细胞伴随着主要与脱粒相关的多种表面变化。因此,活性血液髓样细胞通常上调趋化性受体的表面表达,补体受体型3(CD11b / CD18),并滴下脂多石酶(LPS)受体CD14,低亲和力Fc据span class="inline" id="">RIII或CD16受体,粘附受体CD44和CD62L [据a href="#B4">4.据/a>].据/p>
FC.据span class="inline" id="">受体,足球俱乐部据span class="inline" id="">RI (CD64)是IgG1和IgG3亚类免疫球蛋白的高亲和力受体。FC.据span class="inline" id="">RI在单核细胞和巨噬细胞上呈高密度组构表达,在嗜酸性粒细胞上表达较少,但在静息中性粒细胞上表达极低。据/p>
许多物质外源性和内源性起源迅速上调FC据span class="inline" id="">中性粒细胞表面RI表达[据a href="#B5">5.据/a>].微生物细胞壁组分如LPS,内源补体分裂产品和细胞因子,如IFN据span class="inline" id="">和tnfα是一些活化剂。FC的表达据span class="inline" id="">通过免疫荧光和流式细胞术确定RI。新的诊断套件Leuko64的引入使标准化和定量方法能够确定FC据span class="inline" id="">在免疫细胞上的表达。据/p>
血红蛋白清道夫受体CD163是一种B族富半胱氨酸清道夫受体,仅由单核细胞-巨噬细胞系细胞表达。这种糖蛋白的特征是血红蛋白的清道夫受体,介导血红蛋白-触珠蛋白复合物的内吞作用。先前的研究间接地将CD163清清剂受体与抗炎现象联系起来[据a href="#B6">6.据/a>].高CD163表达与单核细胞和巨噬细胞的MO2抗炎特性相关[据a href="#B7">7.据/a>].据/p>
本研究的目的是遵循粒细胞活化标志物FC表达的变化据span class="inline" id="">在心脏外科手术中,无论是使用体外循环(“泵上”),还是在“泵下”手术中对跳动的心脏进行手术,以及在术后期间使用定量流式细胞术的患者中,RI和抗炎CD163清除受体。据/p>
2.病人据/h4>
40例,男性31例,平均年龄据svg height="9.9375" id="M8" style="vertical-align:-2.34499pt;width:8.0625px;" version="1.1" viewbox="0 0 8.0625 9.9375" width="8.0625" xmlns="http://www.w3.org/2000/svg">
两组患者在年龄、术前左室射血分数(“泵入”患者中位数为0.65,“非泵入”患者中位数为0.65)和冠状动脉吻合次数(“泵入”患者中位数为2.0,“非泵入”患者中位数为2.0)方面具有相似性。该研究方案得到了Hradec Králové大学医院伦理委员会的批准。所有的参与者都被口头和书面详细地告知了研究的目的。他们可以自由提问。有一个人拒绝参加,原因他不愿透露。所有受试者已给予书面知情同意。据/p>
体外循环,“非泵”技术和麻醉管理最近已在其他地方详细描述[据a href="#B8">8.据/a>].据/p>
3.血液取样据/h4>
来自前臂静脉的外周静脉血在手术室和重症监护病房被抽出。标本采集于肝素化管中。不。36884由Becton Dickinson制造。据/p>
在“泵”和“泵”患者中,在以下时间点撤回血液:据/p>
(1)据/span>麻醉的介绍,在两组中都代表随后测量的所有参数的基线或参考值,据/span>(2)据/span>操作终止后,据/span>(3)据/span>术后第一天,据/span>(4)据/span>第三天,据/span>(5)据/span>术后第七天。据/span>从“泵内”患者中采集额外样本:据/p>
(1)据/span>在主动脉交叉夹紧之前,据/span>(1 b)据/span>在主动脉的交叉夹具释放后,据/span>(1c)据/span>CPB终止后。据/span> Leuko64试剂盒由Trillium Diagnostics, LLC, (据a href="http://www.trilliumdx.com" target="_blank">www.trilliumdx.com.据/a>检测CD64和CD163在外周血白细胞中的表达。Leuko64试剂盒由两种特异性CD64单克隆抗体(克隆22和32.2,均与FITC偶联)和CD163单克隆抗体(克隆Mac2-148,藻红蛋白偶联物)和一种荧光珠悬浮液,用于仪器校准和标准化人血液中白细胞CD64和CD163的表达。根据生产厂家提供的说明书进行测定。简单地说,50微升血液和Leuko64单克隆鸡尾酒试剂孵育10分钟,加入红细胞裂解缓冲液并再孵育15分钟,在流式细胞分析前加入5微升珠悬液。采用FACSCalibur流式细胞仪(BD Biosciences, San Jose, california, USA),使用CELLQuest软件测量结果。listmode数据采用Leuko64软件(Trillium Diag.)进行分析。结果用Leuko64软件提供的CD64和CD163在粒细胞和单核细胞中表达阳性的指标来表达。据/p>
我们分别比较两组患者(“泵上”和“非泵下”)CD64和CD163表达强度的变化。麻醉开始时采集的样本作为CD64和CD163的参考或基线表达。我们还评估了“关泵”和“开泵”患者之间的差异。据/p>
数据采用双向方差分析进行重复测量,采用Fisher检验进行多重比较。为排除两组不同年龄、性别表现的混杂效应,采用非配对t检验和卡方检验。一个概率(据i>P.据/i>)值< .05被认为是显著的。采用Statistica 5.5软件(Statsoft, oklahoma, USA)进行统计学分析。据/p>
我们在心脏手术患者的免疫细胞上发现了CD64和CD163分子表达的大量动态变化。这些变化分别表现为单核细胞和粒细胞的CD64和CD163指标的变化。以术前水平作为参考点。在心脏手术期间,“泵上”患者单核细胞CD64表达无显著变化(数据未显示)。从术后第1天到第7天,“泵入”和“非泵入”患者单核细胞CD64指数均显著升高(据i>P.据/i>< . 01)。“泵入”与“泵入”患者单核细胞CD64指数比较,差异无统计学意义(据i>P.据/i><.587)在术后和术后期间(图据a href="//www.newsama.com/journals/mi/2008/235461/fig1/" target="_blank">1据/a>).在我们的心脏外科患者中也发现了类似的单核细胞CD163指数,但有以下例外。单核细胞CD163指数,与单核细胞CD64指数相比,显示出显著差异作为泵状态的函数。在术后第一天,“泵入”患者单核细胞CD163指数比“非泵入”患者显著增加(据i>P.据/i><.001)(图据a href="//www.newsama.com/journals/mi/2008/235461/fig2/" target="_blank">2据/a>).与基线表达相比,“泵”和“泵”和“泵”患者的单核细胞CD163指数的显着增加仅在术后第1天和第3天(据i>P.据/i>< . 01)。据/p>
4.材料和方法据/h4>
5.统计分析据/h4>
6.结果据/h4>