文摘

背景。科学家的趋化因子属于一个独特的家族细胞因子,参与许多恶性肿瘤的进展和发展。趋化因子之间的关系的证据(C-X-C主题)受体2 (CXCR2) C1208T多态性和易感性癌症仍然是不一致的。方法。优势比(ORs), 95%置信区间(CIs),并结合分析被用来调查CXCR2变异对癌症风险的影响。基因集富集分析(GSEA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)也被用来评估CXCR2的表达在前列腺癌(PCA)。结果。在11个病例对照研究,4909例病例和5884例对照参与当前的分析。个人与TT基因型与消化系统癌症的风险增加有关,而那些TC + CC基因型( , - - - - - -1.31, )。个人携带TT基因型高39%泌尿系统癌症的风险比携带CC基因型( , - - - - - -1.87, )。患者TT基因型显示增强患乳腺癌的风险为56%,相比CC基因型( , - - - - - -2.35, )。发现CXCR2在PCA表达下调。与PCA受试者携带CC基因型相比,CXCR2的表达减少患者TT基因型。结论。的CXCR2 C1208T变化与风险相关的尿,乳房,和消化系统癌症。然而,C1208T多态性与减毒患肺癌的风险。

1。介绍

癌症仍然是全世界一个主要公共卫生问题(1]。癌症的发病率和死亡率都在增加发展中国家和发达国家(2]。之前的研究表明,大约有1410万个新的癌症主题和2012年全世界820万人死亡(3]。在中国,新癌症患者的人数超过430万年的2018 (4]。后期诊断、转移和耐药导致大多数恶性肿瘤(可怜的存活率5]。到目前为止,特定的肿瘤标记物对许多实体肿瘤尚未开发。因此,有必要探讨普遍预测预后分子标记,为癌症患者提供目标治疗(6]。

趋化因子是一类结构相关的小分子蛋白质,扮演着重要的角色在细胞招聘和迁移7,8]。以前的研究已经表明科学家趋化因子及其受体参与白细胞游走,血管生成,胚胎发生,肿瘤的生长和转移9- - - - - -11]。科学家趋化因子受体2 (CXCR2)是科学家的一个主要受体超科(12]。这是seven-transmembrane G protein-coupled受体(GPCR)经常表达内皮细胞的细胞膜上,白细胞和肿瘤细胞。先前的研究表明,结合interleukin-8(引发)CXCR1或CXCR2在细胞表面介导引发的生物效应13]。后来的研究证实CXCR2,而不是CXCR1是主要功能趋化因子受体中介chemokine-induced血管生成和内皮细胞趋化作用14- - - - - -16]。CXCR2的绑定和趋化因子诱导增殖,血管生成和肿瘤细胞入侵17,18]。CXCR2具有高度的亲和力趋化因子和被认为是与一些癌症的预后相关,包括结肠癌、肝癌、胰腺癌(19- - - - - -23]。

CXCR2的先前的研究表明,遗传变异可能影响癌症的发展通过调节肿瘤血管生成和抗肿瘤免疫反应途径24,25]。一个等人发现CXCR2与患者的不良预后有关nonmetastatic肾透明细胞癌,CXCR2可以作为一个新的预后因素(26]。然而,其他研究显示没有CXCR2的正相关的结果胰脏癌或食道癌27,28]。CXCR2的C1208T多态性在几个癌症已被调查,其中包括前列腺、膀胱、乳腺癌、结肠癌和肺癌。然而,这种变体之间的关系和对癌症仍然是有争议的。本研究的目的是全面调查之间的关系CXCR2 C1208T多态性与癌症风险结合所有合格病例对照研究(29日- - - - - -36]。此外,我们使用组合分析来探索CXCR2变异的影响。此外,基因集富集分析(GSEA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行评估CXCR2的表达在前列腺癌(PCA)。

2。材料和方法

2.1。搜索策略

我们在网上进行了一项基于Embase数据库搜索,国家医学图书馆(NLM),中国Wanfang,谷歌学者。关键字(“+ 1235 c / T”或“C1208T”或“CXCR2”或“趋化因子受体2 C-X-C图案”)和(“癌症”或“癌”)和(“多态”或“变种”或“基因突变”)。最后搜索更新于2021年5月31日。增加选择的出版物的数量,我们也通过检查检索的研究发表的文章中的引用。

2.2。包含和排除标准

合适的研究在我们的分析中,当它满足以下所有标准:(A)病例对照研究关注的关系CXCR2 C1208T多态性和癌症易感性,(b)研究包含必要的基因型信息计算口服补液盐,对照组(c)必须符合哈迪温伯格平衡(HWE)平衡,和(d)手稿用中文或英文写的。排除标准如下:(a)对照组没有可用的数据,(b)没有足够的数据来衡量优势比(ORs),和/或(c)没有相关性CXCR2 C1208T多态性和患癌症的风险。

2.3。数据提取

研究特征如下:作者,出版年,起源,癌症类型,种族的人口,控制源,CXCR2变体基因分布,样本容量的情况下和控制,HWE,例和对照组的年龄范围。亚组分析,主成分分析和膀胱癌(BLCA)归类为泌尿系统癌症组。消化系统癌症包括胃、食管、结肠和直肠癌。一项研究关注卡波西氏肉瘤,并列为“其他癌症。”

2.4。统计分析

我们应用口服补液盐和95%置信区间(CIs)调查之间的关联强度CXCR2 C1208T变体和癌症易感性。五个基因模型被用来评估整体的口服补液盐。为CXCR2 C1208T多态性,这5个模型是等位的对比(T等位基因与C等位基因),杂合的比较(TC vs . CC),纯合子模型(TT比CC),主导(TT + TC和CC),隐性(TT和TC + CC)模型(37,38]。一个 统计测试是用来计算包括之间的异质性研究。一个 异质性的价值( )小于0.05表示之间的异质性研究。在这种情况下,随机效应方法被选中(DerSimonian和Laird)。如果 ,选择固定效应方法(Mantel-Haenszel) [39,40]。我们确切概率法进行测量 HWE ( )。研究并没有按照HWE平衡被移除。研究样本容量大于1000被归类为大样本组。分层分析包括癌症类型、控制源、种族、样本大小和质量的研究。敏感性分析CXCR2 C1208T突变是由删除每一个研究。发表偏倚评估了贝格的漏斗图和食叶蛾的测试。 表示没有发表偏倚的证据。所有统计分析进行了使用占据软件(v11.0,占据公司,大学城,TX,美国)。

2.5。CXCR2相结合的分析方法

微小等位基因频率(加)在全球人口调查使用的人类基因组单体型图数据库国家生物技术信息中心(NCBI)的存储库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp)。CXCR2在各种癌症的基因表达谱是评估使用基因表达分析交互式分析(GEPIA,http://gepia.cancer-pku.cn/index.html)和人类的蛋白质图谱(THPA,https://www.proteinatlas.org/)数据库。PCA的免疫细胞渗透存活曲线,BLCA,肾脏肾透明细胞癌(KIRC)患者进行了肿瘤免疫评估资源(计时器)数据库(https://cistrome.shinyapps.io/timer)。CXCR2在PCA的表达被肿瘤评估,正常和转移性情节数据库(https://tnmplot.com/analysis/)。字符串的在线服务器采用演示CXCR2的蛋白质相关蛋白智人(https://string-db.org/cgi/input.pl)。GSEA PCA转录组的样本进行了通过GSEA软件(版本4.1.0,http://software.broadinstitute.org/gsea/index.jsp),一个联合项目由加州大学圣地亚哥分校和广泛的研究所。我们使用GSEA评价之间的基因表达差异CXCR2高表达和低表达组MSigDB图书馆(c2.cp.KEGG.v7.4.symbol.gmt)浓缩。这一分析,基因设置对齐进行1000次。表型标记是由高或低CXCR2表达式值,和所有其他参数的默认值(41]。共有220个PCA病人(由穿刺活检证实)为常州第二人民医院和江南大学的附属医院。签署书面知情同意后,每个病人捐赠2毫升的外周血ELISA检测血清CXCR2的。CXCR2的组织表达评价免疫组织化学染色(IHS)的PCA病人从医院。ELISA分析,我们收集病人的血液在标准数据集不包含抗凝血剂。血清分离管被用来巩固和离心样品1000×g(15分钟)。血清立即拿出决心和存储均匀或-80°C。一个CUSABIO酶联免疫试剂盒用于检测血清CXCR2的表达的受试者招募我们的医院42,43]。IHS、石蜡的PCA样本嵌入在1%过氧化氢。然后,幻灯片使用磷酸缓冲盐水洗。山羊血清用于块特异性的蛋白质相互作用。然后我们孵化的部分与anti-CXCR2抗体浓度1:200。Diaminobenzidine用于颜色布朗免疫反应性的网站。目前研究伦理委员会批准的江南大学的附属医院和常州第二人民医院的伦理委员会。

3所示。结果

3.1。特性的研究

总共11个病例对照研究4909名癌症患者和5884名对照组参与当前分析(表1)。在亚组分析类型的癌症,四个研究集中在消化系统癌症,三个研究肺癌,乳腺癌和泌尿系统癌症两个,一个在“其他癌症”(卡波济氏肉瘤)。分层分析的种族,研究欧洲病人的数量是6个,和四个研究专注于亚洲病人(两个在东亚和两个西亚洲人)。额外的研究集中在非洲血统的参与者。分层分析的源控制显示八个人口和三个以医院为基础的研究。分层分析,包括八项研究样本量小尺寸和大尺寸的三项研究。此外,加的CXCR2 C1208T变化如下:非洲人,0.078;美国人,0.461;欧洲人,0.455;全球人口,0.346; and Asians, 0.650. The MAFs in the current study was as follows: case group, 0.484 and control group, 0.479 (Figure1)。

表1
研究的特点CXCR2 C1208T多态性在目前的分析。

图1
轻微的等位基因频率的CXCR2 C1208T多态性在种族和当前的分析报告。
3.2。主要结果

我们使用口服补液盐和95% CIs评价之间的关系CXCR2 C1208T变异和癌症的风险。分层分析竞赛并没有透露这种变体的一个重要协会在欧洲(纯合子的比较, , - - - - - -1.48, ),东亚( , - - - - - -1.08, ),和西部亚洲组( , - - - - - -1.68, ,图2(一个))。然而,亚组分析的癌症类型,个人携带TT基因型高39%泌尿系统癌症的风险比携带CC基因型(纯合子的比较, - - - - - -1.87, ,图2 (b))。在纯合子的比较,CXCR2 C1208T变化也与乳腺癌风险升高( , - - - - - -2.35, )和消化道癌症( , - - - - - -1.41, )。类似的结果很明显,在一个隐性遗传模型(乳腺癌: , - - - - - -2.38, , ;消化系统癌症: , - - - - - -1.31, )。为肺癌,TT基因型个体的风险降低了30%相比与CC基因型( - - - - - -0.92, )。类似的结果在等位的对比观察,杂合的比较,和占主导地位的模式。亚组分析的样本大小,结果是大型和小样本研究之间的不同。在小样本大小的研究中,患者TT + TC基因型风险降低了15%相比与CC基因型( - - - - - -0.98, )。在大样本大小的研究中,个人携带TC基因型风险增加了26%,相比与CC ( - - - - - -1.45, ,图2 (c))。亚组分析的源控制,TT基因型与增加患癌症的风险在医院研究使用隐性模型( , - - - - - -2.09, ,图2 (d))。然而,没有积极的协会在以人群为基础的研究( , - - - - - -1.30, )。

(一)
(一)
(b)
(b)
(c)
(c)
(d)
(d)
图2
森林的情节联系CXCR2 C1208T变体和癌症风险的亚组分析种族(a)、癌症类型(b),样本量(c)和控制源(d)。
3.3。CXCR2相结合的分析方法

我们使用了THPA数据库评估CXCR2在人体组织的表达。CXCR2主要是表达人类的阑尾,脾、膀胱和食道(图3(一个))。我们进一步用GEPIA数据库探索CXCR2表达式在各种癌症。CXCR2在BLCA下调表达,淋巴肿瘤弥漫型大b细胞淋巴瘤(DLBC),食管癌(光电子能谱)、头颈部鳞状细胞癌(HNSC),肺腺癌(LUAD),皮肤皮肤黑色素瘤(SKCM),胸腺瘤(胸腺瘤(图)3 (b))科目。然而,CXCR2表达增强患者的急性髓系白血病(LAML)。此外,血清ELISA是用来评估表达式CXCR2的PCA患者招募从我们医院。与PCA受试者携带CC基因型相比,CXCR2的表达降低患者TT基因型(图4 (b), )。此外,我们使用IHS分析来验证bioinformatical发现的结果。如图4 (c),CXCR2的表达在更高级的PCA,减毒与欠发达患者相比(T3 + T4和T1 + T2, )。CXCR2的表达在PCA参与者减少,相对于在正常( ,图4(一))。

(一)
(一)
(b)
(b)
图3
表达CXCR2在人类组织和各种癌症。CXCR2的表达在BLCA表达下调,淋巴肿瘤弥漫型大b细胞淋巴瘤(DLBC),食管癌(光电子能谱)、头颈部鳞状细胞癌(HNSC),肺腺癌(LUAD),皮肤皮肤黑色素瘤(SKCM),胸腺瘤(胸腺瘤)(b)科目。然而,CXCR2表达增强患者的急性髓系白血病(LAML)。
(一)
(一)
(b)
(b)
(c)
(c)
图4
在PCA CXCR2的表情。表达CXCR2在PCA (a)表达下调。与PCA受试者携带CC基因型相比,CXCR2的表达降低患者TT基因型((b), )。表达CXCR2在更高级的PCA,减毒与欠发达患者相比(T3 + T4和T1 + T2, ,(c))。

我们用R语言在PCA调查CXCR2的基因基因的相关性。在图所示的热图的阴谋5(一个)。最相关的基因包括监管机构11 G蛋白信号(RGS11,图5 (b)6()、黄体酮和adipoQ受体家族成员PAQR6,图5 (c)),copine 7 (CPNE7,图5 (d))。我们进一步采用字符串数据库调查CXCR2的蛋白质相关性。10多个蛋白质与CXCR2交互参与蛋白质(图6(一))。他们interleukin-8 (CXCL8) C-X-C主题趋化因子5 (CXCL5) growth-regulatedα蛋白(处于)C-X-C主题趋化因子2 (CXCL2),血小板碱性蛋白(PPBP) C-X-C主题趋化因子6 (CXCL6) C-X-C主题趋化因子3 (CXCL3),基质细胞衍生因子1 (CXCL12) C-X-C趋化因子受体1型(CXCR1)和主题趋化因子5 (CCL5)。我们进一步执行GSEA调查潜在的相关信号通路与CXCR2的表情。情节的规范化浓缩评分(NES)和假阳性率(罗斯福)被显示在图6 (b)。GSEA显示证据表明CXCR2的表达与通路在肿瘤(图6 (c), )。信号通路,包括增殖蛋白激酶(MAPK)信号(图6 (d))和钙信号系统(图6 (e)),与高CXCR2的表达有关。此外,我们使用了定时器数据库评估预后相关性免疫细胞浸润的PCA, BLCA, KIRC样本。BLCA高患者的生存时间的CD8 + T细胞明显短于BLCA患者低渗透( )。KIRC高表达患者的生存时间显著长于CXCR2的低CXCR2集团( ,图7)。

(一)
(一)
(b)
(b)
(c)
(c)
(d)
(d)
图5
基因基因的相关性CXCR2在PCA的病人。(a)之间的差异表达基因CXCR2的高、低表达。最相关的基因RGS11 (G蛋白信号11日调节器(b)), PAQR6(黄体酮和adipoQ受体家族成员6,(c)),和CPNE7 (copine 7, (d))。
(一)
(一)
(b)
(b)
(c)
(c)
(d)
(d)
(e)
(e)
图6
CXCR2的表达和相关评估基因集富集分析工具(GSEA)和字符串。10多个蛋白质可以参与互动CXCR2的蛋白质。他们interleukin-8 (CXCL8) C-X-C主题趋化因子5 (CXCL5) growth-regulatedα蛋白(处于)C-X-C主题趋化因子2 (CXCL2),血小板碱性蛋白(PPBP) C-X-C主题趋化因子6 (CXCL6) C-X-C主题趋化因子3 (CXCL3),基质细胞衍生因子1 (CXCL12) C-X-C趋化因子受体1型(CXCR1)和主题趋化因子5 (CCL5) (a)。情节的归一化富集得分(NES)与假阳性率(罗斯福)(b)。GSEA显示证据表明CXCR2的表达与癌症通路((c), )。信号通路,包括增殖蛋白激酶(MAPK)信号(d)和钙信号系统(e),与CXCR2的高表达有关。

图7
免疫细胞浸润PCA的存活曲线,BLCA, KIRC病人评估通过定时器数据库。高度的渗透是标识为一个红色的线。低程度的渗透是一个蓝线标注。
3.4。敏感性分析和发表偏倚

我们进行了灵敏度分析,评估每一个整体研究口服补液盐的影响。发表偏倚是调查使用Begg的漏斗图和Egger测试。如补充图所示1没有一个研究发现,在口服补液盐产生重大影响评估CXCR2 C1208T多态性。Begg的漏斗图(补充图1 c, )(补充图和食叶蛾的测试1 b, )还显示没有证据发表偏倚的研究CXCR2变体。

4所示。讨论

癌仍然是一个重大的健康问题在世界范围内,尽管大量的先前的研究探索恶性肿瘤的易感性和高危因素。然而,特定的标记数癌症还没有确认到目前为止(44,45]。有必要调查普遍分子标记形式治疗的癌症患者的预后。先前的研究显示,科学家趋化因子受体的表达,包括CXCR2与坏死和几位癌症的发展23,46,47]。此外,CXCR2作为自分泌或旁分泌生长因子诱导肿瘤侵袭和迁移(48]。CXCR2的遗传多态性可能影响蛋白质的功能通过调节基因的表达。一些先前的研究调查CXCR2突变与癌症风险的相关性32- - - - - -38]。然而,这些研究的结论也不一致。瑞安et al。36)评估CXCR2多态性在印第安人和透露C1208T增加患膀胱癌的风险( , )。彭et al。37)评估了CXCR2变体在两个独立的人群(欧洲和亚洲),发现C1208T与降低患肺癌的风险。2017年,杨et al。48)进行了分析,表明CXCR2表达在肿瘤组织与实体瘤患者的不良预后相关。2018年,乔et al。49]进行另一个荟萃分析和显示CXCR2不利预测患者的总生存期和recurrence-free生存的癌症,除了消化系统癌症。然而,这些研究人员没有评估之间的关联CXCR2 C1208T多态性和癌症易感性,这仍然是有争议的。最近,朱镕基等人进行了汇总分析,发现interleukin-8受体B rs1126579 C > T变化可能与癌症易感性(50]。然而,他们并没有包括所有可用的数据这个基因多态性。在目前的研究中,我们集中14合格病例对照研究CXCR2 C1208T变体,包括4909年癌症病例和5884例对照。我们的研究揭示了重要的关联CXCR2 C1208T多态性和患癌症的风险。CXCR2基因变异扮演了不同的角色在不同的肿瘤。

分层分析的癌症类型,我们观察到C1208T变体与尿的风险增加,乳房,和消化系统癌症。为肺癌,TT基因型个体的风险降低了30%与CC基因型相比,与先前的研究的报道一致彭et al。37]。亚组分析的种族,没有积极的结果在欧洲和非洲血统的参与者。一个可能的原因可能是研究非洲人的数量在我们的分析中是相对较小的。然而,结果Bondurant et al。34]表明CXCR2 C1208T多态性与乳腺癌风险增加有关非洲的病人。亚组分析中描述的样本大小,结果来自大型和小样本研究可能会有所不同。进一步的研究与大样本大小CXCR2 C1208T非洲人口在未来的变化。此外,我们使用组合分析来探索CXCR2的表达式根据比赛的参与者在泌尿系统癌症。CXCR2 BLCA患者表达下调欧洲和非洲裔美国人的后裔。CXCR2的表达也是欧洲血统的PCA患者表达下调。表达谱CXCR2的PCA亚裔患者不可以从在线数据库。我们使用ELISA探讨血清的表达CXCR2在穿刺活检证实PCA病人登记在我们的中心。观察到CXCR2的表达是减少与TT基因型在PCA参与者,与结果来源于汇集分析一致。此外,CXCR2在PCA参与者表达的水平降低,而控制。 Our results show that patients with advanced PCA had lower levels of CXCR2, compared with early-stage patients. It is suggested that the detection of CXCR2 may provide guidance for the prognosis of patients with PCA.

我们进一步用GSEA探讨信号通路可能与CXCR2的表情。信号通路,如MAPK信号和钙信号系统,与高CXCR2的表情。此外,我们使用了定时器数据库评估预后相关性免疫细胞浸润的PCA, BLCA, KIRC样本。BLCA高患者的生存时间的CD8 + T细胞明显短于BLCA患者低渗透。KIRC高表达患者的生存时间CXCR2显著长于低CXCR2的组。然而,有几个限制当前分析。首先,只有一个病例对照研究参与者根据入选标准具有非洲血统的。未来的研究与大样本大小关注非洲人口是必要的。第二,包括研究的样本量CXCR2 C1208T多态性仍然不足。研究肿瘤的数量包括KIRC, PCA, BLCA相当有限。 Third, we revealed that the CXCR2 C1208T polymorphism may be associated with increased risk of PCA. Further research is warranted to confirm whether the CXCR2 C1208T mutation has an impact on CXCR2 expression in PCA. As a single variation cannot have a huge impact on the development of cancer, it is necessary to investigate the gene-gene or gene-environment interactions in future research.

总之,本研究总结了所有符合条件的基因数据之间的相关性CXCR2 C1208T变体和患癌症的风险。我们的研究显示,CXCR2 C1208T多态性与尿的风险增加有关,乳房,和消化系统癌症。CXCR2 C1208T也可能与PCA的风险。最后,CXCR2表达式与PCA恶性程度负相关。

数据可用性

在这项研究的所有数据可以提供相应的作者如果请求是合理的。

的利益冲突

作者披露,没有利益冲突。

作者的贡献

HW王(Hai)和CPZ设计研究。HW(吴皓)、qx、和xk参与数据库搜索。生理和xk分析数据。HW(吴皓)和BWT进行了实验。生理改变、HW王(Hai)和XPC撰写并修改了手稿。所有作者回顾了最后的手稿。荆州,吴皓Quan-Xin,苏,Xiao-Kai史,和唐Bo-Wen同样这项工作。

确认

我们想表达我们的感激之情,所有的成员参与了这项研究。这项研究被授予科技工程常州卫生委员会(WZ201917)。

补充材料

补充图1:当前研究的发表偏倚评估通过灵敏度分析,Begg的漏斗图,症的测试。灵敏度分析的CXCR2 C1208T表明单一研究不会影响口服补液盐(a)的重要性。贝格的漏斗(C)和食叶蛾的情节(B)分析还表示没有证据表明发表偏倚。补充表1:分层分析CXCR2 C1208T变体癌症的可能性。(补充材料)