文摘
背景。喀斯特G12C抑制剂早期临床试验中取得了可喜的疗效,但耐药性妥协他们的长远利益。因此,它是至关重要的理解耐药性的机制和设计适当的组合治疗以提高疗效。方法。了解全面的耐药机制,我们与喀斯特治疗肺癌细胞G12C抑制剂对不同时期和执行转录分析和信号分析识别关键因素和途径,推动药物耐受性和阻力。我们还评估了体外和体内药物组合来识别潜在的有效疗法。结果。我们发现反馈激活多种受体酪氨酸激酶(rtk)合作可能诱发内在和自适应抗喀斯特G12C抑制剂。值得注意的是,连续的喀斯特抑制诱导耐多药表型,这意味着前期结合的治疗可能需要治疗这群病人。我们还证明,同时针对多个节点在RTK / RAS /皇家空军/ MEK / ERK轴改善喀斯特的功效G12C抑制剂,主要通过抑制增殖作用的激活蛋白激酶(MAPK)途径。此外,以及喀斯特作用的结合使用G12C抑制剂在肺腺癌有效的诱导肿瘤回归模型在体外和体内。结论。在一起,我们的研究结果显示机制喀斯特G12C抑制剂阻力和提供新的候选人组合策略来改善他们的抗癌活性。
1。介绍
肺癌是全世界癌症死亡的主要原因。1]。基于组织病理学表现,肺癌分为两大类:非小细胞肺癌(NSCLC,∼85%)和小细胞肺癌(SCLC∼15%)。在非小细胞肺癌、腺癌(ADC)和鳞状细胞癌(SCC)是两个主要的亚型,占病例总数的80%∼[2]。尽管传统的以铂为基础的化疗和放疗,非小细胞肺癌患者的中位生存时间在以前的先进的疾病阶段,但情况已经被目标药物的使用显著提高自2000年代初以来,最近,通过免疫疗法(2- - - - - -4]。无数的复发性基因改变,如TP53,喀斯特,和表皮生长因子受体突变,已确定在NSCLC肿瘤。一些被定义为致癌的司机,因为他们可以直接导致肺部肿瘤发生和,更重要的是,是潜在的治疗靶点5]。例如,表皮生长因子受体突变,它存在于近50%的中国患者ADC (6),很好地定义为肺癌司机和通常在诊断评估作为一线的选择性生物靶向治疗与表皮生长因子受体抑制剂(7]。在过去的十年中,大量研究表明,靶向药物,主要是表皮生长因子受体和筛选抑制剂,是非常有效的治疗基因定义的肺癌患者(3]。目标药物结合在肿瘤细胞突变致癌蛋白和阻止他们的活动更有利,因为它们通常更强大和更少的有毒由于其广泛的治疗窗口(8]。
基因突变RAS的家庭(喀斯特国家管制当局方面,和极品)经常在各种肿瘤,包括肺癌、胰腺癌和结肠癌9]。喀斯特错义突变,其中最常见的是G12 C亚型(∼40%)其次是G12 V(∼20%),在大约25%的adc和主要影响密码子12日13日和61年(10]。喀斯特蛋白是一种GTPase,扮演着关键的角色在许多生物过程,如促进细胞存活和增殖。喀斯特的活动依赖于其GTP-bound活动状态之间的切换和蛋白不活跃的状态,和喀斯特突变锁中的蛋白质GTP-bound活跃状态。这种现象导致增殖作用的持续激活蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇3-kinase PI3K通路,两个重要通路下游的喀斯特protumorigenic当异常激活突变喀斯特(11]。
尽管KRAS基因突变是真实的治疗靶点[11),药物直接的发展目标突变喀斯特只在最近才取得了重大突破。KRAS-mutant allele-specific抑制剂,如AMG 510 (sotorasib)和MRTX849 (adagrasib),可以针对G12C-mutant喀斯特和抑制下游的信号,从而杀死肿瘤细胞窝藏喀斯特G12C突变(12,13]。2021年5月,基于I / II期临床试验的结果,sotorasib获得加速批准美国食品和药物管理局(FDA)喀斯特的治疗G12C突变的晚期或转移性非小细胞肺癌患者(14]。在这些临床试验,治疗sotorasib实现客观反应率在喀斯特(ORR)的37.1%G12C非小细胞肺癌患者和疾病控制率达到86%,证明sotorasib作为单一疗法的临床疗效14]。不久之后,FDA也获得了突破性的治疗指定为喀斯特adagrasibG12C突变的非小细胞肺癌(15]。值得注意的是,sotorasib-treated患者无进展生存的中位数是6.8个月,表明一些病人的反应时间是短暂的,可能由于适应性的发展阻力14]。此外,喀斯特的功效G12C抑制剂在结肠癌很低(奥尔= 7%),这样做的原因并不是很清楚(12,14]。
成对肿瘤38例样本,包括27 NSCLC患者最初回应adagrasib但后来获得性耐药,是分析基因改变(16]。17例(45%)表现出公认的耐药机制,包括高层放大喀斯特G12C、二次喀斯特突变,激活突变的BRAF,见过放大(16]。这些突变的角色在一个更大的群体需要验证;然而,这些数据表明,患者出现获得抗病性的遗传和表观遗传机制。例如,临床前模型研究的结果表明,平行抑制PI3K途径改善喀斯特的抗肿瘤活性G12C抑制剂在一些细胞系表现出固有电阻(17]。mTOR,此外,cotargeting EGFR, SHP2 CDK4/6,免疫检查点可以加强喀斯特的肿瘤抑制活动G12C抑制剂在临床前模型(13,17- - - - - -21]。最近,epithelial-mesenchymal过渡(EMT)据报道,参与抵抗喀斯特G12C抑制剂(22]。虽然这些研究结果表明,肿瘤细胞可以开发固有电阻喀斯特G12C抑制剂通过各种方式,自适应抗喀斯特的机制G12C抑制剂在很大程度上仍难以捉摸。
在目前的研究中,我们调查了肺癌细胞喀斯特的动态响应G12C抑制剂,发现多个受体酪氨酸激酶(rtk),包括ERBB2 ERBB3, FGFR1、可能导致药物耐受性和阻力。此外,我们表明,前期的垂直定位MAPK通路(RAS / RAF MEK / ERK)与喀斯特组合治疗G12C和一半抑制剂可以明显地提高肺腺癌模型的治疗效果。
2。材料和方法
2.1。细胞培养和试剂
H358、Calu-1 H23细胞获得写明ATCC(美国弗吉尼亚州马纳萨斯)。在rpmi - 1640细胞培养介质补充10%胎牛血清(青霉素、链霉素的边后卫)和1%在37°C孵化器有限公司为5%2。人类FGFR1 cDNA克隆(NM_023110.3)空慢病毒表达载体pSlenti-CMV-Puro (OBiO技术,中国上海),以及由此产生的向量用于生成H358细胞overexpressing FGFR1。细胞增殖是CCK-8化验检查。所有与mycoplasma-free细胞实验研究。其他试剂信息表提供S1。
2.2。转录分析
RNA-seq是由北京基因组研究所(深圳华大基因研究院,中国)BGISEQ平台。微分表达式分析使用DESeq2 R包,并与调整后的基因值< 0.05被指定为差异表达基因(度)。基因本体论(去)富集分析clusterProfiler R包。去与调整值< 0.05被认为大大丰富。基因集富集分析(GSEA)进行使用在线GSEA软件(https://www.gsea-msigdb.org)。基因表达数据报告摘要存入NCBI GEO数据库下加入GSE164326数量。
2.3。异种移植研究
H358细胞(5×106)在0.2毫升的PBS皮下注入女性裸体小鼠的侧翼(5 - 6周大)。肿瘤形成的老鼠监控每三天。治疗开始时肿瘤达到约100毫米3大小。老鼠被随机(n≥5老鼠/组)分配给接收AMG 510年口腔填喂法(10毫克/公斤,每天),sta - 9090通过尾静脉注射(50毫克/公斤,一次/周)或组合;控制老鼠处理车辆。肿瘤体积计算使用公式(长×宽2)/ 2。研究进行了符合协议和制度指导南通大学的伦理委员会批准。
2.4。实时聚合酶链反应
RNA提取使用RNeasy迷你包(试剂盒,日耳曼敦,MD),并使用上标很互补脱氧核糖核酸合成互补脱氧核糖核酸合成装备(热费希尔,理查森,TX)。实时PCR是由使用ABI StepOnePlus系统(热费希尔)和iTaq™普遍SYBR绿色Supermix (Bio-Rad大力神,CA)。数据分析,2−ΔΔCT方法被用来计算褶皱的变化。GAPDH表达被认为是影响我们的治疗条件下,作为参考基因。用于实时PCR引物序列如下(5′3′):FGFR1向前,CCCGTAGCTCCATATTGGACA和反向,TTTGCCATTTTTCAACCAGCG;GAPDH向前,GAAGGTGAAGGTCGGAGTC GAAGATGGTGATGGGATTTC和反向。每个实验运行一式三份,误差范围代表的褶皱变化计算出三个或四个独立的实验。
2.5。免疫组织化学(包含IHC)
串行部分(5μ米)从组织块,切deparaffinized二甲苯,水化的分级系列酒。幻灯片当时沉浸在柠檬酸揭露的解决方案(10 x) (CST,丹弗斯,妈,# 14746)在一个高压锅抗原检索10分钟。灭活后内源性过氧化物酶活性为3% H2O2,幻灯片孵化主要抗体(表S1)对Ki67 1: 100稀释一夜之间在4°C调湿室。检测,幻灯片治疗SignalStain提高探测系统(CST, # 8114)根据制造商的指示,沾轻拍3 - 5分钟,并与苏木精复染色5 - 15秒。最后,幻灯片是脱水和安装。所有图片获得使用蔡司显微镜(观察者Z1)。
2.6。免疫印迹
免疫印迹都使用全细胞溶解产物。简而言之,总蛋白质的整除(20 - 50μg / lane)在10% SDS-polyacrylamide梯度凝胶电泳和转移到聚乙二烯二氟化物(PVDF)膜(微孔,贝德福德,妈,美国)。一夜之间,细胞膜被在4°C的环境与主p-ERK抗体,ERK, p-S6, S6, p-FGFR1, FGFR1、p-AKT, AKT, vinculin,连环蛋白。与洗缓冲区,清洗后膜被孵化与辣根peroxidase-conjugated二级抗体稀释1:10000年,信号可视化与西方SuperSignal硬脑膜试剂(热费希尔)。抗体表提供信息S1。
2.7。统计分析
使用GraphPad棱镜7进行了统计分析软件(GraphPad软件、圣地亚哥、钙、美国)。一般来说,值绘制的平均值±标准偏差(SD)。比较方式与学生的独立组织进行t以及(2组)或单向方差分析(3或更多组)为两两比较,和 被认为是具有统计学意义。可以使用其他材料和方法的补充文件。
3所示。结果
3.1。FGFR1先天抵抗喀斯特G12C抑制剂
喀斯特的敏感性G12C抑制剂不同肺癌细胞系中携带喀斯特G12C突变(图1(一)),这表明存在的固有阻力。FGFR1报道引起抵抗MEK抑制剂在肺癌细胞(23,24]。我们发现FGFR1的水平,H358 p-FGFR1 H23, Calu-1细胞与这些细胞的反应ars - 1620(数字1 (b)和1 (c))。ars - 1620和AZD4547联合治疗,3天的FGFR1抑制剂,显示细胞毒性影响H358细胞类似的ars - 1620治疗(图1 (d));然而,这表现出增强的肿瘤治疗为辅,影响H23 Calu-1细胞(数字1 (e)和1 (f))。然后我们建立H358细胞overexpressing FGFR1 (H358-FGFR1OE),正如所料,迫使FGFR1的表达减弱ars - 1620的细胞毒性,而联合治疗ars - 1620和AZD4547增强肿瘤为辅,效果(数字1 (g)和1 (h))。免疫印迹分析表明,p-ERK的水平和抑制了p-S6 ars - 1620细胞株进行测试,并添加AZD4547进一步减少p-S6的表达(图1(我)),说明增强途径抑制。在一起,这些结果表明,FGFR1在肺癌细胞的过度表达可能有助于抵抗喀斯特G12C抑制剂。
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3.2。的转录分析喀斯特G12C抑制剂的反应
1.0 H358细胞,持续治疗μM ars - 1620诱导获得性耐药,通常在2 - 3周内。免疫印迹分析表明,ars - 1620抑制ERK的磷酸化(p-ERK)政府后不久,但p-ERK 48 h后恢复的水平。增加p-ERK更明显在耐H358 (H358_R)细胞,证明显著反弹ERK活性(图的回归2 (b))。喀斯特研究动态反应抑制,我们与父母的表现RNA-seq H358 (H358_P)细胞和H358_R细胞以及H358细胞治疗ars - 1620 24 h (H358_24H)或48 h (H358_48H)。度和显著改变通路被确定(数字2 (c)- - - - - -2 (f),图S1A)。GSEA和热图分析表明,在H358_P细胞相比,KRAS-dependent签名在H358_24H和H358_48H细胞表达下调,更大大H358_R细胞中表达下调,表明这些基因不是H358_R细胞(人物的生存所必需的2 (g)和2 (h))。一致的高架p-ERK H358_R细胞,GSEA表示,一些MAPK和ERK目标基因,如PPP2R1B PPP2CA,和ELK1,表达下调短期治疗后但在H358_R恢复或过表达细胞(图2(我)),而一些基因调节通过短期治疗ars - 1620等MAPK3、DUSP3 MAPK14,再次被压制在耐药细胞(图2(我))。
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反馈激活rtk导致各种癌症靶向治疗抵抗(25]。转录分析显示独特的RTK表达模式在细胞治疗短或长时间,如图3(一个)。H358_P细胞相比,H358_48H细胞显示一些rtk upregulation,等ERBB2/3和KDR(图3(一个)),这表明他们促进细胞存活的急性期治疗。其他几个rtk在H358_R细胞升高,等TNFRSF1A和FGFR1(图3(一个)),而表皮生长因子受体,见过,和其他人没有显著改变在整个疗程(图3(一个))。实时PCR表明FGFR1开始增加治疗后48 h ars - 1620,在两周(图进一步调节3 (b)),的时间点drug-tolerant细胞开始恢复增长。在一起,这些数据显示动态改变多个信号通路和RTK表达对喀斯特抑制的反应。
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3.3。前期联合治疗减少抵抗喀斯特G12C抑制剂
令人惊讶的是,H358_R细胞联合治疗顽固的ars - 1620和AZD4547(图3 (c)),这表明rtk FGFR1以外或其他途径支持耐药细胞的可行性。SHP2是一个适配器所需的信号转导多种rtk(图3 (d))[26];然而,cotreatment ars - 1620和轴马力- 099没有减少H358_R细胞(图的可行性3 (e))。Cotreatment ars - 1620和PD0325901 (MEKi)也未能减少H358_R细胞生存能力,尽管在H358_R细胞MAPK复活是杰出的。细胞甚至抵抗ars - 1620的当天,PD0325901, ravoxertinib (ERKi)(图3 (f))。免疫印迹分析表明p-ERK和p-S6(图的抑制3 (g)),和实时PCR显示减少的两个ERK目标基因的表达,DUSP6 shp和SPRY4(图3 (h)),这表明缺乏效果并不是由于理想药物浓度。因此,H358_R细胞似乎显示耐多药(MDR)表型。这些结果暗示一个前期cotargeting策略比顺序可能更有效的针对策略来最大化肿瘤杀细胞作用,防止适应性发展的阻力。事实上,所有的药物组合测试减少H358_P细胞的生存能力更有效地比任何单一药物治疗,如图3(我)- - - - - -3 (k)。
鉴于MAPK信号级联激活主要通过RTK / RAS / RAF MEK / ERK轴(图3 (d)),我们假设cotargeting多个节点(垂直定位)通路会协同对信号抑制的影响。事实上,ars - 1620和PD0325901结合低剂量(0.1μ米)更有效的杀死H358细胞体外比任何单一药物治疗(数字4(一)和4 (b))。接下来,H358细胞被裸体将皮下移植到免疫缺陷小鼠,当肿瘤达到100毫米3大小的老鼠接受单独或结合trametinib AMG 510。之前的研究表明,单一药物疗法与trametinib 1毫克/公斤未能缩小H358异种移植物大小(18,27]。在这里,我们表明,尽管AMG 510单一疗法30毫克/公斤没能显著缩小H358肿瘤联合治疗与trametinib(1毫克/公斤)和AMG 510有效地诱导肿瘤回归。我们还测试了510 AMG的功效,trametinib,和AZD4547(10毫克/公斤)结合在一起,这似乎比双药物诱导肿瘤回归更有效地结合;然而,差异无统计学意义(图4 (c))。方案耐受性良好,稳定的鼠标重量随时间变化(如图所示的图S2A)。在一起,我们的研究结果表明,前期结合的治疗可以改善喀斯特抑制剂的疗效。
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3.4。针对一半寿命提高喀斯特的功效G12C抑制剂
我们表明,H358_R细胞不再回应治疗目标MAPK通路下游或上游RTK信号(数字3 (c)- - - - - -3 (f))。此外,当父母H358细胞治疗ars环球数码创意- 0941,- 1620和PI3K抑制剂细胞生存能力大幅减少,这与先前的研究一致(17]。然而,cotreatment H358_R细胞的效果比不上H358_P细胞(图4 (d)),再次表明敏感细胞应该最初接受的药物组合。有趣的是,H358_P和H358-R细胞容易sta - 9090,一个一半抑制剂(图4 (e))。一半是一个伴护蛋白质参与多种信号通路,包括MAPK PI3K, NF -κB, JAK-STAT通路(28),不出意料,有很强的细胞毒性效应在许多细胞系窝藏MAPK激活事件,包括H23和Calu-1细胞(图4 (f))。
接下来,老鼠轴承H358异种移植是治疗AMG 510(10毫克/公斤,日报),sta - 9090(50毫克/公斤,一次/周),或两三个星期。方案是耐受性良好(图开通),结合治疗诱导肿瘤回归更有效地比单一疗法(图4 (g))。一致,包含IHC染色Ki67的肿瘤样本显示,肿瘤细胞增殖抑制更重要的是通过联合治疗比AMG 510单一疗法(图S2C)。
AMG 510(500海里),治疗sta - 9090(100海里),或两种药物组合对72 h明显抑制H358细胞生存能力(图4 (h))。正如预期的那样,H358_R细胞抵抗AMG 510年,但他们的增长是明显被sta - 9090单独或者sta - 9090 + AMG 510 cotreatment(图4 (h))。H23和Calu-1细胞的生长抑制了AMG 510年,尽管他们比H358细胞(数字不敏感4(我)和4 (j))。sta - 9090也抑制了H23和Calu-1细胞的生长,同时结合sta - 9090和AMG 510抑制肿瘤的生长比单独用药(数字4(我)和4 (j))。接下来,H358, H358_R、H23 Calu-1细胞处理AMG 510年,sta - 9090,或结合24 h,和西方墨迹图表明,治疗仅AMG 510年的水平减少p-ERK H358, H23, Calu-1细胞;然而,这并不影响的水平p-AKT H23, Calu-1, H358_R细胞(图4 (k))。仅sta - 9090,结合AMG 510 p-AKT的水平显著下降,总AKT, p-S6,和p-ERK细胞系测试和联合治疗似乎更有效地减少p-ERK的水平(图4 (k))。因此,这些结果表明cotargeting一半是一个有效的方法提高肿瘤通过喀斯特杀死G12C抑制作用主要是通过抑制ATK公司信号通路的激活。
4所示。讨论
发现allele-specific喀斯特G12C抑制剂是一个突破,一些开创性的候选人已经先进到早期的临床试验和鼓舞人心的治疗效果。然而,一些患者喀斯特G12C抑制剂最初实现肿瘤回归,但复发后由于耐药性的发展12]。在这里,我们表明,FGFR1超表达有助于抵抗喀斯特G12C抑制剂在肺癌。有趣的是,FGFR1还调节自适应抗MEK抑制剂喀斯特突变的肺癌细胞(24]。相反,RAS激活导致电阻FGFR1抑制剂FGFR1放大肺癌(29日),这表明FGFR1和喀斯特改变都可以维持异常MAPK途径激活和驱动交互的阻力(图在肺癌的靶向药物治疗3 (b))。
Manchado等人报道喀斯特突变的肺癌细胞显示上皮或间质表型(17]。H358等上皮细胞的细胞,反馈upregulation ERBB3导致阻力与MEKi靶向治疗,然而,在间充质细胞如Calu-1细胞,FGFR1 upregulation负责MEKi电阻(30.]。我们发现ERBB2/3 H358细胞是调节后不久ars(图- 1620治疗2(一个)),这表明它立即促进drug-tolerant细胞生存,而间质转型和FGFR1过度后驱动自适应的发展阻力。的一致,我们发现增加表达间充质标记VIM ZEB1, TWIST1和减少的表达上皮标记是携带者H358_R细胞H358_P细胞相比,表明间充质表型耐药细胞(数字印地- - - - - -S1E)。这些结果表明,喀斯特抑制启动多个rtk的动态表达式,并诱发了EMT程序在肺癌细胞,并在人口快速增长的抗药性的出现。这些结果与以前的研究一致表明ZEB1调节FGFR1在肺癌细胞的表达30.,31日),EMT导致抗表皮生长因子受体和BRAF抑制剂(32- - - - - -34)以及AMG 510 (22]。因此,即使在人口相对同质的癌细胞,rtk的水平动态变化治疗仍在继续。此外,环境因素和intertumor intratumor分子异质性进一步复杂化的场景(14]。因此,针对多个rtk或通路可能需要克服不同的耐药机制。
没有回应,H358_R细胞结合治疗KRASi FGFRi;然而,H23的治疗是有效的,Calu-1, H358-FGFR1OE细胞,所有这些都显示,至少一些固有电阻KRASi单独治疗。令人惊讶的是,H358_R细胞也耐药与ars - 1620和SHP2i联合治疗,尽管这种组合应该阻止多个RTK的转导信号通路(26,35]。此外,这些细胞治疗没有反应,同时目标喀斯特G12C,MEK的兵,虽然MAPK通路激活是突出。这些现象让人想起发现黑色素瘤病人,为病人连续单一疗法成为耐火MEKi单药治疗后复发BRAFi单药治疗。因此,前期组合治疗BRAFi和MEKi已成为一线治疗的诊所(36]。间充质转变,我们推测,FGFR1 upregulation和激活多种途径,包括MAPK和PI3K途径,共同诱发多种治疗逃避机制H358_R细胞中观察到,前期结合的临床治疗将是有利的,因为它可能有针对性的疗法的好处最大化。
而在肿瘤耐药性的机制是不同的激活MAPK事件,他们最常与抑制通路的激活37,38),这表明大多数肿瘤都沉迷于,即持续的依赖,持续激活MAPK通路。我们建议前期针对MAPK通路的多个节点(垂直目标)喀斯特是一个合理的策略G12C肺癌,因为它利用了癌基因依赖,因此地址的主要耐药机制。此外,垂直目标信号与药物组合链可能会更抑制肿瘤生长在较低剂量的药物。事实上,我们表明,KRASi和MEKi低剂量有效地杀死了喀斯特G12C肿瘤细胞(图4(一)和4 (b)),在协议与先前的报道显示,联合治疗RAFi + MEKi或MEKi + ERKi协同增强肿瘤死亡(39,40]。与所谓的平行定位相比,这可能阻止互补信号,对正常细胞的生存至关重要,垂直目标可能是更少的有毒(41]。自510年AMG和MRTX849目标突变喀斯特G12C蛋白质,正常细胞被认为是最低限度的影响。然而,临床试验表明,大约有20 - 30%的肺癌患者体验副作用大于三年级(12,14]。因此,安全应该仔细评估合适的临床前模型,尤其是喀斯特G12C抑制剂结合其他代理。
针对一半单独或结合喀斯特G12C抑制剂能有效地杀死父母和耐药细胞(数字4 (e)和4 (h)),可能因为一半客户蛋白质参与多个途径。因此,针对一半可以克服阻力通过广泛的药理作用的发挥42,43]。针对一半显示治疗的潜力喀斯特突变的癌症模型(44]。一半也已被证明能够抵消阻力靶向治疗或免疫疗法在各种癌症模型(42,45,46]。然而,一半抑制剂单一治疗未能改善肺癌患者的生存,这表明耐药性也限制了功效[47]。一半和一种蛋白激酶,从而形成一个复杂的调节AKT活动(48]。一致,我们发现sta - 9090 AKT的水平下降,p-AKT, p-S6肺癌细胞(图4 (k))。sta - 9090也减少了p-ERK在细胞的水平具有不同敏感性的AMG 510,包括耐H358_R细胞(图4 (k))。CRAF蛋白质激酶报告是一个一半的客户(49),因此,sta - 9090可能抑制ERK激活通过阻断RAF MEK / ERK信号转导的级联。在一起,这些数据表明,目标一半可以同时抑制多种途径对肺癌细胞的生存至关重要(图3 (d))。更重要的是,综合治疗与AMG 510和sta - 9090是容许在小鼠和有效地诱发肿瘤回归比单独用药,这表明这种组合可以实现协同杀死肿瘤细胞,防止dual-drug-resistant细胞的出现。
5。结论
反馈rtk和多个通路的激活和间充质转变可能合作促进细胞生存和抵抗喀斯特G12C抑制剂。前期组合治疗针对MAPK-related途径可以改善喀斯特的功效G12C抑制剂。此外,cotargeting喀斯特G12C和一半AMG 510 + sta - 9090可能是一种有效的治疗策略组合与喀斯特肺癌患者G12C突变。
数据可用性
RNA序列数据在NCBI基因表达数据库综合(GEO)下加入GSE164326数量。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
这项工作得到了国家自然科学基金(授予号。81771681,81771681,82172931),社会发展的江苏关键基础(批准号BE2018670),江苏六精锐部队基金会(批准号- 058)西南偏西,南通科技项目(批准号XG202008-5)。
补充材料
图S1: H358细胞的转录分析处理ars - 1620。图S2:联合治疗的疗效与AMG 510和sta - 9090体内。表S1:抗体和试剂的信息。(补充材料)