探索多样性在挪威包柔氏螺旋体压力来自Ixodes蓖麻蜱虫

文摘

描述的包柔氏螺旋体菌株的Ixodes蓖麻蜱虫是重要的媒介传播病原体的流行病学监测。茎序列分析(二)是一个分子的基因工具高歧视性的力量一直在进化研究和应用的描述包柔氏螺旋体基因型群。二是用于研究基因变异包柔氏螺旋体菌株分离即蓖麻蜱虫Skodje林地的收集。结果表明,50包柔氏螺旋体菌株被分离成36序列类型(STs)没有以前MLST数据库中的代表。一个距离矩阵neighbour-joining树(引导500次迭代)显示四支集群,并且每个支集群代表一个包柔氏螺旋体基因型群。平均成对遗传差异确认基因种集群。等位基因分离的结合包柔氏螺旋体菌株从挪威西北部的菌株MLST数据库,从而确定新的STs。尽管一个高度不同b . afzelii可以预期,人口之间的异质性b . garinii菌株更不寻常。目前的研究表明,菌株之间的循环候鸟和静止的鸟类在这个沿海地区可能的进化中发挥作用b . garinii菌株。

1。介绍

蜱虫被认为是重要的病原微生物的载体在北半球(1),而Ixodes蓖麻蜱虫与多样的微生物群(2]。包柔氏螺旋体螺旋体是一种病原体传染给人类的即蓖麻蜱虫(3),而包柔氏螺旋体burgdorferi理智lato (s.l。)代表一个细菌种类复杂,由几个包柔氏螺旋体与莱姆莱姆疏螺旋体病相关基因种(磅)4]。包柔氏螺旋体burgdorferi美国这篇(砂岩),包柔氏螺旋体afzelii,和包柔氏螺旋体garinii是人类磅的病原体在挪威5,磅的流行是由挪威传染病监测系统监测(msi)。第四个包柔氏螺旋体基因型群,包柔氏螺旋体valaisiana,于2010年在挪威发现蜱虫(5]。这四个基因种被检测到即蓖麻蜱虫挪威西北部[6]。

在最近几年,已经建立了几种基因分型方法进行分析包柔氏螺旋体描述菌株并确定菌株之间的系统发育关系(7- - - - - -11]。茎序列类型(MLST)是一种分子类型的工具,用于描述病原微生物(12],MLST可以用作传染病的流行病学监测和跟踪工具(13]。MLST Urwin和定义的少女,是一个工具基于pcr的看家基因序列进化缓慢。序列用于MLST大约400 - 500年英国石油公司在规模和位于整个基因组来避免偏见(13]。茎序列分析(二)MLST适用于特征密切相关的物种系统发育描述使用基于距离的过程,它包括成对基因的相似之处。MLST /二已经应用于人口研究和分析的包柔氏螺旋体物种在地理区域和新的进化研究和描述包柔氏螺旋体物种。虽然有些MLST /二计划把看家基因和变异度高的地区和非编码基因座(9- - - - - -11],MLST计划在2008年出版margo等人基于管家基因,实现Urwin定义的严格标准和少女7,13]。的包柔氏螺旋体MLST方案是基于放大、测序和生物信息学分析的内部碎片八看家基因(clpA、clpX nifS、pepX pyrG, rplB,放射心电图,和uvrA)[7]。

的包柔氏螺旋体MLST方案可以通过MLST网络(http://www.mlst.net/)。MLST网络允许方便地访问序列来自世界各地(14]。最近,系统发育关系的研究包柔氏螺旋体基因种使用二导致的定义两个新的包柔氏螺旋体物种,包柔氏螺旋体bavariensissp。15),包柔氏螺旋体kurtenbachii(8]。这些新发现表明了高MLST歧视性的力量/二方案提供。Rudenko等人利用MLST描述复合的nifS轨迹中b . burgdorferi轮和包柔氏螺旋体美国菌株。他们的研究结果表明,在某种程度上,应变多样性是影响主机(16]。本研究的目的是利用二描述包柔氏螺旋体菌株分离即蓖麻收集的蜱虫动物群挪威西北部。茎挪威菌株的序列分析可以提供关于应变之间的多样性的知识包柔氏螺旋体菌株在这个地区发现和描述他们的进化相比,欧洲的菌株。

2。材料和方法

2.1。样品

DNA探索即蓖麻蜱虫收集在2012年(531名仙女/ 71成年人)和2013(539仙女/ 64成年人)(图1)被孤立,qPCR的DNA样本进行分析检测的存在包柔氏螺旋体基因种如前所述[6]。共86个样本(79仙女/ 7成人)是积极的包柔氏螺旋体2012年,89个样本(83仙女/ 8的成年人)是积极的包柔氏螺旋体在2013年。茎序列分析使用MLST计划由margo et al。共有50个样本放大所有8个看家基因(clpA、clpX nifS、pepX pyrG,放射心电图,rplB,和uvrA)[7),并提交测序。在这项研究中使用的50株是列在表中1。

2.2。扩增和测序

每个看家基因的扩增是15µ包含7.5 L反应体积µL Mastermix 2.0 x SYBR绿色(应用生物系统公司),0.75µ每个引物(10 Lµ3.00米),µL ddH₂啊,和3.0µL模板DNA。放大的八个看家基因(clpA、clpX nifS、pepX pyrG,放射心电图,rplB,和uvrA)是嵌套引物和降落PCR条件执行clpA、nifS pepX pyrG,放射心电图,和uvrA如前所述(7,8]。放大的clpX和rplB执行与引物被margo等人结合变性的嵌套1组成的降落PCR循环(10分钟,95°C),其次是9周期的变性(30秒,95°C),着陆退火(30秒58°50°C),和扩展(1分钟,72°C)和30周期的变性(30秒,95°C),退火(30秒,50°C),和扩展(1分钟,72°C)的最后一个周期扩展(10分钟,72°C)。凝胶电泳是用来证实的大小和浓度近似为每个放大基因PCR产品。凝胶电泳进行Tris-acetate 2% EDTA缓冲(此种)凝胶染色紧随其后GelRed(美国圣克拉拉Affymetrix)。

PCR产物纯化在一个两步过程ExoSAP-IT(美国圣克拉拉Affymetrix)根据制造商的协议。测序反应进行了10µ包含1 L反应体积µL大染料终结者3.1(美国应用生物系统公司,卡尔斯巴德),1µL 5 x排序缓冲区(美国应用生物系统公司,卡尔斯巴德),0.32µL底漆(10µ4.68米),µL ddH₂啊,和3µL模板DNA。放大了在2720年的一次热循环仪(美国应用生物系统公司,卡尔斯巴德)与1的循环变性(6分钟,96°C),紧随其后的是25周期的变性(10秒,96°C),退火(5秒,50°C),和扩展(4分钟,60°C)。最后,10µL ddH₂O是添加到每个在完成测序反应,和样本存储在-20°C到测序。排序是由欧陆坊MWG操纵子(德国)。

2.3。茎校准和序列分析

每个看家基因的序列被肌肉对齐算法和串接在大型5.1 (17]。与爆炸序列进行分析,确认正确的包柔氏螺旋体基因型群(18]。每一个轨迹和连接的所有8个位点序列进行分析。大型5.1软件被用来画一个距离矩阵neighbour-joining树(引导500次迭代)连接的DNA序列。序列从b . duttonii从爆炸数据库添加了(18根neighbour-joining树。b . duttonii是一个包柔氏螺旋体物种,导致回归热[19]。从四个参考序列的物种从MLST数据库是包含在分析中,b . burgdorferi砂岩(B31),b . afzelii(VS461),b . valaisiana(70865 b),b . garinii(20047)。比较等位基因序列和序列类型(STs)和识别相同的序列,nonredundant数据库(NRDB)使用由沃伦·吉斯”华盛顿大学(http://pubmlst.org/analysis/)。所有已知的等位基因和STs的检索包柔氏螺旋体MLST数据库进行比较(http://borrelia.mlst.net/)。STs MLST数据库中没有发现MLST数据库提交了正确的编号。大型5.1执行统计分析。平均成对遗传差异(组)之间的内部和计算使用木村出现模型。平均产生的替换和同义替换(dN/ d年代使用修改后的Nei-Gojobori方法)计算(Jukes-Cantor)。多态的网站的数量(PS)和核苷酸多样性(π)计算使用日本田岛中立的测试。协会的指数,标准和经典计算使用START2 [20.]。

比较挪威之间的关系包柔氏螺旋体菌株和欧洲包柔氏螺旋体菌株的goeBURST生成最小生成树使用PHYLOViZ 1.0软件(21]。

3所示。结果

总共有50株目前的所有8个位点的测序研究。一个距离矩阵neighbour-joining树(引导500次迭代)(图250)表明,菌株分为36序列类型(STs)(表1),之前没有发现MLST数据库中。neighbour-joining树形成四支集群,,四个集群之间没有共享的等位基因。所有菌株集群一起各自参考物种和包含的等位基因组合到MLST数据库新条目。平均成对遗传差异证实了基因种集群(图3基于基因种阈值(0.017)所定义的margo et al。15]。表2总结每个八看家基因的特征包括在茎的测序分析包柔氏螺旋体菌株。

比较goeBURST分析(水平8分组)显示挪威菌株之间的关系和欧洲株(图4)。goeBURST分析显示,挪威人包柔氏螺旋体人口是最密切相关的拉脱维亚和法国的人口。数据集包含175个独特的STs和信息约246株。在SLV goeBURST分析(单个位点变异)水平除以数据集分成32组2个或更多的STs - 64单例。最大的克隆复杂0 (CC0)有13个独特的STs和代表33株。CC0代表菌株鉴定为b . valaisiana并且包含6 SLVs。所有的SLVs分享pepX、pyrG rplB,和uvrA等位基因。在CC1(9针,22株),预测的基因型是ST 86, 8 SLVs代表10株;因此这是排名最高的基因型。SLVs都一样的clpA clpX,和rplB等位基因。DLV goeBURST分析进行(双位点变异)水平组成的数据集划分为54 CCs 26组有2个或更多的STs和28个单例对象。goeBURST分析进行的电磁阀(三个位点变异)级别将数据集分成33 CCs组成的21组2个或更多的STs和11个单例对象。要求4级分组b . valaisiana是由一个CC goeBURST分析,和一个5级分组所需b . afzelii是由一个CC。7级分组所需b . garinii和b . burgdorferi轮是由一个CC。

挪威STs和SLVs和DLVs特征。挪威菌株分布在整个goeBURST树和聚集在一起各自基因种来自欧洲其他国家。四个分支形成的主要创始人。这四个分支包含四个基因种STs相关,b . garinii b . afzelii b . valaisiana和b . burgdorferi砂岩的最高级别祖先的基因型,ST 86,是一个b . garinii从拉脱维亚应变。

4所示。讨论

挪威的特点是西北地理特征等岛屿,几个深邃的峡湾,高山。景观植被生长和维护的迹象,因此为多样化的野生动物提供适宜的生长条件。超过4000种不同的动物类曾被观察到在这个地区(22]。该地区冬天温和,夏天潮湿,创造良好的条件Ixodes蓖麻蜱虫。包柔氏螺旋体螺旋体病毒在自然界的循环向量和主机之间的,和广泛的可用主机可能影响菌株之间的多样性包柔氏螺旋体(23]。包柔氏螺旋体螺旋菌是专性寄生的生活方式,和他们的循环取决于宿主之间的相互作用和向量(24]。鸟类是水库宿主b . garinii而b . afzelii通常与啮齿动物(15,25]。进化和大范围的决定因素影响水库主机和向量可能影响不同的菌株之间的差异(23,24,26]。水库主机和向量是提交给许多因素如气候、营养和污染有不同的影响取决于地理位置(23,24]。除了影响水库主机提供,相关的复杂的微生物群落即蓖麻蜱虫也主题包柔氏螺旋体螺旋菌微生物竞争和自然选择。内共生体,这些微生物群落是由细菌病毒和原生动物蜱虫的自然栖息地和主机,因此,他们之间的差异不同的地理位置2,27,28]。

茎的序列分析包柔氏螺旋体菌株中发现即蓖麻蜱虫从这个地区高多样性的迹象。大多数菌株b . afzelii和b . garinii,在这一地区的最普遍的基因型群6]。五十包柔氏螺旋体菌株分为36 STs,菌株之间的遗传关系呈现在neighbour-joining树。确定为第一个深支集群包含的压力b . afzelii和29株分离成针。29b . afzelii菌株形成一个高度结构化的人口组成的STs MLST数据库中没有先前描述。2011年,Vollmer等人证明了有限的运动b . afzelii菌株之间的地理位置,只有两个b . afzeliiSTs已确定在一个以上地理位置(22,29日]。b . afzelii菌株被描述为异种的,比较goeBURST分析从英格兰苏格兰和株菌株的显示,有一个有限的运动之间的菌株在英国北部和南部[24,29日]。的传播包柔氏螺旋体螺旋菌与宿主的运动。b . afzelii与小啮齿动物宿主与有限的运动模式,因此创建一个有限的传播吗b . afzelii压力(30.]。收集所有的菌株包括在本研究从四个网站在一个地理区域(图中定义1)。的一些b . afzelii菌株被确定在多个样本,但他们总是在集合地点。

第二个集群包含四个分支b . valaisiana菌株分为2 STs代表新条目到MLST数据库中。第三深支集群包含16b . garinii菌株分为11个STs MLST新条目的数据库。这两个b . valaisiana和b . garinii是bird-associated基因种,先前的研究已经发现,这两个吗包柔氏螺旋体基因种序列类型,已确定在不同地理位置的整个欧洲(29日]。Vollmer等人报道b . valaisiana菌株在欧洲而不是完全单一化b . garinii的迹象正在整个欧洲中部混合人口(29日]。候鸟的传播起着重要的作用b . garinii菌株之间的地理位置。Kjelland等人研究的流行包柔氏螺旋体感染31种候鸟和6种留鸟在挪威南部。包柔氏螺旋体感染被发现在所有鸟类(31日]。研究还表明b . garinii菌株能够流传在陆地周期和海鸟与它们相关的蜱虫Ixodes uriae(32- - - - - -34]。一项研究从2011年确定Comstedt等人b . garinii被发现在海鸟和挪威的人口即uriae(35]。测序的基因间的间隔(IGS)b . garinii菌株seabird-associated表示b . garinii菌株比陆地更加多样化b . garinii压力(36]。所有菌株包含在本研究收集的地理位置有大量观察鸟类。Møre Romsdal县,290种鸟类在2013年曾被观察到鸟类学家(37]。这些鸟代表各种不同的宿主b . garinii岛上,嵌套提供了一个传输的可能性b . garinii成动物,诱导迁移和固定主机之间的循环。的大量候鸟沿着挪威西北部沿海地区支持的介绍b . garinii压力来自多个不同的地理起源和多个水库主机和主机之间的循环过程水库一直在建议中发挥作用的遗传进化包柔氏螺旋体基因型群(29日]。一些b . garinii菌株从目前研究DLVs从中欧和电磁阀的压力,而其他人则水平4和5到中欧STs的连接。在挪威b . garinii紧张,一些SLVs DLVs,和一些更远亲。这可能表明,不同菌株所引入的动物迁徙鸟类在不同的时间,一些菌株可能是由固定主机维护一段时间。核苷酸多样性的计算(π值)显示π值至少两倍b . garinii比b . afzelii。假设一个类似的一代之间的时间b . garinii和b . afzelii,不同的宿主,可能会影响之间的进化速率不同基因型群(26]。有限的地理分布b . afzelii压力使他们进化之间的不同地理位置,但核苷酸多样性地理位置相对较低。b . garinii与候鸟受到更高程度的生态因素,并介绍了株的核苷酸多样性可能反映了动物在不同的时间。

第四个集群包含一个深支b . burgdorferi党卫军隔离物种及其相关的参考。的b . burgdorferi从雌性成年蜱虫轮应变是孤立的。这个基因种的低流行率(6),结合某些挑战与放大所有8个位点,使这一毒株是唯一的b . burgdorferi党卫军纳入本研究。

多态的网站的数量(PS)和核苷酸多样性(π)计算进一步描述包柔氏螺旋体菌株。进行序列分析来识别点突变中发现多种菌株。这些点突变的一个小的贡献之间的遗传多样性连接DNA序列从西北挪威全球其他菌株相比。大多数的点突变是沉默与很少或没有影响或错义突变基因的功能。之间的比例产生的替换和同义替换(dN/ d年代)< 1表明同义替换的数量高于产生替换的数量。这表明该基因不受选择压力和适合二分析。协会指数描述了影响复合的人口和计算在两个方面:使用经典的方法定义为史密斯等人定义的标准方法和使用Haubold和哈德逊38,39]。的为克隆的人口都是很重要的。这个群体的计算值和,发现明显的连锁不平衡。指数协会的估计表明,人口是克隆和重组并没有扮演了重要的角色在这个群体的进化。

茎测序分析提供了知识之间的遗传变异包柔氏螺旋体基因种来自即蓖麻蜱虫从西北挪威。等位基因的组合分离这些菌株与其他菌株MLST数据库。这是第一个茎序列分析包柔氏螺旋体菌株鉴定从挪威即蓖麻蜱虫,50包柔氏螺旋体菌株从挪威代表一个大贡献MLST数据库。这使得挪威和欧洲的菌株之间的比较研究,从而应变的发展创造一个更好的理解包柔氏螺旋体在不同地理位置的基因种在欧洲。高水平的差异b . afzelii人口预期,但内部的分歧b . garinii不同于以前的MLST /二研究人口。候鸟不断引入新的毒株动物沿着海岸线挪威西北部和循环之间的迁移和固定主机将影响菌株的多样性。的一些b . garinii菌株表现出的新引进的动物而其他人则最有可能在固定主机保持更长一段时间。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

承认

作者要感谢Synnøve t Broum帮助收集住蜱虫。

引用

1. j·s·格雷,“Ixodes蜱虫的生物学,特别参考Ixodes蓖麻,“人畜共患生态学和流行病学学会http://www.zooeco.org/。视图:谷歌学术搜索
2. a . k . Tveten和k . k . Sjastad识别细菌感染ixodes蓖麻蜱虫16 s rDNA放大和变性梯度凝胶电泳,”媒介传播和人畜共患疾病,11卷,不。10日,1329 - 1334年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. 美国r . Hengge a . Tannapfel s . k .轮胎r·埃贝尔说g .阿伦特和t·“莱姆莱姆疏螺旋体病。”《柳叶刀传染病,3卷,不。8,489 - 500年,2003页。视图:谷歌学术搜索
4. i m . e . Aguero-Rosenfeld g .问:Wang Schwartz和g . p .蠕虫,”莱姆莱姆疏螺旋体病的诊断。”临床微生物学检查,18卷,不。3、484 - 509年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. 诉Kjelland s Stuen t Skarpaas, a . Slettan”患病率和基因型的理智伯氏疏螺旋体感染lato Ixodes蓖麻挪威南部的蜱虫,”斯堪的纳维亚传染病》杂志上,42卷,不。8,579 - 585年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. a . k . Tveten”流行的理智伯氏疏螺旋体篇,包柔氏螺旋体afzelii,包柔氏螺旋体garinii,和包柔氏螺旋体valaisiana在Ixodes蓖麻蜱虫从挪威、西北”斯堪的纳维亚传染病》杂志上,45卷,不。9日,第687 - 681页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. 盖特伍德g . margo a·g·d·m。她Aanensen et al .,“MLST看家基因捕获地理种群结构和显示一个欧洲的起源,伯氏疏螺旋体”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷105,不。25日,第8735 - 8730页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. g . margo a . Hojgaard r s巷et al .,“茎序列分析包柔氏螺旋体bissettii菌株从北美揭示了一个新的包柔氏螺旋体物种,包柔氏螺旋体kurtenbachii,”蜱及蜱传播的疾病,1卷,不。4、151 - 158年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. d级,d . Postic n . Sertour Livey, f·r·Matuschka和g . Baranton”界定美国伯氏疏螺旋体lato茎物种序列分析和确认的界定包柔氏螺旋体spielmanii sp. 11月”国际系统与进化微生物学杂志》上卷,56号4、873 - 881年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. d . Postic m·加尼叶、茎和g . Baranton”典型的序列分析包柔氏螺旋体burgdorferi的理智lato isolates-description包柔氏螺旋体californiensissp. 11月,genomospecies 1和2,国际医学微生物学杂志》上,卷297,不。4、263 - 271年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. W.-G。秋j·f·布鲁诺·w·d·麦凯格et al .,“广泛分布的high-virulence克隆在欧洲和北美,伯氏疏螺旋体”新发传染病,14卷,不。7,1097 - 1104年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. m . c . j .少女j . a . Bygraves大肠Feil et al .,“茎序列类型:便携式方法克隆种群内病原微生物的鉴定,“美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷95,不。6,3140 - 3145年,1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. r . Urwin和m . c . j .少女”多位点序列类型:全球流行病学工具”微生物学的趋势,11卷,不。10日,479 - 487年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. d . m . Aanensen和b·g·索兰托“茎序列输入网络:mlst.net,”核酸的研究,33卷,不。2,W728-W733, 2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. g . margo s . A . Vollmer m .短号et al .,“一个新的包柔氏螺旋体物种定义为茎管家基因的序列分析,“应用与环境微生物学,卷75,不。16,5410 - 5416年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. n . Rudenko m . Golovchenko n·m·Belfiore l . Grubhoffer和j·h·奥利弗,”美国伯氏疏螺旋体的散度lato螺旋体可以由主持人:包柔氏螺旋体菌株的多样性与蜱虫喂养在一个鸟,”Parasit向量第四条,卷。7日,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. k (d·彼得森:彼得森,g . Stecher m . Nei和s . Kumar“MEGA5:分子进化遗传学分析使用最大似然,进化距离,和最大的精简方法,”分子生物学与进化,28卷,不。10日,2731 - 2739年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. s . f . Altschul t·l·马登a·a·谢弗et al .,“豁裂的爆炸和PSI-BLAST:新一代的蛋白质数据库搜索项目,“核酸的研究,25卷,不。17日,第3402 - 3389页,1997年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. m .巨大y Ushijima, l . y .青木和a . Talbert”检测包柔氏螺旋体duttonii,这种回归热代理在坦桑尼亚中部,由鞭毛蛋白以基因为基础的嵌套式聚合酶链反应在蜱虫,”媒介传播和人畜共患疾病,1卷,不。4、331 - 338年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. k·a·乔利·e·j . Feil M.-S。Chan和m . c . j .少女”序列类型分析和重组测试(开始),“生物信息学,17卷,不。12日,第1231 - 1230页,2002年。视图:谷歌学术搜索
21. a·p·弗朗西斯科c . Vaz p t .蒙泰罗j . Melo-Cristino m·拉米雷斯和j·a . Carrico”PHYLOViZ:系统发育推断和数据可视化基于序列的输入方法,”BMC生物信息学,13卷,不。1,第87条,2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. 挪威TNBICatGBIF,物种的地图服务挪威生物多样性信息中心和全球生物多样性信息设施挪威,2007。
23. k . Kurtenbach k . Hanincova j . i曹g . margo d .鱼,和n·h·奥格登,”莱姆莱姆疏螺旋体病进化生态学的基本流程,“自然评论微生物学,4卷,不。9日,第669 - 660页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. g . margo s . a . Vollmer n . h .奥格登和d .鱼,“人口遗传学、分类、系统进化和理智伯氏疏螺旋体lato,”感染、遗传与进化,11卷,不。7,1545 - 1563年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. k . Kurtenbach s . de Michelis s Etti et al .,“主持人协会美国伯氏疏螺旋体lato:主机补充的关键作用,”微生物学的趋势,10卷,不。2、74 - 79年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. s . a . Vollmer e . j . Feil彭译葶。楚et al .,“空间传播和人口膨胀的莱姆莱姆疏螺旋体病螺旋体属在欧亚大陆,”感染、遗传与进化,14卷,不。1,第155 - 147页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. l . van Overbeek f . Gassner c·l·范德塑料p . Kastelein美国Nunes-Da罗查,和w . Takken”的多样性Ixodes蓖麻蜱虫相关细菌群体从不同的森林,”《微生物生态学,卷66,不。1,第84 - 72页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. c . Schabereiter-Gurtner w . Lubitz, s . Rolleke”广泛应用16 s rRNA PCR扩增和DGGE指纹检测tick-infecting细菌,”《微生物方法,52卷,不。2、251 - 260年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. s . a . Vollmer a . Bormane r . e . Dinnis et al .,“主机迁移影响的phylogeography莱姆莱姆疏螺旋体病螺旋菌的物种在欧洲,“环境微生物学,13卷,不。1,第192 - 184页,2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. k . Kurtenbach s . de Michelis H.-S。Sewell et al .,“关键角色的选择和生态移民的莱姆莱姆疏螺旋体病,”国际医学微生物学杂志》上,卷291,不。33岁,152 - 154年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. 诉Kjelland s Stuen t Skarpaas, a . Slettan“理智伯氏疏螺旋体lato在Ixodes蓖麻蜱虫从挪威南部的候鸟,收集”Acta Veterinaria Scandinavica52卷,第五十九条,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. c·拉尔森,p . Comstedt b·奥尔森,s . Bergstrom”第一个在北极莱姆病包柔氏螺旋体的记录,”媒介传播和人畜共患疾病,7卷,不。3、453 - 456年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. b·奥尔森·t·g·t·Jaenson l . Noppa j . Bunikis s Bergstrom,”莱姆莱姆疏螺旋体病周期在海鸟和Ixodes uriae蜱虫,”自然,卷362,不。6418年,第342 - 340页,1993年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. 诉Fingerle j . Bunikis b·奥尔森,j . Bonnedahl b . Wilske和美国Bergstrom分子多态性莱姆病的代理包柔氏螺旋体garinii在欧洲北部受小说地方性动物病的影响包柔氏螺旋体集中在北大西洋,”临床微生物学杂志,34卷,不。2、364 - 368年,1996页。视图:谷歌学术搜索
35. 杰可布森、和p . Comstedt t . s . Bergstrom“全球生态和流行病学的包柔氏螺旋体garinii螺旋体,”感染生态学与流行病学1卷,第9545条,2011年。视图:谷歌学术搜索
36. p . Comstedt l . Asokliene i Eliasson et al .,“人口结构复杂的莱姆螺旋体莱姆疏螺旋体病组包柔氏螺旋体garinii在靠近北极的欧亚大陆,”《公共科学图书馆•综合》,4卷,不。6篇文章ID e5841 2009。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. 挪威语ornitologi forening阿莫,Artsobservasjoner(酷寒观察),2013年。
38. j·m·史密斯,史密斯,m . O’rourke和b . g .。索兰托说,“克隆是细菌如何?”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷90,不。10日,4384 - 4388年,1993页。视图:谷歌学术搜索
39. b . Haubold r·r·哈德逊,“连3.0:茎中检测连锁不平衡数据,”生物信息学,16卷,不。9日,第848 - 847页,2000年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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