毒理学杂志/2014年/文章/标签2

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体外记者测定用于筛选破坏雄激素信号的化学品

表2.

常用的报告基因及其特征。

S.号码 记者基因 功能 好处 缺点

1 - 高烷基酶(lacz) 第一次报道1980年。在大肠杆菌,将乳糖水解至葡萄糖和半乳糖。 可以在许多基板上行事。 用于测定和细胞裂解的昂贵且潜在的有毒化学品。对于实时检测系统无用。

2 荧光素酶(真核或细菌) 在生物学上产生发光的蛋白质。可以是真核或细菌(LUX)。萤火虫荧光素酶是最常见的报告基因之一。 高灵敏度,Luc蛋白与发光输出的紧密耦合,蛋白质不需要发生后期改性。 萤火虫荧光素酶需要添加昂贵的衬底荧光素以监测活性。用于细菌荧光素酶的基材是内源性的,但在真核系统中不是非常活跃的。

3. GFP. 最初从果冻鱼隔离Aequorea Victoria;基因后来克隆。 原核和真核系统中的功能。在没有细胞裂解或基底的情况下,宽的宿主适用性。 在宿主死亡后,这些稳定的蛋白质继续发射荧光。野生型GFP内的荧光团需要两小时的生成。

4. 酶在原核生物中发现。将乙酰基从乙酰COA分子转移到氯霉素中,导致其排毒。 基因产物在抗摩尔浓度下稳定和可检测。适用于哺乳动物系统。 不适合高吞吐量研究。

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