糖尿病研究期刊》的研究

在这一页上

文摘介绍材料和方法结果讨论结论数据可用性的利益冲突作者的贡献确认引用版权相关文章

研究文章|开放获取

体积2022年| 文章的ID4067812| https://doi.org/10.1155/2022/4067812

年龄/愤怒促进大鼠成骨分化骨骨髓来源的内皮祖细胞通过MAPK信号

是的王 ,^1、2 春夏之际江 ,³ Zhongming商,² Guochun邱,² 帮派元 ,⁴ Kaiqiang徐,² (侯,⁵ Yanzheng他 ,^{1、6、7、8} 和勇刘 ^{1、6、7、8}

学术编辑器: Raffaella Mastrocola

收到了 2021年5月19日

修改后的 2021年11月19日

接受 2021年12月01

发表 2022年2月01

文摘

系统性血管损伤是糖尿病最常见的并发症。先进的糖化终端产品(年龄)可以通过影响加剧糖尿病引起的血管损伤内膜和媒体通过各种机制。在这项研究中,我们表明,年龄和他们的膜受体的愤怒可能诱导内皮祖细胞的分化为成骨细胞在某些情况下,从而促进加速动脉粥样硬化。分化为成骨细胞阳性染色证实了DiI-acetylated荧光标记低密度脂蛋白和FITC-conjugatedUlex europaeus凝集素。在分化,表达受体的年龄(愤怒)显著调节。这个upregulation减毒通过转染RAGE-targeting小干扰RNA (si)。siRNA-mediated击倒的愤怒表达显著抑制upregulation AGE-induced calcification-related蛋白质,如runt-related转录因子2 (RUNX2)和osteoprotegerin(功能)。额外的实验表明,年龄显著诱导内皮祖细胞诱导ERK p38MAPK,物激活。的AGE-induced upregulation成骨细胞的蛋白质(RUNX2和功能)被抑制治疗p38MAPK抑制剂(SB203580)或物抑制剂(SP600125),而不是用一种ERK抑制剂(PD98059),这表明AGE-induced成骨细胞分化的内皮祖细胞可能通过p38MAPK和物介导的信号,但并不是通过ERK信号。这些数据表明,年龄可以绑定到愤怒EPC膜触发分化成成骨细胞。底层机制似乎涉及p38MAPK JNK1/2通路,但不是ERK1/2通路。

1。介绍

糖尿病是世界上最常见的慢性疾病之一。在2019年,8.8%的成年人口(4.63亿人)据报道,糖尿病1]。系统性血管损伤是糖尿病最常见的并发症,是糖尿病患者死亡的主要原因之一。在2019年大约有420万人死于糖尿病(1]。因此保护糖尿病患者的血管损伤引起重大关注从研究人员2]。血管并发症的发生率显著增加糖尿病患者相比之下,那些没有糖尿病(3,4]。高级糖化终端产品(年龄)是多余的糖和蛋白结合的产品与血管钙化密切相关。据报道,年龄显著促进动脉粥样硬化的发展通过信号介导的受体年龄(愤怒)5]。血管钙化是动脉粥样硬化的病理特征之一。动脉粥样硬化病变的特点是它们的起源在血管的内膜,伴随着脂类和碳水化合物的积累,出血,血栓形成,随后同时参与的媒体。当疾病进展到动脉管腔阻塞,甚至会直接导致缺血或坏死的组织或器官动脉[提供的6]。当前视图表明血管钙化不是简单的被动的退化过程,但是,相反,一个活跃的过程由多种细胞。它类似于骨骼发育,涉及到活跃的骨形成,包括成骨细胞的发展和活跃的表达在骨表面标记(7]。此外,年龄已被证明诱导人牙周韧带干细胞分化成成骨细胞(8),这表明他们可能有潜在的促进内皮祖细胞分化为成骨细胞过程中糖尿病引起的血管损伤。

Asahara et al。9人类外周血CD34)首先发现⁺造血干细胞可以分化成成熟的内皮细胞。CD34的分化⁺造血干细胞向成熟内皮细胞促进缺血组织血管新生;这种造血干细胞此后被称为内皮祖细胞(epc) [9]。从那时起,研究人员进行了“double-swallow”测试和FITC-UEA-1 DiI-ac-LDL成功鉴定内皮祖细胞(10]。血管损伤触发信号,新兵内皮祖细胞的血管损伤,他们分化为成熟内皮细胞参与血管修复(11]。内皮钙化与血管修复障碍引起的脂质代谢异常、炎症、EPC和/或功能障碍。一项研究表明,内皮祖细胞可以促进受损血管的修复,从而减缓动脉粥样硬化的进展(12]。然而,临床上治疗内皮祖细胞的影响远不及原来的支持者令人印象深刻的预期,特别是糖尿病患者。内皮祖细胞可以同时表达与干细胞相关的表面标记以及那些与内皮细胞(13,14]。因此推测,内皮祖细胞仍有多向分化潜能。在某些情况下,内皮祖细胞多向分化潜能可以分化为成骨细胞,从而减缓血管损伤的修复,促进动脉粥样硬化(15]。

MAPK通路是一个至关重要的信号通路参与各种生理细胞反应,包括细胞生长、发展、分裂、凋亡,功能同步(16]。值得注意的是,MAPK服务角色的分化成骨的间充质干细胞(17),以及分化3 t3-l1 preadipocytes [18]。年龄是否能促进内皮祖细胞的成骨分化和具体机制尚未报道。本研究的目的是探讨是否可能引发内皮祖细胞的分化成成骨细胞- MAPK通路的激活。在何种情况下年龄诱导内皮祖细胞的分化成成骨细胞通过MAPK通路的激活也被评估。内皮祖细胞被成功地分化成成骨细胞暴露年龄,和MAPK信号通路的作用在这个分化。

2。材料和方法

2.1。内皮祖细胞的分离

二十个男Sprague-Dawley老鼠(体重120 - 150克;年龄,6 - 8周,4每笼老鼠)西南医科大学动物实验中心提供的。老鼠被喂食与免费食物/水20 - 25°C和 %湿度与光明/黑暗骑自行车每12 h。综述了目前的研究和执行的实验伦理委员会批准西南医科大学(排名2015103051)。在实验的过程中,老鼠被喂食和处理严格按照中国实验动物管理条例》(2014年修订)(http://www.gov.cn/gongbao/content/2014/content_2692743.htm),以确保动物的福利。老鼠被颈椎脱位牺牲在研究结束的时期。大鼠的股骨和胫骨被移除和穿孔无菌针创建孔两端的股骨。骨髓与PBS冲毁,离心5分钟在室温下,然后用5毫升PBS移液混合。获得的细胞悬液分层Histopaque 1077 (Sigma-Aldrich;默克公司)和额外的30分钟的离心机在室温下。细胞层界面与PBS收集和清洗三次。被播种在t - 75收集的单核细胞组织培养瓶的密度细胞/毫升EGM-2MV介质(Lonza Group Ltd .)补充10%的边后卫(Gibco;热费希尔科学、沃尔瑟姆,妈,美国),1%青霉素(10000 U /毫升)链霉素(10000μg / ml), EGM-2MV SingleQuots (Lonza Group Ltd .)(称为完整EGM-2MV介质)一起在37°C和5%湿润孵化器有限公司₂。孵化后48 h,不依从细胞和碎片吸气,贴壁细胞培养用新鲜完整EGM-2MV媒介每天7天(媒体交换每48 h)。

2.2。鉴定内皮祖细胞

贴壁细胞在37°C和5%孵化有限公司₂1、10-dioctadecyl-3 3 30 30-tetramethyl-indocarbocyanine-labeled acLDL (DiI-acLDL)(分子探针;热费希尔科学)为4 h,固定在2%多聚甲醛在室温下20分钟,然后用FITC-labeled凝集素复染色Ulex europaeus凝集素(UEA-1) (Sigma-Aldrich;默克公司)。使用激光扫描共焦显微镜荧光图像被抓获。

2.3。EPC治疗

内皮祖细胞被分为4组:对照组与孵化完成EGM-2MV介质;(2)集团孵化完成EGM-2MV介质+ 40 mg / l年龄(Biovision、日本);(3)一组完全孵化EGM-2MV介质+ 10更易与lβ甘油磷酸酯;和(iv)一群孵化完成EGM-2MV介质+ 40 + 10 mg / l年龄更易与lβ甘油磷酸盐。

调查肆虐的角色,佩奇被分为四组:(i)控制(PBS治疗);(2)100 mg / l年龄;(3)pHBLV-U6-Scramble-ZsGreen-Puro转染[SnapGene;感染复数(MOI) 50 /每个年龄)+ 100 mg / l;和小干扰RNA (si) (iv)对愤怒(siRAGE;MOI50 /每个)+ 100 mg / l。

2.4。成骨细胞的识别

24-well组织培养的内皮祖细胞板与10更易诱导lβ甘油磷酸盐+ 40 mg / l年龄为7天。分化成骨细胞通过检查免疫荧光染色。短暂,PBS的细胞被固定用4%多聚甲醛在室温下20分钟。细胞内染色,细胞被permeabilized 0.1% Triton x - 100 (Beyotime生物科技、上海、中国)15分钟,洗了PBS(5分钟,三次)在室温下,与骨钙素(OCN)反应,CD34, CD133, VE-cadherin,或runt-related转录因子2 (RUNX2)抗体(Abcam剑桥,英国)一夜之间在4°C,并且,当需要时,与二次抗体反应在室温下2 h。核与DAPI染色。结果CKX53共焦显微镜下观察(奥林巴斯、东京、日本)。

2.5。西方墨点法

收集细胞细胞溶解蛋白质提取缓冲(1毫升蛋白质提取缓冲(Beyotime生物科技、上海、中国)5:l蛋白酶抑制剂、5μl PMSF和5μl磷酸酶)在4°C通过声波降解法40 Hz 10秒,5分钟的间隔在冰。是浮在表面的蛋白质样品离心后收集在4°C 30分钟。每个20μg蛋白样本10% sds - page分离,然后转移到硝酸纤维素。膜被5%的脱脂牛奶和孵化12 h在4°C以下主要抗体(1:1000;所有从Abcam):购买山羊anti-rabbit osteoprotegerin(功能)的免疫球蛋白,RUNX2免疫球蛋白,BMP-2免疫球蛋白,愤怒,GAPDH。然后洗膜和Tris-buffered盐水含0.2% Tween-20 (TBS-T),孵化与辣根peroxidase-conjugated抗体IgG抗体(1:5000)二级抗体1 h,然后洗TBS-T缓冲区的三倍。可视化使用的信号增强化学发光检测试剂(Engreen,北京)。GAPDH是用作加载控制。目标蛋白表达规范化水平的各自GAPDH乐队使用数量一个软件(版本4.6.2)。

2.6。siRAGE和慢病毒转导

核(5 - - - - - -GGAAGGAGGTCAAGTCCAACT-3 )针对鼠愤怒(鼠愤怒基因ID: NM_053336.2)设计并合成了Hanbio生物技术(上海,中国)。空向量(pHBLV-U6-Scramble-ZsGreen-Puro, 你/毫升)(Hanbio生物技术,中国上海)和siRAGEs(分别为莫伊10、30、50)传导到epc使用ViraPower慢病毒表达系统(热费希尔科学)根据制造商的指示量化转染。最后,最优莫伊值50(数据未显示)。转染效率是评价72 h后用荧光显微镜(数据没有显示)。因此,72 h转染时间用于后续实验。最优莫伊值(MOI50)使用的核是由免疫印迹分析。

2.7。MAPK信号分析

Serum-starved第二代epc服用100 mg / l年龄和终止(0)5、15或30分钟37°C孵化器。蛋白质提取的样本作为免疫印迹分析描述。蛋白质水平的磷酸化ERK (CST、钙、美国),p38MAPK(美国圣克鲁斯,CA)和物(美国生物技术,CA)被免疫印迹分析。分析一个特定的途径,细胞使用20更易与l SB20358(美国德克萨斯州Selleck化学品)抑制p38MAPK,与50更易与l PD98059抑制ERK (Selleck化学物质),或50更易与l SP600125 (Selleck化学品)抑制物抑制剂治疗前1 h。等效的DMSO溶液用于控制治疗。

2.8。统计分析

数据分析使用SPSS 20.0版(IBM公司)。所有的数据呈现的和分析用单向方差分析Bonferroni事后比较。被认为是表明一个统计上的显著差异。

3所示。结果

3.1。从大鼠骨髓内皮祖细胞的分离

从大鼠骨髓中分离出单核细胞就完全孵化EGM-2媒介。在3^{理查德·道金斯}一天,大量的细胞似乎表现出圆的形态(图1(一))。在7^th天,殖民地的纺锤状细胞观察(图1 (b))。DiI-ac-LDL积极细胞染色(图1 (d))和FITC-UEA-I(图1 (e)),表明细胞分化成内皮祖细胞(图1 (f))。14日^th天,殖民地的细胞与一个典型的cobblestone-like外观观察(图1 (c))。

(一)3天

(b) 7天

(c) 14天

(d) DiI-ac-LDL

(e) FITC-UAE-1

(f)合并

图1

形态变化和识别骨骨髓来源的内皮祖细胞单核细胞。(a),观察附着单核细胞经过3天的文化。(b)殖民地的成熟,纺锤状内皮祖细胞观察经过7天的文化。(c)成熟的内皮祖细胞与一个典型的cobblestone-like外观和殖民地文化增长14天后观察。(a - c)放大,×100。(d-f)放大,×200。单核细胞分离大鼠骨髓细胞(d)吞噬DiI-ac-LDL染料和(e) FITC-UEA-1积极经过7天的文化。(f)覆盖板(d)和(e)显示colocalization DiI-ac-LDL染料和FITC-UEA-1在同一个细胞。DiI-ac-LDL: 10-dioctadecyl-3 3 30日30-tetramethyl-indocarbocyanine-labeled乙酰化荧光标记低密度脂蛋白;EPC:内皮祖细胞; UEA-1:Ulex europaeus凝集素。

3.2。β甘油磷酸盐+年龄诱导内皮祖细胞的分化成成骨细胞

内皮祖细胞在干预组(年龄+ B-gly)服用10更易/ lβ甘油磷酸盐+ 40 mg / l年龄为7天。表型的改变内皮祖细胞被免疫荧光染色检测。与控制细胞相比,AGE-induced细胞水平明显下降的干细胞标志物CD133(图2(一个))和内皮细胞标记VE-cadherin(图2 (b))。RUNX2 calcification-related标记(图的表达2 (c))和OCN(图2 (d))进行了分析。与未经处理的细胞相比,coexpression内皮标记CD34和成骨的标记OCN相同的内皮祖细胞培养与年龄+后显著增加β- g。(图3)。结果表明,年龄+β-gly-induced内皮祖细胞失去了一些方面的内皮细胞表型和收购了成骨细胞的表型(coexpression CD34和OCN)。

(一)

(b)

(c)

(d)

图2

内皮细胞和成骨细胞标志蛋白的免疫荧光染色和年龄β-glycerophosphate-induced内皮祖细胞。CD133的表达(a)、(b) VE-cadherin, RUNX2 (c)和(d) OCN内皮祖细胞免疫荧光染色法进行了分析;核与DAPI染色。左边的面板显示控制治疗(未经处理的细胞);右边的面板显示细胞治疗后7天的年龄。每个字段的视图是在显微镜下随机选择;放大,×200。年龄:晚期糖化终产物;EPC:内皮祖细胞;OCN:骨钙素; RUNX2: runt-related transcription factor 2.

免疫印迹分析的结果表明,相比10更易/ lβ甘油磷酸盐组,年龄40 mg / l + 10更易与lβ的表达水平明显高于甘油磷酸盐组calcification-related蛋白质功能,RUNX2和BMP-2 ( ;图4)。此外,蛋白质表达较高β甘油磷酸盐组比数控和年龄组(图4)。年龄段的功能表达水平提高的价格相比NC组(图4),即使没有发现统计学意义。这些数据表明β甘油磷酸盐成功诱导内皮祖细胞的分化成骨细胞和年龄可以促进这一进程。

(一)蛋白质印迹

(b)

图4

表达calcification-related蛋白质AGE-induced内皮祖细胞。内皮祖细胞在诱导仅40 mg / l年龄(年龄)β- g,或者年龄40 mg / l +β- g(10更易/ lβ7天- g)。(一)蛋白表达水平进行了分析使用功能抗体免疫印迹,RUNX2,或BMP-2;GAPDH是用作加载控制。(b)的光密度分析功能,RUNX2, BMP-2蛋白质表达。每个数据点代表三个独立重复的结果。年龄40 mg / l +β- g与其他三组相比,^♦ 与其他三组。年龄:晚期糖化终产物;βg:β甘油磷酸酯;EPC:内皮祖细胞;NC:负控制;功能:osteoprotegerin;RUNX2: runt-related转录因子2。

3.3。年龄诱导Upregulation愤怒

我们探讨了不同浓度的年龄对愤怒的影响在接下来的调查。愤怒表达显著增加与10 - 80细胞刺激μg / ml年龄( )。相比之下,10 - 80μg / ml年龄治疗组,100年μg / ml年龄导致的进一步upregulation愤怒表达式( )(图5(一个))。

(一)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

图5

siRAGE转导减少AGE-induced愤怒表达增加内皮祖细胞和内皮祖细胞减少calcification-related蛋白质的表达水平。(a)代表西方墨点法图像和愤怒之光密度分析蛋白表达与内皮祖细胞刺激显示浓度的年龄为7天。愤怒(c)蛋白表达水平检测和semiquantified使用100年的内皮祖细胞诱导免疫印迹μg / ml年龄为7天,与siRAGE转染后,电动汽车,或者用PBS治疗控制。(e)内皮祖细胞与siRAGE转染空向量(EV-AGEs),或控制(EGM-2MV)然后用100诱导μg / ml年龄为7天。细胞不接受年龄是用作控制。表达水平的细胞calcification-related蛋白质功能和RUNX2被免疫印迹检测。GAPDH是用作加载控制。每个数据点代表三个独立化验的结果。与控制,^▲ 对比;年龄在100毫克/毫升与其他组相比;^◆ 对比;与年龄, 对比;与EV-AGEs比较,^# 与年龄:晚期糖化终产物;EPC:内皮祖细胞;电动汽车:empty-vector-transfected对照组;功能:osteoprotegerin;RUNX2: runt-related转录因子2;siRAGE:小干扰RNA对受体的年龄。

3.4。在epc siRNA-Mediated击倒的愤怒表情

愤怒的关键作用AGE-induced成骨细胞分化进一步调查使用siRNA针对rat-specific愤怒mRNA。免疫印迹显示愤怒表达水平显著撞倒在细胞转导siRAGE相比untransfected控制细胞和empty-vector-transfected (EV)细胞( ;图5 (c))。

3.5。siRAGE阻止AGE-Induced分化成骨细胞的内皮祖细胞

与100年siRAGE转染内皮祖细胞治疗μg / ml年龄诱导成骨细胞分化。转染与siRAGE阻止AGE-induced从内皮祖细胞分化成骨细胞,calcification-related蛋白质的蛋白质表达水平(功能和RUNX2)相比,siRAGE-treated细胞明显减少与年龄和EV +年龄组(图5 (e))。这些结果表明年龄促进成骨分化的内皮祖细胞通过愤怒。

3.6。p38MAPK和物途径调解AGE-Induced成骨细胞分化的内皮祖细胞

ERK的磷酸化水平,p38MAPK物进一步分析了西方墨点法内皮祖细胞的刺激与年龄100毫克/毫升0,5、15或30分钟。显著激活这些蛋白5分钟后观察到的(所有的刺激 ;图6)。随着时间的推移磷酸化蛋白质的表达逐渐减少。预处理和50个μmol / l PD98059, 50μ20 mol / l SB203580或μmol / l SP600125阻塞AGE-induced ERK的活化,p38和物( ;图7)。抑制剂治疗的影响在AGE-induced成骨细胞分化研究。内皮祖细胞是用PD98059预处理、SB203580或SP600125 24小时;然后,媒介取代暴露细胞年龄为7天,和osteoblast-related蛋白质的表达被免疫印迹检测。结果表明calcification-related蛋白质的upregulation RUNX2功能和显著预防治疗SB203580 SP600125,但不是PD98059(图8)。这些数据表明,AGE-induced成骨细胞分化的内皮祖细胞是通过p38和物介导的信号,但并不是通过ERK信号。

(一)

(b)

图6

MAPK通路AGE-induced激活ERK的磷酸化蛋白表达,p38MAPK, epc物。内皮祖细胞与100年刺激μg / ml年龄0、5、15或30分钟。p38 (a) ERK的磷酸化水平,并通过免疫印迹物进行了分析。p38 MAPK总,物表达水平作为相应的控制;GAPDH是用作加载控制。(b)平均水平磷酸化ERK p38,物是由磷酸化/总蛋白表达的比率。每个数据点代表三个独立重复的结果。^◆ 与0分钟。年龄:晚期糖化终产物;EPC:内皮祖细胞;p -:磷酸化。

(一)

(b)

图7

MAPK通路抑制剂PD98059、SB203580 SP600125防止AGE-induced激活磷酸化ERK蛋白,p38MAPK,分别在epc物。内皮祖细胞是用PD98059预处理(50μmol / l), SB203580 (20μmol / l),或者SP600125 (50μmol / l) 1 h,然后随着年龄的增长刺激(100μg / ml)为5分钟。治疗和DMSO-treated样本被用作控制。(a)总蛋白质和磷酸化ERK, p38和物水平和GAPDH测定蛋白质印迹。(b) Phosphorylation-to-total ERK蛋白表达率,p38和物。每个数据点代表三个独立实验的结果。与控制,^▲ 对比;与DMSO溶液比较,^◆ 与年龄:晚期糖化终产物;反对:控制;EPC:内皮祖细胞;p -:磷酸化。

(一)蛋白质印迹

(b)

图8

SB203580 SP600125防止AGE-induced upregulation RUNX2的内皮祖细胞功能。内皮祖细胞与PD98059 24小时预处理(50μmol / l), SB203580 (20μmol / l),或者SP600125 (50μmol / l)接着用100μg / ml年龄为7天。细胞并没有暴露于抑制剂或年龄作为消极的控制。细胞受到年龄而不是抑制剂被用作所有年龄的积极控制实验。(a)蛋白的表达RUNX2和功能检测到免疫印迹和(b)的水平semiquantitated光密度分析;GAPDH是用作加载控制。每个数据点代表三个独立实验的结果。^♦ 与AGE-treated样本。年龄:晚期糖化终产物;反对:控制;EPC:内皮祖细胞;功能:osteoprotegerin;帕金森病:PD98059;RUNX2: runt-related转录因子2;某人:SB203580;SP: SP600125。

4所示。讨论

内皮祖细胞的发现和描述以来,研究人员已经开发出一种浓厚的兴趣修复血管的能力。各种各样的研究表明内皮祖细胞可以克服内皮功能障碍和降低动脉粥样硬化风险19,20.]。然而,使用干细胞治疗血管疾病充满了争议。研究表明,在人类中,心血管疾病的风险因素,如糖尿病,高血压,和吸烟,影响内皮祖细胞的数量和功能,有可能限制的治疗潜力祖细胞(21]。内皮祖细胞的损害似乎大大促进糖尿病动脉粥样硬化和动脉粥样硬化疾病的进展22]。在我们的研究中,内皮祖细胞的分化成成骨细胞可能恶化的潜在风险之一,在糖尿病患者动脉粥样硬化。

众多研究表明,血管钙化钙沉积的不是一个简单的过程,而是一个高度管制的过程,类似于骨骼发育(23]。越来越多的证据表明,有一个骨代谢和血管系统之间的紧密联系。内皮祖细胞不仅能够分化成内皮细胞,修复受损血管但也多向分化潜力,偶尔参与骨代谢的细胞类型(24]。实验中执行目前的研究表明,干细胞标志物CD133和内皮细胞的水平标记VE-cadherin年龄和后下降β甘油磷酸盐感应,而calcification-related标记RUNX2和OCN增加的水平。这些发现表明,内皮祖细胞可能transdifferentiate为成骨细胞。研究Gossl et al。15,25)表明,OCN循环内皮祖细胞表达的隔绝严重冠状动脉粥样硬化患者的外周血和钙化的主动脉瓣狭窄。此外,内皮祖细胞的数量表达OCN脑动脉粥样硬化的严重程度呈正相关,(26]。事实上,CD133⁺/ CD34^{- - - - - -}/插入域受体激酶⁺细胞在外周血常常作为一个不稳定的动脉粥样硬化的迹象(27]。在绝经后妇女,二磷酸盐治疗会使OCN和其他osteogenesis-related标记。^{2 +}(28]。因此推测血管内皮损伤在糖尿病患者结果的招聘网站内皮祖细胞的损伤修复受损的血管。然而,如果内皮祖细胞分化成成骨细胞暴露于有害物质后,如年龄,那么产生的动脉粥样硬化可能加重血管损伤,导致严重的动脉粥样硬化。

大多数年龄绑定到愤怒,在细胞内发挥它们的影响。研究表明,年龄和愤怒之间的关系可以调节血管平滑肌增殖,促进炎症细胞的浸润,加剧氧化应激,诱导血管平滑肌的钙化,并加剧动脉粥样硬化(29日]。众多研究表明,激活愤怒的年龄能促进细胞凋亡,细胞迁移,附着力,在内皮祖细胞增殖,以及削弱内皮祖细胞的生物活性在血管的修复30.,31日]。时代发展的动脉粥样硬化的作用仍有待阐明。但是,先前的研究已经表明,减少年龄合成和约束力的愤怒可以减少糖尿病患者动脉粥样硬化的进展缓慢(32,33]。本研究的结果显示使用siRNAs愤怒的击倒,以及抑制p38MAPK物信号,显著降低AGE-induced EPC钙化(也就是说,成骨细胞分化)。这些结果表明,EPC钙化可能由p38和物,但不是ERK1/2。绑定到愤怒和减少下游信号的抑制可能防止内皮钙化,从而防止动脉粥样硬化。

然而,我们的研究主要集中在大鼠骨骨髓来源的内皮祖细胞,并还需要进一步的研究来确定是否有相同的变化或机制在不同的物种。贾等人的研究表明,chemerin(一个adipokine,炎症的发展中起着重要的作用)可以增强人类内皮祖细胞的粘附和迁移能力,降低细胞凋亡率。但在ApoE - / -小鼠,chemerin可以增加脂质积聚在动脉粥样硬化斑块和加剧斑块不稳定。这种效果是由特定的减毒阻塞P38 MAPK通路(34]。因此,是否人类内皮祖细胞可以分化为成骨细胞的刺激下年龄/愤怒和信号通路是后续研究的重点。

在最近的20年里,研究内皮祖细胞的能力来防止在糖尿病患者动脉粥样硬化主要集中在年龄对细胞功能的影响(35]。随着越来越多的研究表明,内皮祖细胞可以表达成骨的标记,年龄的负面影响内皮祖细胞的分化也应该考虑(24]。进一步的研究将是必要的,以确定如何防止内皮祖细胞的分化成osteoblast-like细胞,从而提高生物修复受伤血管的内皮祖细胞的能力。

5。结论

我们的数据表明,内皮祖细胞在一定条件下可以分化成成骨细胞。绑定的年龄膜受体的愤怒可以促进这一进程。底层机制似乎涉及p38MAPK JNK1/2通路,但不是ERK1/2通路。这提供了一个新的理论依据糖尿病血管并发症的预防和治疗。

数据可用性

和/或使用的数据集分析在当前的研究可从相应的作者以合理的要求。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

勇刘和Yanzheng他贡献了同样的工作。

确认

这个项目是由四川省科学技术厅2019 yj0691和西南医科大学2017 - zrqn - 122。

引用

顾x和k . s .大师”的角色MAPK / ERK通路在瓣膜间质细胞钙化,”美国Physiology-Heart和循环生理学杂志》上,卷296,不。6,H1748-H1757, 2009页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
刘h .问:他,y,曾庆红h . et al .,“先进的糖化成品调节平滑肌细胞在培养HSMCs钙化,”国际临床与实验病理学杂志》上,8卷,不。10日,2015年。
视图: 谷歌学术搜索
d . g . Hackam m . k . Tan g . n . Honos l·a·莱特a·兰格s g·古德曼,糖尿病的预后比较与如何建立血管疾病?从加拿大血管保护(VP)注册中心,“美国心脏病杂志,卷148,不。6,1028 - 1033年,2004页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
l . Pletsch-Borba c . Watzinger r . Turzanski福特纳et al .,“血管损伤的生物标志物和2型糖尿病:一个前瞻性研究,系统回顾和荟萃分析,“临床医学杂志,8卷,不。12,2075页,2019年。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
t . Tanikawa y冈田克也、r . Tanikawa和y田中,“先进的糖化结束产品诱导钙化血管平滑肌细胞通过愤怒/ p38 MAPK,”血管研究期刊》的研究,46卷,不。6,572 - 580年,2009页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
n . Cichońd . Lach a . Dziedzic m . Bijak和j . Saluk“动脉粥样化形成的炎症过程,”波兰语merkuriusz lekarski:器官Polskiego Towarzystwa Lekarskiego,42卷,不。249年,第128 - 125页,2017年。
视图: 谷歌学术搜索
m . Fukagawa和j。j Kazama”,使骨的血管:从软壳硬骨,“肾脏国际,卷72,不。5,533 - 534年,2007页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
l . n张x x, z . Wang刘贤,b . h . Xu和j .张”小檗碱改善晚期糖化结束products-induced成骨分化反应人类牙周韧带干细胞通过规范化Wnt /β连环蛋白通路。”分子医学报告,19卷,不。6,5440 - 5452年,2019页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
t . Asahara t . Murohara a·沙利文et al .,“隔离的假定的祖内皮细胞血管生成。”科学,卷275,不。5302年,第966 - 964页,1997年。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
诉Zaccone r .凝花l .澳网et al .,“专注于内皮祖细胞的生物身份。”欧洲医学和药理科学审查,19卷,不。21日,第4047页,2015年。
视图: 谷歌学术搜索
h·乔普拉m . k .挂d l .邝c . f . Zhang和e·h·n·战俘,“洞察内皮祖细胞:起源、分类、潜力,前景,”干细胞国际卷,2018篇文章ID 9847015, 24页,2018。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
c . h . Yun k·h·荣格,k .楚et al .,“增加循环内皮微粒和颈动脉动脉粥样硬化在阻塞性睡眠呼吸暂停,”临床神经病学杂志》第六卷,没有。2、89 - 98年,2010页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
y汉和f·h·谢成骨分化late-outgrowth CD45-negative内皮祖细胞,”血管研究期刊》的研究,51卷,不。5,369 - 375年,2015页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
t·托雅Ozcan, m . t .奉献et al .,“成分改变肠道微生物组和骨钙蛋白表达内皮祖细胞在冠状动脉疾病的患者,”《公共科学图书馆•综合》,16卷,不。第三条e0249187, 2021年。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
m . Gossl美国国防部,e·j·阿特金森a . Lerman和s .斯拉”骨钙素的表达在冠状动脉粥样硬化患者循环内皮祖细胞,”美国心脏病学会杂志》上,52卷,不。16,1314 - 1325年,2008页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
c .沈问:李,y . c . Zhang et al .,“先进的糖化成品提高EPC细胞凋亡,减少一氧化氮释放通过MAPK通路”生物医学和药物治疗,卷64,不。1,35-43,2010页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
郑,y, y杨et al .,“LncRNA MALAT1抑制间充质干细胞的成骨分化骨质疏松大鼠通过MAPK信号通路,”欧洲医学和药理科学审查,23卷,不。11日,第4617 - 4609页,2019年。
视图: 谷歌学术搜索
y安藤,佐藤f . h .巨大et al .,“胎盘提取物抑制分化3 t3-l1 preadipocytes通过加速成熟脂肪细胞激活p38 MAPK在脂肪形成的早期阶段,“营养与代谢,16卷,不。1,2019。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
n . Alexandru e·安德烈·f·Safciuc et al .,“静脉注射外源的管理细胞衍生微泡的健康维护对动脉粥样硬化性心血管疾病的起源发展内皮祖细胞的直接作用,”细胞,9卷,不。2,p。423年,2020年。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
j·l·李h . Wang, x, z,和李问:“内皮祖细胞衍生细胞外囊泡对内皮细胞的影响ferroptosis和动脉粥样硬化血管内皮损伤,”发现细胞死亡,7卷,不。1,2021。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
n·沃纳和g . Nickenig心血管危险因素对内皮祖细胞的影响,“动脉硬化、血栓和血管生物学,26卷,不。2、257 - 266年,2006页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
n .安东尼奥·r·费尔南德斯c .丰特斯里贝罗和洛杉矶Providencia”挑战血管内皮祖细胞修复的糖尿病患者,”心血管和血液疾病的药物靶点,10卷,不。3、161 - 166年,2010页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
m . Ketteler和c . Giachelli“新颖的见解血管钙化,”肾脏国际卷。70年,S5-S9, 2006页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
d·h·张,l . j . Wang l . Si et al。”相关性osteocalcin-positive内皮祖细胞和参差不齐的钙化患者的冠状动脉疾病,”临床与实验药理学和生理学,42卷,不。7,734 - 739年,2015页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
m . Gossl斯拉,x, n . Higano k·l·乔丹和d·吕弗勒”循环成骨的祖细胞在钙化的主动脉瓣狭窄,“美国心脏病学会杂志》上,60卷,不。19日,1945 - 1953年,2012页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
a . j .诡计e·a·马丁,m . Gossl et al .,“Polyphenol-rich酸果蔓汁中性对内皮功能的影响,但降低了一部分osteocalcin-expressing内皮祖细胞,”欧洲营养杂志,52卷,不。1,第296 - 289页,2013。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
a . j .诡计m . Gossl r . j . Widmer et al .,“骨钙素阳性CD133 + / CD34 - / KDR +祖细胞作为一个独立的不稳定的动脉粥样硬化的标志,”欧洲心脏杂志》上,33卷,不。23日,第2969 - 2963页,2012年。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
p .珀里斯·e·j·阿特金森,m . Gossl et al .,“二磷酸盐治疗对循环的影响成骨的内皮祖细胞在绝经后妇女,”梅奥诊所的公报,卷88,不。1,46-55,2013页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
w . m . y . Liu, x l . Zhang et al .,“年龄/愤怒促进thecalcification人主动脉平滑肌细胞通过Wnt /β连环蛋白轴”,美国转化研究杂志》上,8卷,不。11日,2016年。
视图: 谷歌学术搜索
h·李,张x, x关et al .,“先进的糖化结束产品损害迁移、粘附和分泌晚期内皮祖细胞的潜力,”心血管疾病糖尿病学,11卷,不。1,2012。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
b . Gryszczyńska m . Budzyńb Begier-Krasińska et al .,“先进的糖化结束产品之间的联系,可溶性受体,愤怒和内皮功能障碍,评估的循环内皮细胞和内皮祖细胞有轻微和抗高血压的病人,”国际分子科学杂志》上,20卷,不。16,3942年,页2019。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
z Hegab,长臂猿,l . Neyses和m . a .妈妈“先进的糖化结束产品在心血管疾病中的作用,“世界心脏病学杂志》,4卷,不。4、90 - 102年,2012页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
a·普拉萨德·Bekker和s . Tsimikas“先进的糖化结束产品,糖尿病心血管疾病。”心脏病在审查,20卷,不。4、177 - 183年,2012页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
y . j .贾f . Yu Xiong et al .,“Chemerin增强人类内皮祖细胞的粘附和迁移,增加脂质积累与动脉粥样硬化小鼠,”脂质在健康和疾病,19卷,不。1,2020。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索
c .太阳,c .梁任y . et al .,“先进的糖化结束产品抑制内皮祖细胞功能通过p38和ERK 1/2增殖蛋白激酶途径,”在心脏病学基础研究,卷104,不。1,42-49,2009页。
视图: 出版商的网站 | 谷歌学术搜索

版权

PDF 下载引用

下载其他格式

订单打印副本

的观点

447年

下载

518年

引用