微分调节大肠杆菌鱼翅与甘露糖受体结合后的基因

抽象的

调节尿致病大肠杆菌(UPEC)fimB和闪光点在1型pili结合到甘露糖涂覆的琼脂糖珠后检查基因。甘露糖附着后25分钟内，闪光点表达下降了八倍，而fimB转录增加了大约两到四倍。因为两个鱼翅基因编码影响影响的位点特异性重组酶FIMS.包含这一点的元素费马启动子的定位FIMS.也检查。的FIMS.而与甘露糖包被珠相互作用的UPEC细胞的Phase-OFF方向明显更小FIMS.在pH7条件下。另一方面，逐步逐步逐渐取下FIMS.在pH为5.5的环境中，UPEC细胞与普通珠子混合后，细胞数量增加了4倍。定位的FIMS.也受到fimH突变，证明与其受体结合的FIMH配体有利于变化。此外，酶免疫测定显示，当与甘露糖涂层的珠子混合时，UPEC细胞具有更大的1型Pili表达。这些结果表明，在1型菌落结合到束缚甘露糖受体后，生理学大肠杆菌即使在酸性环境中，细胞也会改变以维持1型菌毛的表达。

1.介绍

每年患有1050万名妇女的尿路感染和尿鼠疗法大肠杆菌(UPEC)是这些人类感染的主要原因[1］．Upec致病性是若干毒力因子的作用的结果，尽管1型菌落表达被认为是UPEC产生的主要毒力因子，并且是第一个由分子Koch的假设确认的毒力因子[2］．1型pili在泌尿道感染的起始和维持中发挥的临界作用包括依赖于泌尿道的Uroopithelial细胞上的甘露糖受体，并在侵入到膀胱上皮细胞中的作用[3.，4］．1型菌毛是最常见的菌毛结构之一大肠杆菌从受感染患者的尿路中分离的细胞[5- - - - - -9和微阵列分析证实了这一点鱼翅小鼠尿路中UPEC细胞的基因表达随时间增加[10.］．

1型毛的表达是相位变化的结果，其中非毛细胞(phase - off)和毛细胞(phase - on)之间存在切换[11.］．两个位点特异性重组酶主要通过影响a的位置来决定细菌是Phase-OFF还是Phase-ONFIMS.含有结构基因启动子的可逆元件，费马．这些重组酶包括FIMB蛋白，其允许从逐渐逐渐切换到相位和FIME，以促进从相位接通切换的[12.- - - - - -14.］．其他特异性的重组酶在定位方面具有辅助作用FIMS.可逆元素(在[15.])。生长环境也可以在能力上起到实质性的作用大肠杆菌细胞的相位变化和表达1型菌毛。1型菌毛表达的调节是pH值、温度、脂肪氨基酸、葡萄糖效应和渗透压变化的结果[16.- - - - - -26.］．

没有人直接检验是否鱼翅随着1型UPEC细胞附着在甘露糖受体上，基因以某种方式被调节。我们之前的工作表明，UPEC细胞FimH附着在甘露糖包膜珠上对胶囊基因表达产生不利影响[27.，之前的微阵列研究表明鱼翅基因表达也可以在配体-受体结合后被激活[10.］．在这项研究中，我们检验了fimB和闪光点FimH配体与其甘露糖受体之间的相互作用影响转录。我们证明fimB转录上调闪光点转录在表达FIMH对甘露糖涂覆的珠粒的结合后下调。此外，定位FIMS.可逆的元素变化产生更多的阶段取向和1型菌毛FimH提示adhesin绑定到甘露糖后,表明1型piliated UPEC细胞生理变化后对甘露糖受体通过持续保持坚持承诺1型菌毛的表达。

2.材料和方法

２.１.菌株、质粒和生长条件

NU149尿致病性菌株大肠杆菌［28.]如前所述，在Luria肉汤（LB）中[6]允许1型Fimbriae的最佳表达。FIMH突变体已被描述[29.］．简而言之，它们代表了网站定向突变体fimHUPEC菌株J96的基因克隆到pMMB66质粒上。质粒pWS145-38也被使用fimB启动子区与无启动子区连接勒克斯单拷贝数质粒上的操纵子[25.］．

２.２.结合到普通或甘露糖衣琼脂糖珠

如前所述进行测定[27.］．简单地说，建立了几根试管，每一根试管中都有一种细菌与琼脂糖4l珠(Sigma Chemical Co.， St. Louis, MO)或甘露糖包膜琼脂糖珠混合[30.］．在不同的时间点之后，使用热酚提取程序从两个种群中分离出总rna [31.]并用无RNase的DNase（Boehringer-mannheim）处理两次以去除污染的DNA。接下来，CDNA合成6 μ.如前所述的每个时间点G总RNA [32.通过使用从反转录- (RT-) PCR试剂盒中获得的随机六聚体引物(Stratagene, La Jolla, california)。另外，将菌株NU149/pWS145-38细胞与普通的琼脂糖珠、甘露糖包被琼脂糖珠或甘露糖包被琼脂糖珠与添加了2%游离d -甘露糖(wt/vol, Sigma)的pH 5.5或7 LB低渗透压琼脂糖珠混合。在不同的日子至少进行三次测定，数据以平均值表示标准偏差。

２.３.限制性稀释-反转录- pcr (LD-RT-PCR)

在10,25,60和120分钟后从Nu149细胞中提取总RNA，并如上所述转化为CDNA。使用这些CDNA作为模板，用FIMB1 / FIMB2，FIME1 / FIME2和FTSZ1 / FTSZ2引物对进行限制稀释逆转录聚合酶链反应（LD-RT-RT-PCRS），如前所述[24.］．简而言之，CDNA是连续稀释的双重溶液，每次稀释均得到PCR扩增。集成的DNA技术（Coralville，IA）合成本研究中使用的所有引物。分析扩增产物在1.5％琼脂糖凝胶上，比较群体与普通琼脂糖与甘露糖涂层的琼脂糖珠的反应相比。测定在不同的日子中至少进行三次，用于制备CDNA的不同RNA制剂。

２.４.体外生物发光试验

每一种培养物在pH 5.5和pH 7 LB中生长一夜，用添加或不添加2%甘露糖(wt/vol)的普通琼脂糖珠或甘露糖包被琼脂糖珠进行摇晃培养，然后使用FB 12生物发光单管发光仪(Zylux公司)进行生物发光测试。发光结果以相对发光单元(RLU)的形式报道，如前所述[26.］．每一种培养物的菌落形成单位(CFU)通过将10倍连续稀释的细菌在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中镀到含有12.5的LA上计算μ.G /ml氯霉素并计数菌落。RLU值除以活菌数得到每个培养物的RLU/CFU。

2．5．314 bp的PCR分析FIMS.可逆元DNA

如前所述提取染色体dna并进行处理[23.］．按照Schwan等人的描述，dna进行标准化，制备用于PCR扩增。[31.]与INV/FIMA引物对FIMS.相位开启方向，fme /INV为相位关闭FIMS.定位，EcFtsZ1/EcFtsZ2检测FTSZ.转录物也在先前描述了[24.- - - - - -26.］．使用所有引物对进行多重PCR。相位开启和逐步关闭FIMS.PCR产物条带强度标准化FTSZ.使用ImageQuant软件进行放大。确认的FIMS.定位差异，用INV/FIMA和FIME/INV引物进行LD-PCR24.］．通过不同的DNA制剂至少进行三次分析。

2.6。酶免疫分析法(EIA)分析1型菌毛水平

在pH 5.5或pH 7 LB中分别与普通琼脂糖、甘露糖包被琼脂糖珠或添加2%游离甘露糖包被琼脂糖(wt/vol)混合培养的菌株NU149细胞进行了环境影响评价。在将细菌与珠粒混合后(0 h)立即进行检测，然后在37°C孵育24 h后再次进行检测[24.］．每个条件至少执行三次环评，下面给出的值是平均值标准差。

2.7。统计数据

学生的- 最低用于计算统计变化。值< 0.05被认为是显著的。

3.结果

３.１.转录的fimB和闪光点1型pili与甘露糖受体结合后的变化

以确定与甘露糖受体结合的1型菌毛是否受影响鱼翅基因表达，LD-RT-PCR检测。结果表明，在10 min时，两组间无显著差异大肠杆菌与甘露糖包膜的琼脂糖混合的细胞群进行比较。然而，从25 min开始到120 min，其水平逐渐下降闪光点甘露糖涂层琼脂糖群体与普通琼脂糖群体相比，在120分钟后下降了16倍(图)1）.控制的水平FTSZ.普通和D-Mannose种群的整个时间课程中，转录物保持不变。此外，水平fimB转录物在60分钟后开始上升并与10分钟的尖端和120分钟与普通琼脂糖混合的120分钟的时间点相比，120分钟升高。这表明1型pili和甘露糖受体之间的配体受体相互作用导致了下调的闪光点转录和激活fimB转录。

作为LD-RT-PCR结果的后续行动，fimB使用菌株NU149/pWS145-38在pH 5.5和pH 7.0培养的细胞中检测其表达，将LB与普通的琼脂糖珠、甘露糖包被琼脂糖珠和添加2%游离甘露糖的甘露糖包被琼脂糖珠混合。结果表明fimB在pH 7.0 (RLU/CFU = 0.058)条件下，甘露糖包被微珠混合2 h后，表达量比混合0 h时(RLU/CFU = 0.027;<0.0001;数字2），在4小时后再次升级（RLU / CFU = 0.065;< 0.0001)。另一方面，在pH 7.0的环境下，在0 h (RLU/CFU = 0.027)、2 h (RLU/CFU = 0.027)和4 h (RLU/CFU = 0.026;<0.113为0 H与4小时）。自由甘露糖的增加阻止了上调的fimB转录当0小时时间点（RLU / CFU = 0.027）与4小时时间点进行比较（RLU / CFU = 0.028，< 0.65)。转录的fimB当细菌在酸性环境中与纯琼脂糖珠(< 0.0001的0小时相对于4小时)。然而，在pH值为5.5的甘露糖涂层珠的测试中，fimB横跨0小时，2小时和4小时点（RLU / CFU = 0.027,0.027和0.025，REAP，表达仍然相当恒定。0小时< 0.188，而4小时)。此外，在upec -甘露糖包被珠混合料中添加游离甘露糖，其RLU/CFU数值与使用普通琼脂糖珠相似(0 h时RLU/CFU = 0.027, 4 h后为0.017)。更引人注目的是混合4小时后pH条件的比较。转录的fimBUPEC细胞在pH 7混合甘露糖包被珠和pH 5.5混合普通琼脂糖珠的培养基中表达差异显著(< 0.0001)。这些结果表明与甘露糖受体的结合有助于改善pH的影响fimB表达式在大肠杆菌细胞。

3.2。1型pili与甘露糖受体结合后的可逆性元素的定位变化

1型pili对甘露糖受体的结合似乎转移转录以支持fimB在闪光点．由于FimB和FimE位点特异性重组酶都参与了定位费马314 BP的推动者FIMS.可逆的元素允许或预防费马转录，我们预测可逆元素的位置也会受到影响。为了确定可逆性元素的位置是否在配体 - 受体结合后改变，用寡核苷酸引物进行多重PCR扩增，所述寡核苷酸引物特异于相位的相位和截止方向FIMS.可逆的元素[31.以及FTSZ.从NU149细胞中提取的染色体dna与pH 5.5和pH 7.0 LB生长的普通琼脂糖珠或甘露糖包被珠混合，0 h时UPEC群体为8% Phase-OFF。方向FIMS.可逆元素，包含费马当UPEC细胞与pH 7.0环境下生长的甘露糖包被珠混合时，启动子导致Phase-OFF方向下降了两倍(4%)3.）.在pH 7.0环境中，当细胞与纯琼脂糖珠混合时(11% Phase-OFF)，观察到微移至Phase-OFF位置。然而，在pH 5.5背景下，添加到普通琼脂糖珠中的UPEC种群的Phase-OFF定位显著增加了近4倍(31%)。在pH 5.5和pH 7.0条件下，对NU149细胞与普通琼脂糖或甘露糖包被琼脂糖混合进行LD-PCR分析，结果与上述结果一致(数据未显示)。这些结果表明，配体与其受体的结合抵消了低pH对其取向的影响费马启动子地区。配体和受体之间的接触似乎有利于定位FIMS.允许可逆元素费马转录，即使在酸性环境中。

为了证实FIMH是涉及的配体，使用先前描述的几种FIMH质粒构建体，包括野生型，缺失突变体fimH基因，Q133K突变体和N46A突变体。氨基酸替代突变体两者都影响了甘露糖受体的FIMH的结合结构域[29.］．大肠杆菌表达这些质粒的细胞与甘露糖包被的Sepharose混合，并在混合后0 h、4 h和24 h观察可逆元件的方向。4 h后，与野生型相比，缺失突变体和Q133K突变体的Phase-ON种群减少了2倍，而N46A突变体减少了4倍(图4)4）.在24小时，在使用FIMH突变体时，野生型菌株的相位群体和四重滴下降了两倍。方向的FIMS.元素也在时间过程中更改为更多的Phase-OFF。野生型菌株在4 h后没有变化，但所有突变体的Phase-OFF取向均增加了4倍FIMS.DNA。24 h后，野生型群体的Phase-OFF取向DNA增加了2倍，而FimH突变体的Phase-OFF取向DNA增加了8- (N46A)至16倍(Q133K)。这表明FimH结合影响了定位FIMS.可逆的元素。

３．3.配体受体结合后1型绒毛表达变化

水平的变化fimB和闪光点转录本结合可逆元件的改变表明，1型菌毛与甘露糖结合后，其表达可能发生改变。为了证明1型菌毛表达水平的变化，进行了环评。在pH 7.0条件下，菌株NU149细胞与甘露糖包被的琼脂糖珠混合后24 h(2.69)， 1型菌毛表达量较0 h (1.85;<0.0001;数字5）.在pH 7.0 (1.83 vs 1.67;< 0.067)或大肠杆菌在pH5.5（1.85与1.71对1.85的甘露糖涂覆的Sepharose中混合细胞;<0.092）。然而大肠杆菌与0 h时间点(1.82;< 0.0001)。当游离甘露糖被添加到甘露糖包膜珠中，1型菌毛的表达水平下降到接近普通琼脂糖珠的EIAs水平，这表明甘露糖需要连接到某些东西(如珠或膀胱细胞)上才能发生转录激活效应。当自由甘露糖添加到UPEC细胞混合mannose-coated珠子,1型菌毛的表达水平下降到接近环评完成UPEC与普通琼脂糖珠混合,暗示的甘露糖需要与一些促进1型菌毛的表达发生变化。因此，不仅是关键的转录鱼翅基因受到影响，但1型菌毛的表达也受到FimH与甘露糖受体结合的影响。

4。讨论

UPEC细胞粘附和侵袭人膀胱上皮细胞是通过1型毛状黏附素FimH与含甘露糖残基结合介导的，如在人膀胱上皮细胞上发现的单糖d -甘露糖或甘露糖残基[3.，4］．一旦FimH附着在甘露糖受体被启动，就可以假定生理变化随后发生在大肠杆菌细胞。不幸的是，很少有人研究细菌配体-受体相互作用后的变化特征。Zhang和Normark之前的研究[33.]显示sensor-regulator基因的转录激活细菌iron-starvation反应后P受体菌毛绑定,和我们最近的研究表明,胶囊组装后负面影响基因表达1型piliated UPEC细胞绑定(甘露糖受体27.］．因此，作为配体-受体结合的结果，在UPEC细胞的转录水平上发生了一些变化。然而，以前没有人研究过绒毛基因表达的影响后，该品种的绒毛与其受体连接。

在这项研究中鱼翅随着1型UPEC菌毛细胞与甘露糖包被珠结合，基因表达被注意到。的变化fimB和闪光点表情导致了方向的转变FIMS.可逆元素，包含费马启动子有利于Phase-ON定位，进而导致UPEC细胞表面1型菌毛的更多表达。对几个突变体进行了检测(包括acpxR突变菌株）试图阐明哪种基因产品可能正在调节鱼翅基因随后与甘露糖受体结合，但没有基因与影响的调节变化直接相关fimB要么闪光点(数据没有显示)。因此，即使在酸性环境中，也会触发一个有利于1型菌毛表达的反馈回路，以维持配体-受体结合产生的紧密粘附。一种可能与fimh -甘露糖结合变化相关的调控因子是OxyR，我们没有检测到。OxyR是一种lysr型调节剂oxyR在FIMH介导的粘附到甘露糖后，基因已被证明是略微升高的转录[34.］．1型菌毛的表达k .肺炎［35.] 也Serratia marcescens.［36.]较低oxyR突变株与野生型株比较。激活是有可能的fimB与转录激活相关联oxyRfimh -甘露糖结合基因。附件的大肠杆菌非生物表面会导致生物膜形成的生理变化，随后更好地粘附到表面[37.]，并且在配体 - 受体结合后发生的UPEC细胞的变化很可能让细菌保持紧张的粘附性。

当然，外部环境也在1型菌毛的表达中发挥作用。与pH 7.0环境相比，在pH 5.5环境中发现UPEC细胞中1型菌毛表达较低。人类尿路浸泡在pH值介于5.0和8.0之间的尿液中[38.］．pH值在5.5到6.5之间的酸性是很常见的，这已经被证明会降低1型菌毛的表达[24.]以及其他粘附基因的表达[39.］．人类尿还可以影响1型菌落表达[24.，40，41.］．规定鱼翅基因可能影响人类或小鼠尿路中1型绒毛的相位变化。在小鼠肾脏中，UPEC细胞失去其1型菌毛，而大量的菌毛细胞仍在UPEC细胞中附着于膀胱上皮细胞[26.，28.，42.］．在每个器官中发现的细菌1型菌毛表达的这些差异可能部分归因于肾脏中甘露糖受体比膀胱中少[43.- - - - - -45.]，与肾脏中的pH较低和较高的渗透压相结合[38.］．肾脏中1型菌毛的减少可能对细菌有利，因为肾脏中与免疫系统的接触更多，然而，在甘露糖受体附着后保持1型菌毛的表达对膀胱中防止细菌被尿液冲走是有益的。

几项研究研究了FIMH结构和随后的粘附受体的粘附。FIMH粘附对甘露糖残留物的定量差异是结构差异的结果fimH基因自然出现[46.- - - - - -49或通过位点特异性突变影响FimH结合囊[29.］．在这项研究中，我们证明了与甘露糖结合袋相关的FimH突变体[29.]影响到甘露糖残留物的FIMH配体和随后的变化fimB和闪光点UPEC细胞内的转录。Q133K和N46A FIMH突变体均显示出更大的开关到镜像24小时后的截止方向fimH与野生型FIMH蛋白相比，零构造。FIMH需要一个不受干扰的甘露糖绑定口袋，以适当地绑定甘露糖残留物，然后打开导致变化的调节级联鱼翅基因的表达。

坚持大肠杆菌通过配体-受体结合到宿主细胞，可以促进细菌细胞和宿主细胞之间的相互交流，从而导致一些暂时性的调控鱼翅参与1型菌落表达的基因。不同粘附基因转换器之间的串扰影响菌落表达[50，51]以及胶囊基因表达[27.］．规定鱼翅基因似乎是fimh -甘露糖结合后发生的调控级联反应的一部分，这可能对人类尿路每个部分的细菌有不同的好处。这种串扰可能使UPEC细胞容易适应人体内不断变化的环境，使细菌细胞能够在一系列恶劣的环境中生存，包括人类尿道。

5.结论

FimH与其栓系甘露糖受体的结合导致转录激活fimB导致1型菌毛表达增加的基因。

数据可用性

所有支持本研究发现的数据均可在合理要求下从通讯作者处获得。

的利益冲突

Scott J. Hultgren是美国专利US8937167 B2的发明人，该专利涵盖了基于甘露糖苷的FimH配体拮抗剂治疗疾病的使用。Scott J. Hultgren拥有Fimbrion Therapeutics的所有权，如果该公司成功营销甘甜苷，他可能会从中受益。

致谢

这项研究由美国国立卫生研究院资助William R. Schwan的AI47801和AI065432和Scott J. Hultgren的AI048689。

参考文献

1. B. Foxman，泌尿道感染综合征。发生、复发、细菌学、危险因素和疾病负担，”北美的传染病诊所，卷。28，不。1，pp。1-13,2014。查看在：出版商网站|谷歌学者
2. H. Connell, W. Agace, P. Klemm, M. Schembri, S. Mårild，和C. Svanborg，“1型菌毛表达增强大肠杆菌对泌尿系统的毒性美利坚合众国国家科学院学会第93卷第5期18，页9827-9832,1996。查看在：出版商网站|谷歌学者
3. J. J. Martinez, M. A. Mulvey, J. D. Schilling, J. S. Pinkner, and S. J. Hultgren，“1型菌毛介导的细菌入侵膀胱上皮细胞”，EMBO杂志，卷。19，没有。12，pp。2803-2812,2000。查看在：出版商网站|谷歌学者
4. M. a . Mulvey, J. D. Schilling, and S. J. Hultgren，“在膀胱感染的急性期建立一个持久性大肠杆菌库”，感染和免疫，第69卷，第2期7，第4572-4579页，2001。查看在：出版商网站|谷歌学者
5. N. W. Gunther IV, J. A. Snyder, V. Lockatell, I. Blomfield, D. E. Johnson，和H. L. T. Mobley，“尿液致病性大肠杆菌1型毛状突变体中可逆元件锁相或关闭的毒性评估”，感染和免疫，卷。70，否。7，pp。3344-3354,2002。查看在：出版商网站|谷歌学者
6. S. J. Hultgren，W. R. Schwan，A. J. Schaeffer和J. L. Duncan，“泌尿道尿路中的泌尿道分离株1型Pili的调节”感染和免疫，卷。54，没有。3，pp。613-620,1986。查看在：谷歌学者
7. P. V.Kisielius，W.RC.Schwan，S.K.Amundsen，J.L. Duncan和A. J. Schaeffer，“患有急性泌尿道感染的成人尿液中的大肠杆菌类型1和P pili的体内表达和变异”，“感染和免疫(第57卷)6，页1656-1662,1989。查看在：谷歌学者
8. S. Langermann，S.Palaszynski，M.Barnhart等，“预防基于FIMH-杂志的全身疫苗的粘膜大肠杆菌感染”，科学第276卷第2期5 .第2页，第2 - 3页，1997。查看在：出版商网站|谷歌学者
9. A. Pere, B. Nowicki, H. Saxén, A. Siitonen, T. K. Korbonen，“急性尿路感染患者尿液中大肠杆菌p型、1型和1c型菌丝的表达”，传染病杂志第一百五十六卷第一百五十六期4，第567-574页，1987。查看在：出版商网站|谷歌学者
10. J.A.Snyder，B.Haugen，E. L. Buckles等，“尿路感染期间的尿羟疗法大肠杆菌的转录组”感染和免疫第72卷第2期11，页6373-6381,2004。查看在：出版商网站|谷歌学者
11. J. M.Breitag，C.S.Freitag，J.R. Clements和B.I.Eisenstein，“DNA的可怜的元素”对埃斯克氏菌属1型Fimbriae的相变，“美利坚合众国国家科学院学会，卷。82，没有。17，pp。5724-5727，1985。查看在：出版商网站|谷歌学者
12. P. Klemm，“两个调控膜基因，fimB和fimE，控制大肠杆菌1型菌毛的相位变化，”EMBO杂志，第5卷，第5期。6，第1389-1393页，1986。查看在：谷歌学者
13. M. S. McClain, I. C. Blomfield，和B. I. Eisenstein，“fimB和fimE在与大肠杆菌1型菌毛相变化相关的位点特异性DNA倒置中的作用”，细菌学期刊号，第173卷。17，页5308-5314,1991。查看在：出版商网站|谷歌学者
14. M. S. McClain，I. C.Blomfield，K.J.Eberhardt，以及B. I. Eisenstein，“大肠杆菌中的1型FIMBRIAE的反转 - 的相位变异”，细菌学期刊第175期14，第4335-4344页，1993。查看在：出版商网站|谷歌学者
15. W. R.Schwan，“尿羟疗法大肠杆菌中的FIM基因的调节”世界临床传染病杂志，卷。1，不。1，p。2011年17日。查看在：出版商网站|谷歌学者
16. 小c·c·布林顿，《细菌的非鞭毛附肢》自然第183卷，第183期。4664页，782-786,1959。查看在：出版商网站|谷歌学者
17. C. J. Dorman和N. N. briain，“fimA的热调控，大肠杆菌1型菌毛亚基蛋白的基因编码，”有限元微生物学，第99卷，第5期。2-3，页125 - 130,1992。查看在：出版商网站|谷歌学者
18. B. I. Eisenstein和D.C.Dodd，“对大肠杆菌1型Fimbriae的假催化抑制”，“细菌学期刊，卷。151，没有。3，PP。1560-1567,1982。查看在：谷歌学者
19. D. L. Gally, T. J. Rucker，和I. C. Blomfield，“亮氨酸反应调节蛋白结合到薄膜开关控制1型菌毛表达的相位变化在大肠杆菌K- 12，”细菌学期刊第176期18，页5665-5672,1994。查看在：出版商网站|谷歌学者
20. D. L. Glaly，J.A.Bogan，B.I.Eisenstein和I. C. Blomfield，“FIM开关控制类型的环境调节1型型大肠杆菌K-12的1型残留阶段变异：温度和培养基的影响细菌学期刊第175期19，第6186-6193页，1993。查看在：出版商网站|谷歌学者
21. M. Lahooti, P. L. Roesch, I. C. Blomfield，“在大肠杆菌K-12中，FimB重组对支链氨基酸和丙氨酸的敏感性的调节”，细菌学期刊，卷。187年，没有。18，pp。6273-6280,2005。查看在：出版商网站|谷歌学者
22. P. B. Olsen, M. A. Schembri, D. L. Gally，和P. Klemm，“fimB和fimE重组酶基因的H-NS差分温度调制，控制1型伞膜相位开关的方向，”有限元微生物学，卷。162，没有。1，pp。17-23,1998。查看在：出版商网站|谷歌学者
23. P. L. Roesch和I. C. Blomfield，“亮氨酸改变亮氨酸反应调节蛋白(Lrp)与薄膜开关的相互作用，以刺激大肠杆菌中的位点特异性重组，”分子微生物学第27卷第2期4，PP。751-761，1998。查看在：出版商网站|谷歌学者
24. W. R. Schwan, J. L. Lee, F. A. Lenard, B. T. Matthews, M. T. Beck，“渗透压和pH生长条件调节尿致病性大肠杆菌膜基因转录和1型菌毛表达”，感染和免疫，卷。70，否。3，pp。1391-1402,2002。查看在：出版商网站|谷歌学者
25. A. E. Rentschler, S. D. Lovrich, R. Fitton, J. Enos-Berlage，和W. R. Schwan，“在酸性/高渗透压环境中尿致病性大肠杆菌fimB基因的OmpR调控”，微生物学(英国)，卷。159，没有。2，pp。316-327，2013。查看在：出版商网站|谷歌学者
26. W. R. Schwan和H. Ding，“时间监管鱼翅尿鼠疗法中的基因大肠杆菌在小鼠尿路感染期间杂志的病原体， vol. 2017, pp. 1-13, 2017。查看在：出版商网站|谷歌学者
27. W. R.Schwan，M.T. Beck，S. J. Hultgren，J. Pinkner，N.L.Lowever，以及KPPS区域的下调后，KPS区域1升级装配操纵子后，在大肠杆菌型1 Fimbriae至D-甘露糖受体后，“感染和免疫，第73卷，第2期2，页1226-1231,2005查看在：出版商网站|谷歌学者
28. A. J. Schaeffer，W. R. Schwan，S. J. Hultgren和J.L.Duncan，“患者在大肠杆菌中的1型菌落表达的关系”，“感染和免疫，第55卷，第55期2，第373-380页，1987。查看在：谷歌学者
29. c。“尿路感染中大肠杆菌向膀胱的结构基础”，分子微生物学，第44卷，第5期。4，页903-915,2002。查看在：出版商网站|谷歌学者
30. C. H. Jones, J. S. Pinkner, a . V. Nicholes, L. N. Slonim, S. N. Abraham, and S. J. Hultgren，“FimC是一种周质papd样伴侣，指导细菌中1型菌毛的组装。”美利坚合众国国家科学院学会，卷。90，没有。18，pp。8397-8401，1993。查看在：出版商网站|谷歌学者
31. W. R.Schwan，H. S. Seifert和J.L.Duncan，“生长条件”介导参与1型Pili的相变的FIM基因的差异转录，“细菌学期刊，第174卷，第174期。7，第2367-2375页，1992。查看在：出版商网站|谷歌学者
32. W. R.Schwan和W.Goebel，“宿主细胞对李斯特菌单核细胞增生感染的反应包括患有信号转导的宿主应激基因的差异转录，”美利坚合众国国家科学院学会第91卷第1期14，第6428-6432页，1994。查看在：出版商网站|谷歌学者
33. J. P. Zhang和S. Normark，“菌毛介导的粘附后大肠杆菌基因表达的诱导”，科学，卷。273，没有。5279，pp。1234-1236，1996。查看在：出版商网站|谷歌学者
34. P. Bhomkar, W. Materi, V. Semenchenko, and D. S. Wishart，“大肠杆菌对fimh介导的菌毛粘附的转录反应”，基因调节和系统生物学， 2010年第5期。4, pp. 1-17, 2010。查看在：谷歌学者
35. C. Hennequin和C. Forestier，“Oxyr，涉及Klebsiella肺炎粘膜和非生物殖民化的Lysr型调节器”，“感染和免疫第77期12, pp. 5449-5457, 2009。查看在：出版商网站|谷歌学者
36. R. M. Q. Shanks, N. A. Stella, E. J. Kalivoda等，“粘质沙雷氏菌OxyR同源物介导表面附着和生物膜形成”，细菌学期刊第189卷第1期20，页7262-7272,2007。查看在：出版商网站|谷歌学者
37. K. Otto和M. Hermansson，“OMPX的失活导致1型迷住的大肠杆菌与非生物表面的相互作用，”细菌学期刊第186期1，页226-234,2004。查看在：出版商网站|谷歌学者
38. D. L. Ross和N. E. Neely，《尿液分析和体液教科书中的肾脏功能》，Appleton Century Crofts.，pp.97-112，1983。查看在：谷歌学者
39. C. A. White-Ziegler，A.Villapakkam，K. Ronaszeki和S. Young，“H-NS在大肠杆菌中控制PAP和DAA诱导转录，以回应多个环境线索”细菌学期刊号，第182卷。22，页6391 - 6400,2000。查看在：出版商网站|谷歌学者
40. E.C.Hagan，A.L.Lloyd，D. A.Rasko，G.J.Felerber和H.L.L.T. Mobley，来自患有泌尿道感染的尿液中的尿液中的大肠杆菌全球基因表达，“PLoS病原体，第6卷，第2期11，2010年e1001187，2010。查看在：出版商网站|谷歌学者
41. S. E. Greene, M. E. Hibbing, J. Janetk, S. L. Chen，和S. J. Hultgren，“人类尿液降低尿致病性大肠杆菌的功能和1型菌毛的表达，”mBio，第6卷，第2期4、文章编号e00820-15, 2015。查看在：出版商网站|谷歌学者
42. S. J. Hultgren, T. N. Porter, A. J. Schaeffer，和J. L. Duncan，“1型菌毛的作用和相位变化对大肠杆菌产生的下尿路感染的影响”，感染和免疫，第50卷，第5期。2，第370-377页，1985。查看在：谷歌学者
43. V. Vaisanen‐ren, M. ren, E. Linder, T. K. Korhonen，“大肠杆菌与人体肾脏冷冻切片的粘附”，有限元微生物学第27卷第2期2，第179-182页，1985。查看在：出版商网站|谷歌学者
44. R. Virkola，“大肠杆菌1型菌毛在人类肾脏中的结合特性”，有限元微生物学，第40卷，第5期。2-3，页257-262,1987。查看在：出版商网站|谷歌学者
45. R. Virkola, B. Westerlund, H. Holthofer, J. Parkkinen, M. Kekomaki，和T. K. Korhonen，“大肠杆菌粘连蛋白在人类膀胱中的结合特性”，感染和免疫，卷。56，没有。10，pp。2615-2622，1988。查看在：谷歌学者
46. E. V. Sokurenko，V.Chesnokova，R. J.Doyle和D. L.仓促，“多样性大肠杆菌类型1 FIMBRIAL LECTIN，“生物化学杂志第272期28，页17880-17886,1997。查看在：出版商网站|谷歌学者
47. E. V. Sokurenko, V. Chesnokova, D. E. Dykhuizen等，“FimH黏附素的自然变异对大肠杆菌的致病适应性”，美利坚合众国国家科学院学会第95卷第1期15，第8922-8926页，1998。查看在：出版商网站|谷歌学者
48. E.V.Sokurenko，H. S. Courtney，J.Maslow，A. Siitonen和D. L.仓促，由于FIMH基因的结构差异，1型迷住的大肠杆菌的粘合性的定量差异，“细菌学期刊，卷。177，不。13，pp。3680-3686，1995。查看在：出版商网站|谷歌学者
49. E. V. Sokurenko, M. A. Schembri, E. Trintchina, K. j . r . gaard, D. L. Hasty, and P. Klemm，“1型菌毛黏附素的价转换”，分子微生物学，卷。41，没有。3，pp。675-686，2001。查看在：出版商网站|谷歌学者
50. N. J. Holden，M. Totsika，E.Mahler等，“P.Fimbriae与尿疗法大肠杆菌尿的调控串扰的示范”微生物学，卷。152，没有。4，pp。1143-1153，2006。查看在：出版商网站|谷歌学者
51. 在大肠杆菌中，粘连蛋白操纵子间的调控相互作用:PapB蛋白对1型菌毛表达的抑制作用EMBO杂志，卷。19，没有。7，pp。1450-1457,2000。查看在：出版商网站|谷歌学者

版权

版权所有©2018 William R. Schwan等。这是分布下的开放式访问文章知识共享署名许可协议，允许在任何媒介上不受限制地使用、传播和复制，但必须正确引用原作。