文摘
在过去,基因diabetic-obese糖尿病、糖尿病(db / db),肥胖和肥胖(ob / ob)鼠标菌株被用来调查diabetes-impaired伤口愈合的机制。我们确定的皮肤修复模式基因正常C57Bl / 6 j小鼠使用高脂肪饮食喂养(HFD)诱导diabetes-obesity综合症。伤口关闭明显推迟在HFD-fed老鼠老鼠相比,收到了一个标准的食物饮食(CD)。受损的伤口组织HFD老鼠明显延长伤口发炎。血管内皮生长因子(VEGF)的表达被推迟和相关干扰形成的伤口边缘上皮细胞和一个受损的肉芽组织中血管生成减少。正常伤口收缩是弱智和无序。伤口障碍在肥胖C57Bl / 6 j小鼠被著名的平行的退化NF的抑制剂κ(我κB -α)在缺乏一个Akt激活。相比之下,受损的伤口条件ob / ob老鼠,后期伤口HFD小鼠没有出现慢性炎症状态,epithelialized经过11天的修复。因此,只有遗传肥胖和糖尿病ob / ob老鼠终于表现出慢性伤口,因此代表了适合实验模型探讨diabetes-induced伤口愈合障碍。
1。介绍
糖尿病有一个广泛的全球增长,近10年前曾预测(1]。糖尿病皮肤溃疡代表疾病的严重并发症,而更重要的是,还未满足的医疗问题与重要的相关死亡率(2,3]。一生的风险对于任何开发这个并发症是糖尿病患者约15% (4]。此外,糖尿病溃疡预后不良,截肢后的3年生存率只有50至59% (5,6]。诱发因素(神经病变、缺血),导致足部溃疡(7),都不可能模仿使用各自的伤口愈合的动物模型。然而,糖尿病和肥胖的啮齿动物一直用作解开动物模型可能形成的分子和细胞机制的基础或至少导致diabetes-disturbed伤口条件。
特别是,肥胖基因(ob / ob)和糖尿病(db / db)鼠标菌株8]一直青睐的动物模型diabetes-impaired皮肤修复(9- - - - - -13]。受伤后,ob / ob和db / db老鼠发展严重失调的伤口条件。开创性的研究使用这些动物识别重大机制,导致观察到的组织再生的失败。最严重的缺陷的受损reepithelialization和肉芽组织的形成是与不同的损失函数驱动角化细胞生长因子、成纤维细胞和内皮细胞功能(10- - - - - -12,14- - - - - -16]的存在极大地增强伤口炎症反应(13,17,18]。
值得注意的是暗指这些早期的研究ob / ob和db / db老鼠主要关注糖尿病动物的表型。然而,这也证明,这些动物的糖尿病表型似乎功能连接到巨大的脂肪组织质量(19]。目前,一种新型概念的演变,令人信服地涉及一个脂肪tissue-driven激活的巨噬细胞胰岛素抵抗的中心原因严重肥胖的条件下(20.- - - - - -22]。这个基本概念似乎也证明肥胖老鼠diabetes-impaired愈合的情况,具体损耗的巨噬细胞损伤明显改善网站的组织修复受伤和移植(18,23]。
相比之下的密集使用基因糖尿病和肥胖小鼠伤口修复而言,没有数据可用日期基于食源性糖尿病和肥胖在野生型小鼠表型。这里,我们受伤的基因正常C57Bl / 6 j小鼠呈现的肥胖和糖尿病患者使用高脂肪饮食(HFD) 27周。与结果一致ob / ob老鼠,HFD-fed动物表现出延迟伤口关闭与受损的伤口reepithelialization和收缩,明显延长伤口炎症和干扰中央细胞内信号通路的激活。我们的数据表明,遗传糖尿病ob / ob鼠标是一个合适的动物模型来描述机制受损的伤口愈合的条件下一个肥胖相关胰岛素抵抗。
2。材料和方法
2.1。动物
女性C57Bl / 6 j(野生型)和C57Bl / 6 j -ob / ob老鼠从杰克逊实验室获得(巴尔港,我)和维护在12 h光/ 12 h黑暗周期22°C。
2.2。喂养的老鼠
6周时(对于C57Bl / 6 j)或(对C57Bl / 6 j - 12周ob / ob),老鼠笼单独对体重和监控。高热量饮食的研究中,六个C57Bl / 6 j野生型小鼠()维护随意在水和高脂肪饮食(HFD) (D12331,研究饮食公司,新布伦瑞克,新泽西州)为190天诱导肥胖和糖尿病动物的表型。HFD含有高脂肪(35.8%)、蛋白质(23.0%)和碳水化合物(35.5%)。提供的卡路里的脂肪,蛋白质和碳水化合物58.0%,分别为16.4%和25.5%。控制C57Bl / 6 j小鼠获得水和控制食物的饮食(CD)随意190天的卡路里所提供的脂肪(11%)、蛋白质(23%)和碳水化合物(65%)。C57Bl / 6 j -ob / ob在整个实验中老鼠的CD。
2.3。口服葡萄糖耐量试验(油气痕迹)
或CD, HFD-fed老鼠ob / ob老鼠饿死了16 h。老鼠随后应用口服葡萄糖(每公斤体重1.5克)gastrogavage。之前和60分钟后血糖水平测定葡萄糖的应用程序。
2.4。受伤的老鼠
喂养期后190天,CD - HFD-fed老鼠33周大伤害。C57BL / 6 j -ob / ob老鼠受伤时12周。如前所述(执行受伤的老鼠24,25]。简单地说,老鼠与单个腹腔注射氯胺酮麻醉(80毫克/公斤体重)/甲苯噻嗪(10毫克/公斤体重)。头发的每个鼠标被切断,并随后用70%乙醇擦拭。六个全层伤口(直径5毫米,3 - 4毫米)是在每个鼠标通过切割皮肤和底层膜carnosus。伤口被允许形成痂。皮肤活检标本从动物获得1,3,5,7,受伤后11天。在每个时间点,其中包括痂,完整的上皮和真皮车厢的伤口边缘,相邻的肉芽组织,部分肌肉和皮下脂肪组织从每个人的伤口切除。控制,一个类似的皮肤从nonwounded老鼠的背上。对于每个实验时间点,组织从四个伤口从四个动物(伤口,RNA分析)和两个伤口从四个动物(伤口,蛋白质分析)相结合,用于RNA和蛋白质制备。Nonwounded背部皮肤从四个动物作为控制。所有动物实验进行了根据指导方针和经当地动物伦理审查委员会批准。
2.5。分析从CD或HFD-Fed和血清ob / ob老鼠
血糖测定采用AccuTrend传感器(罗氏生化药剂,曼海姆,德国)。血清胰岛素、瘦素、肿瘤坏死因子(TNF -α)分析Luminex (Biotrend,杜塞尔多夫,德国)所描述的制造商。
2.6。RNA隔离和核糖核酸酶保护分析
RNA隔离和核糖核酸酶保护进行化验如前所述[25,26]。如果不是表示,否则,每一个实验时间点描述12伤口()隔绝四个人老鼠()核糖核酸酶保护伤口组织样本化验分析。所有样本量化使用PhosphoImager PSL计数每15μ克的总RNA。磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)杂交用作加载控制。互补脱氧核糖核酸探针是使用rt - pcr克隆。探针与nt 425(外显子1)到170(外显子2)(加入溶菌酶M,基因库M21047), 816 - 1481元(lipocalin X81627), 912 - 1183元(α光滑的肌肉肌动蛋白(αsma), BC064800.1)或163 - 317元(GAPDH NM002046)发表的序列。
2.7。免疫组织化学
老鼠受伤如上所述。动物被牺牲在受伤后5至7天。活检中分离出来的皮肤伤口,固定在福尔马林或锌(0.05%中国民航固定剂的解决方案2 h2啊,0.5 ZnAc2 h2啊,0.5% ZnCl2在0.1 M Tris-HCl, pH值7.4),随后嵌入石蜡。部分(4μ米)随后被孵化一夜之间在4°C抗血清提出对小鼠F4/80 (AbD Serotec,杜塞尔多夫,德国),Ly-6G (Gr-1) (BD Pharmingen、海德堡、德国),VEGF(圣克鲁斯、海德堡、德国)、CD31 (Chemicon埃施博恩德国),或αsma(σ,Taufkirchen,德国)。主要使用生物素化的二次抗体抗体检测。幻灯片随后被沾avidin-biotin-peroxidase复杂系统(Santa Cruz)使用3、3-diaminobenzidine-tetra-hydrochloride或快速红Substrate-Chromogen系统(Dako,汉堡,德国)显色底物。最后,部分与苏木精复染色和安装。
2.8。制备蛋白溶菌产物和免疫印迹分析
皮肤和伤口组织biopies均质裂解缓冲(1% Triton x - 100、137毫米氯化钠10%甘油、二硫苏糖醇1毫米,10毫米氟化钠,2毫米Na3农村村民4乙二胺四乙酸、5毫米,1毫米phenylmethylsulfonylfluoride, 5 ng / ml抑肽酶,5 ng / ml亮抑酶肽,20毫米三羟甲基氨基甲烷/盐酸,液pH值8.0),通过离心分离。蛋白质浓度测定采用BCA分析工具包(美国皮尔斯Inc .,罗克福德,IL)。50微克的总蛋白皮肤溶解产物使用SDS凝胶电泳分离。转移到硝酸纤维素后,特定的蛋白质用抗血清检测提出了反对F4/80 (AbD Serotec) Ly-6G (Gr-1) (BD Pharmingen),环氧合酶(Cox) 2(开曼群岛,安阿伯市,美国),αsma (Dako、斯特鲁普、丹麦),phospho-signal换能器和转录激活(STAT) 3 (Y705) phospho-Akt (S473)(细胞信号,法兰克福,德国)抑制剂的核因子κ(我κB) -α(圣克鲁斯、海德堡、德国)和β肌动蛋白(σ)。二次抗体结合辣根过氧化物酶和增强化学发光(ECL)检测系统用于可视化蛋白质。Phenylmethylsulfonyl氟化物、二硫苏糖醇抑肽酶、氟化钠和Na3农村村民4来自σ。亮抑酶肽和ocadaic酸来自BioTrend(科隆,德国)。ECL检测系统获得Amersham(弗莱堡,德国)。
2.9。酶联免疫吸附试验(ELISA)
量化的小鼠il - 1β巨噬细胞炎性蛋白(MIP) 2,或者血管内皮生长因子(VEGF)165年使用各自的小鼠蛋白质进行Quantikine ELISA试剂盒(研发系统、威斯巴登、德国)根据制造商的指示。
2.10。分析Neoepithelia
地区neoepithelia测定使用ImageJ分析项目(http://rsb.info.nih.gov/ij/)。
2.11。统计分析
数据显示为±SD方法。数据分析使用未配对的学生的t测试原始数据。统计比较以上两组是由方差分析(方差分析,Dunnett的方法)。
3所示。结果
3.1。高脂肪饮食(HFD)诱发肥胖和胰岛素抵抗和延误正常关闭伤口
C57BL / 6 j使用HFD野生型老鼠,它提供了58%的卡路里是饱和脂肪酸的190天。老鼠6周大,喂养时开始。动物对照组收到标准控制食物的饮食(CD)。的长期吸收HFD导致体重显著增加(图1(一))。HFD-induced肥胖不是一个明显的胰岛素抵抗的发展的老鼠。饥饿的老鼠HFD集团的基础血糖的水平升高(图展出1 (b),左面板)和严重受损的间隙严重增加血糖水平在一个油气痕迹(图1 (b)右面板)。观察到的葡萄糖耐量HFD-treated老鼠伴随着hyperinsulinaemic状态,显著提高循环瘦素水平(图1 (c)),它的代表可以特性发展中HFD-induced 2型糖尿病小鼠(27]。内联与公布的数据,ob / ob老鼠严重胰岛素抵抗(图1 (b))和hyperinsulinaemic [28)(图1 (c)左面板)。由于功能的损失ob瘦素基因产物(29日),ob / ob循环的老鼠缺乏瘦素(图1 (c)右面板)。
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我们开始受伤的老鼠,当我们向超重/肥胖和糖尿病的存在表型HFD-feeding组(图1)。受伤在HFD-induced进行肥胖和糖尿病老鼠,CD-fed瘦老鼠和遗传性肥胖和糖尿病ob / ob老鼠。受伤后,我们通常观察到明显延迟急性伤口关闭与肥胖和糖尿病小鼠表型(HFD,ob / ob)。五天受伤,伤口在HFD-fed和受损ob / ob老鼠直径增加(图2(一个)左面板)。这一发现是由伤口横断面的组织学分析领域,展示了一个大伤口边缘的距离neoepithelia(图2(一个)右面板)。在这些数据的支持,伤口边缘HFD和上皮细胞ob / ob老鼠也缩小(图2 (b))。在受伤后第七天,CD老鼠完全reepithelialized的伤口,而上皮形成仍不完全在HFD老鼠(图2(一个),对面板和数字3 (c)和4 (c)HFD)。此外,伤口的ob / ob小鼠受损(图受伤后在5至7天2(一个)、中、右面板),甚至经过11天的治疗(数据未显示)。在这个时间点,伤口的CD和HFD老鼠完全封闭(数据没有显示)。
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3.2。皮肤损伤变化的循环介质水平
值得注意的是,受伤的皮肤组织也介导显著的系统性影响。循环胰岛素的水平表现出明显的降低CD -受伤和HFD-treated老鼠,但不是ob / ob老鼠(图2 (c))。此外,循环中瘦素减少CD和HFD老鼠(图2 (d))。然而,胰岛素和瘦素水平明显高于留在这个老鼠在修复治疗。Ob / Ob老鼠没有产生的功能ob基因产物(28,29日]。基底肿瘤坏死因子α水平低,所有的动物,而不是依赖于肥胖和不改变(图受伤2 (e))。
3.3。长期存在的伤口巨噬细胞和中性粒细胞在HFD和ob / ob老鼠
控制伤口炎症是至关重要的正常皮肤修复(30.- - - - - -32并被描述在增强db / db和ob / ob老鼠(13,17]。因此,我们决定大量巨噬细胞(图3)和中性粒细胞(图4)愈合组织,我们假设有关的更多数量的白细胞会观察HFD小鼠受损的治疗条件。为此,我们独特的细胞标记的表达限制用于巨噬细胞(溶菌酶)或中性粒细胞(lipocalin),代表持续表达基因在这些细胞类型,允许全面量化细胞数量的各自的渗入伤口部位(13,17]。一般来说,ob / ob老鼠表现出最严重失调的巨噬细胞和中性粒细胞涌入:溶菌酶M(图3(一个))和lipocalin(图4(一))mRNA水平仍很大程度上提高伤害。这是符合强大和持久macrophage-specific F4/80 [33)(图3 (b),较低的面板)或Ly6G (GR-1)特殊信号34)(图4 (b)从后期的伤口,降低面板)在免疫印迹组织溶解产物。相比之下,溶菌酶的动力学M和lipocalin mRNA表达CD和HFD老鼠之间只有适度改变(数字3(一个)和4(一)),但这两个巨噬细胞或neutrophil-specific表达各自的F4/80(图3 (b))和Ly6G(图4 (b)年底)蛋白显著增加急性修复HFD老鼠。这一观点也符合数量增加的两个细胞类型评估伤口组织的免疫组织化学分析(数据3 (c)和4 (c))。
3.4。促炎在伤口处标记蛋白的表达
接下来,我们决定被趋化因子的表达模式MIP-2皮肤受伤后,白细胞的趋化因子释放之前渗透到伤口的网站(13,17,32,35]。再一次,ob / ob老鼠最明显失调MIP-2蛋白质表达水平最高的伤口组织(5和7天)(图5(一个))。有趣的是,MIP-2蛋白质的存在开始不是结束前不同的急性修复所有实验群体之间在受伤后第五天。特别是,延迟愈合HFD老鼠仍然不是增加MIP-2水平的7天修复,当MIP-2近了CD老鼠(图5(一个))。
(一)
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(c)
il - 1β释放激活骨髓细胞在急性炎症过程和代表一个分子的指示器,炎症条件(36- - - - - -38]。il - 1β在CD诱导在受伤,HFD和ob / ob然而,老鼠HFD老鼠显示延迟增加细胞因子(图5 (b))。然后急性伤口反应表现出类似的il - 1的含量β在CD和HFD老鼠。再次,il - 1β水平仍然高企尤其是急性伤口HFD和7天晚ob / ob老鼠。il - 1β然后坚持晚期慢性伤口ob / ob伤口愈合的老鼠,但拒绝基线CD和HFD老鼠(11天)(图5 (b))。
cox - 2是差异表达在皮肤伤口39]。在这里,我们观察到的快速感应cox - 2蛋白在所有老鼠伤害(图5 (c))。在CD老鼠,cox - 2表达后开始下降(图受伤后第五天5 (c),上半部分)。相比之下,cox - 2蛋白仍然增加也在第七天修复HFD老鼠(图5 (c)中间面板),而ob / ob老鼠表现出最明显失调甚至年末伤口组织(图5 (c)较低的面板)。
3.5。伤口血管生成是打扰HFD-Induced肥胖和糖尿病的老鼠
血管生成过程在伤口基本上为正常皮肤修复(30.,31日]。VEGF是关键的伤口血管生成(40]。因此,VEGF表达和伤口血管生成已严重受损db / db和ob / ob老鼠(16,41,42]。只有在这里,我们表明,伤口VEGF水平适度不同CD和HFD老鼠修复(图的第五天6(一))。内联与公布的数据(25,43),重要的是在这里,VEGF在伤口边缘角化细胞(图表示6 (b))。成熟的的形成,VEGF-expressing伤口边缘上皮细胞被推迟在HFD老鼠(图6 (b);还指图2 (b))。当伤口CD老鼠epithelialized受伤后第七天(图6 (b);参见图2(一个)),伤口边缘上皮细胞仍然HFD老鼠的VEGF蛋白表达(图6 (b),对面板)。使用内皮标记CD31检测伤口血管生成,我们表明,伤口VEGF信号似乎翻译成一个健壮的血管生成反应只有在CD老鼠(图6 (c)左面板)。相比之下,HFD老鼠表现出严重干扰血管生成反应甚至在第七天的修复(图6 (c)右面板)。
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3.6。Myofibroblast分化和伤口收缩受损HFD-Induced肥胖和糖尿病的老鼠
接下来,我们研究了在伤口处myofibroblasts的样子,正如我们所观察到的伤口收缩HFD和延迟ob / ob老鼠(图2(一个))。为此,我们评估了αsma mRNA和蛋白表达(图7)作为标记的最后分化myofibroblasts [44]。成纤维细胞分化成的失败在伤口处myofibroblasts HFD老鼠可以显示延迟出现αsma mRNA(图7(一)左面板)和蛋白质(图7 (b))的动物。在这里,新创的出现αsma蛋白质比一天早7修复是不可见的。内联,免疫组织化学显示myofibroblasts主要位于HFD老鼠伤口边缘的存在干扰伤口收缩(图7 (c)右面板)。相比之下,epithelialized伤口的CD老鼠的特点是定义良好的伤口和myofibroblast-mediated收缩组织(图7 (c)左面板)。我们不能发现任何αsma mRNA和蛋白表达的伤口ob / ob老鼠在整个完整的愈合期(数字7(一)和7 (b))。
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3.7。修改激活炎症信号通路在肥胖和糖尿病的老鼠
最后,我们研究了中部典型的信号通路在正常和受损的伤口组织。激活STAT-3 [45),一种蛋白激酶(42)和核转录因子κB (NFκB) (46,47)是涉及皮肤伤口。这里我们看到一个STAT3激活动力学,出现独立于肥胖和糖尿病表型:STAT3磷酸化(Y705)迅速诱导损伤和激活后从第三天开始下降(图受伤8(一个))。相比之下,一个突出的激活一种蛋白激酶(S473磷酸化)仅限于修复在精益CD小鼠的急性炎症阶段,而一个Akt激活没有从肥胖和糖尿病HFD伤口组织ob / ob老鼠在完整的愈合(图8 (b))。前古典促炎NF的激活κB信号通路,IκBα蛋白质必须介绍了蛋白酶体降解释放NFκB蛋白活性的信号(47]。在这里我的消失κBα蛋白质平行精益CD小鼠急性伤口炎症阶段。我的κBα蛋白质在5天再次成为可见的伤口在动物组织,时间点当伤口炎症一般发生(图的分辨率8 (c),上半部分)。然而,一个突出的我κBα信号当时失踪HFD小鼠修复(图8 (c)中间面板)。此外,ob / ob老鼠显示我的缺失κBα随着时间的推移,因此NF的激活κ即使在后期的伤口(图B通路8 (c)较低的面板)。
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4所示。讨论
糖尿病溃疡与高死亡率仍然仍然悬而未决的临床条件(2,3),预计将成为更重要的2型糖尿病的患病率上升在未来二十年48]。药物治疗方案的失败,与血小板源生长factor-BB唯一的例外(49),进一步增加了这令人失望的临床情况。慢性伤口代表不同的皮肤病变不接受正常组织修复的协调进步50]。尽管控制的基本必要性伤口炎症,肉芽组织形成和reepithelialization [30.,31日),diabetes-impaired伤口似乎失去了理想同步事件,导致快速愈合的50]。虽然重要的内在(神经病变、血管问题)或外在(伤口感染、愈伤组织的形成、压力网站)因素的人类糖尿病溃疡(50)只能在一定程度上刺激动物,没有替代品的使用伤口愈合模型2型糖尿病啮齿动物。因此,许多重要的知识对潜在机制的糖尿病大鼠糖尿病溃疡已经通过使用。早期伤口愈合领域的基本文件建立糖尿病患者的使用ob / ob(9),db / db(11]鼠标作为受损的伤口愈合模型。然而,症状的db / db和ob / ob老鼠并不只局限于胰岛素抵抗。瘦素信号潜在的遗传缺陷的动物(29日,51]此外导致食欲过盛,高胰岛素血症、高血糖和明显肥胖(8]。这些表型的变化是由下丘脑瘦素行动的损失,正常的细胞因子调节神经和内分泌电路(52]。由于这些原因,各自的遗传缺陷db / db和ob / ob老鼠主要把明显的肥胖和胰岛素抵抗,实际上产生代谢综合症的模型(53]。
这是更有趣的,因为肥胖相关胰岛素抵抗是目前被认为是坚持的结果低度炎症条件起源于脂肪组织的病理改变沟通导致巨噬细胞激活(20.- - - - - -22]。事实上,标志着脂肪组织之间的病理生理的互连和巨噬细胞激活展览给皮肤修复功能的后果ob / ob老鼠:损耗的伤口巨噬细胞不同的技术(抗体,clodronate脂质体)显著改善组织再生ob / ob老鼠(18,23,54]。因此,这些研究表明,肥胖的明显迹象,紧密连接的2型糖尿病的遗传糖尿病和肥胖ob / ob鼠标(8,29日面积),导致观察到的伤口干扰在动物。
因此,它是合理的在这里探讨皮肤组织修复食源性肥胖小鼠模型及胰岛素抵抗。这样的研究可以确定潜在的差异,优势或捷径使用基因糖尿病和肥胖小鼠伤口愈合实验。我们6个月HFD治疗小鼠导致动物的血糖和胰岛素水平升高。这是根据建立的研究结果表明,6个月随意暴露在高脂肪、简单碳水化合物的饮食产生肥胖、高血糖和高胰岛素血在C57Bl / 6 j小鼠55]。然而,它变得明显,瘦素功能的丧失ob / ob老鼠(29日)导致更严重的hyperglycaemic和insulinaemic州(8,53]。增加HFD-fed小鼠血清中瘦素水平反映了不断增长的肥胖动物的脂肪组织(56]。因此,内分泌和生理参数的确定强烈表明,HFD-feeding导致肥胖和糖尿病的发展在C57Bl / 6 j小鼠表型。
不出乎意料,我们受伤的HFD老鼠导致延迟伤口关闭。三个主要的发现对组织修复HFD老鼠必须强调。首先,主要的干扰影响急性伤口炎症反应,这似乎是长期的。第二,形成正常的伤口边缘上皮细胞被打扰,第三,我们观察到明显损伤myofibroblast分化,因此伤口收缩。这里,myofibroblast分化在伤口组织的损失似乎是最突出的差异基因,诱导糖尿病小鼠模型。没有myofibroblasts伤口的ob / ob老鼠可能反映强烈直接的功能结果转化生长因子(TGF)受损β信号干扰伤口组织的动物。TGF -β1代表的基本信号诱导形成收缩包在正常伤口成纤维细胞(44]。因此,人们很容易认为,一个增广的伤口炎症在糖尿病小鼠可能推动改变的响应性伤口成纤维细胞外部信号,从慢性伤口成纤维细胞隔离透露TGF -干扰信号βII受体(57]。内联与论证、慢性溃疡在人类被抑制为特征的TGF -β受体》和随后缺乏Smad2磷酸化(58]。此外,肿瘤坏死因子-α展品明显延长,高架在干扰伤口的ob / ob老鼠(17),已被证明有说服力地抑制TGF -β1-induced myofibroblast表型的基因在成纤维细胞(59]。因此,强烈加剧伤口发炎ob / ob老鼠(在这项研究中,17])似乎导致观察到的大量损失myofibroblast分化和伤口收缩的结果。
此外,受伤的老鼠导致循环胰岛素和瘦素水平明显下降,这又达到基础水平的修复。尽管发表数据处理系统创伤的影响是有限的,我们的发现出现符合手术创伤后严重降低小鼠胰岛素水平(60]。此外,injury-mediated降低瘦素水平明显表明,循环水平的细胞因子不仅仅是由于脂肪组织质量(56),但也容易受到急性系统性反应如创伤(受伤)。
HFD-induced障碍的伤口发炎,reepithelialization,血管生成和收缩必须被视为与公布的数据从受伤ob / ob老鼠。在确凿的类比条件HFD-treated老鼠,受伤ob / ob老鼠也会表现出减少伤口边缘上皮细胞(10),水平的提高MIP-2, il - 1β(17和cox - 261年)的蛋白质,长期中性粒细胞和巨噬细胞在伤口部位(17,18[],适度改变伤口VEGF水平41)或受损的信号通路54]。由于伤口的整体一致性HFD和条件ob / ob老鼠,它实际上是允许在国家,肥胖症和糖尿病引起的有害效应更明显损伤和延迟愈合ob / ob老鼠。我们的研究结果从ob / ob老鼠显示伤口炎症以及reepithelialization严重受损甚至在后期修复。因此,底层的瘦素缺乏ob / ob小鼠进一步放大皮肤损伤的修复,也可以观察到在食源性肥胖及糖尿病老鼠。因此,我们的数据支持的一般使用ob / ob小鼠模型来研究diabetes-disturbed皮肤修复的基本机制。只要这些差异被认为是仔细和彻底的解释数据ob / ob老鼠拥有强大的优势显示出放大特别是创伤性炎症和组织反应不太强烈了食源性肥胖和糖尿病的小鼠模型。
缩写
| αsma: | α光滑的肌肉肌动蛋白 |
| CD: | 食物的饮食 |
| cox - 2: | Cyclooxygenase-2 |
| HFD: | 高脂肪饮食 |
| 我κBα: | 抑制剂的抑制核转录因子κBα |
| MIP: | 巨噬细胞炎性蛋白 |
| 油气痕迹: | 口服葡萄糖耐量试验 |
| PECAM-1: | 血小板内皮细胞粘附分子 |
| 统计: | 信号传感器和转录的激活 |
| VEGF: | 血管内皮生长因子。 |
承认
这项工作是支持的德意志Forschungsgemeinschaft (SFB SFB 553年815年,格兰特FR 1540/1-2和FR 1540/3-1)。