细胞外锌排除在其凋亡诱导活性中的重组人类钙蛋白酶（MRP8和MRP14）的细胞外锌排除含义

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背景：CalProtectin是一种钙 - 结合和锌结合蛋白质复合物，其在中性粒细胞的细胞溶胶中丰富。该因子由8和14个KDA亚基组成，该亚基也被称为迁移抑制因子相关蛋白MRP8和MRP14。我们以前报道，从炎症中性粒细胞纯化的大鼠CalProtectin以锌可逆方式诱导各种肿瘤细胞或正常成纤维细胞的凋亡。目标：本研究旨在阐明哪种亚基对凋亡诱导活性负责，并探讨锌可逆凋亡诱导的机制。方法：检查重组人MRP8（RHMRP8）和重组人MRP14（RHMRP14）的凋亡诱导活性对EL-4淋巴瘤细胞进行检查体外。为了确定CalProtectin的锌剥夺是否对细胞毒性是必不可少的，在由低分子量切断透析膜中排除在因子和细胞之间的物理接触的条件下测试CalProtectin的活性。结果：首先在标准培养基中以10μm检测rHMRP14对EL-4细胞的细胞毒性，而RHMRP8仅引起40μm的边际细胞毒性。两种蛋白质的混合物显示出更高的比活性（在5μm处发出细胞毒性）。当细胞在二价阳离子耗尽培养基中培养时，每个剂量 - 响应曲线被移至约4倍的较低浓度范围。发现CalProtectin即使当复合物和靶细胞用透析膜分离时，也发现细胞死亡。膜不透水锌螯合剂，二亚乙基三胺五乙酸（DTPA），也诱导靶细胞凋亡在类似的时间过程中作为CalProtectin。此外，通过锌离子的存在完全抑制CalProtectin和DTPA的活性。结论：这些数据表明，CalProtectin具有更高的特异性活性以诱导细胞凋亡，而不是单个亚基，并且该机制是从靶细胞中排除锌。

细胞外锌排除在其凋亡诱导活性中的重组人类钙蛋白酶（MRP8和MRP14）的细胞外锌排除含义

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