高比例的分子证据间日疟原虫苏丹白尼罗河地区的疟疾感染

摘要

恶性疟原虫是一个主要的疟疾物种感染人类在非洲大陆。世界卫生组织最近的一份报告估计95％和5％恶性疟原虫和间日疟原虫疟疾病例，分别在苏丹。然而从苏丹不同地区的许多实验室报告特别指出。为了验证，我们选择从位于白尼罗州，苏丹中部Aljabalain面积四百疑似疟疾病例，并提供优质的保险显微镜和物种特异性巢式PCR诊断他们。我们的研究结果表明，比例间日疟原虫疑似疟疾病例的感染率很高。我们发现，在这两个研究地区，平均20%和36.5%的疟疾感染是由间日疟原虫分别使用显微镜和PCR。这种格局的变化可能是由于最近的人口变化和近年来邻国的高移民率。这是第一次广泛的临床研究，显示上升趋势间日疟原虫苏丹白尼罗河地区的疟疾病例。

1.背景

疟疾是由人类和其他动物的传染病疟原虫寄生虫[1]。根据世卫组织的最新估计，2013年全球约有1.98亿疟疾病例(不确定范围为1.24亿至2.83亿)，估计有58.4万人死亡(不确定范围为36.7万至75.5万)[2]。自2000年以来，全球疟疾死亡率下降了47%，世卫组织非洲区域下降了54% [2]。

有五种疟原虫可以感染人类。撒哈拉以南地区的绝大多数死亡是由恶性疟原虫，而间日疟原虫，p .那，疟原虫，和诺氏疟原虫导致疟疾的通常温和的形式比其他诺氏疟原虫很少致命[1，3]。

间日疟原虫负责大多数疟疾病例在亚洲和拉丁美洲，但它是大多数非洲中部的几乎不存在由于没有达菲抗原，受体这间日疟原虫用于侵入人体红细胞[4]。在非洲东部和南部，间日疟原虫约占疟疾病例的10% - 40%，但在西非和中非的病例不到1% [4，五]。

在苏丹，直到最近，大多数疟疾病例是由恶性疟原虫。间日疟原虫是比较少见的;95％的病例是由引起恶性疟原虫另外5%是由间日疟原虫[6]。然而，近年来，许多临床医生观察到苏丹不同地区疟疾感染反复复发，这表明非恶性疟原虫的传播可能高于预期(很有可能)间日疟原虫因为它是苏丹第二重要的疟疾寄生虫种类)。这项研究的目的是记录所建议的比例上升间日疟原虫苏丹白尼罗州疑似疟疾病例的感染情况。

2。材料和方法

2.1。伦理问题

该研究得到了喀土穆大学地方病研究所的伦理委员会。参与这项研究之前，从每位患者签署知情同意书。

2.2。学习区和样品采集

这项研究是在白尼罗河地区进行的横断面研究，该地区是苏丹中部的一个州1。It lies between latitudes 33 and 30-31 north and longitude 13 and 30–12 east, occupying an area of around 675000 km²，以1.675百万人口。The study was conducted in Aljabalain area, 80 km south of Rabak town, the capital of White Nile state. The area is considered mesoendemic for malaria; transmission follows mainly the rainy season (July to October). Four hundred suspected malaria cases based on patient’s symptoms (fever, headache, sweating, nausea, and vomiting) and signs (pyrexia, pallor) were chosen randomly from Aljabalain hospital and Aljabalain military hospital aged >1 year old regardless of gender. Samples were collected during the rainy season (July–September) in 2012. All suspected malaria cases were treated with a standard regimen (artemisinin based combination therapy) by the local malaria control program according to the Sudanese Malaria Treatment Guidelines in Sudan National Malaria Control Program (NMCP), and the National Protocol for Treatment of Malaria (Federal Ministry of Health, Khartoum, Sudan, 2013, unpublished).

2.3。疟疾诊断

从每个病人身上取两毫升半静脉血。使用血膜显微镜诊断了疟疾，并通过PCR进行了确认。使用厚血膜和薄血膜，至少读两次场，并按照世界卫生组织质量控制指南进行操作。对两者进行了PCR检测恶性疟原虫和间日疟原虫。PCR是在喀土穆大学地方病研究所进行的，并进行了质量控制(采用了阳性和阴性对照)。采用Chelex法提取全血寄生虫基因组DNA。PCR扩增疟原虫18S rRNA基因片段，用种特异性低探针进行种鉴定，引物如下恶性疟原虫， rPLU5: 5 ' - ttaaaattgttgttgccttaaacttc -3 ';为间日疟原虫， rVIV1: 5 ' -CGCTTCTAGCTTAACCACATAACTGATAC-3 '， rVIV2: 5 ' -ACTTCCAAGCCGAAG CAAAGA AAG TCC TTA-3 '，如前所述[7]。

2.4。统计分析

数据分析采用SPSS(社会科学统计软件包)第二十版软件。

3.结果

在我们的研究中，男性和女性都受到疟疾的影响;然而，更多的女性在Aljabalain医院(64.4%)和更多的男性在Aljabalain军队医院(64%)。两个研究点所有患者的平均血红蛋白水平为11.9 g/dL。疟疾患者中贫血的患病率很高，在两个研究地点均超过三分之二。大多数疟疾病例(90%以上)寄生虫水平较低(≤500寄生虫/)μ升血液），表1。

在两个研究地点，比例间日疟原虫疑似疟疾病例的感染率很高。镜检结果显示，Aljabalain医院和Aljabalain military医院30(15%)和50(25%)的疟疾感染是由间日疟原虫。结果甚至高于PCR（图2）;从Aljabalain医院和Aljabalain军事医院样品66（33％）和80（40％）为阳性间日疟原虫,分别。混合感染（恶性疟原虫+间日疟原虫）在平均样品的2.25％中检测到来自两个学习区，表2。

4.讨论

本研究是在特征为季节性的和不稳定的疟疾传播的区域中进行。最显着的结果，在这项研究中是意想不到的高比例（约40％通过PCR）的间日疟原虫比以前在苏丹报道[更多疑似疟疾病例中的感染，八倍4]。这种格局的变化很可能是由于最近社区的组成发生了变化，这是由于若干亚洲和非洲国家的人移徙到白尼罗地区的石油和新制糖公司工作，特别是来自埃塞俄比亚的人，在那里高流行间日疟原虫疟疾病例中发现感染病例(31%)[6]。

对于出现的另一个建议的说明间日疟原虫是的替代机制寄生虫的发展侵入比达菲抗原其他人类红细胞。这是因为一个合理的解释间日疟原虫达菲阴性基因型感染以前在许多非洲国家有报道[8-16]。这是它的种类的第一项研究记录在疟疾显著上升间日疟原虫传输苏丹。并从此重要的卫生政策的影响间日疟原虫由于肝细胞内存在休眠的催眠虫，感染需要用伯氨喹消除肝分期[17，18]。最近的数据显示，间日疟原虫感染变得尤其是儿童更严重，需要进一步的研究来了解这种模式的确切原因[19]。

本研究的样本人群(400例)是根据他们高度怀疑的疟疾症状和在医院实验室做的阳性血膜镜检选择的。随后，在更多高质量保障的环境中，血液胶片仅显示50%的阳性。疟疾过度诊断的这一明显结果可能是由于综合医院缺乏培训、显微镜控制质量低和高工作量。之前在坦桑尼亚也发现了同样的结果，那里的疟疾被过度诊断了5倍[20，21]。

疟疾的PCR诊断是准确的，特别是在区分疟原虫种类方面，但是它昂贵而且需要训练有素的人员。在本研究中，质量控制显微镜允许20%间日疟原虫而PCR诊断为38.7%。这可能是由于很难根据单一的环型来区分物种，特别是对于未经训练的人员。本研究中90%以上的玻片有低寄生密度(≤500寄生/)μL）;这也使得疟原虫物种之间的差异非常困难。

5.结论

我们的研究证实了观察到的高比例间日疟原虫苏丹中部白尼罗河地区的感染。这一结果对疟疾控制具有重要意义，需要修改苏丹目前的疟疾治疗准则。

缩略语

BFFM：	疟疾血片
聚合酶链反应:	聚合酶链反应
Pf:	恶性疟原虫
光伏：	间日疟原虫。

利益争夺

所有作者均声明无竞争利益。

作者的贡献

Muzamil迈赫迪·阿卜杜勒·哈米德·马卡里姆M.亚当苏里曼和布沙拉M.哈马德作出的概念和研究的设计作出了重大贡献。·穆萨布·M.·阿里Albasheer所做的实验室工作。分析和解释数据是由Muzamil迈赫迪·阿卜杜勒·哈米德·马卡里姆M.亚当苏里曼和布沙拉M.哈马德完成。Muzamil迈赫迪·阿卜杜勒·哈米德·玛哈Elobied和Mutaz穆斯塔法·阿明校订手稿和Mutaz阿明穆斯塔法写的。Muzamil迈赫迪·阿卜杜勒·哈米德给了要发布的版本最终批准;所有作者阅读并认可的终稿。

致谢

作者送他们的感谢谁参加了这项研究的患者和家属。这项研究是由TWAS的研究资助协议没有任何资助。13-145 RG / BIO / AF / AC_G。

参考

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