减少表达MPC2有助于有氧糖酵解和结肠直肠癌扩散通过激活mTOR途径

文摘

线粒体丙酮酸载体1 (MPC1),病原蛋白参与糖酵解代谢之一,已被证明是一个在几个癌症肿瘤抑制剂。这个研究与探索的目的的作用和潜在机制MPC2在结直肠癌(CRC)。在这里,我们发现MPC2表达减少CRC样本。蓝玉的分析数据显示,低表达MPC2与远处转移的发生率更高,淋巴结入侵,更大的肿瘤大小,病人的存活率低,和先进的阶段。功能,体内/体外实验表明,MPC2击倒诱导CRC细胞增殖和生长,而MPC2过度抑制CRC的扩散和发展。进一步的研究表明,MPC2击倒导致CRC细胞有氧糖酵解。同样,MPC2过度导致CRC细胞也抑制有氧糖酵解。进一步的研究发现,在CRC MPC2击倒细胞系mTOR信号通路的激活,以及雷帕霉素逆转MPC2击倒在CRC扩散的促进作用和糖酵解。同样,添加MHY1485也扭转了MPC2超表达的作用,阻碍在CRC细胞有氧糖酵解。总的来说,我们的研究证实低表达MPC2导致CRC增长以及有氧糖酵解的监管mTOR CRC细胞通路,指示CRC的潜在生物标志物和治疗目标。

1。介绍

结直肠癌(CRC),作为一个全球流行的类型的癌症,在美国排名第三癌症相关死亡的因素(1,2]。CRC患者的预后阶段在诊断和CRC患者的5年生存率在阶段1和阶段2可能达到70%,同时为四期(不到10%3]。因此,预后生物标志物和治疗目标是紧急确认提高CRC患者的存活率。

线粒体丙酮酸载体(MPC)是一个heteroligomeric复杂的包含两个成员,MPC1和MPC24- - - - - -7]。复杂在整体内部的线粒体膜和细胞溶质负责进行丙酮酸进入线粒体,糖酵解rate-liming步骤之一,与线粒体氧化磷酸化和糖酵解的链接(OXPHOS) [5,8]。越来越多的研究显示MPC复杂的表达下调表达在不同的癌症,如前列腺癌和肝细胞癌和恢复MPC2在人类肿瘤细胞抑制黑素瘤细胞增殖和迁移9- - - - - -11]。此外,一项研究表明,MPC2预测差异柠檬酸dehydrogenase-mutant神经胶质瘤患者的生存期(12),尽管MPC2癌症的潜在作用,临床相关性,和分子机制对CRC进展的影响仍然未知。

代谢重编程一直被认为是癌症的标志之一,Warburg效应是一个共同的特点13,14]。Warburg效应是高葡萄糖摄取和利用提供癌症增加的生物能学和生物合成厌食症和缺氧条件(8]。因此,糖酵解在癌症协会和潜在的调控机制的研究。

在这项研究中,我们显示低表达MPC2 CRC样本,通过激活mTOR导致有氧糖酵解途径,促进了CRC扩散。

2。材料和方法

2.1。数据库、病人和临床组织标本

我们分析了MPC2 mRNA表达327年样本(包括286儿童权利公约组织和41组织毗邻癌症)的癌症基因组图谱(TCGA)数据库和17匹配样本地理(15]。OncoLnc (http://www.oncolnc.org)是用来连接TCGA生存数据的患者数据库规范化MPC2信使rna;患者分为高集团(前三十个百分位)和低(低30百分位)。卡普兰的曲线和log-rank的阴谋由OncoLnc自动价值进行了分析。组织微阵列芯片由三百九十二个CRC对相邻的非癌变和肿瘤样本病人患CRC在瑞金医院,中国。瑞金医院的伦理委员会批准了这项研究,和每一个病人被分配知情同意。

2.2。细胞培养

lovos HCT116、, RKO和SW620写明ATCC提供的人类结肠癌细胞系。杜尔贝科修改鹰的介质(与10%胎牛血清的DMEM Hyclone)(的边后卫,Gibco)以及1%的青霉素和链霉素1%被用来培养的细胞在一个孵化器有限公司5%₂和37°C。

2.3。慢病毒转染

慢病毒载体的短发卡RNA(成分)MPC2被GenePharma生成(上海,中国)。我们转移的shRNA序列MPC2 CRC细胞系和生成shRNA-MPC2 # 1和shRNA-MPC2 # 2 10毫克/毫升聚凝胺(σ,H9268)。此外,负控制设置为shNC-MPC2。MPC2的表达(MPC2-OE)是由人类MPC2使转染全长cDNA、消极控制(向量)lentivirus-NC。补充表S1列出了序列。转染的成分是根据制造商的协议执行。

2.4。RNA提取和RT-qPCR

总RNA被简单地从细胞中提取样品P总RNA提取工具包(BSC51S1,骏科技,中国)。反向转录cDNA由PrimeScript RT试剂盒(RR037Q,豆类生物技术,中国)。目标基因的相对表达18 s RNA被计算ΔΔCt方法。补充表S1列出所有的引物设计RT-qPCR在这项研究中。

2.5。蛋白质提取和免疫印迹

里帕缓冲区(Sangon生物技术,中国),以及1%的磷酸酶抑制剂和蛋白酶(Sangon生物技术,中国),应用于提取总蛋白。BCA蛋白质分析工具包(A53225热费希尔)被选为蛋白质浓度的测量。西方墨点法进行如前所述。等主要抗体MPC2(1: 1000年,ab236584 Abcam,剑桥,MA),β肌动蛋白(1:1000年,20536 - 1 - ap, Proteintech,中国),mTOR (CST 1: 1000年,2983年,美国),和p-mTOR (CST 1: 1000年,2971年,美国)。二次抗体是HRP-conjugated山羊anti-rabbit Proteintech提供的免疫球蛋白,中国(1:5000年,SA00001-2)。

2.6。免疫组织化学(包含IHC)

包含IHC染色后进行标准程序(如前所述)(16]。组织与石蜡和切割成4嵌入式μ米厚的部分。脱蜡和二甲苯的补水的部分酒精被执行,其次是抗原检索通过柠檬酸钠(Sangon生物技术,中国)和内源性过氧化物酶阻断0.3% H₂O₂。Sangon生物技术牛血清白蛋白(BSA)被用来屏蔽的网站,和MPC2(1: 100年,ab236584 Abcam)和Ki67(1: 100年,27309 - 1 - ap, Proteintech,中国)被用来孵化片8小时然后用二次抗体(Proteintech SA00001-2 1: 100年,中国60分钟。民建联衬底工具包(# 8059年代,春秋国旅)是用于可视化;然后,细胞核被苏木精染色。进一步脱水进行酒精和中性树脂密封。包含IHC染色是合格的使用等级评分法,并取得了从1到4,弱,温和,和强大的染色,分别17,18]。此外,样本分为两组根据他们MPC2染色:低水平组(分数1和2)和高水平组(分数2和3)。

2.7。细胞生长和集落形成试验

细胞的生存能力是衡量细胞计数Kit-8 (CK04 Dojindo,日本)使用方法如前所述[19]。细胞接种与100年的暂停μl /(3000细胞/)在96孔板培养在一个孵化器(在37°C, 5%的公司₂)24、48、72和96 h后治疗。后加上CCK-8解决方案(10μ信用证),细胞培养2 h在37°C。然后,450海里的吸光度测量标。

单独使用的试验中,我们使用6-well板(3000个细胞/)接种细胞。两周后,4%多聚甲醛固定,结晶紫染色0.5% 30分钟进行。

2.8。细胞外的酸化和耗氧率分析

对于培养细胞,耗氧量的检测率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR)被发现之前报道的支持下海马XF96通量分析仪(海马生物科学、安捷伦)后,协议的制造商20.]。海马XF细胞水压力测试装备和海马XF糖酵解压力测试套件(103010 - 100和103020 - 100年,安捷伦科技,美国)被用来检查OCR和ECAR,分别。具体而言,我们在XF 96孔板接种细胞( /)与指定的治疗。基线测量后,糖酵解压力测试,10 L更易与葡萄糖,1更易与L寡霉素(氧化磷酸化抑制剂)和50更易与L 2-deoxyglucose (2 dg,氧化磷酸化抑制剂)应用于每一个为了在给定的时间。线粒体的压力测试,1更易与L寡霉素,1更易与L FCCP(可逆的氧化磷酸化抑制剂),0.5 L更易与鱼藤酮(死记硬背,线粒体复杂我抑制剂)和0.5更易与L放线菌素(AA,线粒体复杂三世抑制剂)按顺序添加到井中。海马xf - 96采用波软件进行数据分析。糖酵解通量和最大呼吸能力测量如前所报道(21,22]。葡萄糖治疗后ECAR表示糖酵解增加通量;总高度在OCR基底FCCP治疗后呼吸表示最大呼吸能力。OCR和ECAR测量pmols /分钟,英里/小时/分钟,分别。

2.9。原位肿瘤异种移植模型

CRC的原位异种移植模型生成方法之前报道后(23]。我们使用0.5%戊巴比妥麻醉裸小鼠。腹腔暴露通过中线剖腹手术。 luciferase-expressing HCT116或HT29细胞悬液直接注入了ileocecum的黏膜下层。肿瘤的生长监测的新谱(美国卡尺生命科学)腹腔内注射D-luciferin(150毫克;Promega目录)和气体麻醉。生活图像软件(版本4.5.3)被用来量化的荧光素发射。四个星期后,我们牺牲了老鼠,异种移植肿瘤的分离,重,用4%多聚甲醛固定。动物福利的国际标准是跟随在整个动物实验,研究伦理委员会批准的瑞金医院。

2.10。统计分析

我们都重复在体外实验中不少于三次。GraphPad棱镜(圣地亚哥,CA)应用于整体的统计分析。如何分类与MPC2 CRC患者相关临床变量表达式,学生的 - - - - - -测试或应用卡方分析计算测量数据如年龄和肿瘤大小或计算分类变量包括性和患者的远处转移和淋巴结的存在入侵和排名数据像T阶段。双向有序分类数据被斯皮尔曼等级相关的计算。患者的生存曲线生成的数据进行分析的生存率较以及kaplan meier方法。的 采用表达测量数据。本研究是5%的显著水平。显著水平以下:值< 0.05,值< 0.01,值< 0.001,值< 0.0001。

3所示。结果

3.1。MPC2下调在CRC CRC的组织和与不良预后相关

根据TCGA和地理数据集,与配对组织毗邻癌症相比,mRNA的表达MPC2减少CRC组织(数字1(一)和1 (b))。值得注意的是,kaplan meier生存分析显示对患者总生存期短,较低水平的MPC2表达式( )(图1 (c))。包含IHC染色TMA包含392 CRC标本和配对相应组织毗邻癌症进行验证MPC2的蛋白质水平。根据强度表达式是得分。TMA分析的结果也显示大幅降低MPC2蛋白表达的CRC组织比组织毗邻癌症,和CRC组织体现染色评分(数据较低1 (d)和1 (e))。MPC2表达的差别因此,我们的数据显示对这些CRC组织与邻近组织。MPC2表达与患者临床病理特征之间的关系进行了分析探索MPC2的临床意义。表1意味着肿瘤大小负相关,远处转移的发生率,和淋巴结的入侵,以及T分期,MPC2的表达。此外,患者的生存MPC2低表达患者低于MPC2表达水平更高,kaplan meier生存分析(图做了演示1 (f))。

3.2。MPC2抑制CRC细胞的扩散在体外和在活的有机体内

接下来,我们测量蛋白质MPC2和mRNA的表达在几个CRC细胞系(图2(一个),补充图S1A)。HCT116、细胞被选为研究RKO MPC2击倒,因为它们的影响相对更高的表情,而HT29和SW620细胞被选为调查的影响MPC2超表达对CRC细胞根据下面的表达式。MPC2的mRNA和蛋白表达明显下调后使转染shRNA # 1 (shMPC2 # 1)和shRNA HCT116 # 2 (shMPC2 # 2),使转染后细胞和调节RKO MPC2-OE HT29和SW620细胞(数字2 (b)和2 (c)),补充图印地)。此外,货币政策委员会是一个复杂的,我们进一步发现MPC1 MPC2击倒或过度后的表达。结果表明mRNA水平和蛋白水平的MPC1改变与MPC2击倒或超表达(CRC细胞补充数据就是S1C和S1D)。

然后,我们评估了CRC的增殖细胞CCK8 MPC2击倒或过度后的分析。发现击倒MPC2增加和HCT116 RKO细胞的增殖与控制(shNC)组(图2 (d)),而过度的MPC2降低HT29细胞增殖和SW620细胞与控制(补充图S1G)。此外,集落形成化验显示更多的殖民地shMPC2 # 1和shMPC # 2组(图2 (e))。这些数据表明,MPC2受损CRC体外细胞增殖。

MPC2 CRC增长的角色被一个原位肿瘤模型进一步评估。sh-MPC2(使用shRNA # 2)组显示肿瘤重量明显高于对照组,而MPC2-OE组向量组(数据相比要低2 (f)和2 (g))。进一步包含IHC检测Ki67的原位肿瘤显示击倒的MPC2提升Ki67表达而过度MPC2抑制表达(图2 (h))。这些数据都显示MPC2在抑制CRC增长的作用在体外和在活的有机体内。

3.3。在CRC下调MPC2表达增强糖酵解

我们执行GSEA研究背后的机制下调MPC2促进CRC增长。我们TCGA样本数据库分为MPC-high组和MPC2-low集团基于MPC2表达式。结果表明负MPC2协会表达与糖酵解和积极的协会与氧化磷酸化(图3(一个))。因此,葡萄糖摄取和乳酸生产检测来确认是否击倒和超表达MPC2影响糖酵解的CRC细胞。MPC2促进葡萄糖吸收和乳酸生产的击倒,而过度MPC2摄取葡萄糖和乳酸生产,显示在图3 (b)和补充数据S3A和S3B。此外,glycolysis-related基因检查,结果表明,GLUT1,HK2,PFKFB3,LDHA是调节和抑制MPC2击倒和超表达,分别(图3 (c)和补充图S3C)。此外,糖酵解通量和细胞外酸化率的指标(ECAR),以及耗氧速率(OCR)线粒体呼吸、指标检测。结果表明,MPC2击倒在CRC细胞糖酵解增加通量和减少最大呼吸能力,恢复的拯救MPC2过度(数字3 (d)和3 (e)和补充图S2A)。相比之下,MPC2过度糖酵解通量降低,增加最大呼吸能力(补充数据S3D和S3E)。综上所述,这些数据表明MPC2表达式在CRC细胞受损的糖酵解。

3.4。MPC2通过mTOR通路在CRC细胞糖酵解水平降低

根据GSEA上面提到的结果,MPC2表达式被发现负面与mTOR通路活动(图4(一))。此外,mTOR信号通路在调节细胞增殖中起着关键部分以及糖酵解(24,25]。因此,进一步研究mTOR途径进行。免疫印迹显示MPC2击倒表现出更高的p-mTOR表达与对照组相比,虽然MPC2超表达显示低p-mTOR表达式(图4 (b)和补充图S4A)。此外,mTOR的激活途径引起MPC2击倒逆转了雷帕霉素,mTOR通路的抑制剂,减少p-mTOR水平造成overexpressing MPC2逆转了mTOR活化剂的加入MHY1485(图4 (b)和补充图S4A)。结果表明,沉默的影响MPC2 shRNA # 2在葡萄糖吸收,乳酸生产、glycolysis-related基因表达,ECAR, OCR明显废除mTOR抑制剂(数字4 (c)- - - - - -4 (f)),补充图S4B-C)。总的来说,这些发现表明通过mTOR MPC2降低糖酵解途径。

4所示。讨论

在这项研究中,我们发现表达下调MPC2促进CRC增长通过mTOR增强糖酵解途径。在特定的,我们确认MPC2表达式downexpressed CRC组织从一个在线数据库和TMA的医院,这是积极的临床特点的病人呈负相关。此外,我们的研究表明,抑制MPC2提拔使用CRC扩散在体外和在活的有机体内模型。从力学上看,我们发现通过mTOR MPC2推广使之抑制糖酵解途径。

最近的一项研究发现,MPC2 mRNA水平预测恶化生存异柠檬酸dehydrogenase-mutant神经胶质瘤患者使用一个在线数据库(12]。此外,另一个研究报告说,MPC2水平降低前列腺癌的细胞和组织中,和MPC2预测前列腺癌患者更好的操作系统(9]。在我们的研究中,我们第一次展示MPC2在CRC较低的组织,和表达下调MPC2预测还要糟糕的操作系统让CRC患者使用更大数量的配对病人的组织。

新陈代谢依靠糖酵解和线粒体OXPHOS产生ATP,在正常情况下提供能量。在癌细胞增殖,有氧糖酵解产生ATP的主要过程和支持生物合成,即使有足够的氧气,叫做Warburg效应(26]。这种癌症细胞增殖代谢重编程的优势通过提供能量更快,这被认为是癌症的一个常见特性,包括CRC (27]。此外,大多数关键分子糖酵解相关参与肿瘤恶化[28]。CRC的糖酵解基因表达分析显示增加葡萄糖摄取和有氧糖酵解在结肠组织,和高糖酵解角色与CRC患者预后差(29日]。符合这些先前的研究,我们的数据表明,基因数MPC2导致有氧糖酵解的CRC细胞。

mTOR / PI3K / Akt通路已被证明为糖酵解和癌症扩散的中央监管机构之一(24,25]。关于CRC细胞糖酵解的潜在机制,越来越多的研究发现,mTOR通路的激活直接与糖酵解增加肿瘤细胞与正常细胞相比,(30.,31日]。最近的一项研究表明,激活Purinergic受体P2Y2 (P2RY2)导致PI3K-mTOR通路的激活从而提高癌症糖酵解在胰腺导管腺癌32]。此外,在我们的研究中,GSEA还表示MPC2表达式和mTOR通路之间的联系。进一步的探索表明,mTOR通路的抑制剂可能减弱MPC2的沉默引起的糖酵解,表明mTOR可能参与糖酵解MPC2所扮演的角色。因此,通过mTOR MPC2可能参与糖酵解途径中CRC细胞。我们的研究显示相关MPC2和首次mTOR通路。最近的一份报告显示,细胞外的乳酸、丙酮酸的产物,激活Akt-mTOR信号通路促进细胞增殖,防止细胞死亡。此外,乳酸能燃料氨基酸合成的柠檬酸循环,导致mTORC1激活在常氧癌细胞33,34]。此外,先前的一项研究发现MPC1表达消极与HIF1有关α表达在人类RCC (35]。HIF1α是糖酵解的主要监管机构,以及下游的mTOR通路(36]。结合我们目前的结果,我们推测,通过mTOR / HIF1 MPC2可能抑制糖酵解α轴,这将进一步证实了在未来的研究中。

除了MPC2的增殖抑制作用,研究还调查了MPC1失去晋升迁移和入侵在碾压混凝土35]。在我们的研究中,我们还发现MPC2表达与淋巴结的发病率呈现负相关的入侵和肝脏转移。然而,我们的研究集中在MPC2 CRC增长的作用。在未来,我们将进一步探讨是否MPC2抑制迁移和入侵从而影响肝脏转移CRC使用小鼠模型。

总之,我们的结果表明减少表达MPC2 CRC及其与CRC患者的不良预后相关。此外,MPC2抑制CRC的增长在活的有机体内和在体外。此外,MPC2减少了抑制mTOR的糖酵解途径。我们的研究建议的潜在作用MPC2 CRC诊断和一个有前途的治疗目标。潜在的分子机制还有待进一步确定,值得进一步研究。

5。结论

总之,我们发现表达下调MPC2 CRC组织中表达,以及消极的协会的表达式与远处转移,患者的生存,淋巴结入侵、T台和肿瘤大小。因此,我们还发现,表达下调MPC2提升CRC增长通过mTOR诱导糖酵解途径。我们的研究建议的潜在作用MPC2 CRC诊断和一个有前途的治疗目标。

数据可用性

数据支持以上结果的批准下可以访问相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

作者的贡献

Manzila Kuerbanjiang Lei顾,淳杰许,温家宝徐婷的贡献同样这项工作。

确认

目前的研究是由中国国家自然科学基金(82072671)。

补充材料

补充图S1: a . mRNA的表达在几个CRC MPC2细胞系中存在。b超表达效率在HT29 SW620细胞显示,使用中存在。c . HT29的可行性(右)(左)和SW480细胞转染MPC2-OE或向量与CCK-8试验检测。c的mRNA表达MPC1 HCT116和细胞RKO MPC2击倒的shRNA衡量存在(相对于shNC集团)。d的mRNA表达MPC1 SW620和HT29细胞MPC2过度衡量存在(相对于向量组)。大肠的蛋白表达MPC1 HCT116和细胞RKO MPC2击倒shRNA测量免疫印迹。g . SW480细胞的生存能力(右)和HT29细胞(左)通过转染MPC2-OE或向量与CCK-8试验检测。补充图S2: MPC2击倒在CRC细胞促进糖酵解。a .糖酵解通量衡量ECAR HCT116、细胞与/或MPC2击倒RKO MPC2超表达。b .最大呼吸能力衡量OCR HCT116和/或细胞与MPC2击倒RKO MPC2超表达。 Supplementary Figure S3: MPC2 overexpression inhibited glycolysis in CRC cells. A. Lactate production of CRC cells transfected with vector or MPC2-OE (relative to vector). B. Glucose consumption of CRC cells transfected with vector or MPC2-OE (relative to vector). C. Relative mRNA levels of glycolysis-related genes in HT29 cells (right) and SW620 cells (left) through the transfection via vector or MPC2-OE (relative to shNC). D. Glycolytic function of SW620 (left) and HT29 cells (right) under the indicated treatments showed by extracellular acidification rate (ECAR). E. Mitochondrial stress test glycolytic function of SW620 (left) and HT29 cells (right) in MPC2 knockdown and/or overexpression under the indicated treatments as measured by oxygen consumption rate (OCR). Supplementary Figure S4: MPC2 reduced p-mTOR level in CRC cells. A. Western blot analysis of phospho-mTOR (p-mTOR) and mTOR in SW620 and RKO cells with vector and MPC2 overexpression transfection and/or MHY1485 treatment (10 μ米,4 h)。b .糖酵解通量衡量ECAR HCT116和细胞RKO MPC2击倒和/或雷帕霉素。b .最大呼吸能力衡量OCR HCT116和/或细胞与MPC2击倒RKO雷帕霉素治疗(50 nmol / L)。补充表S1:的数量和百分比包含IHC得分在392例正常组织和匹配CRC组织。补充表S2:序列成分和底漆。(年代upplementary材料)

引用

1. r·l·西格尔,k·d·米勒,s . a . Fedewa et al .,“结肠直肠癌的统计数据,2017年,”CA:临床医生的癌症杂志》上,卷67,不。3、177 - 193年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. h·布罗迪,“直肠癌”,自然,卷521,不。7551,S1,页2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. m·a·j·b·奥康奈尔Maggard, c . y . Ko,“结肠癌存活率与新美国癌症联合委员会第六版分期,”美国国家癌症研究所杂志》上,卷96,不。19日,1420 - 1425年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. d . k .砖,e·b·泰勒,j . c . Schell et al .,”一个线粒体丙酮酸丙酮酸吸收所需的载体在酵母、果蝇、和人类,”科学(纽约),卷337,不。6090年,第100 - 96页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. 美国赫齐格,e . Raemy s Montessuit et al .,“识别和线粒体丙酮酸的功能表达载体,“科学(纽约),卷337,不。6090年,第96 - 93页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. t·本德、g .佩纳和j . c . Martinou”调控线粒体丙酮酸吸收的替代丙酮酸载体复合物,”在EMBO杂志,34卷,不。7,911 - 924年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. j . r . Colca w·g·麦克唐纳·g·s·卡维et al .,“线粒体的目标的识别thiazolidinedione药物胰岛素增敏剂(mTOT)关系新发现线粒体丙酮酸载体蛋白,”巴解组织的一个,8卷,不。5篇文章e61551 2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. a . j . Rauckhorst和e·b·泰勒“线粒体丙酮酸载体功能和癌症新陈代谢,”当前在遗传学和发展意见,38卷,第109 - 102页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. x, y, g .汉et al .,“MPC1和MPC2表情与良好的临床结果在前列腺癌,”BMC癌症,16卷,不。1,p。894年,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. x y邓,h . Li阴et al .,”c端结合蛋白1通过反馈调节细胞氧化还原调控MPC1和MPC2黑色素瘤细胞,”医学科学箴言报:国际医学杂志的实验和临床研究,24卷,第7624 - 7614页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. 崔x, y, h .周,李问:“线粒体丙酮酸载体的功能在肝细胞癌患者中,“肿瘤的信件,15卷,不。6,9110 - 9116年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. m . Karsy j .关,l·e·黄”异柠檬酸dehydrogenase-mutant胶质瘤预后作用线粒体丙酮酸的载体,“神经外科杂志》,卷130,不。1,56 - 66,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. w·h·Koppenol p l .界限,c . v .党”奥托华宝的贡献目前癌症新陈代谢的概念,“自然评论癌症,11卷,不。5,325 - 337年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. l·c·m·g·范德Heiden负责人和c·b·汤普森,“理解Warburg效应:细胞增殖的代谢需求,”科学,卷324,不。5930年,第1033 - 1029页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. a . khama t石川,k Shimokawa et al .,“epigenetically蒙面基因在结直肠癌筛查使用5-Aza-2脱氧胞苷,微阵列基因表达谱,”癌症基因组学与蛋白质组学,9卷,不。2、67 - 75年,2012页。视图:谷歌学术搜索
16. X.-M。杨,X.-Y。曹,p . et al .,“过度的Rac GTPase激活蛋白1有助于癌细胞扩散通过减少河马信号促进胞质分裂,”胃肠病学,卷155,不。4、1233 - 1249页。e22, 2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. n . Chen g .赵x燕et al .,“小说FLI1其实环状RNA促进乳腺癌转移的协调监管TET1 DNMT1,”基因组生物学,19卷,不。1,p。218年,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. w·Weichert a . Roske诉Gekeler et al .,”协会模式类我组蛋白脱乙酰酶的表达与胃癌患者的预后:一项回顾性分析,“柳叶刀肿瘤学,9卷,不。2、139 - 148年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. w·罗高f、s·李和l .刘”FoxM1促进细胞增殖、入侵和干细胞属性在鼻咽癌,”在肿瘤领域,8卷,p。483年,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 工程学系。江,F.-Y j . Li。董et al .,“增加5 -羟色胺信号有助于Warburg效应在胰腺肿瘤细胞代谢压力和促进小鼠的胰腺肿瘤的增长,”胃肠病学,卷153,不。1,页277 - 291。e19, 2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. l . Gibellini l . Losi s De Biasi et al .,“LonP1不同调节线粒体功能和生物能学原发性和转移性结肠癌细胞,”在肿瘤领域,8卷,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. h . v . Vangapandu o . Havranek m·l·艾尔斯et al .,”b细胞受体在慢性淋巴细胞白血病信号调节新陈代谢,”分子癌症研究:MCR,15卷,不。12日,第1703 - 1692页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. c .徐g .田江c . et al .,“NPTX2促进结直肠癌生长和肝转移的激活规范Wnt /β通过FZD6连环蛋白通路。”细胞死亡和疾病,10卷,不。3,p。217年,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. b . Zhivotovsky和美国Orrenius Warburg效应返回到癌症的阶段,”在癌症生物学研讨会,19卷,不。1、1 - 3,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. r·科特妮,d . c .非政府组织:马利克,k . Ververis s m . Tortorella和t . c . Karagiannis“癌症新陈代谢和Warburg效应:HIF-1和PI3K的角色,”分子生物学报告,42卷,不。4、841 - 851年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. l·m·r·费雷拉“癌症新陈代谢:今天Warburg效应,”实验和分子病理学,卷89,不。3、372 - 380年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. r . j . DeBerardinis j . j .亮度g . Hatzivassiliou b和c。汤普森“癌症的生物学:代谢重编程燃料细胞生长和增殖,”细胞代谢,7卷,不。1、11日至20日,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. r . Camarda a . y .周r . a . Kohnz et al .,“抑制脂肪酸氧化作为一种治疗MYC-overexpressing三阴性乳腺癌,”自然医学,22卷,不。4、427 - 432年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. f·格拉齐亚诺,a . Ruzzo大肠Giacomini et al .,“糖酵解基因表达分析和选择性代谢优势在结直肠癌的临床进展,”药物基因组学杂志,17卷,不。3、258 - 264年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. k . Masui k .田中d Akhavan et al .,“mTOR复杂2控制糖酵解代谢在胶质母细胞瘤FoxO乙酰化和upregulation原癌基因,”细胞代谢,18卷,不。5,726 - 739年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. Tran, h·李,j .公园,s . h . Kim和j .公园,“针对癌症metabolism-revisiting Warburg效应,”毒理学研究,32卷,不。3、177 - 193年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. l·p·胡x x张江s h . et al .,“针对purinergic受体P2Y2预防胰腺导管腺癌的生长通过抑制癌症细胞糖酵解,”临床癌症研究:美国癌症研究协会的官方杂志,25卷,不。4、1318 - 1330年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. 密维尔·e·艾伦,p .合拍,c·m·沃伦et al .,“代谢共生使自适应抗抗血管生成疗法取决于mTOR信号”细胞的报道,15卷,不。6,1144 - 1160年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. l . Pisarsky r·比尔大肠Fagiani et al .,“针对代谢克服阻力的共生抗血管生成疗法,”细胞的报道,15卷,不。6,1161 - 1174年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. X.-P。唐问:陈,李y . et al .,“线粒体丙酮酸载体1函数作为一个肿瘤抑制和预测人类肾细胞癌的预后,”实验室调查,卷99,不。2、191 - 199年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. g . l .西门“HIF-1介导的代谢反应瘤内缺氧和致癌突变,”《临床研究杂志》上,卷123,不。9日,第3671 - 3664页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2021 Manzila Kuerbanjiang等。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。