减肥对血清Mannose-Binding凝集素水平的影响

文摘

背景。mannose-binding的血清凝集素(MBL),这是一个激活补体系统,被认为是广泛的疾病的致病因素,和调制MBL因此被评估的手段。在这项研究中,我们审查的影响减肥MBL的水平,在延续这个如果MBL在人类脂肪组织合成。方法。36个非糖尿病的肥胖受试者接受一个低热量的饮食(VLCD) 800千卡/ 8周。收集血液样本在基线和VLCD之后。此外,我们测量MBL mRNA水平实时rt - pcr对人类脂肪组织相比,肝脏组织。结果。平均体重减少公斤,公斤,。MBL在基线中值是746μ316 - 1190 g / L(差)与892年μ336 - 1511 g / L(差)8周后,。之间没有相关性被发现减肥和MBL的变化(,)。MBL实时rt - pcr显示脂肪组织中没有mRNA的表达,但像预期的一个好表现在肝组织观察。结论。MBL水平不影响减肥和MBL不是人类脂肪组织合成。

1。介绍

Mannose-binding凝集素(MBL)是一种血清蛋白被肝细胞合成。

MBL先天免疫系统发挥了重要的作用,它在与碳水化合物结合的模式微生物凝集素途径的激活补体系统通过MBL-associated丝氨酸蛋白酶1、2和3 (1,2]。这导致招聘的炎症细胞,调理素作用,形成膜的攻击复杂(3),导致微生物的破坏。

依赖于基因型和血清MBL水平,因为常见的MBL编码基因的多态性MBL2,表达的个人间血清MBL范围从几的水平μg / L几千μg / L。在健康受试者大约56%有很高的MBL编码基因型(纯合体野生型),40%的人一个中间MBL编码基因型(一个等位基因的突变),和4%低MBL编码基因型(突变等位基因),后者在MBL[功能缺陷4),最常见的免疫缺陷描述。

一些临床研究显示低MBL水平与增加感染的易感性或贫穷的结果。这种缺乏防御入侵的微生物可能很重要尤其是在某些情况下,例如,在婴儿的免疫系统发育尚未成熟5- - - - - -7和成人的免疫系统8,9),免疫系统正常功能一定程度的冗余。

感染以外的疾病情况下,激活补体系统的可以在这里不良和MBL水平低可能授予一个优势。凯勒等人发现,较低的健康男性MBL水平防止心血管疾病(10]。

通常,MBL不绑定到人体自身的细胞,但可能与改变self-structures反应,例如,细胞暴露于缺血/再灌注损伤(11,12)或凋亡细胞(13]。也在自身免疫性疾病,如风湿性关节炎,MBL可能绑定到改变self-structures [14]。

在15年的后续的前瞻性研究,我们小组记录增加2型糖尿病患者的死亡率高MBL水平与MBL水平较低(15]。此外,患者心血管疾病的历史MBL水平要明显高于未经心血管疾病患者(15]。此外心血管疾病史之间的关系和高MBL水平已被证明在1型糖尿病患者和肾病患者所料患者MBL水平明显高于正常蛋白尿(16]。一个合理的解释高MBL水平和糖尿病血管并发症之间的关系可以MBL绑定glucosylated内皮细胞通过补体的激活和促进轻度炎症,导致加速动脉粥样硬化。

因为MBL的可能致病参与广泛的疾病可能构成潜在的治疗目标。研究人类MBL体外直接抑制(17老鼠体内MBL [12)和下游调节补体激活与anti-C5补充抗体在人类18正在进行)。

MBL水平,正如上面提到的,主要依赖于基因型和虽然是受荷尔蒙的刺激(19),是这样一个可修改的参数,个体内的MBL小随时间的变化(20.,21]。

到目前为止减肥的影响和变化在胰岛素抵抗MBL水平只有被调查和冲突的结果。对于减肥减肥手术引起的肥胖,增加水平(22和不变的水平23已报告。在本研究旨在调查减肥饮食干预造成的影响是否MBL水平,除了调查是否脂肪组织可以产生MBL。

2。研究设计和方法

我们研究了减肥的效果和MBL水平变化在胰岛素抵抗的干预研究包括36健康和非糖尿病的肥胖受试者(18妇女和18人)。受试者接受一个低卡路里饮食(VLCD) ~ 800千卡/ 8周。

人体测量数据得到基线和VLCD 8周后。身体成分的比例(脂肪)和脂肪(脂肪量/重量×100%)被使用多频生物电阻抗估计bioimpedance光谱分析仪(SGB3;独特的有限,澳大利亚布里斯班)所描述的发展(24]。

我们获得了空腹肘前的静脉的血液样本在基线和VLCD 8周后。血清分离和冻结在−80°C到分析的时间。

HOMA-IR计算产品的空腹血浆胰岛素水平(microU /毫升)和空腹血糖水平(更易/ L),除以22.5。

此外,调查如果MBL合成脂肪组织实时rt - pcr MBL mRNA表达了对人类脂肪组织从脂肪活检获得从参与者的一个子集,而商业可用人工肝RNA。

这项研究是根据赫尔辛基宣言》进行,并经当地伦理委员会批准。研究参与者进入研究之前给书面知情同意。

3所示。血液样本化验

血清葡萄糖测定的标准方法在临床生化,奥尔胡斯大学医院。

血清胰岛素被AutoDELFIA测量胰岛素工具包b080 - 101(珀金埃尔默,图尔库,芬兰)。

免疫测定血清MBL水平测量,如前所述[25),使用一个内部的时间分辨immunoflurometric化验检测较低水平的10μg / L。总之,微量滴定井被涂上一层单克隆抗体anti-MBL其次是孵化与样品稀释200倍。洗后,单克隆抗体anti-MBL贴上铕补充道,孵化和洗涤后,绑定的数量,标记抗体被时间分辨荧光测定术评估。控制血清样本覆盖不同的MBL水平纳入所有化验。

4所示。MBL实时rt - pcr

测定MBL mRNA表达,RNA从脂肪组织分离获得的一个子集参与者使用试剂盒试剂如前所述[26]。孤立肝总RNA从Ambion(生命科技有限公司3喷泉,Inchinnan商业公园,佩斯利不仅9射频,英国)。

逆转录是使用随机执行六聚物引物所描述的制造商(GeneAmp RNA PCR从珀金埃尔默鲸鱼座工具包,诺沃克,CT)。然后,PCR-mastermix包含特定的引物和Taq DNA聚合酶(美国Quiagen Inc . HotStar Taq)是补充道。

以下引物设计使用引物分析软件6.64版本低聚糖:MBL2: GCAAACAGAAATGGCACGTAT AGAGGCCTGGAACTTGACA,产品长度139个基点β肌动蛋白:ACGGGGTCACCCACACTGTGC CTAGAAGCATTTGCGGTGGACGATG,产品长度658个基点。实时定量的目标基因β肌动蛋白mRNA进行SYBR-Green实时PCR试验使用Bio-Rad ICycler。目标基因和β肌动蛋白mRNA在单独的管道而被放大。实时荧光测定的增加在扩展步骤。阈值周期计算(Ct)和相对基因表达计算基本上按照用户2号公告,1997年从珀金埃尔默(珀金埃尔默鲸鱼座,诺沃克,Ct)。简而言之,目标基因(X0) - - - -β肌动蛋白(R0)比在每个样本在放大计算X0 / R0 =kx1 / ((2 * * deltaCt));三角洲的区别是Ct Ct-target Ct-reference,和k是一个常数,设置为1。所有的样品都在重复放大。类似的设置用于消极的控制,除了逆转录酶被省略,未发现PCR产品在这些条件下。

5。统计分析

值作为意味着±SE,除了MBL,非正态的分布,并给出值中位数和四分位范围(差)。

成对或未配对t以及用于正态分布变量。对于非正态的分布的变量,比较各组进行使用或Mann-Whitney魏克森讯号等级测试U以及适当的。皮尔逊相关性用于正态分布的变量,而斯皮尔曼相关的双尾概率值被用来估计的强度非正态的分布变量之间的联系。

统计学意义是假定。IBM SPSS版本20是用于所有计算。

6。结果

参与者的平均年龄是43年(从24到62年)。在基线特征和8周后VLCD展示在表1。他们平均体重(范围从76.1到142.7公斤)和平均身体质量指数(BMI)(范围从29.5到40.8公斤/米²)。

VLCD 8周后平均体重降低了12.7% (公斤和公斤,),图1(一)。平均体重指数降低了12.6% (公斤/米²与公斤/米²,)和胰岛素抵抗(HOMA-IR)降低了50.2% (与,)。

腰和脂肪量(%)8周后也显著降低。

平均血清MBL水平没有显著变化的8周期间VLCD (746 (316 - 1190)μg / L和892 (336 - 1511)μg / L,),图1 (b)。

平均血清MBL男人和女人之间没有显著差异水平在基线和8周后和MBL的变化水平仍微不足道当看男人和女人分开(数据没有显示)。

MBL水平没有与年龄(数据未显示)。

正如预期的那样,改变HOMA-IR相关重量变化(,)。

血清MBL在基线和其他基线参数之间的相关性如表所示2。MBL在基线不相关基线体重、BMI、HOMA IR。血清MBL的变化之间的相关性和其他参数变化后8周如表所示2。MBL的变化之间没有相关性被发现和减肥,体重指数的变化,在HOMA-IR或改变。

MBL实时rt - pcr显示没有脂肪组织mRNA的表达,但如预期良好的肝组织中表达,人物2。

7所示。讨论

我们的研究结果表明,血清MBL水平似乎并没有与体重和胰岛素抵抗有关。正如所料,减肥和降低胰岛素抵抗相关。MBL水平没有影响减肥或胰岛素抵抗的变化。

减肥的效果在MBL水平已经阐明,和迄今为止相互矛盾的报道。10严重肥胖的一项小型研究,非糖尿病的男性和女性减肥后发现MBL水平增加了2年以上(胆胰分流后)。此外,这项研究得出结论,MBL的变化水平与胰岛素敏感性的增加呈正相关(22]。相比之下,同一组的另一项研究发现减肥后MBL水平无显著变化(也在胆胰分流)在10正常glucose-tolerant肥胖女性(23)、数据支持我们的研究结果。

我们发现没有证据表明MBL在人类脂肪组织合成。这进一步支持我们的发现MBL不是与减肥有关。

MBL的矛盾的影响在不同条件下支持假说的MBL的二元性疾病和干预,改变MBL水平,目前正在探索。到目前为止,大部分已经关注MBL抗体或下游补充因素,而生活方式干预的可能效果仍然稀疏了。

8。结论

我们建议MBL水平可能不会大幅修改的由生活方式干预,比如减肥,肥胖和胰岛素抵抗与MBL水平相关。MBL不是人类脂肪组织合成。在一起,这表明减少MBL水平既不是结果也不是一个影响导致的肥胖和胰岛素抵抗。而MBL的个别间差异主要取决于MBL基因型和构成一个先前存在的条件,这可能是一个优势还是劣势在不同情况下的健康和疾病。

引用

1. 泰尔,t . Vorup-Jensen c . m .干草et al .,”第二个与mannan-binding凝集素相关的丝氨酸蛋白酶,激活补体,”自然,卷386,不。6624年,第510 - 506页,1997年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. m·r·达尔泰尔,m .松下et al .,“MASP-3及其与不同的复合物mannan-binding凝集素补体激活途径,”免疫力,15卷,不。1,第135 - 127页,2001。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. m . Gadjeva k高桥,s·泰尔”Mannan-binding lectin-a可溶性模式识别分子,”分子免疫学第41卷。。2 - 3、113 - 121年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. p .雀鳝,f·拉森,j . Seyfarth r . Fujita h·o·马德森,“Mannose-binding凝集素及其基因变异,”基因和免疫,7卷,不。2、85 - 94年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. j . a位于m . Sumiya m·莱文和m . w . Turner”协会的甘露糖结合蛋白基因的突变与儿童感染在医院连续系列中,“英国医学杂志,卷314,不。7089年,第1232 - 1229页,1997年。视图:谷歌学术搜索
6. a .科赫m . Melbye p Sørensen et al .,“急性呼吸道感染和mannose-binding凝集素不足在儿童早期,“美国医学协会杂志》上,卷285,不。10日,1316 - 1321年,2001页。视图:谷歌学术搜索
7. d·p·艾森m·m·迪恩·m·a·Boermeester et al .,“低血清mannose-binding凝集素水平会增加死亡的风险由于肺炎球菌感染,”临床感染疾病卷,47号4、510 - 516年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. l . h . Bouwman a .鲁斯ot Terpstra et al .,“甘露糖结合凝集素基因多态性赋予一个主要肝移植术后严重感染的风险,”胃肠病学,卷129,不。2、408 - 414年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. n . a . Peterslund c·科赫j . c . Jensenius和s·希尔,”之间的联系缺乏mannose-binding凝集素和严重感染化疗后,“《柳叶刀》,卷358,不。9282年,第638 - 637页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. t·t·凯勒,美国范鲁汶,m . c . Meuwese et al .,“血清mannose-binding凝集素水平和未来的冠状动脉疾病的风险看似健康的男性和女性,”动脉硬化、血栓和血管生物学,26卷,不。10日,2345 - 2350年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. m . m . Møller-Kristensen w . Wang Ruseva et al .,“Mannan-binding凝集素识别结构缺血性reperfused老鼠肾脏和参与组织损伤,”斯堪的纳维亚免疫学杂志,卷61,不。5,426 - 434年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. j·e·乔丹,m . c . Montalto g·l·斯塔尔,“抑制mannose-binding凝集素可以减少缺血后心肌再灌注损伤,”循环,卷104,不。12日,第1418 - 1413页,2001年。视图:谷歌学术搜索
13. a . j . Nauta n . Raashou-Jensen a .鲁斯et al .,“Mannose-binding凝集素参与晚期凋亡和坏死细胞,”欧洲免疫学杂志,33卷,不。10日,2853 - 2863年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. m·w·特纳和r . m . j . Hamvas”Mannose-binding凝集素:结构、功能、遗传和疾病的关联,”评论在免疫遗传学,卷2,不。3、305 - 322年,2000页。视图:谷歌学术搜索
15. l·t·k·汉森·m·a·加尔塔尔努夫et al .,“Mannose-binding凝集素在2型糖尿病和死亡率,”内科医学档案,卷166,不。18日,第2013 - 2007页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. t·k·汉森l·塔尔努夫s泰尔et al .,“mannose-binding凝集素与1型糖尿病血管并发症,”糖尿病,53卷,不。6,1570 - 1576年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. c . d .羽衣甘蓝,a . Vakeva m·a·莫西里et al .,“补体激活后氧化应激:补体的凝集素的作用,“美国病理学杂志》,卷156,不。5,1549 - 1556年,2000页。视图:谷歌学术搜索
18. c·b·格兰杰k . w . Mahaffey w·d·韦弗et al .,“Pexelizumab anti-C5补充抗体,作为辅助疗法的主要经皮冠状动脉介入急性心肌梗死:心肌梗死治疗的补充抑制血管成形术(逗号)试验,”循环,卷108,不。10日,1184 - 1190年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. t·k·汉森泰尔,r·达尔et al .,“GH强烈影响mannan-binding凝集素的血清浓度:新证据IGF-I GH,独立的免疫调节效应”临床内分泌和代谢杂志》上,卷86,不。11日,第5388 - 5383页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. t·k·汉森”Mannose-binding凝集素(MBL)在糖尿病血管并发症,”激素和代谢研究,37卷,补充1,S95-S98, 2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. h .欧美j·克里斯坦森,美国希尔et al .,“mannan-binding凝集素的生物循环水平的变化(MBL)和MBL-associated丝氨酸protease-2和年龄的影响,性别和身体锻炼,”斯堪的纳维亚免疫学杂志,卷66,不。4、458 - 464年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. j . m . Fernandez-Real m . Straczkowski j . Vendrell et al .,“保护从胰岛素抵抗炎症性疾病:mannan-binding凝集素的作用,“Diabetologia卷,49号10日,2402 - 2411年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. m .曼科j . m . Fernandez-Real f . Equitani et al .,“大规模的减肥对炎症的影响adipocytokines和病态肥胖的女性,先天免疫系统”临床内分泌和代谢杂志》上,卷92,不。2、483 - 490年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. b . l .发展“预测成人身体水和脂肪的丹麦人电阻抗的测量。验证研究,“国际肥胖期刊,14卷,不。9日,第802 - 789页,1990年。视图:谷歌学术搜索
25. 泰尔,m . Møller-Kristensen l . Jensen和j·c . Jensenius“化验的机能活动Manna-binding凝集素途径补体的激活,“免疫生物学,卷205,不。4 - 5,446 - 454年,2002页。视图:谷歌学术搜索
26. k . s . b . Pedersen Kristensen, p·a·赫尔曼·j·a . Katzenellenbogen和b . Richelsen雌激素控制通过调控脂类分解α2 a-adrenergic受体直接通过雌激素受体在人类脂肪组织α。对女性的脂肪分布的影响。”临床内分泌和代谢杂志》上,卷89,不。4、1869 - 1878年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2012 p h . Høyem等。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。