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毒力质粒(pYV)相关表型的表达毒性在致病因素鼠疫物种:一种方便的方法,监测pYV文化条件下的存在及其隔离/检测中的应用鼠疫杆菌在食品
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| 第一天 |
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| (我)股票文化被飞跑到CR-MOX和CR-BHO冻结。 |
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| (2)板块在37°C孵化48 h pYV-bearing细胞的分化和隔离pYV-less细胞。 |
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| 第三天 |
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| (我)使用立体显微镜,红色查明殖民地检查以确保电感电容电阻测量和CR吸收。使用无菌循环,2 - 3红查明殖民地被接种到无菌10毫升的BHI肉汤。 |
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| (2)肉汤是接种和孵化28°C 18 - 24 h。 |
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| 第四天 |
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| (i)在一夜之间文化分为三个部分:冻结的股票文化,股票文化工作,和细胞用于PCR检测和表达式的pYV-encoded恶性表型特征包括电感电容电阻测量、CR吸收,简历绑定。 |
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| (2)冻结的股票文化:5毫升的一夜之间文化混合等分的BHI肉汤和20%甘油和分发到500年μL为存储部分−80°C。 |
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| (3)股票文化工作:使用10μL循环,细胞有CRMOX和CR-BHO。盘子被孵化48 h在37°C。盘子被储存在2°C,以供将来使用。盘子可以存储15天为CR-BHO CR-MOX和30天。 |
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| (iv) PCR试验:1毫升离心机,部分细胞和DNA PCR试验做好准备。pYV面前证实了PCR检测目标virF在pYV基因。 |
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| (v)的存在pYV也证实了展示表型的表达毒性特征包括菌落形态、CV绑定,电感电容电阻测量,CR绑定。 |
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