文摘

在这项研究中,在体外四种植物精油的抗菌活动(t . schimperi,e .桉,r . officinalis,m . Chamomilla)对细菌和真菌进行了评估。研究进行了使用琼脂扩散法筛选最有效的精油和琼脂稀释法测定最低抑制浓度的精油。本研究的结果显示,精油的t . schimperi,e .桉,r . officinalis对细菌和真菌是活跃。的抗菌效果m . chamomilla被发现较弱,没有表现出任何抗菌活性。的最低抑制浓度的值t . schimperi是15.75毫克/毫升的大部分时间在这项研究中使用的细菌和真菌。其他精油的最小抑制浓度的值的范围在15.75 - -36.33毫克/毫升对细菌进行测试。这项研究强调了精油的抗菌活性e .桉,m . chamomilla,t . Schimperi,r . officinalis。结果表明,t . schimperi显示强大的抗菌活性,这可能是潜在的候选人制备抗菌药物准备。

1。介绍

传染病代表一个连续和日益威胁人类的健康和福利。他们巨大的发病率和死亡率的主要原因是在世界各地的,尽管发展中国家的主要部分的负担1]。除了通常的传染病,医院和机会性感染的发病率大幅上升。造成的感染人数新、重现或耐药病原体一天天增长,和免疫缺陷患者住院比例的增加导致了增加严重和侵入性感染(2]。为了填补这些空白,急需新的抗菌药物。

植物的药物仍然是一项重要的资源,尤其是在发展中国家,应对严重的疾病。大约60 - 80%的世界人口仍然依赖传统药物治疗常见疾病(3,4]。在埃塞俄比亚,传统疗法不仅代表人民斗争的一部分,满足他们的基本药物需求也文化信仰的组成部分。80%的埃塞俄比亚人仍然依赖传统医学(5]。

精油做过多的药用价值6]。从叶子的精油胸腺schimperi拥有打虫药、抗菌和抗真菌活性(7];蓝桉叶子油可以刺激免疫系统,有助于水痘病例,感冒、流感、麻疹、传染性疾病(8,9];洋甘菊chamomilla花油对皮肤护理、痤疮、过敏、疮、烫伤、湿疹、炎症皮肤病,伤口和用于感染(10,11];迷迭香属officinalis叶子油具有抗肿瘤和抗炎的行动和抗菌活性12,13]。

在埃塞俄比亚北部Ankober药用植物被用作传统医学治疗不同人类和牲畜疾病从远古以来当地人民。然而,没有研究在体外以及在活的有机体内抗菌活性的胸腺schimperi,洋甘菊chamomilla,蓝桉,迷迭香属officinalis对常见的微生物。因此,本研究主要关注在体外精油的抗菌活性胸腺schimperi,洋甘菊chamomilla,蓝桉,迷迭香属officinalis对所选菌株的细菌和真菌。

2。材料和方法

2.1。化学药品和试剂

以下化学品、溶剂和药物使用:Mueller-Hinton琼脂,营养肉汤,MacConkey琼脂,营养琼脂,甲醇,无菌钻,磁盘扩散抑制剂区阅读统治者,庆大霉素,氯霉素,二甲亚砜,干燥器,Sabouraud葡萄糖琼脂(SDA),马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),手套,96%乙醇,液体肥皂和硫酸钠。

2.2。细菌和真菌

这次调查中使用的细菌微生物测试伤寒沙门氏菌,甲型副伤寒沙门氏菌,鼠伤寒沙门氏菌,志贺氏杆菌物种,铜绿假单胞菌,金黄色葡萄球菌,大肠杆菌和四个真菌(两个毛癣菌属仕达屋优先计划。和两个曲霉属真菌仕达屋优先计划。),它是由埃塞俄比亚捐赠公共卫生研究所(EPHI)。

2.3。收集的植物材料

新鲜的叶子胸腺schimperi收集从·昆蒂(Ankober区)。新鲜的叶子迷迭香属officinalis(迷迭香),蓝桉和成熟的花头洋甘菊chamomilla收集来自Ankober区和植物标本的身份被确认由国家植物标本在亚的斯亚贝巴大学,埃塞俄比亚。

2.4。精油的制备

新鲜的叶子迷迭香属officinalis(迷迭香),胸腺schimperi和成熟的头状花序洋甘菊chamomilla树荫下干。胸腺schimperi(30克)被带进一个1000毫升圆底烧瓶和400毫升蒸馏水被添加到它,然后它被Clevenger-type蒸馏器2小时(14]。迷迭香属officinalis(30 g)摄于圆底烧瓶1000毫升和300毫升蒸馏水被添加到它,然后蒸馏Clevenger-type 3人力资源得到无色油器(14]。洋甘菊chamomilla(30 g)摄于圆底烧瓶1000毫升和400毫升蒸馏水被添加到它,然后它被Clevenger-type蒸馏器4人力资源(14]。获得的原油被转入分液漏斗和石油是上层分开。石油被干过无水硫酸钠和存储在分析前−4°C。

新鲜的叶子蓝桉完全沉浸在1000毫升圆底烧瓶与蒸馏水,然后hydrodistilled满杯Clevenger-type装置给无色油。这个过程持续了3小时。石油被允许足够的时间,需要澄清的是,然后仔细收集冷凝水排水后。石油被干过无水硫酸钠和储存在−4°C到使用[14]。

2.5。的抗菌检测

2.5.1。剂的制备

细菌用于研究由接种分离成营养肉汤和孵化24小时37°C。真菌菌株用于研究由接种分离株对SDA / PDA和孵化30°C。

2.5.2。抗菌药物敏感性试验

琼脂扩散法是用来确定抑制区。Mueller-Hinton琼脂为细菌,SDA毛癣菌属spp和PDA曲霉属真菌种虫害。大约20 - 25毫升的熔融介质冷却到45°C和添加presterilized盘子大小(150毫米)。在这些16-24-hour-old文化的细菌物种,48-hour-old文化曲霉属真菌种虫害和7-day-old文化毛癣菌属种虫害传播使用无菌棉拭子和每一个微生物均匀分布在整个琼脂板表面获得均匀板表面的增长。佩特里盘子被允许干燥。约3 - 4井盘直径6毫米和5毫米深度是穿孔的帮助下在琼脂表面消毒钻将提取的油样品。大约50μL(每个工厂的纯精油被分发到各个井和10 mcg庆大霉素作为一个积极的控制。二甲亚砜(DMSO)作为消极的控制。板块在室温下然后离开30分钟,然后孵化30°C为7天毛癣菌属种虫害和盘子曲霉属真菌48小时与细菌和盘子是孵化24小时37°C。孵化后,用直尺测量区域的抑制,结果发表在毫米(mm)。所有的测试运行一式三份,平均结果是(15,16]。

2.5.3。确定最低抑制浓度(MIC)

最低抑制浓度测定用琼脂稀释法。麦克风是评价植物提取物显示抗菌活性对任何生物在琼脂扩散试验。执行这个测试在每个提取五个浓度(250毫克/毫升,125毫克/毫升,62.5毫克/毫升,31.25毫克/毫升,和15.75毫克/毫升)采用翻倍系列稀释植物提取物在营养肉汤第五稀释。隔夜孵化暂停每个生物在营养肉汤准备和50μL是添加到所有的试管和准备孵化24小时37°C。孵化后,用无菌棉拭子,每个管悬挂接种于营养琼脂,看看是否抑制细菌增长。生长的细菌在固体媒体表明,特定浓度的提取无法抑制细菌。麦克风被定义为最低浓度的抗菌隔夜孵化后抑制微生物的明显增长(17]。

2.6。数据分析

所有的测量每个试验重复三次,结果是平均数±标准差。数据分析使用windows使用SPSS 17.0版和描述性统计。

3所示。结果

3.1。精油分析

精油的主要成分的测试提出了四种植物被GC / MS在桌子上1根据其组成百分比(14]。

3.2。抗菌活性

3.2.1之上。抑菌圈测定

精油测试表现出不同程度的抗菌活性与细菌病原体,除了进行测试洋甘菊chamomilla精油,未能抑制增长的测试细菌病原体(图1)。整体的精油t . schimperi,e .桉,r . officinalis显示类似的抑制细菌的生长。t . schimperi表现出几乎最高的活动对所有测试细菌以12-33毫米的范围,如(表所示2)。t . schimperi显示最大的抑菌圈直径33毫米反对美国epidermidis。的油e .桉表现出显著的抗菌活性,观察其抑菌圈10-32毫米。的油r . officinalis也抑制了检测细菌的生长,抑制区6-32毫米。测试中使用的标准药物,庆大霉素的抑菌圈是21毫米。庆大霉素未能抑制的增长志贺氏杆菌spp。负控制DMSO显示没有检测细菌的生长的抑制作用。

如表所示3,所有的油测试对两个表现出不同程度的抗真菌活性毛癣菌属spp。(数据2和3)和两个曲霉属真菌spp。(数据4和5)。所有不同的精油测试,所表现出的最大抗真菌的活动t . schimperi抑制所有检测真菌的生长。t . schimperi显示最大的抑菌圈直径。e .桉和r . officinalis表现出对一个或多个微生物抗真菌效果。毛癣菌属spp1被抑制e .桉和r . officinalis27.3和28.6毫米的抑制区,分别。然而,毛癣菌属对这两种精油spp2并不敏感。的油e .桉和r . officinalis表现出温和的活动对曲霉属真菌spp。另一方面,m . chamomilla没有抑制所有检测真菌的生长。控制DMSO没有抑制作用。作为起诉在表3,t . schimperi抑制了所有测试真菌的生长浓度低于15.75毫克/毫升。

3.2.2。最低抑制浓度

麦克风的精油t . schimperi,e .桉,r . officinalis提出了表4。自洋甘菊chamomilla精油未能抑制检测致病菌的生长,MIC测定试验没有进行。获得的结果的基础上,t . schimperi显示显著的抗菌效果。t . schimperi精油抑制的增长几乎所有测试细菌浓度低于15.75毫克/毫升。然而,它需要更高的浓度(23.25毫克/毫升)抑制增长铜绿假单胞菌。另一方面,可以从表4,e .桉精油的抑制增长测试细菌浓度15.75 - -31.25毫克/毫升。r . officinalis不像其他有效;它表现出更少的抗菌活性与麦克风测试细菌值范围15.75 - -36.33毫克/毫升。的最低浓度r . officinalis精油的美国epidermidis无法被发现生长< 15.75毫克/毫升使它那么有效吗t . schimperi。

4所示。讨论

传染病代表一个连续和日益威胁人类的健康和福利。传染病的细菌来源,如金黄色葡萄球菌,沙门氏菌spp。,志贺氏杆菌spp,构成了发病率或死亡率的主要原因在埃塞俄比亚这样的发展中国家1,17]。霉菌的感染也是常见的疾病在发展中国家。虽然有各种治疗传染病的药物、微生物产生耐药性对于大多数传统的药物疗法。因此,有需要新的有效的治疗方法,效果更佳。药用植物是新化学物质的重要来源,有益的治疗效果。今天,大量的药物是由植物活性对许多疾病(18]。

在这项研究中,从四种植物精油的抗菌效果,t . schimperi,e .桉,r . officinalis,m . chamomilla,对细菌和真菌进行了测试。在目前的研究结果表明,提取的精油通过hydrodistillation应用同一浓度变量对抗菌效果金黄色葡萄球菌,链球菌,伤寒杆菌,美国epidermidis,大肠杆菌,志贺氏杆菌spp。铜绿假单胞菌,两个毛癣菌属spp1,两曲霉属真菌spp。在体外。四种植物,胸腺schimperi埃塞俄比亚是全面有效所特有的对所有测试生物体。

其中一个模型用于研究在体外抗菌活性的植物提取物的抑菌圈测量。这项研究的结果显示,抑制检测细菌和真菌的生长,因为它被测量抑菌圈。胸腺schimperi导致更高的抑菌圈的范围12 mm-33 mm对细菌。这种植物的精油是发现最活跃的细菌对所有用于本研究。同样的,t . schimperi也被发现展览整体优势比其他植物提取物抗真菌活性。最可能由于麝香草酚,精油的主要成分和化合物发现的最宽的频谱活动对多种细菌和真菌菌株的19]。,此外,香芹酚的展品杀菌、杀虫抗菌活动和抗癌的抗肿瘤活动的主要成分是油(表1)。因此,这两个组件可以负责强大的抗菌活性胸腺schimperi。本研究发现的结果与其他研究结果揭示了这种油的各种抑制作用金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌,大肠杆菌(20.]。

在这项研究中提取的精油e .桉叶展示了强大的抗菌活性。这些结果符合Bachir和贝纳里的报告8),显示摘录e .桉具有抗菌活性对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。抗菌活性的观察可以归因于在这个研究α蒎烯和1,8-cineole组件存在于石油。然而,另一项研究通过Damjanović-Vratnica et al。21]显示精油的抗菌活性e .桉对测试菌株高于抗菌活性的研究。观察区别这两个研究可能的原因可能是由于更大的内容1、8-cineole(85.82%),负责抗菌活性(21]。1的比例组成,8-cineole本研究的内容范围是63.00%,低于报告由英国药典。石油对真菌表现出温和的活动比预期值较小。这可能是由于更少数量的1,8-cineole在桉树精油已经称为组件,抑制真菌的生长。

的叶子r . officinalis精油表现出对检测细菌的抗菌作用。这一发现同意研究在其他地方(22,23]。这种油的主要成分,α蒎烯,已经知道对菌株表现出抗菌活性(金黄色葡萄球菌,葡萄球菌epidermidis,铜绿假单胞菌,弗氏志贺菌,肺炎克雷伯菌,伤寒沙门氏菌,粘质沙雷氏菌,大肠杆菌)[22]。精油富含α蒎烯展示了潜在的抗菌活性(22,23]。桥接的双环单萜α蒎烯和β蒎烯显示相当大的生物活性。另一方面,对映体α蒎烯,β蒎烯、柠檬烯和芳樟醇有很强的抗菌活性,23]。抗菌活性显示这些叶子相似的r . officinalis精油分析Derwich et al。22),主要组件α蒎烯。其他研究显示1.8桉树脑,对菌株表现出抗菌活性(大肠杆菌,铜绿假单胞菌,葡萄球菌伤寒,金黄色葡萄球菌,葡萄球菌中间部,枯草芽孢杆菌)[22,24]。油显示中度活动对真菌。包含超过49%的1的桉树脑8-cineole显示抗真菌活性最高(25]。

另一方面,花的m . chamomilla精油并没有显示任何抗菌活性测试浓度,与其他精油与相同浓度表现出抗菌活性。的活动的m . chamomilla观察到精油不同意之前报道的研究(26,27在这种植物提供对不同细菌的抗菌活性。公布的其他数据显示,精油的抗菌活性m . chamomilla显然是相关的吗α蒎烯、莰烯、桧烯1 8-cineole,没药醇氧化物,α没药醇组件(27]。缺乏抗菌活性的原因m . chamomilla可以与更少数量的活性成分特别吗α没药醇(4.139%)与其他出版的数据相比非常低(56.86%)28]。季节性变化和高度负责可变性的植物的次生代谢物。同样,花m . chamomilla精油没有任何抗真菌活性的测试浓度。选择的化合物m . chamomilla花精油包括α没药醇、spiroethers chamazulene, umbelliferone已报告有抗真菌的活动(27,28]。行动的可能机制抑制真菌生长的植物精油,可能在菌丝的隔间与相应的形态变化有关,可能是精油成分之间的相互作用的结果和酶参与细胞壁的合成,影响真菌生长和形态发生。公布的数据表明,α没药醇从m . chamomilla抑制真菌生长的可能通过抑制特定的麦角固醇的生物合成(29日]。如上所述在目前的工作内容α没药醇被认为更少的与其他报告数据。所以缺乏抗真菌活性m . chamomilla精油对真菌可能是合理的测试数量越少的重要组成部分[28]。

测定MIC值进一步显示精油的抗菌活性t . schimperi,e .桉,r . officinalis。麦克风被定义为最低浓度的抗菌,抑制微生物的可见的增长后隔夜孵化(17]。MIC值并没有表现出实质性的变化相比,抑制的趋势显示板扩散法。一般来说,更大的抑制带值与较低的麦克风。在植物研究中,t . schimperi石油被发现展览的整体优势与其他植物相比,其抗菌活性显示麦克风价值较低。这项研究还显示,t . schimperi可以抑制所有检测真菌浓度很低。这个结果进一步加强强烈的精油的抗真菌活性t . schimperi。

总体而言,这并不奇怪,有抗菌活性的差异由于这四种植物群落类型和/或数量的变异植物化学的成分存在。生成的数据从这个研究有区别与其他报告数据。这可能是解释为敏测试条件的差异,提取方法,物种差异,甚至应变应变差异。

5。结论

这项研究强调了精油的抗菌活性e .桉,m . chamomilla,t . schimperi,r . officinalis。结果表明,t . schimperi显示强大的抗菌活性,这可能是潜在的候选人制备抗菌药物准备。的抗菌活动r . officinalis和e .桉油比的更有效t . schimperi油,其抗菌活动并不被认为是无用的。然而,m . chamomilla石油没有显示任何抗菌活性。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

最重要的是,作者感谢全能的神。他们在表达他们伟大的荣誉和债务不断感谢德勃雷Berhan大学研究为融资这项工作和社区服务。他们最大的升值→Ankober项目所有成员的真诚和友善的支持。他们非常感谢所有实验室人员的德勃雷Berhan转诊医院合作以不同的方式在他们的工作。他们也表达他们的感激之情,真诚的感谢德勃雷Berhan大学生物系和实验室工作人员提供设施,使他们能够成功地完成这项工作。