耐甲氧西林的患病率金黄色葡萄球菌埃塞俄比亚东北部转诊医院伤口感染患者的相关危险因素

摘要

背景。由耐甲氧西林引起的感染光谱金黄色葡萄球菌是多方面的，与更坏的结果有关。对这些病原体及其灵敏度模式的患病率的研究会给更新的信息是负责在患者的管理和及时监测耐药菌的出现，医务人员非常有帮助。因此，这项研究旨在评估的流行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌德西转诊医院伤口感染患者的相关因素方法．横断面研究中的266例患者在Dessie转诊医院从2月进行到了无菌采集五月2016伤口拭子样本使用莱文的技巧，并通过脑心脏灌注传输介质输送到Dessie地区实验室。孤立金黄色葡萄球菌基于文化和生化谱已完成。使用盘扩散技术按照标准进行药物敏感性测试和解释为基于临床和实验室标准研究所的指导方针。将数据录入，并通过使用SPSS版本20进行分析。结果．葡萄球菌266个加工伤口拭子的分离物为92（34.58％）。其中26（28.3％）被鉴定为耐甲氧丙蛋白S.金黄色葡萄球菌和66（71.7％）是甲氧西林敏感性S.金黄色葡萄球菌．甲氧西林耐药的总体流行率S.金黄色葡萄球菌研究人群中的9.8％。抗甲氧二蛋白抗性S.金黄色葡萄球菌显示出对青霉素（100％），其次是红霉素和环丙沙星（16，61.5％）和复方新诺明和庆大霉素（14，53.8％）完全抗性。从总S.金黄色葡萄球菌20株(21.7%)出现多药耐药。这些耐甲氧西林S.金黄色葡萄球菌18例(69.8%)为多药耐药。患者职业农民(AOR = 6.1, 95%可信区间(1.086 - -33.724)),承认在医院(优势比= 3.56,95%可信区间(1.429 - -8.857)),和BMI较低(< 18.5)(优势比= 13.89,95%可信区间(4.919 - -39.192))等相关的风险因素明显由于耐甲氧西林伤口感染S.金黄色葡萄球菌．结论．所有耐甲氧西林S.金黄色葡萄球菌青霉素耐药率为100%，多药耐药率较高。因此，治疗前应进行药敏试验。

1.背景

伤口是皮肤休息一下，露出下面的组织外部环境。通过伤人皮肤完整性的丧失提供了一个潮湿，温暖，以及微生物的定植，增殖和感染[营养环境1那2］.常见的细菌性皮肤感染包括金黄色葡萄球菌那大肠杆菌，绿脓杆菌那Klebsiella肺炎那酿脓链球菌那蛋白质物种，链球菌物种,肠球菌物种 [3.那4.］.在最常见的伤口感染中，金黄色葡萄球菌[5.是医院感染(NI)和手术伤口感染的主要原因[6.］.近年来它对许多抗生素产生了耐药性。

耐甲氧西林S.金黄色葡萄球菌通过甲氧西林抗性基因获得其抗性梅卡，它编码一个低亲和力青霉素结合蛋白（PBP2a的），其在不存在敏感S.金黄色葡萄球菌菌株[7.那8.］.这种耐药的青霉素结合蛋白受体不能很好地结合大多数β-内酰胺，因此允许MRSA在它们的存在下生长[8.］.耐甲氧西林S.金黄色葡萄球菌最近通过流行病学以及分子特征以及分子特征，即社区相关（CA）MRSA和医疗保健相关（HA）MRSA的菌株。社区相关的MRSA分离株通常较低，而不是HA-MRSA分离物[9.］.

耐甲氧西林S.金黄色葡萄球菌是全世界引起医院获得性感染的主要问题[10］.据估计，医疗环境内MRSA感染单独超过15万名患者，每年在欧盟受灾，3.8亿欧元[额外费用11］.广泛和长期使用抗生素导致伤口感染期间出现耐药细菌病原体，导致高发病率和死亡率[12］.感染由于MRSA的光谱是多方面的[13那14]，并与除延长住院时间更坏的结果，治疗费用较高，死亡率增加有关[15那16］.

在非洲的一些地方，80%S.金黄色葡萄球菌感染对甲氧西林有抗性，用标准抗生素无效地进行治疗[17］.尽管埃塞俄比亚各地的不同研究表明，MRSA的负担构成了一个主要的公共卫生问题[18-20.[预防和控制策略是否不充分地确定MRSA。此外，抗生素广泛而不恰当地使用导致耐药菌株细菌如MRSA的患病率增加，从而研究了这些病原体的患病率及其在医疗保健设施中的敏感模式将提供更新的信息，这对健康非常有帮助负责患者管理的人员，及时监测抗性细菌的出现。通常，目前的研究结果也可用作输入数据，以确定最小化MRSA负担的指导。

2.方法

2016年2月至2016年4月进行了一项横断面研究，评估甲氧西林耐药的抗生素耐药模式金黄色葡萄球菌从伤口感染和相关危险因素中分离出Dessie推荐医院（DRH）。Dessie推荐医院位于Dessie Cown，距离县城县亚的斯亚贝巴的首都有400公里，远离Bahir Dar 471公里，是阿马拉区域国家的首都。在Dessie镇，有一个推荐医院，三位私人一般医院，三名卫生中心，五个私人诊所，以及进行培养和易感性测试的一个区域卫生研究实验室。涉嫌在研究期前过去两周没有服用抗生素的所有患者均包含在本研究中。使用单一种群比例公式测定样品尺寸，19.6％[18， 95%置信区间(CI)，总样本量为266。

采用结构化问卷收集社会人口学相关数据和相关危险因素。

2.1。样品收集和处理

使用Levine技术收集伤口样品[21.］.用含70%酒精的无菌纱布擦拭创面。取出敷料后，用无菌生理盐水清洗已包扎的伤口。在无菌条件下，将无菌棉签涂布器的末端旋转1厘米以上²面积为5秒从伤口组织如技术由Levine和加德纳[陈述内足够的压力以表达流体和细菌表面22.］.用70%的酒精清洗皮肤后，从闭合的伤口中收集样本。在某一时间点从每个伤口取双伤口拭子，以增加病原菌恢复的机会。所有采集标本均在1小时内用脑心灌注转运介质标记并运送至Dessie区域卫生研究实验室进行培养和药敏试验。每个伤口标本接种于血液(Oxoid, Ltd, Basingstoke, Hampshire, England)，并在甘露醇盐琼脂上传代。所有培养皿在35-37℃好氧气氛中培养24 h。

金黄色葡萄球菌基于集群革兰阳性球菌经鉴定，β- 血液琼脂的溶解菌落，过氧化氢酶和凝固酶生产，黄色区域围绕甘露醇盐琼脂包围的黄色菌落[21.］.

２.２.抗菌药物敏感性试验

使用Muller Hinton琼脂（MHA）上的盘扩散方法对每个细菌分离物进行抗微生物易感性试验。挑选每种细菌的三到五个纯菌落并转移到含有5ml无菌营养肉汤的管中。将制剂彻底混合以使悬浮液均匀。将悬浮液在37℃下孵育直至悬浮液的浊度调节至0.5 McFarland浊度标准（细菌浓度为1.5×10^8.形成菌落单元/ ml）[23.］.无菌拭子浸入在悬浮液中，并且MHA板的整个表面均匀地与所述悬浮液淹没，并使其干燥约15-30分钟。

The antimicrobial impregnated disks were placed on the media using sterile forceps in such a way that each disk was placed at least 24 mm away from each other to avoid the overlapping zone of inhibition. After the disk was placed on the inoculated media, the plates were allowed to stand for 30 minutes so that the antibiotic will diffuse into the media. The plates were inverted and incubated at 35 ± 2°C for 24 h and observed for the zone of inhibition.

选用的抗生素片为(Oxoid UK)青霉素(10IU)、环丙氯青霉素(5μ.g)、复方磺胺甲恶唑(1.25/23.75μ.G)、强力霉素(30g)、红霉素(15μ.克），克林霉素（2 μ.氯霉素(30克)μ.G)和庆大霉素(10)μ.G）。敏感性图案被抑制区域的比较根据临床和实验室标准研究所（CLSI，2014）准则解释和报告为敏感，中间，和抗性[24.］.标准株S.．金黄色葡萄球菌（ATCC25923）作为在生化试验控制和琼脂平板包括MHA具有抗菌盘，以确保抗微生物盘的测试性能。

数据输入并使用SPSS 20版的Windows进行分析。逐步回归模型被认为是确定与伤口感染有关的因素。校正比值比和95％CI分别计算为测量的关联的强度。值<0.05被认为具有统计学意义。

结果

3.1。研究参与者的社会人口学特征

本研究共纳入266名研究参与者。其中男性180例(67.7%)，女性86例(32.3%)。研究参与者的平均年龄为33.2±17.8岁(范围从5岁到81岁)。四分之一的研究参与者没有受过正规教育，而大多数生活在城市(205,77.1%)(表1）。

3.2。MRSA的患病率

出的266例怀疑发生伤口感染，92（34.58％）的已培养证实的S.金黄色葡萄球菌伤口感染。其中，26（28.3％）为MRSA。MRSA的研究人群的总患病率为9.8％（266分之26）。间82名住院病人和184个门诊病人疑似伤口感染的，41.5％（82分之34）和31.5％（184分之58）为培养阳性对S.金黄色葡萄球菌,分别。住院患者和门诊患者的MRSA总患病率分别为19.5%(16/82)和5.4%(10/184)(图)1）。

3.3。抗生素抗性图案

走出92S.金黄色葡萄球菌从包括MRSA的伤口拭子分离，78（84.8％）显示出高水平的青霉素抗性，4（4.3％）显示出对Clindamycin的低水平耐药性，而MRSA显示出对青霉素的含量（100％）耐药率，然后是红霉素和红霉素。环丙沙星（16,61.5％）和Cotrimoxazole和庆大霉素（14,53.8％）（表2）。

3.4。MRSA的多药电阻模式

在这项研究中，与甲氧西林敏感相比，对MRSA的多药耐药(MDR)的患病率很高金黄色葡萄球菌(MSSA)，分别占18(69.2%)和2 (3%);没有一种菌株对测试的所有抗生素都有耐药性。然而，10例(15.2%)MSSA对所有抗生素均敏感(见表2)3.）。

3.5。与MRSA伤口感染个体之间的相关因素的二元和多元分析

在二元逻辑回归分析，伤口感染，由于MRSA表现出与职业显著的关联，近期入场的历史，最近的手术史，被诊断在住院部和低体重指数（BMI）（<18.5）。然而，其他因素如年龄，性别，教育，居住，先前使用抗生素的历史，和慢性疾病并没有表现出统计学显著关联。

在多因素logistic回归分析中，除近期入院史外，上述相关因素仍与MRSA所致伤口感染相关。农民发生MRSA伤口感染的可能性是其他人的6倍(AOR = 6.1;95% CI(1.086-33.724))。BMI较低的患者发生MRSA伤口感染的可能性为13.9倍(AOR = 13.89;95% CI(4.919-39.192))。此外，住院患者感染MRSA的可能性是正常人的3.6倍(AOR = 3.56;95% CI (1.429-8.857))4.）。

4。讨论

由于MRSA引起的伤口感染是资源有限国家的主要问题，特别是埃塞俄比亚，感染差的感染和控制措施[25.］.在这项研究中S.金黄色葡萄球菌伤口感染34.5%。这一发现与在Debre Markos进行的研究(39.7%)一致[18]及喀麦隆(28.9%)[26.］.另一方面，这一发现高于在吉马进行的研究(23.6%)[19，尼日利亚(26.6%)[27.]、坦桑尼亚(26.7%)[28.]，巴西(20%)[29.］.然而，目前研究报告的患病率低于亚的斯亚贝巴的一项研究(57.8%)[30.]及乌干达(41%)[31.］.在患病率的变化可能是由于在研究的受试者的变化，研究进行时间，并用于检测的方法金黄色葡萄球菌。

在我们的研究中，MRSA的总患病率为9.8%。这一发现与在亚的斯亚贝巴的研究结果相似(13.2%)[20.， Eretria (9%) [32.]和喀麦隆（13.16％）[26.]并且低于结果从埃塞俄比亚以前的研究如德勃雷马科斯（19.6％）[报道18]和Jimma（17.4％）[19]等非洲国家：乌干达（41％）[31.]和利比亚（31％）[33.］.在另一方面，这项研究发现是不是从尼日利亚（5.8％）的研究报告，高27.]巴西（5.6％）[29.]，坦桑尼亚(4.3%)[28.］.在我们的研究MRSA的观察到的高发病率的原因可能是某些抗生素率高的使用无论是由于可用性或成本效益的问题。

关于可能的相关危险因素，MRSA伤口感染与占领（农民）有显着相关，低BMI患者，与其同行相比，目前被录取的患者（住院病人）。这可能是因为农民可能无法了解利用医疗保健服务;此外，它们的职业可能使它们暴露于伤口感染，并使它们在没有处方的情况下使用抗生素。录取患者MRSA的高患病率可能归因于卫生机构的抗性菌株细菌交叉污染。低BMI的患者由于MRSA而产生伤口感染的几率。健康的人可以长时间患有MRSA，但受损免疫系统受损的患者具有明显更大的症状感染风险[13那14］.

关于分离株的耐药性情况，在本研究中，S.金黄色葡萄球菌分离物显示出对青霉素的抗性（84.8％），庆大霉素（15.2％）Ciprofloxacillin（18.4％），Clindamycin（4.3％），红霉素（26.1％），CoTrimoxazole（16.3％），强霉素（9.7％）和氯霉素（8.7％））。电阻曲线S.金黄色葡萄球菌与DRH内的结果相似(82.2%)[18］.在其他研究中，耐青霉素在坦桑尼亚[完成28.和埃塞俄比亚吉玛[34.的比例略高，分别为97%和100%。目前研究中的克林霉素耐药性与埃塞俄比亚的其他研究类似，后者的耐药性小于50% [20.那30.］.我们注意到，在埃塞俄比亚进行的不同研究中，上述其他抗生素的耐药率存在差异[18那19］.

目前的研究显示，MRSA菌株对青霉素(100%)、庆大霉素(53.8%)、环丙沙林(61.5%)、克林霉素(7.7%)、红霉素(61.5%)、复方新诺明(53.8%)、强力霉素(30.8%)和氯霉素(26.9%)耐药。同样，在不同地区进行的研究表明，MRSA菌株对青霉素100%耐药[18那35.］.在本研究中，MRSA分离株对庆大霉素的耐药性高于在亚的斯亚贝巴Yekatit 12医院进行的研究(38.2%)[20.］.同样，与坦桑尼亚报告的结果(54%)相比，对环丙沙星的耐药性略高[28.］.相比之下，对克林霉素、红霉素、复方新诺明和氯霉素的耐药性低于在埃塞俄比亚进行的研究[18那20.］.

在不同的研究中耐药模式的主要变化可能是由于这些抗生素在一定区域内的乱用和可用性。不同区域之间的电阻率的变化指示根据区域和地理位置的抗生素而变化电阻图案，并且还通过改变一次。

此外，在研究区域报告了高耐多药MRSA患病率(69.2%)。这一发现与在印度北部进行的研究一致，其中73%的MRSA菌株具有多药耐药性[36.］.同样，在Debre Markos进行的一项研究表明，分离出的所有MRSA菌株对≥3种抗生素耐药[18］.多药耐药的高流行率可能使患者容易感染难治性分离株，强调有必要改进感染控制实践和在这种情况下使用抗生素的指南。

目前的研究结果不能表明MRSA是社区相关或医疗相关。

5.结论

在涉嫌伤口感染的266名患者中，92名（34.58％）培养证实S.金黄色葡萄球菌．其中，26（28.3％）为MRSA。由于MRSA引起的伤口感染表现出与职业的显着相关性，被诊断为住院部门和体重指数。大于50％的MRSA分离物对庆大霉素，环丙沙西州，Cotrimoxazole和红霉素抵抗。

缩写

BMI：	身体质量指数
CA-MRSA:	社区相关耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
缺点：	Coagulase-negative金黄色葡萄球菌
Ha-MRSA：	医疗保健相关的甲氧化植物金黄色葡萄球菌
耐多药:	多药抵抗力
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌:	耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
MSSA：	甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌．

数据可用性

用于支持本研究结果的数据可根据要求从通讯作者处获得。

伦理批准

这项研究在伦理上得到了冈达尔大学生物医学和实验室科学学院伦理审查委员会的批准。

同意

从DRH获得许可。从数据收集之前参与者获得书面知情同意书。从研究对象获得的所有信息进行编码，以保持机密性。当参与者被发现呈阳性S.金黄色葡萄球菌，他们是由医院的临床医生告知并得到适当的治疗。

利益冲突

作者没有利益冲突。

作者的贡献

YT和TG构建了这项研究主题和目标。YT，TG，AA，MA和BG参与了研究和数据分析的设计并进行了统计分析。MM和ST准备并批判性地修订了其科学内容的稿件。所有作者阅读并认可的终稿。

致谢

在此，作者要感谢德西地区健康研究实验室的工作人员，他们在研究工作中给予了很大的帮助。作者还想感谢所有参与这项研究的数据收集者和研究参与者。这项研究由阿姆哈拉地区卫生局提供资金支持，完成这项工作所需的材料由Dessie地区卫生研究实验室提供。

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