表皮生长因子受体暴露于原子能委员会/ p-BQ无法绑定c-Cbl并不是ubiquitinated。Serum-starved A549细胞都参与(NT)或暴露于100 ng / mL EGF 5分钟(用作积极控制),2L /毫升原子能委员会或200 ng / mL p-BQ 1小时。治疗后,立即细胞细胞溶解,表皮生长因子受体是免疫沉淀反应(IP)从细胞溶解产物使用anti-EGFR抗体。免疫沉淀反应蛋白sds - page分离,转移到PVDF膜,和免疫印迹(IB)表示抗体(a)。Serum-starved A549细胞都参与(NT)或暴露于100 ng / mL EGF 5分钟或2小时,2L /毫升原子能委员会或200 ng / mL p-BQ 1小时。治疗后,细胞被洗PBS和新鲜血清培养基的进一步孵化2小时前在37°C溶解。表皮生长因子受体的免疫沉淀反应(IP)从细胞溶解产物使用anti-EGFR抗体。免疫沉淀反应蛋白sds - page分离,转移到PVDF膜,免疫印迹(IB) antiphosphotyrosine (PY20)抗体(b)。
