文摘

血清细胞因子水平进行了探讨合并后集团的自身免疫性肝病患者(AILDs)和自身免疫性肝炎(AIH)患者分别和重叠综合征。总体而言,60 AILD患者,其中32例AIH患者和28重叠综合症患者,包括横断面研究。血清细胞因子水平测量基准和21健康对照组相比。患者AILD拥有更高水平的il - 6(0.70(范围0.17 - -99.86)患者AILD相比0.40(范围0.14 - -2.65)控制, ),引发(1.66(0.45 - -34.58)和0.53(0.35 - -2.38),分别地。 )和肿瘤坏死因子-α(2.61(0.23 - -120.88)和1.65(0.21 - -7.54),分别地。 )。调整逻辑回归分析显示明显的关系引发AILD, 48.36(3.63 - -643.60),以及AIH、18.54(1.08 - -318.54),和重叠综合征,23.85(2.37 - -240.23),而其他细胞因子的水平之间的关联和AILD被评估为不重要的。在绝对数字的语言,引发血清水平的增加1 pg / mL增加了病人的机会发现自己在一群AILD 48.36倍。此外,高血清引发强烈相关临床参数。

1。介绍

自身免疫性肝病(AILDs)包括广泛影响肝脏及胆道系统的自身免疫性疾病,原发性胆汁性肝硬化(PBC)、原发性硬化性胆管炎(PSC),和自身免疫性肝炎(AIH) AILD的经典类型。虽然AIH肝细胞和主要目标与肝细胞损伤有关,中国人民银行的自身免疫系统攻击的目标和PSC是胆道上皮细胞,导致淤胆型特性的优势(1,2]。AIH和中国人民银行是最频繁AILDs发生率约1 - 2每100000人口每年为每个疾病(3每100000人口)的患病率厅2例在世界不同地区,发病率和患病率最高的发现在美国和欧洲北部[4]。条件表现出两种不同的特点AILDs通常指定为重叠综合征。他们并不罕见,中国人民银行和AIH发生在所有AIH患者的2 - 19%,而且通常显示一个进步的过程对肝硬化和肝功能衰竭(没有足够的治疗2]。

虽然AILDs的确切机制尚不清楚5),类似的致病途径AIH的伤害被假定,中国人民银行,和PSC,这些组成一个联合环境诱因的影响,遗传素质,和免疫耐受机制的失败,这反过来,诱导抗体和协作T细胞介导免疫攻击肝脏特异性指标,导致坏死炎性组织和肝脏纤维化的过程[进步2]。持续的肝损伤,与慢性AILD有关,导致持续的炎症、细胞增殖和细胞外基质蛋白沉积的肝星状细胞和门户myofibroblasts。肝硬化,肝功能正常,失去的发生必然随之而来(1]。

尽管人们普遍认识到,AILDs主要T细胞介导的疾病(6],它也表明,细胞因子如白细胞介素(IL),扮演一个关键的角色在肝脏疾病的发病机理和先天淋巴细胞和自然杀伤细胞T细胞激活(7]。某些细胞因子的确切作用及其效用作为预测疾病的生物标志物的结果,或作为诊断工具,以及他们的潜力作为治疗目标还可以研究,尽管单克隆抗体,例如,抗体针对il - 12 / IL-23,即使是现在被认为是一个潜在的治疗方案AILD [8]。

本研究的目的是揭示AIH患者血清细胞因子水平差异和重叠综合征,和合并后的集团之间的AILD患者和健康对照组,并探讨细胞因子水平之间的关联和AILD患者疾病的临床特征。

2。患者和方法

2.1。病人

总体而言,60 AILD患者(现年54岁的女性(90%),平均年龄 年),其中32 AIH患者(女性,28(87.5%),平均年龄 年)和28重叠综合症患者(女性,26(92.8%),平均年龄 年),连续横断面noninterventional队列研究中。包含了在一个中心(共和党胃肠病学、临床医院,喀山,俄罗斯),2015年4月至2016年5月举行。入选标准是18岁以上,诊断AILD根据实际的建议:建立PBC-EASL (2009) (9),AIH-AASLD (2010) (10),AIH-PBC重叠综合征,IAIHG位置声明(2011)(11),患者的能力和意愿提供研究的知情同意。患者不包括如果他们下列:病毒性肝炎B或C(血清标记或历史),威尔逊的疾病、非酒精性肝病、酒精性肝病、药物引起的肝炎,怀孕,和任何严重的条件或其他条件,研究认为医生排除参与这项研究。每一位病人,他观察到部门与AILD满足入选标准的要求,被邀请参加这项研究。

作为对照组,21岁健康和sex-matched志愿者(女性,18(85.7%),平均年龄 年)检查。他们都有一个不显眼的病史没有诊断出活跃的胃肠疾病,感染,和肝脏疾病,没有历史的主要肠道手术在过去12个月中或酗酒,也没有历史的抗生素或抗炎药物摄入量在上个月。上述排除标准也被应用于控制。大多数的控制在这个研究是医务工作者,他们自愿被包括在对照组。

2.2。研究设计

所有患者接受完整的临床和实验室检查。人口数据(如疾病持续时间、年龄和性别的),临床表现,(如腹水的存在和严重性,门户低血压,肝性脑病,和肝外症状),和患者评估的重要参数包含的日子。正在进行的和以前治疗和并发药物记录。实验室检查包括常见的血细胞计数和生化血液测试,以及免疫试验(抗线粒体,反核antismooth肌肉滴度,水平的循环免疫复合物和gamma-globulins),根据标准临床协议。

2.3。细胞因子分析

在基线血清样本收集从每个主题。血清细胞因子水平进行了分析使用〈〈Bio-Plex 200〉〉(美国Bio-Rad大力神,CA)多元分析后,制造商的指示。血清水平的七个细胞因子测定:2、il - 4、il - 6,引发,il - 10,移行细胞(IFN -γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF -α)。平均荧光强度测量使用Luminex 200分析仪(美国Luminex、奥斯汀、TX)。收集的数据进行了分析使用MasterPlex CT控制软件和MasterPlex QT分析软件(美国MiraBio圣布鲁诺,CA)。为每个分析物标准曲线生成的使用厂家提供的标准。

2.4。统计分析

统计处理和分析获得的数据是由IBM SPSS统计版本23(美国芝加哥,IL) Statistica version 12.5 (Statsoft)和Microsoft Excel 2013。描述性数据的中值和范围(细胞因子水平),或者M±SD, M是平均值和SD是标准偏差(人口和临床数据)。使用Mann-Whitney组比较U测试和克鲁斯卡尔-沃利斯检验。两个参数组间比较采用卡方检验。获得的差异被认为是具有统计学意义 。之间的关系的机会疾病和血清细胞因子水平评估使用逻辑回归分析。变量是重要的单变量分析进一步分析使用多变量分析为混杂因素调整,如其他细胞因子的水平,年龄和性别。

2.5。伦理委员会批准

研究协议是经当地伦理委员会批准的喀山州医科大学(协议10号,2014年12月23日)。所有患者签署知情同意书之前被包括在研究中。

3所示。结果

3.1。患者的临床特征

基线患者的临床和实验室数据如表所示1。观察两组之间有一些差异。总的来说,重叠综合症患者,与AIH患者相比,症状持续时间较短( ± 与 ± 年,职责。)和更高水平的丙氨酸转氨酶(ALT) ( ± 与 ± U / L)和碱性磷酸酶( ± 与 ± U / L),以及更高的红细胞沉降率(ESR) ( ± 与 ± 毫米/小时),糖皮质激素较少(15(53.6%)和25(78.1%)、职责),虽然整体可比性的意思是剂量的糖皮质激素( ± 与 ± 毫克/天,职责)。

表1
病人的特点。
3.2。比较之间的血清细胞因子水平的患者AILD和控制

循环各AILD患者血清细胞因子水平检查,比较以下的健康对照组水平。总的来说,和AIH重叠综合症患者,以及整个群AILD相结合,明显有较高水平(相对于控制)il - 6(0.70(范围0.17 - -99.86)患者AILD相比0.40(范围0.14 - -2.65)控制, ),引发(1.66(0.45 - -34.58)和0.53(0.35 - -2.38),分别地。 )和肿瘤坏死因子-α(2.61(0.23 - -120.88)和1.65(0.21 - -7.54),分别地。 )。分布的il - 6、引发和TNF -α图所示的水平1。群重叠综合症患者,以及一般群AILD,但不是AIH患者,2水平明显低于控制(AILD患者2.07(范围0.11 - -111.87)相比,2.76(范围0.45 - -4.10); )。没有差异中发现血清水平的其他细胞因子相比,控制和水平之间的所有检测细胞因子组AIH和重叠综合征。完整的数据如表所示2。

表2
血清循环水平的细胞因子在AILD患者和健康对照组。数字值(范围)。

图1
循环血清interleukin-8,肿瘤坏死因子-α(肿瘤坏死因子-α)和白细胞介素- 6的浓度在自身免疫性肝炎(AIH)和重叠综合症患者和健康对照组。AIH与对照组之间的差异和重叠和对照组之间重要的情况下, 。

显示统计学意义关联回归分析进行了进一步的分析。未经调整的逻辑回归证实,血清il - 6的水平,引发,TNF -α在AILD病人相比,对照组显著提高。这种联系是引发尤其明显(优势比(或)和95%可信区间(CI) - 57.54 (6.15 - -538.08))。- 2水平和疾病之间的联系不再重要。在亚组分析,或引发仍高和统计学意义:30.39 (AIH 3.15 - -293.12)和22.12(3.07 - -159.55)重叠综合征与健康对照组。合并后的调整后的回归模型,其中包括所有4细胞因子和调整年龄和性别,也显示出明显的标志的关系引发AILD, 48.36(3.63 - -643.60),而其他细胞因子的水平之间的关联和AILD被评估为不重要的。在亚组分析,或引发仍高,显著调整后:18.54 (AIH 1.08 - -318.54)和23.85(2.37 - -240.23)重叠综合征与健康对照组。完整的数据如表所示3。

表3
协会(表示为优势比和95%置信区间的逻辑回归分析)之间血清细胞因子水平(- 2、il - 6、引发和il - 10),自身免疫性肝病。
3.3。细胞因子水平及其与临床和实验室参数

参数的肝损害,如肝酶水平,白蛋白,和胆红素水平,和参数的活跃持续的炎症,如ESR和gamma-globulins水平,探索他们的协会和循环血清细胞因子水平在整个群AILD病人和子组(AIH和重叠综合征)。大多数的相关性观察引发的水平,与ESR水平呈正相关( ; )、AST ( ; )、碱性磷酸酶( ; )、总胆红素( ; )和血清白蛋白水平负相关( ; )。表4给所有显示血清细胞因子水平与疾病活动之间的相关性。没有透露其他实验室或临床相关性参数或血清细胞因子水平。

表4
斯皮尔曼秩实验室变量之间的相关性和血清细胞因子水平测量。鉴于数字 值。统计上显著的相关性是标有斜体字体。

4所示。讨论

据我们所知,这是第一个研究比较广泛的支持和抗炎细胞因子AILD患者,特别是在重叠综合症患者,健康对照组。在我们的研究中,血清4细胞因子的水平,2、il - 6,引发,TNF -α明显不同的AILD患者与健康对照组相比。调整后的回归模型表明中央引发的重要性,因为这是唯一的细胞因子,AILD患者之间的差异和控制调整后仍然是重要的。在绝对数字的语言,引发血清水平的增加1 pg / mL的机会增加病人发现自己在一群AILD惊人的48.36倍,在一群重叠综合征,由23.85倍。一起,引发高血清水平密切相关的临床参数。AILD患者血清和更高的引发往往更高水平的总胆红素水平,AST,碱性磷酸酶,ESR和低水平的血清白蛋白,表明肝脏合成功能降低(白蛋白),更高等级的细胞溶解(AST)和胆汁淤积(碱性磷酸酶),以及更高年级的系统性炎症(ESR)。这个协会几乎失去了亚组分析,我们假设主要是由于小样本大小。考虑这一点,似乎引发水平可能的使用建立的诊断AILD(即。作为诊断标记)和测量活动的疾病和严重程度(即。,as a clinical marker), which needs to be confirmed and explored in detail by further studies and supported by calculation of diagnostic utility parameters in future research.

其他报告也显示更高水平的促炎细胞因子相比,控制患者的相似条件。例如,患者原发性胆汁性肝硬化的一项研究揭示了增加il - 1的水平β、il - 6和TNF -α与健康对照组相比,这类患者(12]。另一项研究揭示了可能的修改功能之间的联系T细胞和组织水平的肿瘤坏死因子-α原发性硬化性胆管炎患者(13]。考虑在AIH Th17细胞的中央致病的作用,同样重要的是,Th17闲暇等细胞因子的基因表达IL-17, IL-23, IL-21, il - 1β据报道,il - 6显著增加与健康对照组相比,AIH患者的肝脏(14]。自身免疫性肝炎患儿的细胞因子水平的研究发现了一个肿瘤坏死因子的水平之间的相关性α、il - 6和引发1型AIH患者与疾病活动。上述细胞因子的水平增加活动性疾病,儿童相比,控制和减少患者缓解期(15]。我们的报告,因此,证实细胞因子变化的假说AILD患者促炎细胞因子的水平,如白介素、引发,TNF -α,会增加与健康人相比,虽然引发血清水平和AILDs之间的关系,我们所知,从来没有广泛研究,等明显协会从未公布过。

海拔引发血清水平显示在其他肝脏疾病患者。最近,一项研究肝硬化患者免疫功能已报告增加血清促炎细胞因子的水平,包括引发。在这项研究中,引发与il - 6,高稳定的患者和那些失代偿肝硬化居高不下后发展acute-on-chronic肝功能衰竭(16]。也已经表明,引发水平增加intrahepatically和酒精性肝病患者的血清,可能导致肝脏嗜中性粒细胞也积累和运用系统性行动(17]。在非酒精性脂肪肝患者,interleukin-8表达式也增加(18]。

感兴趣的,重叠综合症患者在我们的研究人群更严重、更迅速进展疾病根据临床和实验室参数,疾病持续时间较短,但同样频率的严重纤维化和ALT水平升高,ESR,碱性磷酸酶,而孤立的AIH患者。这不是一个预期的发现。显示之前,AIH患者明显更可能出现黄疸和AST水平较高而重叠综合征患者(19]。这种差异可能部分解释了近10年的年龄差距之间的团体(不过不是统计学意义)和低比例的重叠综合症患者接受系统的治疗,如糖皮质激素和抑制细胞生长的,包容的时候。

尽管临床参数的差异,il - 6水平的差异控制在某种程度上更为明显的AILD AIH患者和整个团队,而不是重叠综合征患者。然而,在重叠综合症患者的一组中,但不是在其他病人,il - 6水平与免疫相关参数,如ESR和血清水平γ球蛋白。这是符合这两组患者的差异。众所周知,自身免疫反应在重叠综合症患者更加明显,导致更高的自身免疫性抗体生产和显著减少的预期寿命持续时间(19]。il - 6的关键细胞因子调节全身免疫反应(20.),可能扮演一个角色。

5。结论

AILD,患者细胞因子显著不同于在健康受试者,增加血清水平的促炎细胞因子,il - 6等引发,TNF -α。引发似乎最强的有关疾病也与实验室AILD患者异常的严重程度。可能引发潜在的诊断或临床标记,或治疗目标,仍有待探讨。

相互竞争的利益

作者宣称他们没有任何关于利益冲突披露本研究。

确认

执行的工作是根据俄罗斯喀山联邦大学的竞争力增长的政府项目和补贴分配到喀山联邦大学的国家分配的科学活动范围。的一些实验使用跨学科中心集体使用的设备和医药研究和教育中心,喀山(伏尔加地区)联邦大学,喀山,俄罗斯。作者感谢Protopopov米哈伊尔·博士的援助手稿准备。