描述的金黄色葡萄球菌在医院隔离,在医学生的城市卡利,哥伦比亚

文摘

介绍。鼻运输耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)代表一个细菌传播的风险。本研究的特点金黄色葡萄球菌与医学生,在他们的临床旋转卡利市的一家医院。材料和方法。216名学生参与了这项研究,63隔离金黄色葡萄球菌进行评估的易感性和PCR扩增agr和mec一个基因。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离株的来源是通过分析建立的agr多态性。结果。29.2%的学生被殖民金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和鼻运输率为23.6%和14.3%。三个agr组(agr二世,agr3)确定;的agr我组是最常见,患病率为35%;这群来自社区的起源。结论。目前的研究表明医学生携带金黄色葡萄球菌菌株,蔓延的威胁他们的社区和医院环境。

1。介绍

金黄色葡萄球菌耐甲氧西林(MRSA)是目前全球关注的细菌(1,2]。它负责广泛的community-associated耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染,特别是在没有危险因素的年轻个体软组织(3- - - - - -5),在医院,特别是在重症监护病房(ICU) [1,6]。最严重的情况下耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性是由mec一个基因;这些菌株可以同时获得致病性基因使他们能够开发更激进的感染(1]。

无症状的运输金黄色葡萄球菌在健康个体已被证明具有较高的发病率,尤其是儿童,年轻人,和卫生保健工作者7- - - - - -10]。医学生代表医疗人员的一个重要部分,一般都在频繁接触社区或医疗环境,并且可能传播细菌和其他社区成员或易感患者,分别为(10- - - - - -16]。

流行病学研究的患病率在拉丁美洲的医院进行报告金黄色葡萄球菌从20到60%在卫生领域学生殖民10- - - - - -13),一个重要的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的比例高于在欧洲(14- - - - - -16]。

流行病学的知识在我们的环境中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的状态循环有助于建立控制措施,防止病原体的传播通过充分利用生物安全壁垒的医疗人员,包括医学生。在这个意义上,两个方面,必须考虑是否金黄色葡萄球菌由医疗人员的intrahospital起源或社区在医院病房,以及它是如何传播。

分子的方法,比如多态性的分析agr基因,允许确定隔离产生的可变性和起源流行疫情。根据这个基因的变异模式,到目前为止,四个变量被定义,计价的I - IV组(17]。隔离属于第三组相关感染与社区相关联,而第二组检测主要在菌株分离intrahospital水平(18,19]。

本研究的目的是建立隔离的遗传多样性金黄色葡萄球菌和检测的存在mec基因的菌株分离从无症状临床医学学生旋转阶段在卡利市的一家医院。

2。材料和方法

2.1。研究人群

在研究过程中,481年的医学生在临床前和临床轮换周期;216名学生签署了知情同意和满足纳入和排除标准,其中包括过去三个月内没有接受抗生素治疗,而不是呈现呼吸道或皮肤疾病。共有119名妇女和97名参与者被人在医院实践从10月到2010年12月在圣胡安de Dios卡利市的医院。进行了横断面描述性研究和评估和批准的伦理和生物伦理学委员会大学教职员工的健康。

2.2。培养条件

样本用无菌棉签通过涂片的鼻粘膜和皮肤的每个学生。在微生物实验室样本立即处理。隔离是由编码管理,因此,尊重学生的机密性。

孤立的物种葡萄球菌属,样品被播种在甘露醇盐酚红琼脂(Oxoid有限公司,汉普郡、英国)和孵化24至48小时37°C。的识别金黄色葡萄球菌是通过发酵的甘露醇选择性琼脂(中黄颜色),凝固酶试验阳性反应,显微镜观察革兰氏阳性球菌在集群直接扩展革兰氏染色剂。的金黄色葡萄球菌从coagulase-negative分化葡萄球菌(缺点)通过使用DNase测试。

2.3。抗生素敏感性测试

抗菌药物敏感性试验是进行配对样本使用建议后的琼脂纸片扩散法的临床和实验室标准协会(CLSI) [20.]。

进行这个测试,一个标准化的金黄色葡萄球菌由Mc Farland接种(标准0.5)在Mueller-Hinton琼脂培养基总经理(沙劳打电话化学能够允S.A.),然后sensi-disks被放置:新青二(OXA, 1μ30 g)、头孢西丁(福克斯μg)、头孢氨苄(LEX 30μg)、庆大霉素(创10μg)、环丙沙星(CIP 5μg)、红霉素(红霉素,15μg)、克林霉素(CLI, 2μg)、磺胺甲恶唑/甲氧苄氨嘧啶(SXT 1.25/23.75μ30 g),四环素(春节μ的背影,g)、氯霉素(30μ30 g),万古霉素(货车μ10 g), imipenem (IPMμ10 g)和青霉素(笔、U) (Oxoid)。核实sensi-disks的行动,在敏感性分析写明ATCC 25923株金黄色葡萄球菌被用来控制。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离测定了苯唑西林根据评价的结果和头孢西丁和检测mec一个基因(21,22]。

2.4。分离株的分子分析

参考菌株的DNA和细菌分离提取使用修改后的协议Cheng和江,基于细菌裂解使用蔗糖25%,10毫克/毫升的溶菌酶,和1毫克/毫升的蛋白酶K,在56°C (23]。

建立耐甲氧西林,mec基因是放大,后李和他的同事们报告的协议使用引物:MR1, 5′(478) -GTG棉酚TTG GCC AAT ACA GG - (497) 3′, MR2, 5′(1816) tga GTT CTG CAG TAC CGG 3′- (1797)22]。

确定四个agr组,440个基点的碎片,572个基点,406个基点,和588 pb,分别独立使用一组引物而被放大,由普遍意义上底漆,agr基因序列5′ATG CAC ATG GTG CAC ATG颈- 3′,和一个特定的引物为每个组反义,agr我5′gtc ACA AGT行动ATA AGC TGC GAT-3′,agr二5′gta TTA CTA ATT棉酚亚美大陆煤层气有限公司TGC猫AGC-3,agr三世5′ctg TTG AAA亚美大陆煤层气有限公司柠檬酸法AAA AGC TC-3′,和agr四5′cga TAA TGC CGT AAT ACC CG-3′(18]。

在50个PCR反应进行μL MgCl组成的反应混合物的体积₂25毫米,200μ0.5米的四个核苷酸,U的Taq DNA聚合酶(表达载体),每个引物10 pmol, 1μL的DNA溶液thermocycler GeneAmp PCR系统2400。在这项研究中金黄色葡萄球菌写明ATCC 25923菌株用于积极控制。

2.5。统计分析

单位的分析从鼻腔拭子细菌分离获得的微生物和分子特征进行登记和相关运营商的社会人口特征,如性别和学术学期。微生物变量的存在金黄色葡萄球菌和程度的易感性或抗性抗生素评估,分为不同的度,因此:电阻(1),中间易感性(2),(3)和易感性,根据每个抗生素的标准建立了金黄色葡萄球菌。分子的变量存在mec一个基因的变异agr基因。数据库是由感兴趣的变量使用Excel的程序。

的存在金黄色葡萄球菌被确定为永久的和性别比例的时间。在殖民金黄色葡萄球菌,关联分析在不同的变量如抗生素抗性表型不同,存在mec一个基因,agr基因变异,牢记学术实践学期,每天的小时数:3个小时对于三年级学生来说,五个小时对于四年级的学生来说,第五年学生8小时,12小时第六年的学生。流行的不同agr基因变异决心MRSA和MSSA表型。

研究结果统计分析使用描述性统计、卡方检验(χ²),值(统计显著)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的风险因素分析殖民了使用SPSS统计软件包(版本20.0,SPSS, Inc .)、芝加哥、IL,美国)。

3所示。结果

总共有29.2%(63)的学生在不同的服务在医院被殖民金黄色葡萄球菌。表1显示了隔离根据学生的学年;它可以指出,四年级的学生最多的隔离(45%)()。鼻运输的频率金黄色葡萄球菌皮肤明显高于(20.4%与8.9%;或= 2.870;)和五年级学生的最高频率金黄色葡萄球菌的鼻子比皮肤(18.2与1.8%;或= 5.294;)(表1)。

3.1。抗生素敏感性分析

隔离与阻力β内酰胺抗生素分布在大量的学生的学业成绩,有差异(表90和22%2)。分离株耐抗生素抑制蛋白质合成是注册在18%和90%之间,对抗生素抑制核酸合成注册在11%和44%之间。

3.2。分离株的分子分析

放大的mec基因检测的五隔离同时呈现oxacillin-cefoxitin阻力和四只隔离耐头孢西丁(14.3%)。多药耐药性表型是独特的特性在这些与同时抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离株β内酰胺、大环内酯物、氨基糖苷类、喹诺酮抗生素(表3)。

共有54隔离是积极的agr基因扩增与普遍存在的具体差异agr团体之间的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)隔离。分为35细菌分离株(55.6%)agr组我,31(49.2%)菌株MSSA,和4(6.3%)株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;差异具有统计学意义()。

5耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离株(9.3%)被发现agr第二组;的mec所有的隔离和基因检测agr第三组被发现只在14 MSSA隔离(22.2%)(表4)。

大多数的金黄色葡萄球菌菌株分离出属于学生agr组我紧随其后agr第三组(41株),最后agr组二(9株)分布在隔离的第四,第五,第六年学生。的agr第三组我发生在主要的百分比(25.9%和18.5%,分别地。)大四学生(数据未显示)。

4所示。讨论

目前的研究证据的存在金黄色葡萄球菌与29.2%的医学生在临床患病率旋转,和鼻马车是一个风险因素。在拉丁美洲国家的趋势是相似的百分比在50 - 20%之间(10- - - - - -13]。在欧洲,流行的鼻的载体金黄色葡萄球菌据报道在25% (14- - - - - -16]。在亚洲,殖民的患病率金黄色葡萄球菌在中国、马来西亚和印度医学生是注册在31%的情况下24]。

尽管一些研究报告的频率增加鼻运营商作为医学生有更大的接触临床旋转期间医院环境25,26),我们的结果并没有显示显著差异在鼻运营商和永久的时间在医院环境。然而,大量的分离株耐imipenem决定在三年级学生和更多的隔离与耐氨基糖甙类、红霉素、喹诺酮类永久的学生更多的时间在医院(表2)。

我们的研究的高频率决定金黄色葡萄球菌分离株耐青霉素、头孢氨苄、imipenem红霉素、氯霉素、克林霉素、四环素、庆大霉素、功效、环丙沙星、多药物耐药性孤立的存在。这些隔离进化的反应选择性压力对微生物区系居住在病人,然后传递给学生,或者可以直接生成的微生物区系的学生。

类似的结果在李和他的同事们所做的研究(22];所有与耐头孢西丁隔离了mec一个基因。达塔和他的同事在他们的研究中,证明了头孢西丁诱发的PBP2a蛋白质编码的表达mec一个基因;头孢西丁磁盘扩散试验诊断中性能最好的表型方法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(21]。

的因素之一,允许在无症状携带者耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的存在是由于摄入抗生素,加强皮肤和粘膜表面上生长的有机体(2,6]。它已经表明,使用青霉素与收购相关的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;同样,使用氟喹诺酮类原料药、大环内酯类和头孢菌素增加了这些菌株的风险27]。

尽管在哥伦比亚据报道,大多数的MRSA菌株不院内的起源2),越来越多的报道显示流行病学变化的流行菌株的社区起源(5,28]。

本研究确定的医院起源(AH-MRSA)抵抗β内酰胺抗生素和多种抗生素(表3),根据agr这些隔离位于基因分析agr二组,一组符合医院的起源(17,18]。

在无症状携带者AH-MRSA菌株的存在是在社区传播的潜在风险;此外,这些菌株耐多药性与一些治疗选择。

然而,我们还发现隔离具有社会性质的起源(AC-MRSA)在四个耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离分组agr即鼻MRSA运输成为一个重要的储层和源病原体传播的人员,社区,和耐心。

观察表3MSSA隔离提出抗耐多药的特点。在西班牙进行的一项研究表明MSSA隔离易感性也显示耐红霉素(13.5%)、克林霉素(11.5%)和环丙沙星(1.9%)16]。

此外,MSSA隔离被分为49.2%和22.2%agr我和agr三世,分别将它们与分子社区起源。

几项研究已经发现MRSA和MSSA循环在哥伦比亚有克隆USA300遗传相似性29日,30.]。这通常克隆(ST8-MRSA-IVa)港口瑞典克朗,seq,bsaB,lukF-PV,lukS-PV基因,编码的葡萄球菌肠毒素K和Q,细菌素,和金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素(PVL)。此外,克隆通常包含一个类型agr操纵子。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的传播也可以收购造成的SCCmec在无症状携带者金黄色葡萄球菌在社区(30.]。因此,在医学生可能导致无症状MSSA运输耐甲氧西林金黄色葡萄球菌在社区和医院之间的传播。

尽管一些风险因素的殖民金黄色葡萄球菌是年龄、性别、住院治疗,抗生素的使用,和一些疾病和栖息地3,12),在人口进行了分析,这些变量没有评估,成为研究的一个限制。然而,这项研究的结果,无症状携带者的重要存在的证据金黄色葡萄球菌在医学生从他们开始他们的临床实践。此外,增加耐甲氧西林金黄色葡萄球菌殖民被发现在学生花更多的时间在医院里,因为它是在五年级学生展示最多的航空公司。

利益冲突

作者没有利益冲突声明。

确认

作者感谢总体研究方向(DGI)大学圣地亚哥卡利经济支持进行研究;协调员感激也表示Bellazmin领域研究的中心,研究教师的健康(cei)支持。

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