识别和体外药敏布鲁氏菌物种与人类的布鲁氏菌病

文摘

布鲁氏菌病是一种全球性人畜共患疾病,对公众健康产生重大影响。由于实验室获得感染的高风险,有限的实验室调查进行这种生物,包括详细的鉴定和敏感性研究。布鲁氏菌melitensis是人类最常见的病原学的代理布鲁氏菌病在这个地区。体外敏感性模式对选择抗菌药物使用评估E以及。所有隔离被指出是敏感抗菌药物测试除了利福平在高架麦克风> 1μg / mL被指出在30出41隔离测试。

1。介绍

人间布鲁氏菌病是最常见的一种人畜共患疾病报告在世界范围内,每年新发病例达500000多的近似(1]。疾病所致布鲁氏菌spp。,这是一个挑剔的革兰氏阴性细菌。疾病是获得直接接触受感染动物,食用受感染的乳制品,或产生的气溶胶吸入任何活动期间处理隔离的实验室2]。

布鲁氏菌病的患病率高的国家之间的不同地方的特性与地中海国家,中东,亚洲西南部,在拉丁美洲一些地区(1,3]。实现国家监察计划和牲畜的大规模疫苗接种计划导致了根除的疾病在欧洲、澳大利亚、新西兰和加拿大(3]。布鲁氏菌病的发病率和患病率在马来西亚是未知的。布鲁氏菌病的发病率在马来西亚隔离后的首次报道流产布鲁氏菌在1950年和布鲁氏菌是1963年在牲畜(4,5]。随后,人类布鲁氏菌病病例激增,敦促国家计划的启动“Area-Wise根除牛布鲁氏菌病”,在1979年实现全国范围内。这项工作在马来西亚牛布鲁氏菌病的患病率明显下降从1979年的3.3%到1988年的0.23% (5]。有限的生物安全三级(BSL3)设施所需的处理布鲁氏菌分离株侵犯的正确识别生物。因此,布鲁氏菌病病例被诊断。布鲁氏菌分离株的灵敏度模式遇到了在这一地区也未知的体外敏感性测试尚未完成经常由于以上原因。因此,临床病例治疗是基于之前文献报道以及世卫组织的建议(6]。目前,四环素、利福平、功效、复方磺胺甲恶唑(SXT),链霉素,和其他氨基糖甙类,分别或组合,为布鲁氏菌病最常用的抗菌药物治疗。然而,敏感性降低生物链霉素(7)、利福平(8,9],SXT [10,11)最近报道需要适当的调查评估当地分离株的磁化率模式。本研究的主要目的是确定最常见的物种造成布鲁氏菌感染在马来西亚和确定这些临床分离株的易感性模式对常用的抗生素药物。

2。材料和方法

识别方法。这项研究包括41布鲁氏菌种虫害分离收集了从2010年到2011年。隔离都来自血液文化除了一个,这是来自腰椎区域的组织活检。隔离来自马来西亚各地,主要是槟城33隔离(80.6%)、雪兰莪州和吉隆坡2分离株(4.9%),分别和1隔离(2.4%)分别来自Negeri Sembilan,马六甲,玻璃市和吉打州。生物的识别是基于传统的方法,考虑到革兰氏染色剂的特点,菌落形态,有机体的考究的,公司要求₂的增长。生产脲酶、氧化酶和硫化氢,减少硝酸盐亚硝酸盐能力,活性测试使用半固体活性介质,和敏感染料,基本洋红和硫堇(20 - 40的最终浓度μg / mL),也被观察到。与单一的抗血清凝集和M抗原(英国兽医实验室动物卫生机构)也在考虑识别的生物属和种的水平和确定生物体的生物型。这种方法已经被先前描述(14,15]。

抗菌药物敏感性试验。的最低抑制浓度(MIC)值四环素(TC),链霉素(SM)、强力霉素(直流),功效(SXT)、利福平(RF)、庆大霉素(GM)确定使用以及(Biomerieux、瑞典)方法。生物培养液相当于0.5麦克法兰浊度准备和草坪Mueller-Hinton琼脂(BD洗液)补充5%羊血。每个抗生素地带分别放置在接种琼脂和孵化环境空气,35°C 48小时。读数记录后48小时的潜伏期。麦克风被解释为价值的抑制区拦截的规模以及地带。麦克风₅₀和麦克风_90年水平定义为最低浓度50%和90%的抗生素的分离被抑制,分别。三个参考菌株(布鲁b .流产544年,b . melitensis16米,b是1330)被用作控制识别、生物型、抗菌药物敏感性试验。除了这些参考菌株,布鲁2其他生物,大肠杆菌写明ATCC 25922和金黄色葡萄球菌写明ATCC 29213年,也被用作质量控制应变敏感性测试。

3所示。结果

所有的隔离包含在本研究被确定为布鲁氏菌melitensis除了一个隔离标识为是。血清学分型使用特定单克隆抗血清显示,31(76%)的隔离b . melitensi年代是血清型3、7(17%)血清型2,从血清型1和两个(5%)。

解释所有抗生素的MIC值测试是基于断点布鲁氏菌。概述了在CLSI [12除了利福平)。作为这种药物可没有断点,断点生长缓慢的细菌(流感嗜血杆菌)是指13]。所有隔离是敏感抗生素检测利福平除外。只有11分离株(26%)展览麦克风≤1μ利福平的g / mL。麦克风₅₀和麦克风_90年每一种抗生素的值显示在表中1。

基于麦克风_90年SXT是指出,最有效的代理布鲁氏菌。(0.125μg / mL),紧随其后的是四环素和庆大霉素(0.19μ(0.25 g / mL),强力霉素μ链霉素(0.75 g / mL)μ和利福平(1 g / mL)μg / mL)。利福平对布鲁氏菌显示最少的活动,与麦克风水平升高1以上μ30 g / mL中观察到隔离(70%)。因此,所有这些药物被发现是有效的应对布鲁氏菌病除了利福平。的布鲁氏菌是是所有抗生素敏感测试。

4所示。讨论

布鲁氏菌病与偶尔的爆发零星病例主要发生在人与农场动物,尤其是牛、绵羊和山羊在马来西亚。例还指出那些消耗原料奶由于传统认为它有一些隐藏的健康益处。布鲁氏菌病的诊断是由通过血清学检测的抗体或隔离的有机体。然而,疾病的金标准诊断方法是通过隔离的病原体。这种生物是传染性很强的传染性剂10 - 100细菌足以引起感染(16),操纵这些生物认股权证3实验室设施。因此,尝试隔离和标识布鲁氏菌种虫害从临床标本并不广泛执行。误认这些生物与其他生长缓慢的革兰氏阴性,nonoxidizer细菌使用商业测试工具,进一步强调了低可探测的病例数。这导致在马来西亚对布鲁氏菌病的流行病学数据有限。克服这种缺乏信息,我们进行了这项研究,这表明人类的布鲁氏菌病在马来西亚是专门所致b . melitensis。我们发现是一致先前的报道来自不同地区的土耳其,追捕和南美盆地(17- - - - - -19]。

有很多报告布鲁氏菌的敏感性测试,基于不同的方法(20.- - - - - -22]。虽然被指出的方法之间无显著差异(23使用microbroth稀释),磁化率测试是最推荐的方法体外有效性测试的抗生素布鲁氏菌sp。然而,我们选择了以及目前的研究方法被报道是可靠的,可再生的,更少的劳动密集型,耗时少,以及实施实验室获得性感染由于较小的操纵的风险较小的生物过程中17]。

世界卫生组织发布了建议使用强力霉素治疗成人急性感染,加上利福平或链霉素为六周时间(6]。这个建议直到今天仍在使用。然而有报道称,布鲁氏菌病和osteoarticular内脏并发症与复发的风险较小三联疗法链霉素、利福平、强力霉素(24]。审查和30个随机对照试验的荟萃分析25]还得出结论,首选的治疗应结合强力霉素和庆大霉素或三倍(如强力霉素和利福平庆大霉素)方案。即使联合治疗,复发高达10%还报道(26]。然而这些病例复发与治疗剂量不当或不足病人的依从性差而不是抗菌素耐药性(8,27),因此药敏测试还没有布鲁氏菌病病例管理的关键。

强力霉素最规定四环素衍生物已成为布鲁氏菌感染的治疗,因为其优越的药代动力学性质的(28]。在目前的研究中,在测试抗菌药物,麦克风断点四环素和强力霉素被发现在敏感类别和最低的记录。这是先前的报道一致(11,22,29日]。我们的麦克风₅₀和麦克风_90年值低于先前的报告(21,30.]。因此这种药物仍然是一个强大的代理布鲁氏菌病的治疗。类似研究结果指出其他衍生剂,四环素,显示甚至更强的活动相比,强力霉素。然而,最有效的代理与最低的麦克风₅₀和麦克风_90年值记录相比其他代理在这个研究是SXT测试。这证明,代理可以作为很好的替代剂口服治疗。相关的药物而且便宜,副作用较小,布鲁氏菌病的首选剂治疗儿童和孕妇2]。类似的结果由其他一些研究报道证明这种药物的体外活性是一致的(18]。当前的麦克风值也远低于其他地区流行的研究布鲁氏菌(22,30.,31日]。

氨基甙类抗生素,如庆大霉素、链霉素和它的导数据报道也对布鲁氏菌病有效的药物。多中心的一项研究报道,庆大霉素和强力霉素的组合被认为是同等功效的推荐政权的强力霉素和链霉素32]。因此,这可以作为替代如果患者不容忍第一线治疗。前奏曲其广泛使用的主要因素可能是副作用和肠外的管理模式。在这项研究中庆大霉素显示良好的体外活动对所有检测布鲁氏菌分离株报道之前在其他国家(18,28,33]。类似的发现(34)以及低(29日和更高的8对庆大霉素)麦克风值被报道在土耳其。

利福平的断点尚未建立,因此这些生物不能自信地定性为易感,中间或耐药。然而,根据使用的断点,一个令人担忧的模式与我们隔离观察。高架麦克风> 1.0的水平μg / mL检测中高达70%的隔离。这支持了先前的发现减少的利福平布鲁氏菌分离株之间的敏感性。我们的麦克风₅₀和麦克风_90年值是类似于一些报道(28,34,35]然而低于其他人20.,29日]。上面没有显示的隔离麦克风2μ克/毫升。这种升高模式是临床关注的利福平广泛用于布鲁氏菌病的治疗在这个国家。

5。结论

彻底根除布鲁氏菌感染已被证明是难以实现散发病例和偶尔的爆发还观察到在马来西亚,尽管此前采取的措施。在这项研究中,布鲁氏菌melitensis是主要的病原体对人类在这个国家布鲁氏菌病。隔离是易感SXT、强力霉素、庆大霉素、四环素、链霉素。我们报告一个敏感性降低对利福平的大部分检测布鲁氏菌分离株。常规抗菌测试不可行的许多实验室设置,最好避免使用利福平治疗布鲁氏菌病。定期检查监控存在抗性表型的如果可能的话,建议以确保及早发现任何可能发展的阻力和可能导致治疗失败。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

承认

作者感谢卫生总干事,卫生部马来西亚,同意发表这篇论文。

引用

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