文摘
进行这项工作栀子花良性属于家庭茜草科的叶子,是中小但高,落叶树,7.6 9米高的平均。叶用于治疗风湿性疼痛和支气管炎。植物的叶子由coronalolide、coronalolic酸,coronalolide甲基酯,乙基醋酸coronalolate三萜烯(secocycloartanes),等等。甲醇提取物的叶子栀子花良性完全是筛查膜稳定性和抗菌活性。Methanolic叶提取的低浓度栀子花良性了良好的抗菌和抗炎活性,但是更高的浓度相对更突出的抗菌活性在体外与卡那霉素相比。天然药的抗炎作用与阿司匹林的积极控制。Methanolic提取的栀子花良性叶子具有广谱抗菌活性对多种革兰氏阴性和革兰氏阳性微生物链球菌agalactiae,大肠杆菌,铜绿假单胞菌,蜡样芽胞杆菌,志贺氏杆菌sonnei,志贺氏杆菌鲍氏,变形杆菌抑制区,从10到16毫米。提取也显示良好的膜稳定性被认为是具有显著的抗炎作用。
1。介绍
从一开始的文明,是一个极端的人类和植物之间的关系。在古代时期的系统治疗不像今天丰富。古人用来利用几部分的植物在不同的治疗目的。植物不仅用作药物,而且在许多日常工作(如钓鱼、打猎等)的目的。最终,植物的终极看守环境在某种意义上。单一植物可能由许多药用价值的一部分,但事实证明,直接摄入的原油植物是不好的,因为它包含必要的和不必要的组件。不必要的的可能不是所要求的身体康复的目的或其他情形;不必要的组件可能会毒害人的身体在某些情况下。甚至基本组件通过粗提物的摄入可能会导致一个不适当的剂量(1]。
抗菌剂,杀死微生物或抑制其增长通常被称为抗生素。抗生素一词涵盖了广泛的代理像抗菌素,包括抗真菌和其他化合物(2]。这个词在1942年首次使用抗生素Waksman;他使用这个词来描述任何物质对抗生长或杀死其它微生物在高稀释(3]。现代科学的发展,大多数今天的抗生素是第一代抗生素使用的化学改性天然化合物,例如,青霉素,头孢菌素,磺酰胺,喹诺酮等等(4]。
植物化学物质,通常应该是负责抗菌效果使用酚环,生物碱,单宁,等等,最常见。例如,常见的草本植物百里香和龙蒿拥有有效的抗菌、抗真菌、抗病毒活动,包含咖啡酸在植物化学的列表(5- - - - - -8]。的机制还不清楚,但被认为是负责酚醛毒性通过酶抑制微生物的氧化化合物,可能通过与含巯基的组织反应或更多非特异性相互作用的蛋白质(9]。
细菌感染的控制自发现以来一直非常有效的抗菌药物。然而,一些病原体迅速成为抵抗许多首次发现有效的药物。耐药性的发展,以及外观不良副作用的抗生素(10),导致寻找新的抗菌药物特别是药用植物。高等植物已被证明是一个新抗菌药物的潜在来源(11]。
炎症是一种常见的和痛苦的主要原因,每次过去。这些药物被称为可用非甾体抗炎药,也就是说,非甾体类抗炎药物,通过抑制前列腺素的功能。前列腺素是一种内分泌物,释放细胞开始疼痛。抗炎剂块内分泌物合成,抑制COX酶或保护溶酶体膜破裂。植物的叶子栀子花良性用于治疗风湿性疼痛和支气管炎的当地居民(12]。
2。材料和方法
2.1。植物材料
工厂收集的宪兵,孟加拉国的吉大港广阔的丘陵地区,2012年10月。然后被谢赫Bokhtear博士Uddin,吉大港大学植物学系副教授。植物样本,其中包括一米长树枝和树叶的生果,被保存在孟加拉国植物标本,并进一步采取森林研究所(BFRI),再一次确认栀子花良性由植物分类学者Sohel先生。
2.2。提取
使用有机溶剂萃取的植物叶子是由(13]。新鲜的叶子栀子花良性被削减、清洗和风干在室温下(大约10天)。干叶子被研磨成粗粉。粉干重约(500克)浸渍在甲醇。然后Methanolic叶粉的混合是动摇了7天的旋转震动器。提取收集使用Buckner漏斗,Methanolic混合的粉末倒在真空吸力。滤液中含有甲醇的药材提取。甲醇是蒸发温度低于45°C和Methanolic集中药材提取的栀子花良性离开了,重达29克,涌入一个高山管和冰箱里储存在4°C。
2.3。抗菌检测
2.3.1。植物提取物稀释和浸渍盘的准备
股票的解决方案是由溶解10毫克的Methanolic药材甲醇提取物。五个过滤器文件被和穿孔大小均匀的光盘直径6毫米。灭菌滤纸光盘用无菌钳在盘子。示例解决方案所需的浓度(100μ克/片,200年μ克/片,400年μ克/片,500μg /盘)被应用于阀瓣的帮助下微量吸液管在一个无菌条件。这些光盘是离开几分钟在无菌条件完全蒸发的溶剂。标准的光盘被用来测试材料的抗菌活性进行比较。在目前的研究中,卡那霉素盘准备与注入卡那霉素sulfate-injectable剂型(品牌Kantrex)盘。k 30光盘包含30μg /盘使用的抗生素卡那霉素作为比较的标准盘的目的。的在体外纸片扩散试验方法(14抗菌的筛选是用来确定病原微生物的易感性测试复合应用。板扩散试验利用不同浓度的测试化合物吸收无菌滤纸磁盘上在同一板包含一个特定的生物。
2.3.2。用于测试生物研究和节育措施
七病原菌被选为测试,其中两人其余五种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌。收集的这些微生物的纯培养微生物学实验室,国际伊斯兰大学吉大港;菌株用于这个调查是列在表中1。
的抗菌检测进行了层流气流单位和所有类型的预防措施非常维护,以避免任何类型的测试期间的污染。紫外线是开启前半小时在层流罩,以避免任何意外污染。培养皿和其他玻璃器皿消毒在121°C的高压蒸汽温度和压力的15磅/平方英寸15分钟。微量吸液管技巧、文化传媒、棉花、钳、空白光盘,等等,也消毒(15]。
2.3.3。营养琼脂培养基的制备、新鲜文化的致病菌,测试板,和浸渍光盘放置测试盘子
即时营养琼脂培养基(Difco)重锥形瓶中,然后用蒸馏水重组根据规范2.3% (w / v)。当时在水浴中加热溶解琼脂,直到获得一个透明的解决方案是(16]。
营养琼脂培养基制备和分散在许多试管准备偏在每个测试管(5毫升)。这样做是为了准备无菌文化从提供的文化17,18]。棉花和消毒的试管被插在高压釜在121°C的温度和压力的15磅/平方英寸15分钟。灭菌后,试管被保存在一个倾斜的位置凝固。这些被孵化为37.5°C,以确保他们是无菌的。测试生物都被转移到琼脂偏从文化提供的帮助在无菌接种环的条件。循环被烧后的微生物转移仔细避免污染。文化是保持在4°C或更少为12小时,然后细菌生长在37°C孵化24小时,以确保测试生物的生长。这些新鲜无菌文化被用于敏感性测试。
测试板的阀瓣扩散试验准备测试样品(19]。首先,之前准备的营养琼脂培养基倒在15毫升量在每个干净的试管和插入的棉花。培养皿的试管和数量为此在121°C的高压蒸汽灭菌温度和压力的15磅/平方。英寸15分钟,被转移到一个层流气流单元,然后允许冷却45至50°C。测试生物体从新鲜的亚文化手中转移到包含15毫升热压处理过的培养基的试管的帮助下一个接种环在一个无菌条件。那么试管被旋转摇动均匀悬浮的有机体。细菌悬浮液被立即转移到无菌培养皿在一个无菌区。培养皿旋转几次,顺时针和逆时针方向以确保同质分布测试的生物。中倒入培养皿以这样一种方式,为了给一个统一的深度约4毫米。
最后,媒介在层流冷却到室温空气流动单元,这是保存在冰箱在4°C和样本标准浸渍光盘和光盘被播种,subsolidified介质。中凝结了室温在层流气流单元,然后在4°C冷藏24小时为了提供足够的时间抗生素扩散到培养基。板块在37°C孵化24小时在一个孵化器,孵化后,测试样品的抗菌活性测定通过测量直径的抑制区。因此,抑制的区域不同的样品进行比较20.]。
3所示。抗炎(膜稳定)活性测定
3.1。方法和原则
溶酶体酶释放炎症产生各种疾病。据说这些酶的细胞外活动相关的急性或慢性炎症。非甾体类药物通过抑制这些溶酶体酶或行动稳定溶酶体膜。因为HRBC(人类红细胞)膜类似于溶酶体膜,研究检查方式进行的稳定性HRBC提取预测膜的抗炎活性在体外。各种提取物浓度的100年,200年和300年μg / mL,分别是孵化与HRBC单独解决方案(21]。
3.2。过程
3.2.1之上。HRBC膜稳定的方法
各种叶提取物的抗炎活性栀子花良性评估了在体外HRBC膜稳定方法。从健康志愿者血液收集。收集的血液与相同体积的Alsever混合解决方案(葡萄糖2%,柠檬酸钠0.8%、柠檬酸0.05%,氯化钠0.42%,和蒸馏水100毫升)和isosaline离心机。1毫升HRBC悬挂,相同体积的试验药物在三个不同浓度,100,200,300μ克/毫升,是补充道。所有测定混合物在37°C孵化30分钟和离心机。上层清液的解决方案是估计的血红蛋白含量用分光光度计在560纳米22]。当时红血球溶解的百分比计算的公式如下考虑:
保护的比例可以因此计算给出的方程如下:
这里“OD测试”是光学密度或测试样品的吸光度和“OD控制”是光密度或吸光度的负面控制。
这里,消极的控制使用Alsever的解决方案与血液,它不含有阿司匹林或Methanolic提取的植物材料。的吸光度-控制被发现(表0.2423)。
4所示。结果与讨论
树叶的Methanolic提取的抗菌活性栀子花良性测量采用纸片扩散法。不同浓度的100μ克/片,200年μ克/片,400年μ克/片,500μg /盘测量并与压抑的区域标准产生的抗生素,卡那霉素在30岁μ克/盘。
被认为对选择性抑制细菌的区域在特定浓度(表2)。研究了Methanolic提取植物的叶子栀子花良性显示更高的活动对E。杆菌,志贺氏杆菌sonnei,链球菌agalactiae。400年在更高的浓度μg /盘和500年μ克/片,提取也表现出良好的抑制铜绿假单胞菌分别为13毫米,16毫米。然而,提取对革兰氏阴性细菌都没有活动变形杆菌(图1)。
从100年的提取浓度范围μ克/毫升到300μg / mL保护人类红血球膜对溶解引起低渗的解决方案。在100年的浓度μg / mL,提取抑制红细胞溶血的24.38%由阿斯匹林在100年,这一比例是38.84%μ克/毫升(图2)。自人类血红细胞膜类似于溶酶体膜组件、低渗的预防诱导HRBC膜溶解被视作衡量抗炎活性的药物。获得的结果表明,Methanolic提取的叶子栀子花良性可以显著和剂量依赖性抑制HRBC溶血。
这在体外方法更节约时间,灵活、方便的在其他方面。调查显示良好Methanolic叶萃取精华的能力抵抗细胞溶菌作用浓度很小而标准药物阿司匹林在100μg / mL,虽然不是比阿司匹林。甚至在300年的最高浓度提取μg / mL能够防止溶解33%还低5.84%比阿司匹林,使用时只有100μ克/毫升(图2)。从这个实验的研究,它可能会得出结论,Methanolic提取的叶子栀子花良性植物膜具有良好的稳定性,因此良好的抗炎活动。自从Methanolic提取的叶子栀子花良性进一步显示了显著的抗菌、抗炎作用,实验室研究和化学隔离这种植物的叶子会有效证实有效的药物分子在药理学方面,在这两种类型的制药领域。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。实验作为项目的一部分任务没有外部资金来源,这可能潜在的偏见或操作数据。
确认
作者承认国际伊斯兰大学吉大港,吉大港,提供实验室设施包括微生物学实验室设施和谢赫Bokhtear Uddin博士,副教授,植物学,吉大港大学。作者还要感谢孟加拉森林研究所(BFRI)和Sohel先生(植物分类学者)的友好支持通过完成这个实验。国际伊斯兰大学的药学部门吉大港帮助作者通过提供实验室设备,帮助学生完成他们的项目作为他们的日常工作任务。