登革热的血清透析和血清转换和亚马逊儿童临床诊断的影响

抽象的

本研究旨在评估亚马逊人口中儿童血清IgG登革热的患病率，以评估12个月内的血清转换率，并估计有多少血清阳性儿童患有先前的登革热临床诊断。我们在2010年和2011年进行了一项基于人口的研究，儿童为6个月至12年，居住在巴西亚马逊的一个小镇的城市地区。通过间接ELISA技术测定对登革扬抗原的IgG抗体的患病率，并在12个月后重新审视血清腺癌以确定血清转化率。结果显示IgG抗体的SEROPREVALING，对登革热型2.9％，年龄，种族和性别之间没有重大关联。在血清阳性儿童中，只有8.4％获得了登革热的临床诊断，临床诊断病例和亚临床病例的比例为1：11。2010年和2011年的血清转换率为1.4％（CI 3.8％至35.1％）。这种儿科人群中登革热的血清透视性低，绝大多数病例未被临床检测，表明难以使儿童的临床诊断和高频率的无症状感染。

1.介绍

登革热是一种主要的传染病，2010年估计了9600万个症状病例[1］.登革热的一个重要特征是四种血清型（DEN-1，DEN-2，DEN-3和DEN-4）以及最近对新血清型的确认[2]，可能在某一地区同时发生，导致某一血清型的某些流行病。这种情况在巴西发生过，1981年为DEN-1和DEN-4血清型，1990年为DEN-2血清型，2002年为DEN-3血清型。最近一次流行包括696,472例报告病例[3.- - - - - -7］.

该疾病的另一个重要特点是，在流行期间，暴露人群对循环血清型产生了保护，但对其他血清型却没有，从而产生了血清型特异性免疫。由于多年来血清型的循环发生了变化，老年人保持了他们已经获得的免疫力，并获得了对其他血清型的免疫力，但每年新生儿都可能易受新的循环血清型的影响[8，9］.

在巴西，2010年报告了100万个案例，每10万名居民的发病率为530.3例，对应于全球报告的60％以上的案件[10］.根据卫生部的数据，2010年至2012年期间报告的严重病例(登革热出血热和伴有并发症的登革热)为32 445例，其中1 465例死亡[11，12］.该期间年龄组的案件数量为1岁以下的儿童为20,185名，1-4岁儿童47,420名，9-9岁儿童90,845名，10-14岁儿童140,279人。他们占这3年中的9％和8％的病例[11］.

在巴西，登革热病例的分布各不相同[6，7］.2001年，在北部地区发现了51,309例病例，但在2010年，病例数几乎翻了一番(98,632例)。2010年，北部地区的登革热病例发病率在巴西排名第二(每10万居民621例)，2011年是全国最高的(每10万居民752例)。北部地区最近发病率的增加可能是由三个主要因素引起的:由于对该地区的投资和便利人员过境的新公路和贸易路线的建设，以及2011年从罗赖马重新引入血清型4，以及一种病媒从大型城市中心转移到小型亚马逊地区，导致移民增加[13- - - - - -15］.2011年，阿克里州是巴西登革热发病率最高的州，每10万居民中有2571.7例。2014年，在连接里约热内卢Branco和Cruzeiro do Sul的BR-364铺设完成几个月后，在Vale do Jurua首次报告了近100例本地登革热病例[16］.因此，Acre预计登革热流行的新焦点很快将出现在naïve主题的免疫领域，这表明登革热再次成为巴西亚马逊地区的一个主要问题。

关于登革热在儿科年龄组的临床特征，最重要的问题之一是诊断难度，因为提出的标准（头痛，止血疼痛和肌痛）难以在幼儿中测量[17］.比斯瓦斯等人[18]报告说，在尼加拉瓜检测出登革热血清学阳性的儿童中，有25%不符合世界卫生组织(世卫组织)提出的诊断标准。此外，与大多数老年患者的情况相反，几种小儿发热性疾病可能包括在鉴别诊断中[19]，使登革热的诊断复杂化，并要求15岁以下患者完成全血细胞计数(CBC)的临床诊断[17］.

虽然发现临床病例有助于估计登革热的流行情况，但在普通人群中进行的血清学调查使我们能够确定无症状感染并深入了解病毒的传播，这有助于提高对登革热的认识，特别是在儿科年龄组。2010年至2011年，我们在巴西亚马逊西部阿克的一个小镇对儿童进行了一项血清学调查，以确定针对登革热抗原的抗体在这一特定年龄组的血清流行率。

2.受试者，材料和方法

2．1．研究区域

1976年，阿西斯巴西公司成立于橡胶种植园地区的老社区。2003年，人口估计为3667人，38%的人口居住在农村地区。2010年，估计人口为6075人，其中61%居住在城市地区[20.］.Assis Brasil位于西南344公里的白色河畔，并向东部的胸头胸甲，塞纳塔基（玻利维亚）和南部的博尔佩拉（玻利维亚）和北北部的城市。气候是赤道，热，潮湿的，热带气候的细分。该地区在11月至4月至4月之间主要有雨季，5月至10月之间的主要旱季。平均年度温度为24.5°C，范围为20°C和32°C。全年相对湿度为80-90％。年降雨量在1600毫米和2750毫米之间。本地植被是棕榈树和热带雨林的开放林[21］.

2.2。研究设计和人口

在这项基于人口的研究中，研究人口包括2010年和2011年居住在巴西阿克雷州阿西斯巴西城市地区的儿童。该研究分为流行病学研究和血清转化研究。

登革热患病率研究包括6个月至12年的儿童样本，居住在2010年1月至2月之间的Assis Brasil城市地区。儿童使用家庭健康计划卫生工作者维护的记录。该研究向父母或法定监护人解释，并在研究开始之前获得了知情同意。使用健康记录确定了500万儿童6个月和12年之间;411（80.2％）同意将其血液测试过抗登革热的抗体。

登革热血清转化研究包括2010年研究中确定的411名接受检测的儿童中，6个月至12岁的292名血清阴性儿童。2011年，在第一次血样采集12个月后，这些儿童再次接受了检测。2011年1月和2月采用问卷调查和静脉血采集方法收集数据和生物样本。在巴西阿西斯收集了关于孩子的年龄、性别、自我报告的种族、出生地点和居住时间的信息。该儿童的母亲或监护人还被问及，该儿童之前是否从卫生工作者或医生那里得到过登革热的临床诊断。血清转化的目的是检测之前对登革热抗体呈阴性的受试者，以及在2010年至2011年间任何时间感染了登革热病毒的受试者。然而，到2010年1月还没有检测到IgG的最近的登革热感染是不可能排除的。

2．3.样本采集及抗体检测

我们用带凝块激活剂的无菌真空管收集3 - 5ml静脉血。将样品离心，血清被稀释并保存在−20°C，直到进行血清学检查。根据制造商的说明书，使用商业酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对血清样本进行检测，间接定性检测针对登革热抗原血清型1、2、3和4的免疫球蛋白G (IgG)抗体(PanBio, Inverness Medical Innovations Australia Pty Ltd.， Australia)。

2.4。统计分析

使用SPSS 13.0软件(SPSS Inc.， Chicago, IL)创建数据库。采用方差分析(ANOVA)确定各自变量的分布情况，比较均值，采用卡方检验或Fisher检验比较频率或比例，显著性确定在α= 0.05。

在2010年和2011年之间计算了整体血清转换率和置信区间，使用了用于R 2.14.0（统计计算，维也纳）软件的第21.0（R基础）的二项式精确概率计算epicalc包。还使用相同的程序计算特异性年龄层的血清转换率。当差异被认为是统计学上的用Fisher或Chi-Square测试获得的值小于0.05。考虑到黄金标准血清系统之前，母亲或监护人报告的母亲或监护人报告的信息的积极和消极预测价值也在已经进行了登革热。

2.5。道德方面

该研究是2009年联邦ACRE大学伦理研究伦理委员会批准的儿童健康项目的一部分（协议编号23107.008153 / 2010-92）。在研究开始之前，从每个参与者的父母或法定监护人获得知情同意书。

3.结果

在2010年接受检查的411名儿童中，211名(51.3%)为男性，200名(48.7%)为女性。平均年龄5.15岁(中位3.9岁，最低6个月，最高11.8岁)。在该市平均居住时间为4.79年(中位数= 3.79，最低15天，最高11.8年)。在出生地点方面，397个孩子出生在阿克里，3个出生在秘鲁亚马逊或玻利维亚，1个出生在Rondônia, 8个没有列出出生地点。从种族分布来看，22.1%的孩子是白种人，2.8%是黑人，7.5%是印度人，67.6%是黑白混血。关于是否存在登革热症状，1.9%的儿童在其一生中的某个时候曾有过登革热发作，据其母亲或监护人报告。

IgG抗体对12岁以下儿童登革热血清型抗原的患病率为2.9％（12例），97.1％的儿童（399名儿童）中为阴性。年龄组的阳性测试患病率没有统计学意义（)、竞赛()或性别(）.在12例血清学阳性的儿童中(表1)， 11人出生并自出生起就一直生活在巴西阿西斯，只有1人出生在另一个城市阿克。

报告有登革热临床诊断的儿童(2.7%)和否认一生中有过登革热的儿童(12.5%)的登革热抗体流行率没有统计学上的显著差异。）.然而，在12名血清学呈阳性的儿童中，只有1名报告以前曾患登革热(见表)2）.

血清转阴率为1.4%(可信区间为3.8% ~ 35.1%)。2011年，只有4名儿童检测出抗体，其中2名2至3岁，1名5岁以上。

4.讨论

在过去10年里，阿克雷的登革热病例数量大幅增加。2004年报告4,458例，2009年上升至19,406例，2010年上升至34,316例[12］.这些案件大部分发生在州首府。在阿克的其他城市，登革热病例直到2010年之后才增加。巴西阿西斯市2004年仅报告了1例登革热病例，2009年报告了30例，2005年至2008年期间没有报告任何病例。

2010年，阿克里州一些内陆城市报告的登革热病例数量有所增加[12］.Assis Brasil的发病率最高（每10,000名居民409例），其次是Acrelancia（287.1个案例/ 10,000名居民），Brasiléia（175例/ 10,000名居民），Xapurí（161.7例/ 10,000名居民）和Capixaba（152例/10,000名居民）。随着Acrelancia除外，这些城市沿着IntercopeAnic Highway，于2003年铺设，可能促进了国家西南地区疾病的内化。在英亩的其他市政当局中，2010年报告了一些案例，但在地理上孤立的市政当局（没有道路访问），2010年没有报告案件[12］.与此同时，随着最近向南克鲁塞罗铺设BR-364, 2014年已报告近100起案件[16，预计未来几个月或一年还会有更多。在巴西国家卫生信息系统2010年报告的249例病例中，只有5.22% [12]发生在0到10年的儿童。

2009年至2010年期间，向卫生部报告了居住在巴西阿西斯的12例0至10岁儿童登革热病例。因为在我们的血清学研究只有8.3%的儿科病例通过血清学鉴定临床发现(因此11亚临床病例的比例每例症状),受感染儿童的数量在2009年到2010年之间可能是大约十倍报卫生部。tian et al. [22]发现越南2至10岁儿童临床检出的每例病例中，有3-6例为无症状登革热感染。关于本研究中发现病例的来源，大部分血清阳性儿童可能是在巴西阿西斯市感染的，因为91.6%的参与研究的儿童出生在该市。

在我们的研究中最重要的发现是，大多数具有可检测到的登革热病毒抗体的儿童并没有被卫生保健专业人员或其家人临床诊断。在亚洲进行的研究表明，年龄与登革热症状的出现有关，无论是在初次感染还是继发感染中，无症状登革热在某一特定年份在社区中出现，会导致随后数年出现严重病例[23，24］.

诊断儿童登革热遇到的困难是由许多因素引起的，例如影响儿科人群的大量发炎疾病以及儿童对登革热的特定信号来说25，26］.因此，儿科人群中的登革热特征是一个非常重要的话题，强调了为这一人群建立新的诊断标准的重要性，因为并不总是可用实验室检测进行诊断。

基于人口的研究，以确定登革热的儿科患者血清转化是在巴西和全球的稀缺。格雷厄姆等人。[27]报告说，1994年至1995年期间，印度尼西亚4-9岁儿童的发病率高达7.7%。泰国人[28]报告了2004至2005年间越南学龄前儿童中17.3%的血清发病率。tian et al. [22]发现越南2-10岁儿童血清转阴率在16.9%至40.4%之间。在尼加拉瓜和泰国进行的其他研究表明，儿童血清转化的比率不同[24，29］.Teixeira等[30.]发现巴伊亚州萨尔瓦多0-3岁儿童的血清转换率为33.2%，主要危险因素是年龄。然而，传播水平的差异和每个地区的特点使这些数据很难与我们的研究进行比较。

该研究的横断面设计排除了在2010年1月至2月首次采血前几天发生的登革热感染的血清转化的最佳评估。在这种情况下，这些儿童在接受采访时还没有检测到IgG抗体。然而，即使在这种情况下，它也表明了病毒最近的传播，这将最大限度地减少该研究可能的分类偏差。

5.结论

本研究显示了登革热病毒在巴西亚马逊的偏远地区，并表明难以诊断儿童登革热。需要进一步研究登革热病毒与儿科群体之间的关系，以评估无症状感染的真正比例，以及在亚马逊等诊断资源差的环境中诊断困难。

利益冲突

作者声明论文的结果没有抄袭，也没有在其他地方发表。他们还宣称他们没有利益冲突。

致谢

作者感谢参与这项研究的人们的合作。他们还感谢当地卫生和政府部门的帮助，以及帮助确定研究中所包括房屋的卫生工作者。作者感谢圣保罗大学病毒学实验室的工作人员在血清学检测中的技术问题上提供的帮助。这项工作得到了阿克联邦大学(UFAC，巴西)和阿克技术基金会(FUNTAC，巴西)的支持，通过“SUS公告MS/CNPq/FDCT-FUNTAC/SESACRE赠款电话号码的研究计划”。01/09及01/10 "[拨款编号04/2010及11/2010]。国家研究委员会(CNPq，巴西)和UFAC提供研究奖学金。

参考文献

1. S. Bhatt, P. W. Gething, O. J. Brady等人，“登革热的全球分布和负担，”自然，卷。496，没有。7446，pp。504-507,2013。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
2. D. Normile，“令人惊讶的新登革热病毒破坏了疾病控制的努力，”科学，第342卷，第2期2013年第415条第6157条。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
3. M. G. Teixeira, M. C. N. Costa, M. L. Barreto和E. Mota，“巴西的登革热和登革热出血热流行:根据趋势、监测和控制经验，需要什么研究?”Cadernos de Saúde Pública，第21卷，第1307-1315页，2005。查看：谷歌学术搜索
4. A. P. A. T. Rosa, J. M. Rocha, O. V. Silva, Z. C. Lins，“Surto de Dengue em Boa Vista, território de Roraima, Brasil，”Boletim Epidemiologico，第14卷，93-100页，1982年。查看：谷歌学术搜索
5. C. H. Osanai, A. P. Rosa, A. T. Tang, R. S. Amaral, A. D. Passos, and P. L. tail， " Surto de dengue em Boa Vista, Roraima， "Revista do Medicina Tropical deSãoPaulo，卷。25，pp。53-54,1983。查看：谷歌学术搜索
6. Ministerio da Saude;秘书处Vigilância em Saúde;department amento de Vigilância Epidemiológica，Casos确认了FHD, seconddo ano de confirmação。巴西，Grandes Regiões e Unidades Federadas, 1990年至2012年，[互联网专论]，Ministério da Saúde, Brasília，巴西，1990。
7. MinistérioDaúde，秘书长威尔··尼西亚emsaúde，以及Deallameodevigilânciaepidemiológica，Casos de dengue。Brasil，GrandesRegićese Unidades Federadas，1990年2012年，2013年。
8. p.r.s. de Melo, e.a. G. Reis, i.a. Ciuffo, M. Góes, r.e. Blanton，和m.g. Dos Reis，“登革热3血清型病毒在巴西巴伊亚州的引进和传播的动态”，奥斯瓦尔多·克鲁兹研究所的纪念，卷。102，没有。8，pp。905-912,2007。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
9. I. Rodriguez-Barraquer, M. T. Cordeiro, C. Braga, W. V. de Souza, E. T. Marques, D. A. Cummings，《从重新出现到高度地方化:巴西登革热流行的自然史》，PLoS被忽视的热带病，第5卷，第5期。1, p. 935, 2011。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 世界卫生组织，“登革热和登革热，”事实表117，世界卫生组织，日内瓦:瑞士，2013，[互联网专论]，http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs117/en/index.html．查看：谷歌学术搜索
11. 巴西。Ministerio da Saude。邮箱:vigilância em saúde。department amento de Vigilância Epidemiológica，Óbitos por feb Hemorrágica da登革热。巴西，Grandes Regiões e Unidades Federadas, 1990年，2012年[互联网专著]， Ministério da Saúde, Brasília，巴西，2013。
12. Ministério da Saúde(巴西)和巴西信息部，DATASUS，互联网数据库，Ministério da Saúde, Brasília，巴西，2013，http://www2.datasus.gov.br/DATASUS/index.php?area=0203．
13. J.G.Touthão，G.O.Penna，E. H. Carmo等，“登革热病毒血清型4，Roraima State，Brazil”，新发传染病，第十七卷，第二期5, pp. 938-940, 2011。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
14. r·c·罗卡Epidemiologia da dengue na Cidade de Rio Branco，Acre，Brasil，NoPeríodode 2000 A 2007 [Ph.D.论文]，2011年的大学德圣保罗。
15. Globo G1, São，圣保罗，巴西，2013，http://g1.globo.com/ac/acre/noticia/2013/04/infestacao-do-aedes-aegypti-preocupa-em-cruzeiro-do-sul.html．查看：谷歌学术搜索
16. 南克鲁塞罗登记了100例登革热病例。São圣保罗，巴西，Globo G1, Globo 2014，http://g1.globo.com/ac/acre/noticia/2014/04/cruzeiro-do-sul-confirma-quase-100-casos-de-dengue.html．
17. Ministério da Saúde, secretary ia de vigilância em saúde(巴西)，Departamento de Vigilância Epidemiológica，登革热:diagnóstico e manejo clínico: criança，互联网专题，Ministério da Saúde, Brasília，巴西，2011，http://portal.saude.gov.br/portal/arquivos/pdf/web_dengue_crian_25_01.pdf．
18. H. H. Biswas，O. Ortega，A. Gordon等，“尼加拉瓜病毒感染的早期临床特征”尼加拉瓜儿童：纵向分析，“PLoS被忽视的热带病，第6卷，第2期3，文章e1562, 2012。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
19. A. Jain和U. C. Chaturvedi，“婴儿登革热：概述，”有限元免疫学和医学微生物学，第59卷，第59期2，页119-130,2010。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 巴西地理研究所Estatística，这是2010年的法式烤面包卷，Instituto Braasileiro de Geografia eEstatística，2010年，http://www.ibge.gov.br/home/estatistica/populacao/censo2010/tabelas_pdf/total_populacao_acre.pdf．
21. Governo do estado do Acre，“Sistema Estadual de Informações Ambientais，”Governo do estado do Acre，里约热内卢Branco，巴西，2012。查看：谷歌学术搜索
22. N. T. K. Tien, C. Luxemburger, N. T. Toan等，“越南龙宣县学童登革热感染的前瞻性队列研究”，皇家热带医学和卫生学会学报，卷。104，不。9，pp。592-600,2010。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
23. K. T. Thai, H. Nishiura, P. L. Hoang等，“原发性和继发性感染期间临床登革热的年龄特异性”，PLoS被忽视的热带病，第5卷，第5期。6, p. 1180, 2011。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
24. T.P. Endy，S. Chunsuttiwat，A.Nisalak等，“易缺陷和症状急性登革热病毒感染的流行病学：泰国Kamphaeng小学儿童的前瞻性研究”美国流行病学杂志，卷。156，没有。1，pp.40-51,2002。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
25. M. B. Rodrigues, H. B. Freire, p.r. Corrêa, M. L. Mendonça, M. R. Silva, E. B. França，“É possível identifica dengue em crianças a partir do critério de caso suspeito preconizado pelo Ministério da Saúde?”•Pediatria第81卷第1期3，页209-215,2005。查看：谷歌学术搜索
26. C. Sirivichayakul, K. Limkittikul, P. Chanthavanich等，“泰国ratchaburi儿童登革热感染:队列研究。2临床表现。”PLoS被忽视的热带病，第6卷，第2期文章编号e1520, 2012。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
27. R.R. Graham，M. Juffrie，R. Tan等人，“伊耀达塔，印度尼西亚的日惹4至9岁儿童登革热的前瞻性血清化学研究。1995 - 1996年，研究美国热带医学和卫生杂志第61卷第1期3，第412-419页，1999。查看：谷歌学术搜索
28. K. T. D. Thai, T. T. Nga, N. van Nam等，“越南南部儿童原发性登革热病毒感染的发生率和对其他黄病毒的反应”，热带医学与国际卫生，第12卷，第2期12, pp. 1553-1557, 2007。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
29. a . Balmaseda, S. N. Hammond, Y. Tellez等人，“在尼加拉瓜马那瓜学童的前瞻性研究中抗登革热病毒抗体的高血清流行率”，热带医学和国际卫生，第11卷，第5期。6, pp. 935-942, 2006。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索
30. M. G. Teixeira, V. Morato, F. R. Barreto, C. M. C. Mendes, M. L. Barreto和M. D. C. N. Costa，“学龄前儿童登革热病毒感染发病率的风险因素”，热带医学和国际卫生，第十七卷，第二期11页，1391-1395,2012。查看：出版商的网站|谷歌学术搜索

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