Alda-1改善肝脏缺血再灌注损伤通过激活醛脱氢酶2和提高自噬在老鼠身上

文摘

乙醛脱氢酶2 (ALDH2)是代谢的关键酶的活性醛,但它的作用在肝脏缺血再灌注损伤(IRI)仍不清楚。在目前的研究中,我们调查的影响ALDH2活化剂,Alda-1,肝脏IRI和阐明底层机制。老鼠用Alda-1预处理和受到90分钟70%肝缺血模型,和肝脏组织或收集血清样本在再灌注后表示时间点。我们证明了Alda-1预处理在肝脏IRI王亚南的作用就是明证肝坏死区域减少,血清ALT、AST水平和肝脏炎症反应。ALDH2的机械化,Alda-1治疗增强活动,随后减少无功的积累醛和有毒蛋白加合物,从而导致减少肝细胞凋亡和线粒体功能障碍。我们进一步证明Alda-1治疗可以激活AMPK和自噬,AMPK活化所需Alda-1-mediated自噬增强。这些研究结果共同表明Alda-1-mediated ALDH2的激活可能是一个有前途的战略来提高肝脏IRI的间隙自噬活性醛和增强。

1。介绍

肝脏缺血再灌注损伤(IRI)是一个不可避免的病理过程中一系列的临床程序,如肝移植、肝切除和出血性休克1]。虽然肝IRI占10%的早期移植失败,导致更高的患病率肝移植后急性或慢性排斥反应,没有开发有效药理干预措施以保护肝脏免受IRI迄今为止(2]。肝细胞死亡和随后的炎症反应是肝IRI的两个关键特性,形成一个恶性循环发病机制驱动的发展肝IRI (3]。因此,策略来有效地改善肝细胞死亡和中断以下炎症级联反应急需改善肝脏IRI。

自噬被广泛认为是一个关键保护细胞通路响应多个内部或细胞外压力(4]。据报道,自噬是深入参与各种肝脏疾病包括代谢疾病、传染病和癌症(5]。然而,自噬的定义函数IRI的发病机制仍存在争议(6]。我们和其他团体证明自噬的激活具有保护作用在肝脏IRI (7- - - - - -9]。

氧化应激的不利因素之一在肝脏IRI的发病机理和占肝细胞死亡的主要原因10,11]。因此,过量的活性氧可能导致反应性醛的积累,包括4-hydroxy-2-nonenal (4 hne)和丙二醛(MDA),通过脂质过氧化(12),可以直接攻击细胞蛋白形成的有毒蛋白质进一步加重肝脏IRI (13]。线粒体醛脱氢酶2 (ALDH2)是一个主要负责解毒酶的活性醛羧酸(14]。先前的研究已经表明,ALDH2活动明显减少与反应性醛非凡的积累在肝脏IRI (15),这表明ALDH2激活可能在肝脏发挥保护性作用通过清理有毒的醛IRI。ALDH2 Alda-1,良好的催化剂,用于激活或恢复ALDH2催化活性通过修改ALDH2的动力学性能和增加substrate-enzyme交互(16- - - - - -18]。先前的研究已经表明,Alda-1治疗显著提高IRI各种类型的器官包括心脏、脑、肺、肾、肠(16,19- - - - - -22]。然而,Alda-1是否具有保护作用在肝脏IRI仍然未知。

在这里,我们采用了一个老鼠体内肝IRI模型加上一个在体外原发性肝细胞缺氧/复氧(H / R)损伤模型来调查Alda-1是否具有保护作用在肝脏IRI通过激活活性醛ALDH2-mediated清理。我们发现Alda-1-induced药理ALDH2的激活增加反应性醛的间隙,增强肝自噬和改善肝脏IRI。因此,我们认为Alda-1治疗可能具有临床意义来防止肝脏IRI。

2。材料和方法

2.1。动物

8-10-week-old雄性C57BL / 6野生型(WT)小鼠(汽车g体重(BW))是购自上海线性有限公司(上海,中国),住在一个环境光(12 h光暗周期),控制温度,湿度,免费的水和食物。动物协议机构批准的动物保健和使用委员会瑞金医院,上海交通大学医学院。

2.2。鼠标温暖肝IRI模型

温暖肝IRI的建立和稳定的小鼠模型被用来作为我们之前描述的7]。简而言之,在戊巴比妥钠麻醉(40毫克/公斤,i.p。),一个中线剖腹手术。防止损伤的剪辑是放置在门户三和弦,高于右侧侧叶。经过90分钟的缺血,再灌注的夹取出,动物被牺牲在表示时间点再灌注后,立即和肝组织或血清样本收集进行进一步分析。Sham-operated老鼠接受了同样的手术,但是没有血管闭塞。麻醉老鼠维持在37°C的变暖垫和热灯在麻醉过程中。Alda-1(20毫克/公斤BW,多国评价,蒙默思郡交界处,新泽西,美国)溶解在溶液(5% DMSO + 45% PEG400 +水)腹腔内接种2 h操作之前肝缺血,而3-methyladenine (3 ma, 30毫克/公斤BW, MCE)溶解在PBS或复合C (CC、5毫克/公斤BW MCE)溶解在PBS腹腔内接种1 h在肝缺血的操作;同等体积的溶液在相同的方式作为车辆管理控制。区分车辆的顺序控制是管理,车辆控制Alda-1将被描述为DMSO控制本文和其他车辆控制。

2.3。血清样本化验

血清中ALT、AST的水平是衡量一个标准临床自动分析仪(维度Xpand最;西门子戴德贝林,德国慕尼黑)。血清肿瘤坏死因子-α使用商用和il - 6水平测定酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(NeoBioscience科技、深圳、中国)根据制造商的协议。

2.4。肝脏组织病理学、免疫组织化学和TUNEL染色

标准程序的肝脏组织病理学、免疫组织化学和TUNEL染色被用作我们先前描述的7]。短暂、肝脏组织在4%多聚甲醛固定,嵌入在石蜡,切成5μ米厚的部分。组织病理学分析,部分被苏木精和伊红染色()),铃木的标准被用来评估肝脏IRI的严重程度(23],细胞质液泡化、正弦拥堵和实质细胞坏死分级从0到4。免疫组织化学染色,deparaffinization和补液的部分然后antigen-unmasking过程和处理后隔夜孵化与主抗体4 hne(兔多克隆,1:300年,Abcam), MPO(兔多克隆,1:300年,Abcam),裂解caspase-3(兔多克隆,1:200年,细胞信号技术),和F4/80(鼠单克隆,1:250年,AbD Serotec)在4°C,部分被孵化HRP-conjugated二级抗体,免疫反应性的细胞可视化使用轻拍。TUNEL染色,细胞死亡在肝脏切片被TUNEL方法检测(美国印第安纳波利斯罗氏诊断)根据制造商的指示。对于每个彩色部分,至少有三个图像被随机的字段,和至少三个老鼠每组受到每个实验。Image-Pro +软件(版本6.0)被用于图像分析的部分。

2.5。隔离、文化和治疗肝细胞

原发性肝细胞被孤立为我们之前描述的24]。缺氧/复氧化验,肝细胞培养在模块化孵化室37°C(美国纽约BioSpherix, Lacona)加油有限公司5%₂和95% N₂气体混合物4 h后跟2 h在常氧条件下复氧(空气/ 5%股份有限公司₂)。Alda-1 (20μ马米)、3(5毫米),或CC (5μ米)被添加到前1小时缺氧的媒介。细胞生存能力评估使用CCK8细胞生存能力分析工具包(Dojindo、日本)和细胞毒性是由乳酸脱氢酶(LDH)释放(Beyotime、上海、中国)根据制造商的指示。所有实验进行了至少3次确认结果。在肝细胞线粒体跨膜电位的评估试验设备与JC-1 (Beyotime)根据制造商的指示。线粒体生成过氧化物是沾MitoSOX红(美国表达载体,沃尔瑟姆,MA)。

2.6。ALDH2活性和MDA含量

ALDH2 ALDH2活动在肝组织中测量使用一个活动分析工具包(GMS50131;美国辉瑞GENMED),根据制造商的指示。简单地说,用分光光度计测定的活动通过监测NADPH(340海里)的生产。ALDH2活动表示为nmol NADH /分钟/毫克蛋白(一个单位)。丙二醛(MDA)含量测定的商用工具(南京建成生物工程研究所、南京、中国)根据制造商的指示。

2.7。定量rt - pcr和免疫印迹分析

肝组织和PMH处理使用rt - pcr和免疫印迹分析我们之前描述的24]。信使rna和蛋白质的相对表达水平目标基因被规范化的相对变化β肌动蛋白。引物用于rt - pcr分析如下:(我)MCP1: F GGGCCTGCTGTTCACAGTT(2)MCP1: R CCAGCCTACTCATTGGGAT(3)il - 6: F TAGTCCTTCCTACCCCAATTTCC(iv)il - 6: R TTGGTCCTTAGCCACTCCTTC(v)肿瘤坏死因子-α:F CCCTCACACTCAGATCATCTTCT(vi)肿瘤坏死因子-α:R GCTACGACGTGGGCTACAG(七)il - 1β:F TGGACCTTCCAGGATGAGGACA(八)il - 1β:R GTTCATCTCGGAGCCTGTAGTG(第九)β肌动蛋白:F TGACAGGATGCAGAAGGAGA(x)β肌动蛋白:R ACCGATCCACACAGAGTACT

主P62抗体(兔单克隆,1:1000年,细胞信号技术),裂解caspase-3(兔多克隆,1:1000年,细胞信号技术),伯灵顿(兔多克隆,1:1000年,细胞信号技术)、Bcl2(兔单克隆,1:1000年,细胞信号技术),4 hne(兔多克隆,1:1000年,Abcam), ALDH2(兔多克隆,1:3000年,Proteintech), LC3B(兔多克隆,1:1000年,Proteintech),和β肌动蛋白(1:20000年,Sigma-Aldrich)。

2.8。由透射电子显微镜观察肝组织超微结构

肝脏组织解剖,小块固定在2.5%戊二醛。超薄部分被削减,与醋酸双氧铀缓冲柠檬酸铅,然后观察与日立ht - 7700透射电子显微镜。

2.9。统计分析

所有的值被表示为±SEM。未配对的学生 - - - - - -测试或单向方差分析测试是用来比较两组或两组以上,分别。对于非参数测试,Mann-Whitney测试或克鲁斯卡尔-沃利斯测试使用。一个值小于0.05是用来表示一个统计上的显著差异的统计比较,和数据分析使用GraphPad Prism7 (GraphPad软件公司,圣地亚哥、钙、美国)。

3所示。结果

3.1。Alda-1预处理保护肝脏免受IRI

调查对肝脏IRI Alda-1是否有保护作用,我们首先确定适当的剂量和时间窗口Alda-1治疗小鼠通过测量ALT、AST水平,发现Alda-1治疗20毫克/公斤,2 h肝脏缺血前取得了更好的保护(补充数据结果1和1 b)。DMSO控制相比,小鼠使用Alda-1显示明显减少坏死区和铃木的分数在再灌注后6 h和12 h(数字1(一)和1 (b))。也符合这些组织学改变,Alda-1-pretreated小鼠血清ALT、AST水平较低(图展出1 (c))。检测Alda-1在原发性肝细胞的功能,我们采用缺氧/复氧(H / R)治疗原发性肝细胞模型在体外。DMSO控制相比,主肝细胞处理Alda-1显示更少的形态异常,提高细胞生存能力,和较低的细胞毒性(数字1 (d)- - - - - -1 (f))。总的来说,这些发现表明,在肝IRI Alda-1有保护作用。

3.2。从IR-Induced Alda-1保护肝细胞凋亡

细胞凋亡是一种重要的机制诱导肝细胞死亡过程中肝IRI (25]。然后我们检查肝细胞凋亡水平通过测量TUNEL caspase-3裂解,伯灵顿,Bcl2。DMSO控制相比,小鼠使用Alda-1显示显著降低肝细胞凋亡水平就是明证TUNEL减少,caspase-3裂解,和伯灵顿信号和增加Bcl2水平(数字2(一个)- - - - - -2 (e))。此外,Alda-1治疗引起的增加Bcl2和伯灵顿水平减少原发性肝细胞受到H / R的挑战在体外(图2 (f))。这些发现表明,Alda-1能减少肝细胞凋亡在肝脏IRI。

3.3。Alda-1改善炎症反应在肝IRI

在肝脏IRI,肝细胞death-induced炎症反应可以进一步加剧肝IRI的严重程度(26]。然后我们试图评估Alda-1是否也会影响肝脏IRI后炎症反应。如数据所示3(一个)- - - - - -3 (d)肝浸润的中性粒细胞(MPO)和巨噬细胞(F4/80)显著减少Alda-1-pretreated老鼠相比,DMSO控制。此外,血清和肝MCP-1等水平的促炎细胞因子和趋化因子,il - 1β肿瘤坏死因子-αAlda-1-pretreated老鼠,il - 6都低于对照小鼠(数字3 (e)和3 (f))。总的来说,这些发现显示,Alda-1降低炎症反应在肝IRI。

3.4。Alda-1政府减少线粒体功能障碍和ROS生产后H / R的挑战在体外

在细胞水平上,线粒体功能障碍和过度ROS生产两个初始有害事件驱动肝细胞死亡和炎症反应在肝IRI (10]。调查是否Alda-1-mediated hepatoprotection IRI期间由于改善线粒体功能障碍和活性氧的生产,我们测量了在原发性肝细胞线粒体膜电位和ROS水平H / R治疗在体外。与DMSO控制相比,Alda-1显著预防线粒体膜电位的下降(使用JC-1荧光染料)和活性氧的增加生产(使用mitoSOX红色染料)在H / R的挑战(数字4(一)- - - - - -4 (d))。因此,我们得出结论,Alda-1预处理可以防止线粒体功能障碍和抑制氧化应激在肝脏IRI。

3.5。ALDH2 Alda-1预处理提高活动和减少有毒的醛在肝脏IRI

Alda-1 ALDH2的活化剂,然后检查是否激活ALDH2 Alda-1治疗。在肝脏IRI,尽管ALDH2活动明显减少再灌注后6 h和12 h, Alda-1预处理明显肝ALDH2活动增加(图5(一个))。ALDH2有趣的是,这些活动的变化与ALDH2表达式因为ALDH2免疫印迹分析表明,没有虚假的小鼠体内的蛋白质含量变化,车辆控制,或Alda-1老鼠预处理(补充数据2和2 b)。ALDH2是关键酶负责清除活性醛,然后,我们调查是否Alda-1预处理可以降低无功的积累在肝脏IRI醛。免疫印迹和包含IHC检测表明,车辆控制相比,Alda-1预处理显著降低的水平4 hne加合物在肝脏再灌注后6 h或12 h(数字5 (b)- - - - - -5 (d))。此外,Alda-1预处理也阻止了MDA的积累,另一种类型的反应性醛,再灌注后6 h和12 h(图5 (e))。因此,这些结果表明,ALDH2 Alda-1预处理可以增加活动和清除活性醛。

3.6。Alda-1-Mediated Hepatoprotection在肝脏IRI取决于增强的自噬

先前的研究已经表明,ALDH2激活足以诱导自噬在不同生理和病理条件下27,28]。与这些结果一致,DMSO控制相比,Alda-1治疗显著增强肝脏LC3BII自噬的增加和减少P62水平(图6(一)和补充图3)。相应地,Alda-1-pretreated老鼠的肝脏的自噬小体数量明显增加(数据6 (b)和6 (c))。测试是否Alda-1-mediated hepatoprotection依赖增强的自噬,我们调查的影响Alda-1通过阻断自噬与3-methyladenine (3 ma,自噬抑制剂)。)染色和铃木的分数显示在肝脏坏死区域的Alda-1-pretreated DMSO的老鼠相比显著减少管制,而抑制自噬逆转Alda-1(数据的保护作用6 (d)和6 (e))。符合组织的数据,3 ma-mediated自噬抑制也逆转了小鼠血清ALT、AST水平降低Alda-1-treated(图6 (f))。免疫印迹分析显示,3 ma废除Alda-1-induced表达增加LC3BII Bcl2和减少P62和伯灵顿(图6 (g))。此外,3 ma-mediated自噬抑制使敏感Alda-1-treated主要肝细胞H / R损伤在体外的细胞生存能力降低,增加LDH释放水平(补充数据3 b和3 c)。正如我们先前已经表明,雷帕霉素治疗通过自噬诱导和保护肝脏免受IRI mTORC2-Akt激活(29日),然后测试雷帕霉素治疗能否进一步加强王亚南Alda-1的影响。我们发现,尽管Alda-1或雷帕霉素治疗肝坏死和降低血清ALT / ALT水平,没有观察到有协同作用的cotreatment Alda-1和雷帕霉素(补充数据4- - - - - -4摄氏度)。总的来说,这些结果表明,Alda-1预处理具有保护作用在肝脏IRI通过自噬的增强。

3.7。Alda-1-Induced期间自噬增强肝脏IRI是由AMPK活化

之前的研究表明,反应性醛等4 hne损害激活AMPK信号(30.,31日]。鉴于AMPK活化具有保护作用在肝脏IRI至少部分是通过自噬途径的激活(32,33),然后,我们测试是否Alda-1-mediated hepatoprotection在肝脏IRI归因于AMPK活化。免疫印迹分析表明,与虚假和车辆控制相比,Alda-1预处理明显增加了AMPK的磷酸化水平在肝组织IRI(图7(一))。一致,Alda-1治疗也增强AMPK在原发性肝细胞磷酸化(补充图H / R的挑战5)。确定Alda-1-induced自噬增强取决于AMPK活化、复合C (CC,特定AMPK抑制剂)是用来阻止AMPK活化在肝脏IRI。AMPK抑制的CC钝化hepatoprotection Alda-1在肝脏IRI就是明证肝坏死区域增加,血清ALT、AST水平(数字7 (b)- - - - - -7 (d))。此外,免疫印迹显示CC治疗导致明显降低AMPK磷酸化和Bcl2 LC3BII表达和P62和伯灵顿表达明显增加(图7 (e))。相应地,CC治疗显著降低细胞的生存能力和增加在原发性肝细胞LDH释放处理后Alda-1 H / R在体外(补充数据5 b和5度)。因此,这些发现表明,AMPK活化Alda-1-mediated自噬激活在肝脏IRI是必要的。

4所示。讨论

在我们目前的研究中,我们表明,Alda-1, ALDH2受体激动剂,防止肝脏IRI。详细Alda-1减毒治疗肝坏死、肝细胞凋亡,减少炎症反应,抑制线粒体功能障碍和活性氧的生产在肝脏IRI。Alda-1的防护作用的潜在机制与醛反应的直接间隙和间接引起的AMPK激活自噬增强。

在IRI, ROS增加生产是主要的有害事件导致细胞损伤甚至死亡,部分原因是ROS攻击各种关键生物脂类,尤其是膜磷脂,导致反应性醛的形成,如4 hne和MDA,进一步加重损伤(34]。尽管多个证据表明ALDH2的主要解毒酶活性醛,ALDH2活动的现象通常是抑制IRI期间不可能有效地清除活性醛(15,16,19- - - - - -22),因此导致大量积累那些有毒的醛反应和细胞损伤。因此,激活ALDH2是一种可能的方法来改善IRI。事实上,管理Alda-1已被证实能改善IRI在许多其他器官除了肝脏(16,19- - - - - -22]。在目前的研究中,我们还证明了降低小鼠肝脏IRI ALDH2活动模型和ALDH2 Alda-1可以显著提高管理活动,这是独立于ALDH2的表情变化。因此,Alda-1-mediated ALDH2活动增强阻塞4 hne和MDA的积累,提高了肝脏IRI。

除了导致细胞损伤和死亡,反应性醛也有报告称,激活NF -κB通路链接激活炎症反应(35];因此,反应性醛可能诱发炎症反应直接或间接。在目前的研究中,我们表明,Alda-1治疗可以改善肝细胞凋亡和无菌炎症在肝脏IRI,这与先前的报道是一致的,表明Alda-1 antiapoptosis和消炎作用[19- - - - - -22]。

一般认为自噬是细胞保护性手段对各种细胞内或细胞外刺激的反应。虽然在IRI自噬的功能仍然是有争议的,我们和其他组织已经确定了自噬在肝脏IRI的保护作用[7- - - - - -9,29日]。在目前的研究中,我们发现自噬增强后Alda-1治疗水平的提高LC3BII, P62退化,自噬小体。显然,王亚南Alda-1依赖于自噬的作用因为3 ma-mediated自噬抑制大大降低在肝脏IRI或者Alda-1王亚南的影响在体外H / R治疗。有趣的是,rapamycin-induced自噬增强不能进一步增加Alda-1-mediated hepatoprotection,建议Alda-1和雷帕霉素不协同工作。

最近的一项研究表明,蛋白加合物的活性醛抑制LKB导致受损的激活信号LKB1的活动/ AMPK mTOR通路(30.]。此外,ALDH2报道保护心肌功能通过一个AMPK-dependent自噬激活轴在一个实验性糖尿病心肌病模型(28]。在目前的研究中,我们还发现,Alda-1治疗诱导激活AMPK,而复合C-mediated AMPK大大废除Alda-1的保护作用和抑制自噬激活。此外,考虑到4 hne可以直接抑制其活动的目标AMPK [31日),我们建议直接或间接激活AMPK Alda-1治疗导致自噬激活在肝脏IRI。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

孟李和许敏同样这项工作。

确认

这项工作得到了国家自然科学基金(81670562 x香港,81670562问:夏,和31671453 h . Wu),上海市临床医学教育Commission-Gaofeng拨款支持x香港(20171911),从科学技术委员会授予的上海市政府x香港(16401970600 - 03),和中国国家重点研发项目(2017 yfc0908100问:夏)。

补充材料

补充图1:Alda-1用法在不同浓度和时间的。补充图2:ALDH2在肝脏IR的表达。补充图3:在肝细胞自噬增强人力资源的挑战。补充图4:使用雷帕霉素和Alda-1相结合。补充图5:AMPK活化肝细胞中人力资源的挑战。(补充材料)

引用

1. y翟,h . Petrowsky j . c .香港r·w·Busuttil和j·w·Kupiec-Weglinski”Ischaemia-reperfusion损伤肝脏移植到板凳的床边,“自然评论胃肠病学和肝脏病学,10卷,不。2、79 - 89年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. h . Jaeschke和b . l . Woolbright“当前策略以减少肝缺血再灌注损伤对活性氧物种,”移植的评论,26卷,不。2、103 - 114年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. a·j·鲁r·w·Busuttil和j·w·Kupiec-Weglinski“肝脏缺血和再灌注损伤的分子介质:简要回顾,“分子医学,14卷,不。5 - 6,337 - 345年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. t . Yorimitsu和d . j . Klionsky”自噬:分子机械自食。”细胞死亡和分化补充2卷。12日,第1552 - 1542页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. p . e . Rautou a . Mansouri d . Lebrec f . d .眉毛,和r·莫罗,勾勒出“自噬在肝脏疾病,”肝脏病学杂志,53卷,不。6,1123 - 1134年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. l·默罗和j . Debnath”,自噬作为一种应激反应和质量控制机制:对细胞损伤和人类疾病的影响,“年度回顾的病理,8卷,不。1,第137 - 105页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. d, l·陈,陈x et al .,“三萜CDDO-imidazolide改善小鼠肝脏缺血再灌注损伤通过激活Nrf2 / HO-1途径增强的自噬,”细胞死亡和疾病,8卷,不。8篇文章e2983 2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. p . j .红衣主教锅,a . Tsung“缺血性肝损伤保护作用的顺铂通过诱导的自噬,”自噬,5卷,不。8,1211 - 1212年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. h·a . Liu, w·魏o . Dirsch和Dahmen,“缺血性预处理预防肝缺血/再灌注损伤通过血红素oxygenase-1-mediated自噬,”危重病医学,42卷,不。12日,pp. e762-e771, 2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. k . m . Quesnelle p v Bystrom, l . h . Toledo-Pereyra”分子反应缺血和再灌注在肝脏,”档案的毒理学,卷89,不。5,651 - 657年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. 混合,s·j·雷明顿:盛田昭夫,k . Terui和m . Ozaki“肝缺血再灌注后立即引起氧化应激,reperfusion-induced损害的严重程度决定的,”抗氧化剂和氧化还原信号,11卷,不。10日,2563 - 2572年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. m . Fukai t . Hayashi Yokota r . et al .,“脂质过氧化在缺血取决于缺血期间在温暖的缺血和再灌注的大鼠肝脏,”自由基生物学和医学,38卷,不。10日,1372 - 1381年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. k .田”4-Hydroxy-2-nonenal:氧化应激的产品和中介,“脂质研究进展,42卷,不。4、318 - 343年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. c·h·陈,l·a·克鲁兹,d .她“药理招聘三醛脱氢酶a1 (ALDH3A1)协助ALDH2乙醛和乙醇代谢体内,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷112,不。10日,3074 - 3079年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. k -。h .月亮,b . l .罩p Mukhopadhyay et al .,“关键线粒体蛋白质的氧化失活导致功能障碍和在肝缺血再灌注损伤,”胃肠病学,卷135,不。4、1344 - 1357年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. c·h·陈,g·r·布达e . n .丘吉尔,m . h . Disatnik t·d·赫尔利和d .她“激活醛dehydrogenase-2减少缺血性损害心脏,”科学,卷321,不。5895年,第1495 - 1493页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. s . Perez-Miller h·哈里斯,r . Vanam c·h·陈,d .她和t·d·赫尔利,“Alda-1是人类共同的受体激动剂和化学女伴醛脱氢酶2变种,”《自然结构和分子生物》上,17卷,不。2、159 - 164年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. j . a . Belmont-Diaz b . Yoval-Sanchez l . f . Calleja-Castaneda j . p . Pardo巴斯克斯和j·s . Rodriguez-Zavala”Alda-1调节线粒体的动力学性质醛脱氢酶(ALDH2)”2月日报,卷283,不。19日,3637 - 3650年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. s . h .傅h·f·张,杨z . b . et al .,“Alda-1减少脑缺血/再灌注损伤大鼠通过反应性醛的间隙,“Naunyn-Schmiedeberg药理学的档案,卷387,不。1,第94 - 87页,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. j .丁问:张先生,问:罗et al .,“Alda-1减弱肺缺血再灌注损伤,减少4-hydroxy-2-nonenal在肺泡上皮细胞,”危重病医学,44卷,不。7,pp. e544-e552, 2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. z z钟,问:胡,傅et al .,“增加醛脱氢酶2的表达减少肾细胞凋亡在低温机器灌注缺血/再灌注损伤后,“人造器官,40卷,不。6,596 - 603年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. y .问:朱,g .他j . Wang Wang和w·陈,“预处理与ALDH2兴奋剂Alda-1减少肠道损伤引起缺血和再灌注在老鼠中,“临床科学,卷131,不。11日,第1136 - 1123页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. 铃木s l . h . Toledo-Pereyra f·j·罗德里格斯和d . Cejalvo嗜中性粒细胞浸润,肝脏缺血和再灌注损伤的一个重要因素。调制吸收FK506环孢霉素的影响。”移植,55卷,不。6,1265 - 1272年,1993页。视图:谷歌学术搜索
24. y, d·冯·h·吴et al .,“有缺陷的起始osteopontin-deficient小鼠部分肝切除术后肝再生的由于激活的il - 6 / Stat3通路,不足”国际生物科学杂志》上,11卷,不。10日,1236 - 1247年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. p .吉奥吉夫·达姆、r·格拉夫和p . a . Clavien”阻止死亡之路:抗凋亡分子肝缺血/再灌注损伤中,“当前的药物设计,12卷,不。23日,第2921 - 2911页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. j·鲁茨、k . Thurmel Heemann,“抗炎治疗策略在移植缺血/再灌注损伤,”杂志的炎症,7卷,不。1,p。27日,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. r·郭x, s . a . Babcock y,和j .任“醛dedydrogenase-2起着有益的作用在改善慢性饮酒导致的肝脂肪变性和炎症通过调节自噬,”肝脏病学杂志,卷62,不。3、647 - 656年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. d . y .郭,w . Yu太阳et al .,“小说为线粒体醛脱氢酶保护机制(ALDH2) i型diabetes-induced心脏功能障碍:AMPK-regulated自噬的作用,“Biochimica et Biophysica学报(BBA)——疾病的分子基础,卷1852,不。2、319 - 331年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. j .朱陆t, s悦et al .,”雷帕霉素保护肝脏免受缺血和再灌注损伤依赖于自噬诱导和哺乳动物雷帕霉素靶复杂2-Akt激活”移植,卷99,不。1,48-55,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. t·d·Calamaras c·李,f .局域网,y、d . a . Siwik和w·s·科鲁奇产品4-hydroxy -脂质过氧化作用反式通过激活mTORC1-p70S6K-RPS6 2-nonenal引起心肌细胞动作电位蛋白质合成信号”自由基生物学和医学卷,82年,第146 - 137页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. c . t . Shearn d s Backos d . j . Orlicky r . l . Smathers-McCullough d·r·彼得森,“识别5 '活化激酶活性的目标醛在慢性摄入高浓度的乙醇,”《生物化学》杂志上,卷289,不。22日,第15462 - 15449页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. m, d .杨x锣et al .,“活化蛋白激酶在肝缺血再灌注损伤具有保护作用,”美国转化研究杂志》上,9卷,不。3、823 - 829年,2017页。视图:谷歌学术搜索
33. 美国赫齐格和r . j . Shaw”AMPK:代谢及线粒体内稳态的监护人,”自然评论分子细胞生物学,19卷,不。2、121 - 135年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. f·j·罗梅罗,f . Bosch-Morell m·j·罗梅罗et al .,“脂质过氧化反应产品在人类疾病和抗氧化剂,“环境健康展望补充5卷。106年,第1234 - 1229页,1998年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. m . Shoeb n h·安萨里,s . k .斯利瓦斯塔瓦和k . v .拉”4-Hydroxynonenal在人类疾病的发病机制和进展,”当前药物化学,21卷,不。2、230 - 237年,2014页。视图:谷歌学术搜索

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