κ-阿片受体激动剂通过激活Ca改善术后神经认知障碍²⁺/ CaMKII /分子通路

摘要

客观的．体外循环(CPB)是重要的心脏手术，也是高危手术，术后易发生神经认知障碍。然而，治疗体外循环后遗症的有效药物却很少。因此，我们观察kappa阿片受体(KOR)激动剂对体外循环(CPB)大鼠认知功能障碍的影响，并探讨其作用机制²⁺/钙调素依赖性蛋白激酶（CaMKII）/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）途径。方法．40只sd大鼠随机分为假手术组(假手术组，假手术组，n = 10） ，CPB模型组（CPB组，n = 10), CPB + KOR agonist U50488H group (UH group,n= 10)， CPB +特异性CaMKII拮抗剂+ U50488H组(CKU组，n= 10)。Morris水迷宫法观察大鼠认知功能变化，苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, H&E)染色观察海马组织病理学变化，TUNEL染色检测神经元细胞凋亡率。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑损伤标志物、炎症因子和氧化应激因子的变化。海马的变化²⁺采用免疫荧光染色法检测Ca浓度和氧化应激指数(ROS)水平，western blotting法检测Ca的表达变化²⁺/CaMKII/CREB途径。结果. KOR激动剂可缩短潜伏期，增加游泳距离和在靶象限的停留时间，改善术后神经认知障碍（PND）。同时，KOR激动剂减轻CPB诱导的海马和氧化应激损伤，降低NSE和S-100β降低细胞凋亡率，抑制炎症反应，减轻脑损伤。U50488H能降低Ca²⁺内流和谷氨酸（Glu）水平，抑制N-甲基-d -天冬氨酸受体(NMDAR)表达，上调CaMKII表达，促进CREB磷酸化，增加脑源性神经营养因子(BDNF)水平。然而，在应用camkii特异性拮抗剂后，KORs对PND的保护作用被抑制。结论. KOR激动剂激活Ca²⁺/CaMKII/CREB通路，改善CPB大鼠脑损伤，缓解PND。

1.介绍

体外循环（CPB）主要用于缺血性心脏病、瓣膜病、先天性心脏病和主动脉夹层的心脏手术[1]。然而，它在CPB引起了更多关注之后，它在中枢神经系统中的应用。不幸的是，术后神经认知疾病（PND）已成为CPB下心脏手术后患者残疾和死亡的主要原因之一[2]根据报告，CPB后第一周内短期认知障碍的发生率高达40–60%，25%的患者出现长期神经认知障碍，严重影响他们的日常行为能力[3.,4]。因此，寻找有效的防治措施，从发病机理上解决这些问题，对于提高PND的发病率，降低死亡率具有重要的临床意义。

神经炎症，特别是海马组织炎症是PND发病的主要原因[5]。老年大鼠和小鼠均表现出显著的记忆和学习缺陷，并伴有小胶质细胞的激活和肿瘤坏死因子- (TNF-)的增加α)白细胞介素-1β在海马中的表达，导致神经细胞凋亡和学习记忆能力降低[6,7]。此外²⁺/钙调蛋白依赖性蛋白激酶（Camkii）/ Camp响应性元素结合蛋白（CREB）途径在学习和记忆中起着重要作用[8]。具体来说，当大脑的认知功能出现异常时，海马神经元中的谷氨酸(Glu)会上升，N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）过度激活，Ca²⁺细胞膜通透性增加，体积Ca²⁺内流导致细胞钙超载。此外,钙²⁺通过调节与学习、记忆和神经保护相关的基因的转录和翻译，激活CREB，磷酸化(p-CREB)调节学习和记忆能力，因此参与突触可塑性、长期增强和大脑保护等过程[9]因此，减少海马中神经炎症因子的释放并抑制Ca²⁺对改善体外循环心脏手术引起的脑损伤及预防和治疗PND具有重要的临床意义。

Kappa阿片类受体(KORs)在前额叶皮层等脑区大量表达，在动物模型和局部脑缺血中可减轻脑组织损伤，促进功能恢复[10]。研究表明，KOR激动剂u50488可改善由胆碱能功能障碍引起的小鼠认知功能下降，特别是东莨菪碱诱导的认知功能损害[11]。这一功能与胆碱能系统相关，可被一种选择性的KOR拮抗剂-降bni逆转。KORs有望成为缓解体外循环心脏手术引起的PND的治疗方法之一。本研究通过建立CPB大鼠模型并给予KOR激动剂治疗，探讨KOR激动剂对认知功能和海马神经元损伤的影响，并探讨Ca的作用机制²⁺/CaMKII/CREB途径。

2.材料和方法

2.1.实验动物和分组

Sprague Dawley大鼠用于CPB Anim Model准备。实验室动物部提供了40个SPF级雄性Sprague Dawley大鼠[实验室动物，使用许可证No.Syxk（军事）20120007和实验室动物生产许可证号SCXK（军事）20120006]。北部剧院综合医院。所有大鼠随机分为4组：假手术组（假组，n = 10） ，CPB模型组（CPB组，n = 10), CPB + KOR agonist U50488H group (UH group,n= 10)， CPB +特异性CaMKII拮抗剂+ U50488H组(CKU组，n= 10)。本研究经北方战区总医院实验动物伦理委员会审查批准。

2．2．CPB模型的建立

大鼠腹腔注射30%葡萄糖进行麻醉 mg/kg戊巴比妥钠，仰卧位固定在手术台上，进行气管插管，连接到啮齿动物呼吸机和麻醉机。麻醉由2%异氟醚维持。a 24 将G套管针置入右股静脉，打开静脉通路，在0.5℃下注入6%羟乙基淀粉 mL/h。之后，一个22 在左股动脉内插入G型套管针，实时监测动脉压，并用22 使用G套管针进行尾动脉穿刺，并进行18分钟的检查 在头端侧有开口的G型套管针用于右颈静脉插管完成CPB。在连接和固定电路后，静脉血被排入血库，然后在蠕动泵中进行旁路并在氧合器中进行氧合后通过尾动脉重新注入体内根据血气分析调整药物，并维持以下参数：MAP>60 毫米汞柱，pH值在正常范围内，PaCO₂35-45岁 毫米汞柱，并在−3–3 mmol/L。当红细胞压积高于0.25时，逐渐停止旁路，恢复机械通气。随后，移除回路，继续机械通气，缓慢注入血库中的残余血液以维持稳定循环。如果大鼠仍然活着，6 UH组大鼠静脉注射U50488H（1.5μg/kg），UH组大鼠静脉注射U50488H（1.5μg/kg） mg/kg）30 体外循环前min，对照组5例 μ特异性CaMKII拮抗剂KN93 (10μM） 注射到侧脑室60 CPB前min，注射U50488H 30分钟 分钟后。

2．3.莫里斯水迷宫

Morris水迷宫对大鼠认知功能的影响。术后3 d，各组进行水迷宫试验，观察行为和认知功能的变化。实验用大鼠从任意象限面向池壁放入水中，自由游泳90秒，寻找隐藏的平台。在池中找到隐藏平台的时间被记录为逃逸延迟。大鼠连续测试5天，前4天作为训练期，第5天的测试结果作为空间学习记忆表现。隐藏平台测试结束24 h后，平台退出。然后，将大鼠放入水中，从相同的入水点，沿着游泳路径游泳60秒。记录在原平台象限停留时间和穿越原平台的次数。最后，利用Morris水迷宫视频分析系统对数据进行处理。

2.4.样本收集

水迷宫试验结束后，各组大鼠经异氟醚麻醉后腹主动脉放血处死。将血液离心，收集血清，并冷冻保存以备以后使用。脑组织分离，部分用4%多聚甲醛固定，保存在−80°C冰箱中。

2．5．Hematoxylin-Eosin(他)染色

通过苏木精-伊红(H&E)染色观察海马组织病理改变。将多聚甲醛固定脑组织分别置于70%、80%、90%、95%、100%乙醇中，二甲苯透明，石蜡浸泡，制备石蜡包埋块，切片至4μ使用切片机制作m厚切片。切片脱蜡，苏木精染色5分钟 min，用磷酸盐缓冲盐水（PBS）冲洗，并用1%盐酸乙醇进行鉴别。接下来，切片用曙红溶液染色30分钟 s、 在梯度酒精中脱水，并在中性香脂中清除和安装。最后，在光学显微镜下观察切片并拍照（CX33，日本奥林巴斯公司）。

2.6. TUNEL染色

TUNEL法检测神经元细胞凋亡率。采用TUNEL检测试剂盒(Roche Diagnostics, Mannheim, Germany)检测海马神经元凋亡，按照说明书进行检测。将石蜡包埋的海马组织切成5μm厚截面，用50 μL TUNEL反应溶液，并在37℃下培养60分钟 在黑暗中。这一步之后是添加50 μL中的链霉抗生物素蛋白 - 辣根过氧化物酶（HRP）工作溶液在防水盒中温育30分钟。然后，使用4'，6-二氨基-2-苯基吲哚（DAPI）染色溶液对核进行荧光染色，并且将切片脱水，安装在荧光安装介质中，并在荧光显微镜下拍摄。

2.7。酶联免疫吸附试验(ELISA)

采用ELISA法检测脑损伤标志物、炎症因子和氧化应激因子。S-100蛋白表达水平β(SEA567Ra, USCN)，神经元特异性烯醇化酶(NSE) (SEA537Ra, USCN)和Glu (CES122Ge, USCN);炎症因子IL-1的水平β（CSB-E08055r，CUSABIO），IL-6（SEA079Ra，USCN）和TNF-α（SEA133Si，USCN）和氧化应激指数超氧化物歧化酶（SOD）（SES134Hu，USCN）、丙二醛（MDA）（CEA597Ge，USCN）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH Px）（CEA294Ge，USCN）使用ELISA试剂盒并按照制造商的说明进行测量。具体而言，100 μ标准物质的L和100μ将L稀释样品依次加入相应反应板的孔中，轻轻摇动30分钟 s那么，100 μ在每个孔中加入1份血清样品，并孵育2小时 h在37°C下进行。接下来，用PBST和100清洗板 μ在每个孔中加入L个HRP标记的二级抗体，并孵育30分钟 在37°C条件下至少进行一次。该步骤之后是洗板，添加50 μ开发商A的L和50μL显影剂B，在黑暗中显色15分钟。后增加50μL停止缓冲器，使用微孔板读卡器（EXL800，USA）在450nm处读取光密度（OD）值。最后，用OD值作为纵坐标和标准物质浓度作为横坐标的标准曲线绘制标准曲线，以获得曲线方程和r价值。根据曲线方程计算相应样品的浓度。

2.8.免疫荧光（IF）

Ca²⁺采用免疫荧光染色法测定浓度和氧化应激指数（ROS）水平。石蜡包埋的海马组织切片脱蜡，直到再水化，浸泡在3%过氧化氢溶液中，用PBS清洗，并用0.1%硫酸钠处理 M柠檬酸钠用于抗原回收。随后，切片在山羊血清中孵育30分钟 37°C时的最低温度，约²⁺添加荧光探针、活性氧（ROS）探针和脑源性神经营养因子（BDNF）抗体（ab205067，美国Abcam），并在4°C下再次孵育过夜。用PBS洗涤后，切片用荧光标记的二级抗体孵育30分钟 在37°C条件下至少冲洗一次，然后再次在PBS中冲洗。细胞核用DAPI染色，并在室温下孵育10分钟 min，然后用PBS洗涤，安装在抗褪色荧光安装介质中，并在荧光显微镜下摄影。

2.9.蛋白质印迹法

Western blotting检测Ca的表达变化²⁺/CaMKII/CREB途径。冷冻保存的海马组织中加入1 mL含有1%蛋白酶的蛋白质裂解缓冲液，均质，置于冰上30分钟 最小，并在12000时离心 每分钟15转 收集上清液，并通过双金鸡纳酸（BCA）法测定其蛋白质浓度。接下来，对蛋白质进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），转移到膜上并在脱脂乳中密封2小时 h、 然后与核因子-κB（NF-κB） p65抗体（ab16502，Abcam，美国）、B细胞淋巴瘤-2（Bc1-2）（ab59348，Abcam，美国）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）（ab32503，Abcam，美国）、NMDAR2B抗体（ab65783，Abcam，美国）、CaMKII（ab22609，Abcam，美国）、CREB（ab32515，Abcam，美国）、p-CREB（ab32096，Abcam，美国）、BDNF（ab108319，Abcam，美国）和GAPDH抗体（ab181602，Abcam，美国）在37°C温度下持续1小时 h，并在4℃下过夜。用TBST冲洗膜3次，持续10分钟 然后与HRP标记的山羊抗兔IgG抗体孵育1分钟 在37°C条件下，在膜清洗后，使用ECL试剂盒和凝胶成像系统显示蛋白质，并通过图像工具软件分析吸光度。

2.10.统计分析

使用SPSS 20.0软件进行分析，实验数据以平均值表示 ± 标准差(χ±年代）.用于比较组之间的数据的单向方差分析。< 0.05为差异有统计学意义。

3.后果

3.1.KOR激动剂改善CPB大鼠的脑损伤并减轻PND

采用水迷宫试验测定大鼠的认知功能。在隐平台训练中，CPB组发现平台的潜伏期延长，在目标象限的游泳距离和停留时间明显减少(与Sham组相比，< 0.05)。然而，KOR激动剂u50488可缩短潜伏期，增加游泳距离，延长在靶象限停留时间(与CPB组相比， < 0.05）（数字1(一))通过H&E染色观察海马组织病理学变化，结果表明CPB组海马损伤严重，细胞排列紊乱，细胞间隙逐渐变宽。然而，UH组海马损伤减轻（图1）1 (b)）.为了阐明大鼠脑损伤的状态，通过ELISA检测脑损伤标记的浓度。观察到NSE和S-100的浓度βCPB组（与假手术组相比，< 0.05))，而UH组明显低于CPB组( < 0.05). 这些结果表明，KOR激动剂可以改善CPB大鼠的脑损伤，减轻PND。

3．2.KOR激动剂抑制CPB大鼠炎症和氧化应激反应

炎症反应和脑组织氧化应激损伤是cpb诱发PND的主要因素;因此，采用ELISA法检测各组大鼠血清中炎性和氧化应激因子的变化。结果显示血清中IL-1浓度升高βIL-6和TNF-α（vs．假组， < 0.05）（数字2（a）)在UH组，炎症因子的血清浓度下降，NF的表达降低-κB在海马组织中受到抑制(图2（b）)提示KOR激动剂能抑制CPB诱导的炎症反应。

活化的炎症反应可以促进氧化应激损伤，并且在神经变性障碍中证明了ROS增加。在这项研究中，首先进行ELISA以测量SOD，MDA和GSH-PX血清含量，结果表明，KOR激动剂可以增强SOD和GSH-PX的释放，并抑制MDA（VS.CCB组， < 0.05）（数字2（c））.此外，利用IF检测海马中ROS的表达，发现CPB组ROS表达升高，UH组ROS表达降低(图)2（d）)，提示KOR激动剂可减轻CPB大鼠氧化应激损伤。

3.3. KOR激动剂抑制CPB大鼠海马神经元凋亡

cpb诱导的PND引起大鼠脑损伤，促凋亡因子Bax表达增加，抗凋亡因子Bcl-2表达降低(图)3.（a） ）。根据海马神经元TUNEL染色结果（图3.（b） UH组神经细胞凋亡率明显降低（与对照组相比，UH组神经细胞凋亡率明显降低）．体外循环组, < 0.05）（数字3.（c） ），提示KOR激动剂可抑制CPB大鼠神经元凋亡。

3.4.KOR激动剂激活Ca²⁺/CaMKII/CREB通路在CPB大鼠中的作用

在炎症和氧化应激刺激下，CPB可提高海马神经元的Glu水平(图)4(一))，过度激活NMDAR（图4 (b)),增加钙²⁺细胞膜渗透性，刺激大规模CA.²⁺导致细胞内钙超载(图4 (c)）.此外，钙在神经生长和突触重塑中起着至关重要的作用。它与Camkii结合以削弱Creb磷酸化（图4 (d))降低BDNF水平，影响大脑学习记忆能力。然而，KOR激动剂能够降低Ca²⁺在CPB大鼠中，抑制NMDAR表达，促进CREB磷酸化，上调BDNF，从而减轻CPB大鼠的脑损伤，缓解PND。

3．5．KOR激动剂通过Ca改善PND²⁺/ CaMKII /分子通路

为进一步研究Ca的调控机制²⁺/CaMKII/CREB通路，CPB造模前给予CaMKII拮抗剂KN93，再注射KOR激动剂观察对CPB大鼠PND的影响。观察到CKU组S-100水平升高β、NSE和Glu（图5(一个))细胞凋亡率增加（图5（b）)， BDNF表达下调(图5（c）)此外，发现平台的潜伏期延长，但目标象限内的游泳距离和停留时间明显缩短（与．呃集团,， < 0.05）（数字5（d））.

4.讨论

心脏手术后，PND是一种常见的并发症，可导致短期的负面影响，如延长ICU时间和住院时间，增加围手术期并发症的发生率和死亡率，降低日常生活活动[12]。从长远来看，它降低了生活质量，甚至增加了长期死亡率。在CPB期间，低灌注或平均动脉压，不稳定的血液动力学，脑血栓形成，全身炎症反应，贫血，高血糖和CPB的CBP创伤导致术后神经认知下降[13]。在本研究中，CPB大鼠模型建立并用Kor激动剂进行治疗，并研究了对认知功能，炎症反应，氧化胁迫损伤和细胞凋亡的影响。结果表明，Kor激动剂可以缓解脑损伤并缓解CPB大鼠的PND。行动机制与CA的激活有关²⁺/ CaMKII /分子信号通路。

阿片受体作为G蛋白偶联受体的超家族，主要分为三个亚型：µ-阿片受体、KOR和δ阿片受体。虽然µ-阿片受体一直是阿片类镇痛药的主要靶点，KOR是人脑中含量最丰富的阿片受体，在包括疼痛调节、运动功能、应激反应和情绪控制在内的多个生理系统中起着重要的调节作用[14]一项研究表明，KOR能显著减轻海马损伤、认知障碍以及缺血引起的学习记忆障碍[15]。U50488H是高度选择性κ站点，但与µ-及δ阿片受体。减轻海马皮层1区(CA1)损伤，改善学习记忆障碍;因此，U50488H被广泛应用于KORs的生理效应研究。

衰老、老年痴呆和冠状动脉移植患者的C反应蛋白和IL-6水平升高与认知障碍密切相关。Cibelli等人通过动物模型研究报告，全身和海马炎症与TNF密切相关-α, il - 1β和NF -κB通路[16,17]这些研究表明，U50488H可降低血清TNF水平-α, il - 1β和IL-6，抑制NF-κ通过KORs对海马神经元的特异性激活，降低CPB大鼠海马神经元的凋亡率。这些结果证明u50488可改善CPB大鼠的PND。

CaMKII是调节突触可塑性和海马依赖性学习和记忆的重要角色，并涉及调节神经递质的合成、释放和信号转导[18,19].人类认知学习障碍、血管疾病和各种中枢神经系统疾病都伴随着CaMKII水平的变化。CaMKII缺乏的小鼠可能表现出海马依赖性空间学习和记忆障碍。根据本研究结果，CPB-ra海马神经元的Glu水平升高激活的NMDAR导致海马神经元钙超载、CaMKII表达降低和CREB磷酸化抑制。此外，p-CREB通过调节参与突触的学习、记忆和神经保护相关基因的转录和翻译来调节学习和记忆能力tic可塑性：所有研究结果都表明CPB后PND的发生率与记忆蛋白表达的下降有关。

此前的研究表明，KORs具有负调控作用β-通过PKC/cAMP途径的肾上腺素能受体，即肌醇1,4,5-三磷酸（IP3）/Ca²⁺途径，受体本身，从而实现心肌保护[10,20.]。IP3 / Ca²⁺途径进一步激活钙调素及其下游调控蛋白CaMKII和CREB，调控突触可塑性，形成神经元，维持长时记忆。在本研究中，KORs可增加CPB大鼠CaMKII表达，激活CREB磷酸化，上调BDNF表达。已证实CREB和BDNF可改善认知障碍，促进神经细胞生长分化，参与调节突触的长期可塑性[21.]。这意味着KOR激动剂可以激活Ca²⁺/CaMKII/CREB通路，促进CPB大鼠神经细胞生长和分化。此外，我们还研究了CaMKII拮抗剂KN93联合U50488对CPB的影响，以探讨Ca的调控机制²⁺/CaMKII/CREB途径。结果显示，KOR对PND的保护作用受到抑制，并且在应用CaMKII特异性拮抗剂后，CPB大鼠的PND加重，表明KOR激动剂可通过Ca减轻CPB大鼠的PND²⁺/CaMKII/CREB途径。然而，Kor激动剂参与通过多种途径调节CPB大鼠的脑保护;因此，通过在围手术期中改善神经认知功能并通过与途径的协调来保护大脑，需要通过深入研究进一步研究。

数据可用性

本研究中使用和分析的数据集可根据需要从通讯作者处获得。

的利益冲突

作者声明他们没有利益冲突。

致谢

本研究由辽宁省重点研发计划项目(批准号:200810901)资助。2020 jh2/10300051)。

参考文献

1. y.Hirata，“儿科心脏手术的心肺旁路”，普通胸心血管外科第66期2, pp. 65-70, 2018。视图:出版商网站|谷歌学者
2. L. Evered，B. Silbert，D.S.Nepopman等，“与麻醉和外科 - 20181相关的认知变化的术语建议”，“阿尔茨海默病杂志第66期2018年，第1 - 10页。视图:出版商网站|谷歌学者
3. N. Patel, J. S. Minhas, E. M. L. Chung，“心脏手术后术中栓塞与认知能力下降”，心胸和血管麻醉研讨会，第20卷，第3期，第225-231页，2016年。视图:出版商网站|谷歌学者
4. R.Hood、A.Budd、F.A.Sorond和C.W.Hogue，“围手术期神经并发症，”麻醉，卷。73，没有。4，第67-75,2018。视图:出版商网站|谷歌学者
5. “花青素通过抑制MLK3激活降低围手术期神经认知障碍小鼠模型的神经炎症反应，”大脑研究，第1726卷，第146504条，2020年。视图:出版商网站|谷歌学者
6. J.J.Alam，“p38 MAPK的选择性脑靶向拮抗作用α减少海马IL-1β提高老年大鼠的morris水迷宫性能阿尔茨海默病杂志，第48卷，第48期1，页229 - 227,2015。视图:出版商网站|谷歌学者
7. J. B. Buchanan, N. L. Sparkman, J. Chen，和R. W. Johnson，“轻度重复应激的认知和神经炎症后果在老年小鼠中加剧，”心理神经内分泌学，卷。33，不。6，pp。755-765,2008。视图:出版商网站|谷歌学者
8. 高H-L.徐H.Xin N.Xin W.Zheng Z-H.Chi和Wang Z-Y.“CaMKII/CREB信号的中断与缺锌诱导的学习和记忆损伤相关。”神经毒性的研究第19卷第2期4, pp. 584-591, 2011。视图:出版商网站|谷歌学者
9. 木村武本，铃木，S-i。Horigane等人，“钙调蛋白激酶：健康和疾病的基本调节因子，”神经化学杂志，第141卷，第6期，第808-818页，2017年。视图:出版商网站|谷歌学者
10. C. Chen，C. Xi，X. Liang等人，“角色κ阿片受体与脑缺血危重病护理医学，卷。44，不。12，PP。E1219-E1225,2016。视图:出版商网站|谷歌学者
11. K.Takahashi，O.Nakagawasai，M.Sugawara等人，“在嗅球切除小鼠中施用卡帕阿片受体激动剂通过胆碱能神经元激活恢复认知损伤，”生物和药物公报号，第41卷。6，第957-960页，2018。视图:出版商网站|谷歌学者
12. F. Yürek, M. Olbert, U. Müller-Werdan等，“围手术期神经认知障碍-术后预防策略”，安塞舒尔强化诺法尔梅德施梅尔兹特，第54卷，第11-12号，第669-683页，2019年。视图:出版商网站|谷歌学者
13. C. L. Tamargo, M. Botros，和R. V. Saveanu，“神经认知衰退与心肺机之间的关系”，心脏外科杂志第35期5, pp. 1057-1061, 2020。视图:出版商网站|谷歌学者
14. M.S.Placzek，F.A.Schroeder，T.Che等人，“通过PET成像显示的卡帕阿片类激动剂结合差异，”ACS化学神经科学，第10卷，第5期。1, pp. 384-395, 2019。视图:出版商网站|谷歌学者
15. C.Charron、C.Messier和H.Plamondon，“在全脑缺血大鼠模型中给予卡帕和delta1阿片类激动剂所产生的神经保护和功能恢复，”生理学和行为，第93卷，第3期，第502-511页，2008年。视图:出版商网站|谷歌学者
16. M. J. Simone和Z. S. Tan，“炎症在老年人谵妄和痴呆发病机制中的作用:综述，”CNS神经科学和治疗方法，第17卷，第5期，第506-513页，2011年。视图:出版商网站|谷歌学者
17. E. Nemeth, K. Vig, K. Racz等人，“接受心脏泵内手术的老年患者术后炎症反应对认知能力下降的影响:一项对照的前瞻性观察研究，”BMC麻醉学，第17卷，第1号，p。113, 2017.视图:出版商网站|谷歌学者
18. M.-S.Sadat Shirazi、H.Ahmadian Moghadam、S.Khalifeh、S.Nouri Zadeh Tehrani、M.Farahmandfar和M.-R.Zarrindast，“钙钙调素依赖性蛋白激酶II在吗啡致敏大鼠空间记忆调节中的作用，”行为脑研究， vol. 359, pp. 298-303, 2019。视图:出版商网站|谷歌学者
19. X.Jiang，G.-S.Chai，Z.-H.Wang等人，“CaMKII依赖性树突分枝和脊柱生成促进散发性阿尔茨海默病大鼠模型中空间训练诱导的记忆改善。”老年神经生物学，第36卷，第2期，第867-876页，2015年。视图:出版商网站|谷歌学者
20. 彭译葶。王,Z.-Y。王,J.-W。Xie等人，“在阿尔茨海默病小鼠模型中，dl -3-n-丁基苯酞诱导的抗氧化防御上调参与了CREB和Nrf2之间的交流增强。”老年神经生物学，卷。38，pp。32-46,2016。视图:出版商网站|谷歌学者
21. H.Bito和S.Takemoto Kimura，“Ca（2+）/CREB/CBP依赖性基因调控：长期突触可塑性和神经元存活的关键共同机制，”细胞钙，第34卷，第4-5号，第425-430页，2003年。视图:出版商网站|谷歌学者

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