金属氧化物纳米颗粒和散装的某些混合物的亚致死剂量的拮抗作用（铝₂Ø₃，CuO和二氧化硅₂)的鳃组织claria gariepinus

抽象

背景。纳米粒子(NPs)对水生环境的影响研究甚少。目的。本研究评估这些不同的金属纳米颗粒和它们的散装以混合物的联合作用的毒性（铝₂Ø₃，CuO和二氧化硅₂)研究鱼类的组织生物标记。材料和方法。三种盐的体积和纳米尺寸₂Ø₃，CuO和二氧化硅₂）使用。Nanosizes ranged from 25 nm to 100 nm. The juvenile fishes ofclaria gariepinus（mean Length: 12.3 ± 3.5 cm; mean weight: 18.52 ± 6.41 g) were used for the acute and chronic toxicity tests. They were exposed to 7 mg/L each of the bulk and nano sizes of the three metallic oxides either singly or in mixtures for 28 days. The basis for the sublethal concentration was that the 96 hr acute toxicity of the varied sizes of the three metallic oxides was nontoxic up to the concentrations of 100 mg/L with no significant mortality at the highest exposure concentrations. The gills were collected for histopathology.结果。三种金属氧化物纳米颗粒中，SiO毒性最强，组织病理改变指数(HAI)为20.0，其次为纳米cuo (HAI, 10.0)和纳米al₂Ø₃(海,2.0)。单次暴露时，鳃的改变包括鳃片糜烂(EGL)、肥大(HPT)、水肿(OD)和坏死(N)的高频率出现₂Ø_3.SiO + CuO和SiO + Al₂Ø₃+ CuO相等(1:1 - hai, 2和6;1:1:1 - hai, 6)和不等比(1:2 - hai, 16和6;2: 1-HAI, 8和6)。同样，除了体积CuO (HAI, 20)和体积Al等比例外，所有体积组合均具有拮抗作用₂Ø₃(HAI, 10)与HAI为32的相加效应。结论。纳米氧化铝的联合行动₂Ø₃与SiO结合的CuO产生的毒性低，不像他们单一试验的毒性高;这也说明纳米铝₂Ø₃CuO是对手。类似地，本体金属氧化物中（SIO，铝₂Ø₃，而CuO是毒性最大的。体积SiO和Al₂Ø₃是对CuO对鱼鳃的影响拮抗。有必要正确记录纳米颗粒的生态影响在水生环境。

1.简介

纳米技术产业在过去20年的快速发展尚未达到其潜力[1]。这已推动通过材料具有纳米尺度的不同寻常的性质;然而，它也是这些特性是关于其潜在的毒性和生态毒理学部分燃料的关注。纳米粒子的工程材料的应用可以提高其浓度，地下水，土壤和地表水呈现最显著曝光渠道，途径和命运评估环境风险[2]。

像氧化硅这样的纳米颗粒在制备纳米复合材料中有许多应用，以提高其耐热性和电气和机械性能。此外，它还应用于催化剂、颜料稳定剂、电子和传感器等各个领域。纳米氧化铝被用作固体火箭推进剂配方和炸药的原料。纳米氧化铜用于生物医学应用，如抗菌剂和等离子体材料作为重整催化剂的组成部分。

有关使用新意念的研究有限[3]。材料的小型化是极大的兴趣，由于相比于散装物料的理化性质的差异。这些属性包括颜色，溶解性，导电率，和工程纳米材料的催化活性[4]。除了增加的表面积与体积比外，纳米颗粒还可以作为污染物的吸附剂。

纳米毒理学解释了纳米粒子对健康的毒理学基础的概念和环境[五]。一些研究报告了NPs及其大量盐对生物群的有害影响，但环境中其他污染物和成分混合物的存在尚未得到充分研究。NPs对水生生态系统的污染一直是全球关注的问题[6]。这些污染物包括纳米颗粒可能会增加天然水中的金属含量，严重影响湿地栖息地[7]。It was reported that the 95 hr LC₁₀从100介于对鱼的各种纳米粒子的 μgL的^-1to 1 mg·L^-1，while the 95 hr LC₅₀的纳米粒子到达mg / L的范围内8]。地表水中NPs的预期浓度范围为μgL的^-1低mg·L^-1[8，9]。

已经由几个生态毒理学家和科学家[报告为组织阶段的分类和分类工具使用鱼组织病理学改变指数的变化相对于压力或接触化学品10-13]。这已被用来评估对鱼类的环境，并帮助建立接触有毒物质和各种生物反应[之间的因果关系健康污染物的影响10]。利用与污染物有关的鱼类疾病发病率和流行率作为环境压力指标，为暴露史提供了一个明确的生物学终点[10，13，14]。

鱼鳃是对环境变化非常敏感，很容易被低浓度污染物[受影响15]。鳃有很大的表面积和执行各种生命功能，如呼吸、渗透调节和排泄。由于它们是与外界环境直接接触的外部结构，对水生环境的化学和物理变化非常敏感[16]。鳃用于气体交换和诸如除了酸碱平衡离子和渗透调节其它重要功能的主要位点;在这些器官的结构组织病理学变化涉及呼吸障碍和电解质紊乱[16]。

曼苏里等人。[15]报道在鲤鱼如增生，水肿，曲率，融合，动脉瘤，和坏死后10天和20天暴露于TiO 2的鳃中最常见的组织病理学的异常₂NPs (10.0 mg·L^-1）和措NPs (2.5 and 5.0 mg·L^-1）单独和混合物。将混合物效果报告为协同。这项研究是相似的[17],暴露Carassius auratus(金鱼)对20纳米铝悬浮液的混合物₂Ø₃和50nm大小的ZnO。鳃部有明显的形态改变，如增生(伴有鳃片融合)。混合物中的组合相互作用可能是拮抗、协同或添加剂，具体取决于氧化物NPs的特定性质和类型，如尺寸和表面积[17]。但是，也有在纳米颗粒上的上使用组织生物标志物的鱼的联合作用及其块状金属的盐有限的研究。

本研究的目的是评估的不同重金属的混合物联合作用的毒性（铝₂Ø₃，CuO和二氧化硅₂)研究鱼类的组织生物标记。

2。材料和方法

2.1。实验化学品和试验溶液的制备

三种盐的体积和纳米尺寸₂Ø₃，CuO和二氧化硅₂）购自Sigma Aldrich公司购买。它们被存放在室温下在实验室中使用之前。纳米铝₂Ø₃appeared as grey coloured powder, density of 2.70 g/cm³尺寸为40nm，纯度为99.9%。纳米cuo呈红色至黄色粉末，25℃下密度为8.94 g/ml，粒径<50 nm。二氧化硅₂is a brown yellow powder, density of 2.33 g/ml at 25°C with size <100 nm.

用去氯的自来水制成无涂层粉末的悬浮液，以获得不同浓度的测试溶液。将相应克的金属氧化物溶解在1升脱氯自来水中，以获得适当的混合物，以获得储备溶液(图)1)。通过文献检索得到试验浓度。测试化合物的浓度被制备为单一溶液和1:1、1:2、2:1和1:1:1的混合物，对于体积和纳米级氧化物。

2.2。实验生物:采集和驯化

非洲尖牙鲶鱼claria gariepinus，用于这项研究。它是便于文化的基础上，选择和已知响应从现有的文献中的污染物。鱼是从Akoka，拉各斯养鱼场采购，而在开放的鼓运到动物，实验室附件在生物园处。The fishes were transported into large holding tanks (100 L capacity) in the laboratory which were half filled with dechlorinated tap water left open for 24 hours. The juvenile fishes (mean length: 12.3 ± 3.5 cm; mean weight: 18.52 ± 6.41 g) were employed for the sublethal/chronic toxicity tests. Only catfishes of the same batches were used for the experiment.

这些鱼在实验室中适应环境，使用容量为100 L的水箱，养殖密度为每升20条小鱼，每窝幼鱼5条。驯化持续7天，然后开始生物测定。驯化在标准实验室条件下进行(温度26.0±3.0℃;湿度:75±6%;光周期，光:暗，12:12小时)。生物测定培养基(去氯自来水)的质量也适宜(pH: 6.8;D。Ø，8。五 mg/L; Salinity, 0.0 ppt).

2.3。室内生物测定

2.3.1。急性毒性试验

The acute toxicity test/range finding exercise was conducted over 96 hours with varying concentrations in order to achieve mortality. The bioassay containers were made of plastics (6 m × 4  cm × 4 cm). During the acute toxicity test, the fingerlings were stocked at 10 fishes per litre of water, made up by equivalent concentrations of the stock solution of the bulk and nanoscale heavy metals acting singly. Each setup was in duplicate, i.e., 20 fingerlings per concentrations.

The fishes were exposed to concentrations of 1 mg/L, 10 mg/L, 100 mg/L, 1000 mg/L, and 3000 mg/L as required based on the response of the test organism. The 96-hour acute toxicity of the nano and the bulk metals was found to be nontoxic up to the concentration of 100 mg/L, and no significant mortality was found at the highest exposure concentration.

2.3.2。慢性毒性试验

在慢性毒性试验中，幼龄鲶鱼被单独或混合暴露于三种金属氧化物的体积和纳米大小各7毫克/升的环境中28天。慢性毒性试验是在较大的塑料(11 cm×9 cm×7.5 cm)中进行的，使用5 L的水，因为与急性毒性试验相比，鱼的体型较大。暴露期结束后，用脊髓穿刺固定鱼体，将鱼体解剖，收集鱼鳃并保存以作组织病理学检查。

2.3.3。组织病理学检查

鳃用10%福尔马林固定，用分级乙醇脱水[18]，清除在二甲苯，包埋在石蜡中，并在5切片 μ我在旋转切片机上。使用苏木精和伊红技术对载玻片进行光镜染色[18]。根据组织病理学变化进行评价[18]和[10]，其包括用于使用以下公式每条鱼组织病理学改变指数（HAI）的计算：

Because I, II, and III correspond to the number of stages of change, the mean HAI was scored on six-point scale: 0 = normal tissue; 2.0 = mild damage to the tissue; 4.0 = moderate damage to the tissue; 6.0 = partially severe damage to the tissue; 8.0 = severe damage to the tissue; 10 = irreparable damage to the tissue. These stages of change and scoring system or scale are given in Table1。

3.结果与讨论

3.1。单次和联合照射的组织病理学效应和联合作用claria gariepinus28天亚致死浓度的纳米金属盐

NPs与其他污染物的相互作用取决于NPs的特性，如大小、组成、形态、孔隙度、聚集/分解和聚集结构。除了生物组织中的毒性外，NPs和bulk的破坏性影响主要是由于它们的分散、持久性、生物积累和生物放大潜力[19]。

鳃是NPs作用的主要靶器官。Jayaseelan等人和Griffitt等人[20.，21已经报道了诸如渗透调节、呼吸气体交换和体液渗透平衡功能障碍等生理改变。由于每体积比上皮层表面积大，该器官更容易受到污染物的影响[22]。在以往的研究组织学和生化分析表明鳃是主要的靶器官[10，11，21]。正如Griffitt等人所揭示的那样，生理改变可以作为组织学改变而变得明显[21]，谁报告上皮细胞的纳米颗粒产生肥大在鳃[21]。

在这项研究中，最组织病变在鱼鳃如增生，水肿，曲率，缩短和鳃片，动脉瘤，和坏死中描述的融合和使用索引量化为在几个研究[使用10-13]。表2和4-7和数字1-12显示了组织病理效应和单联合行动和联合曝光claria gariepinus到的纳米金属的盐的28天的亚致死浓度。单次暴露于纳米二氧化硅，纳米铝₂Ø₃和纳米CuO的制备在28天后产生不同的影响。纳米二氧化硅是最有毒的，与组织病理学改变指数为20.0（HAI），随后通过纳米的CuO（HAI，10.0）和纳米的Al₂Ø₃(海,2.0)。鳃的改变包括鳃片糜烂(EGL)、肥大(HPT)、水肿(OD)和坏死(N)。

组织病理学改变指数(HAI)显示，这些金属氧化物的纳米颗粒会影响鱼鳃，而暴露于铜NPs的其他鱼类也有类似的损伤[22，23),TiO₂NPs (24]，以及其他的NP如钴（III）氧化物（钴₂Ø₃）纳米颗粒[24]和胶体银纳米粒子[25]。

如果纳米SiO与同等比例(1:1)的另一种纳米盐联合暴露的影响是个体效应的增加，则SiO + Al的HAI₂Ø₃和二氧化硅 + CuO should be 22.0 and 30.0, respectively. The actual combined effects of SiO + Al₂Ø₃和二氧化硅 + CuO were HAI: 2.0 and 6.0, respectively. The gill alterations include low frequencies of hypertrophy (HPT) and shortening of secondary gill lamella (SSGL). This implies that joint actions of Al₂Ø₃与SiO结合的CuO产生的毒性低，不像他们单一试验的毒性高;这也表明Al₂Ø₃CuO是对手。

Increasing the concentration of SiO in the mixtures (SiO + Al₂Ø₃和二氧化硅 + CuO) in ratio 2 to 1 makes no difference in the toxic level. The actual combined effects of SiO + Al₂Ø₃SiO + CuO分别为HAI: 8.0和6.0。鳃的改变包括低频率的鳃上皮增生(EH)和次级鳃片缩短(SSGL)。

增加铝的浓度₂Ø₃和措in the mixtures (SiO + Al₂Ø₃和二氧化硅 + CuO) in ratio 1 to 2 still had no change in the toxic level for CuO with HAI of 6.0, but there was moderate toxicity for Al₂Ø₃具有16.0 HAI。鳃改变包括上皮细胞的不受控制的增殖（PEC），鳃上皮升降（EPL）和坏死（N）的中等频率。

三个纳米金属的盐的混合物（SIO，铝₂Ø₃，和措）in ratio 1 : 1 : 1 produced low toxic effect (HAI, 6.0) compared to the addition of the individual effect, assumed to be HAI: 30 or 22. The gills have low frequencies of epithelial lifting (EPL) and shortening of secondary gill lamella (SSGL).

3.2。单次和联合照射的组织病理学效应和联合作用claria gariepinus上大块金属的盐的28天亚致死剂量

表3和4-7和数字1-12显示了组织病理效应和单联合行动和联合曝光claria gariepinus大量金属盐的28天亚致死浓度单次暴露散装SiO，散装Al₂Ø₃和体产生的CuO 28天之后产生不同的影响。散装的CuO是最有毒的，与组织病理学改变指数为20.0（HAI），其次是散装的Al₂Ø₃（HAI，10.0）和体的SiO（HAI，6.0）。鳃改变包括鳃薄片的侵蚀（EGL），肥大（HPT），水肿（OD）的高频，发育不良鳃薄片（SGL），动脉瘤（ANS）和坏死（N）。

急性和慢性暴露于NPs下的鱼的主要变化及其体积是板层上皮的形态变化。继发板层上皮层水肿，表面积减少，导致窒息。这种变化也可能表明上皮钠泵失效引起的急性炎症[26]。上皮水肿和融合影响毒性动力学和污染物在鳃上皮中的分布[27]。

此外，改变的层状上皮原因变化的结构中气体和离子交换的体积[28，29]。Ostaszewska等人和Johari等人的类似研究[30.-32报道了肠组织中杯状细胞肿胀、绒毛变形、增生、炎症、坏死、空泡等组织学变化。

If the effect of the joint exposures of bulk CuO with another bulk metallic salt of equal ratio (1 : 1) were to be the addition of individual effect, then the HAI of CuO + SiO and CuO + Al₂Ø₃应分别为26.0和30.0。CuO + SiO和CuO + Al的实际联合效应₂Ø₃HAI: 14.0, 32.0。CuO + SiO的鳃改变包括中度肥厚(HPT)、鳃片侵蚀(EGL)和鳃上皮隆起(EPL)。铜铝的鳃改变₂Ø₃包括中度水肿(OD)、动脉瘤(ANS)、鳃片总损伤(TDL)和坏死(N)。这意味着SiO和Al的联合作用₂Ø₃与CuO的生成的低毒性作用，不像他们单个试验的高毒性;这也表明散装的SiO和体积的Al₂Ø₃是对手。

提高混合物(CuO + SiO和CuO + Al)中CuO的浓度₂Ø₃)的比率为2比1，对中毒程度没有影响。CuO + SiO和CuO + Al的实际联合效应₂Ø₃为HAI：分别为6.0和6.0。鳃改变包括鳃上皮增生（EH），肥大，和坏死（N）的低频。

增加二氧化硅和铝的浓度₂Ø₃在混合物(CuO + SiO和CuO + Al)中₂Ø₃）在比1〜2使得毒性水平为铝没有差别₂Ø₃。The actual combined effects of CuO + Al₂Ø₃是HAI：8.0。有中等毒性利用SiO2 14.0 HAI。鳃改变包括上皮增生（EH）和水肿（OD）的中等频率。

三种金属盐(SiO, Al)的混合物₂Ø₃，和措）in ratio 1 : 1 : 1 produced low toxic effect (HAI, 12.0) compared to the addition of the individual effect, assumed to be HAI: 26 or 30. The gills have low frequencies of epithelial lifting (EPL) and shortening of secondary gill lamella (SSGL).

动脉瘤是本研究中常见的一种改变。这是鳃组织中血管的肿胀，可能会干扰血液流动。32，33]。鱼鳃的组织学反应主要是由循环障碍引起的，如动脉瘤、退行性和进行性变化以及增生[34，35]。

4。结论

Al的联合行动₂Ø₃与SiO结合的CuO产生的毒性低，不像他们单一试验的毒性高;这也表明Al₂Ø₃CuO是对手。类似地，本体金属氧化物中（SIO，铝₂Ø₃，而CuO是毒性最大的。二氧化硅和铝的联合行动₂Ø₃与单一接触的高毒性不同，CuO产生的毒性较低。体积SiO和体积Al₂Ø₃是对CuO对鱼鳃的影响拮抗。有必要正确地记录纳米颗粒的生态影响在水生环境。

数据可用性

所有的数据都在稿件中提供。对于可能需要的任何进一步的数据，与对应的作者。

利益冲突

作者声明他们没有利益冲突。

补充材料

表4-7列出了用于计算和估计表中总结的结果的数据2和3。（补充材料）

参考

1. K. Savolainen, H. Alenius, H. Norppa, L. Pylkkanen, T. Tuomi，和G. Kasper，“工程纳米材料和纳米技术的风险评估-综述”，毒理学第269卷，no。2-3，第92-104页，2010。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
2. M. Farre, K. Gajda-Schrantz, L. Kantiani, D. Barcelo，“水生环境中纳米材料的生态毒性和分析”，分析和生物分析化学，第393卷，第2号1，第81-95页，2009。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
3. P.基督教，F.冯·德尔·KAMMER，M. Baalousha和T.霍夫曼，“纳米粒子：结构，性质，制备和行为环境介质中，”生态毒理学卷。17，没有。5，第326-343，2008。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
4. S. W. Wijnhoven, S. Dekkers, M. Kooi, W. P. Jongeneel和w.h. Jong，消费产品中的纳米材料:2010年欧洲市场产品更新，国家公众健康和环境，荷兰，2010。
5. R. D. Handy, N. van den Brink, M. Chappell等人，“使用人造纳米材料进行生态毒性测试方法的实际考虑:到目前为止我们学到了什么?”生态毒理学第21卷，no。4，第933-972页，2012。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
6. D. G. McNeil和J. Fredberg，“南澳大利亚袋鼠岛中央河流域本地鱼类的环境用水需求——给SA水资源部门的报告，”水产科学，第528卷，第50-57页，2011。查看在：谷歌学术搜索
7. 余国彬，刘玉华，余s等，“城市表层沉积物重金属风险评估的不一致性和综合性”，光化卷。85，没有。6，第1080至1087年，2011。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
8. R. D.手持，T. B.亨利，T. M. Scown，B.D。约翰斯顿，和C. R.泰勒“：上鱼一种机械分析它们的摄取和效果，制造的纳米粒子”生态毒理学卷。17，没有。5，第396-409，2008。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
9. F. Gottschalk, T. Sonderer, R. W. Scholz，和B. Nowack，“利用概率材料流分析对工程纳米材料环境暴露建模的可能性和局限性，”环境毒理学和化学卷。29，第1036至1048年，2010。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
10. V. Poleksic, M. Lenhardt, I. Jaric等，“多瑙河小尾鱼的肝脏、鳃和皮肤组织病理学与重金属含量”(鲟鱼属ruthenus林奈，1758），”环境毒理学和化学第29卷，no。3, 2010年515-521页。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
11. J. K. Saliu，S. A. Oluberu，I. I. Akpoke，和U. D. Ukwa，“皮质醇应激反应和组织病理学变动指数claria gariepinus暴露于夸伊博原油和钻机洗涤的亚致死浓度，”非洲水产科学杂志第42卷，no。1, 2016年第55-64页。查看在：谷歌学术搜索
12. B.阿金桑亚，O. U. Utoh和U D. Ukwa，“毒理学，丰富的植物提取物的植物化学和驱虫性质claria gariepinus”[应用基础与应用动物学卷。74，第75-86，2016。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
13. “肠道感染和外源性应激对宿主能量的联合效应。电鲇尼日利亚莱基泻湖的寄主-寄生系统。”伊朗杂志鱼类学卷。5，没有。1，第43-54，2018。查看在：谷歌学术搜索
14. J. K. Saliu，B.阿金桑亚，U. D. Ukwa，J. Odozie和Y. Ganiu，“主机条件，寄生虫相互作用和金属积累在罗非鱼guineensis从易多拉各斯泻湖区，尼日利亚，”伊朗杂志鱼类学，第1卷，no。4，第286-295页，2014。查看在：谷歌学术搜索
15. B. Mansouri, A. Maleki, S. A. Johari, B. Shahmoradi, E. Mohammadi和B. Davari，“氧化铜纳米粒子对普通鲤鱼鳃和肠道的组织病理学影响(鲤)在二氧化钛纳米颗粒存在的情况下，"化学和生态学卷。33，没有。4，第295-308，2017。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
16. C. C. C. Cerqueira和M. N.费尔南德斯，“后的热带鱼铜曝光和血液参数响应吉尔组织恢复巴西鲷鲷”生态毒理学和环境安全卷。52，没有。2，第83-91页，2002年。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
17. M. Benavides, P. Coelho, C. Lodeiro和M. S. Diniz，“纳米颗粒氧化物暴露的影响(Al₂Ø₃和ZnO)单独混合Carassius auratus腮,“显微镜和显微分析第21卷，no。6, 2015年18-19页。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
18. J. Schwaiger, R. Wanke, S. Adam, M. Pawert, W. Honnen，和R. Triebskorn，“利用组织病理学指标评估鱼类中与污染相关的应激，”水生生态系统压力与恢复杂志第6卷，no。1，第75-86，1997。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
19. m . Golobiča . Jemec d . Drobne t . Romih k . Kasemets和a . Kahru接触铜纳米粒子,等足类动物中铜的积累鼠妇scaber是由于消化道内溶解的铜离子，"环境科学与技术卷。46，没有。21，第12112-12119，2012。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
20. C. Jayaseelan, A. Abdul Rahuman, R. Ramkumar等，“亚急性暴露于镍纳米颗粒对莫桑比克罗非鱼氧化应激和组织病理学变化的影响，”Oreochromis mossambicus”生态毒理学和环境安全卷。107，第220-228，2014。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
21. R. J. Griffitt，R.韦尔，K. A.海德门等人，“暴露于铜纳米颗粒导致在斑马鱼鳃损伤和急性致死性（鲐鱼类），”环境科学与技术第41卷，no。23，第8178-8186页，2007。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
22. A.马利基，N. A.阿萨迪，B.曼苏里，F Majnoni，Z.雷扎伊和F Gharibi，“在萨南达季Gheshlagh水库，伊朗两个鱼类微量元素的健康风险评估，”毒理学和环境健康科学第7卷，no。1，第43-49页，2015。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
23. G. A. Al-Bairuty, B. J. Shaw, R. D. Handy， "金属和金属纳米颗粒对虹鳟鱼身体系统的组织病理学影响(虹鳟，英国普利茅斯大学生物医学与生物科学学院，2013年，博士论文。查看在：谷歌学术搜索
24. L.宋，M. G.•维杰威，W. J. G. M. Peijnenburg，T. S.加洛韦，和C. R.泰勒，“关于在三个种淡水鱼铜纳米颗粒的体内毒性的比较分析，”光化卷。139，第181-189，2015。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
25. 纳米二氧化钛对虹鳟鱼的毒性(虹鳟）：鳃损伤，氧化应激和其他生理效应，”水生毒理学卷。84，没有。4，第415-430，2007。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
26. B. Mansouri和S. A. Johari， "短期暴露于亚致死浓度的纳米银颗粒对斑马鱼组织病理学和电子显微镜超微结构的影响(斑马鱼）腮,“伊朗毒理学杂志，第10卷，第2期。1, 2016年15-20页。查看在：谷歌学术搜索
27. 《细胞损伤的适应与死亡》，台北:国立台湾大学出版社罗宾斯基本病理， V. Kumar, R. S. Cotran, S. L. Robbins, Eds。， 3-32页，桑德斯，新德里，印度，2000年。查看在：谷歌学术搜索
28. 《斑马鱼肌肉、肝脏和鳃组织的组织病理学改变》鲐鱼类由于有机氯除害剂和重金属的浓度与环境有关，"国际环境研究杂志卷。9，第1365至1372年，2015年。查看在：谷歌学术搜索
29. W. Jiraungkoorskul, E. S. Upathama和M. Kruatrachuea， "草甘膦除草剂农达对尼罗罗非鱼的组织病理学影响(Oreochromis niloticus），”亚洲科学卷。28，第121-127，2002。查看在：谷歌学术搜索
30. T. Ostaszewska，M. Chojnacki，M. Kamaszewski和E. Sawosz-Chwalibóg，“关于表皮，鳃，和西伯利亚鲟鱼肝银和铜纳米粒子的组织病理学的影响，”环境科学和污染研究卷。23，没有。2，第1621至1633年，2016。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
31. H.卡亚，F.艾登，M.Gürkan等人，“小的和大尺寸锌氧化物纳米颗粒在罗非鱼之间的比较毒性研究（Oreochromis niloticus）：器官病理学，渗透调节反应和免疫学指标，”光化卷。144，第571-582，2016。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
32. S. A. Johari的，M. R. Kalbassi，I. J.于，和J. H.李，“上虹鳟鱼水性银纳米颗粒的慢性效果（虹鳟）：组织病理学和生物累积，”比较临床病理学卷。24，没有。5，第995-1007，2015年。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
33. F. Flores-Lopes和a . Thomaz，“作为环境监测工具在鱼鳃中观察到的组织病理学变化，”巴西生物学杂志卷。71，没有。1，第179-188，2011。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
34. 奈米潘迪安，和Thirumurugan， <纳米银暴露于淡水鱼的血液病理学、生化和组织病理学改变的毒性评估>Labeo rohita”应用纳米第6卷，no。1，第19-29页，2012。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
35. J. C.范迪克，M. J. Marchand的，G. M. Pieterse，I. E. Barnhoorn和M. S. Bornman“，在鳃ofClarias鲇组织学变化（真骨：clariidae）从污染的南非城市水生系统”非洲水产科学杂志卷。34，没有。3，第283-291，2009。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索

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