噬菌体政府减少单核细胞增多性李斯特氏菌的浓度在胃肠道和易位在实验感染小鼠脾脏和肝脏

文摘

补充调查噬菌体的功效在减少病原体数字,通过口服填喂法与小鼠治疗单核细胞增多性李斯特氏菌噬菌体制剂(指定ListShield)口服感染l . monocytogenes。的浓度l . monocytogenes在肝脏、脾脏和肠子都显著降低()phage-treated比控制老鼠。噬菌体和抗生素治疗同样有效减少的水平l . monocytogenes内部器官的受感染的老鼠。然而,显著减肥检测控制和antibiotic-treated组中没有观察到感染,ListShield-treated老鼠。长期(90天),两周一次的治疗感染小鼠ListShield并未引起检测大肠内的微生物群的变化或有害他们的健康的变化。我们的数据支持的潜在使用噬菌体控制核扩散的可行性l . monocytogenes在老鼠身上而不影响共生的微生物群组成。

1。介绍

食源性致病菌的仍然是一个主要的健康威胁。除了减少病原体在源和负载在最终产品,目前可用的一些措施来保护人类宿主。副作用的危险与长期抗生素治疗和相关新兴小说抗生素耐药性菌株antibiotic-based预防方案不可行。相比之下,有前途的努力正在指向利用共生微生物群来提高我们自己的抵抗病原体。传统的方法旨在重塑微生物群组成对有益的细菌通过添加生活益生菌和/或提高其经济增长通过添加生命起源以前的补充剂1]。塑造整体微生物群组成的另一个方法旨在减少有害的和潜在的致病细菌通过特定的噬菌体迄今已收到很少注意。

人类胃肠道(GI)束殖民的丰富多样的微生物群,在粘膜保护中起着重要作用,调节胃肠道免疫耐受,消化复杂的大分子,包括粘液和纤维和维生素K合成(2,3]。众多因素(如年龄、抗生素治疗、饮食、心理和生理压力,荷尔蒙水平,等等)可能会导致生理紊乱在肠道的微生物群4]。这样的改变可能导致许多慢性退化性疾病,包括克罗恩病,溃疡性结肠炎,风湿性关节炎,肠易激综合症,炎症性肠病和其他“肠道dysbioses”[5,6]。修改肠道微生物群的预处理和益生菌已被证明修改患各种疾病,调节细胞增殖,减少血清胆固醇(7,8]。

噬菌体病毒(噬菌体)与特定的细菌宿主和杀了他们通过连续的内部复制和细胞溶解。噬菌体是地球上最普遍的生物(据估计总数是10^30.到10³²),他们被认为扮演着一个关键角色,建立微生物平衡在每一个他们存在的生态系统9]。噬菌体中丰富的海水、淡水、土壤、植物和动物,他们经常从饮用水(孤立10- - - - - -17),从范围广泛的食品,包括牛肉,猪肉香肠、鸡肉、养殖淡水鱼,鲤鱼和海洋鱼,沙丁鱼,石油原料脱脂牛奶和奶酪18- - - - - -23]。在人类中,数量惊人的噬菌体胃肠道的“殖民”,他们被孤立于皮肤,口腔、阴道,尿液和粪便(24,25)(审查,看26])。

噬菌体的使用在人类身上是非常安全的,最近总结了大量评论文章(26- - - - - -34]。因此,我们假设噬菌体政府可能是安全有效的方法减少或消除食源性和水源性的肠道细菌病原体在不改变正常的肠道微生物群;因此,引发对抗生素相比显著减少有害的副作用。如果我们的假设是证明有价值,常规管理噬菌体(例如,类似于益生菌制剂是日常饮食的一部分)可能在未来提供一个自然、安全、温和的方式维持健康的肠道微生物群和防止特定食源性和水源性病原体。目前的报告提出了我们的概念验证的结果,在活的有机体内研究一个l . monocytogenes特定的噬菌体制剂(i)浓度的影响l . monocytogenes内部器官和相关的健康影响在实验用受感染老鼠,和(2)整体健康的老鼠包括正常肠道微生物群组成后长期暴露在我们的噬菌体制剂。

2。材料和方法

2.1。噬菌体的准备

ListShield(以前lmp - 102),l . monocytogenes特殊技能噬菌体制剂由Intralytix公司,在我们的研究使用原型phage-based益生菌制剂。ListShield混合/鸡尾酒六天然噬菌体,并有很强的溶解能力l . monocytogenes。ListShield已通过美国食品和药物管理局作为一个l . monocytogenes您对即食肉类食品添加剂(21 CFR§172.785),和由环境保护局环境净化剂用于各种食品加工厂和机构(EPA注册。74234 - 1)。ListShield很多没有。0108 b070117和0108 d160161期间使用我们的研究。

2.2。菌株

l . monocytogenes应变Lm370年被用来实验感染的老鼠。它是一种萘啶耐酸写明ATCC应变的突变菌株49594来自斯科特。突变体是由连续写明ATCC 49594菌株混合氧化物燃料使琼脂板和萘啶酸浓度增加补充。应变进行了≤8串行通道之前确定为萘啶耐酸ca的浓度,50 ng / ml。Lm370年对氨苄西林和ListShield也敏感。其对氨苄青霉素的敏感性是由一个标准磁盘扩散法,及其灵敏度ListShield决心如下所述。存储的应变是冷冻(−80°C) 30%甘油/ 70%磅肉汤,镀在使用前混合氧化物燃料琼脂,生长在磅肉汤(30°C,一夜之间)之前被用于小鼠口服填喂法。核工业琼脂和磅汤用于细菌生长和萘啶酸补充(50 ng / ml)。以下21个非l . monocytogenes的体外特异性菌株被用来证实ListShield:两个粪肠球菌写明ATCC 11823株(1),(2)写明ATCC 19433;八大肠杆菌写明ATCC 700728株(1),(2)写明ATCC 35321,(3)写明ATCC 35322年,写明ATCC 35335,(4)(5)写明ATCC 35342,写明ATCC 35343,(6)(7)写明ATCC 35351,(8)写明ATCC 35352;一个志贺氏杆菌sonnei应变写明ATCC 9290;四个铜绿假单胞菌写明ATCC 15692株(1),(2)写明ATCC 51674年,写明ATCC 43390,(3)(4)写明ATCC 39324;和六个沙门氏菌血清无性系种群。血清菌株,包括(1 - 2)写明ATCC 19585和鼠伤寒型菌株写明ATCC 13311,(3)型Gallinarum应变写明ATCC 9184,(4)型新港应变写明ATCC 6962,(5)肠炎型应变写明ATCC 13076,(6)型乙型副伤寒写明ATCC 10719株。

2.3。确定体外特异性噬菌体的准备

证实了体外特异性的ListShield描述其溶解能力21株除了上述细菌物种l . monocytogenes。溶解性活动与古典实地试验检测技术(35),通过孵化细菌草坪发现整除的稀释噬菌体制剂(10⁴空斑形成单位/毫升)和研究区域的草坪溶菌作用。

2.4。体内研究

近亲繁殖C57BL / 6 j小鼠获得哈伦(哈伦实验室,印第安纳波利斯),适应实验室环境至少3天后到来,和美联储随意哈伦chow 7912(哈伦实验室,印第安纳波利斯)和水。佛罗里达大学进行了研究(UFL),根据协议(没有。FO97)批准UFL动物保健和使用委员会制度。的体内研究进行短期(7天)和长期(90天)的实验。

在短期内(7天)的研究中,每个鼠标称重和随机分配到三个实验组,每组:第1组(15老鼠,PBS对照组)收到磷酸盐(PBS, pH值7.4)每天3天(ca之前和之后的挑战。10⁵菌落与应变(CFU))Lm370;组2(20老鼠,ListShield测试组)治疗ListShield (10⁵空斑形成单位)每天3天之前和之后的挑战;和组3(10老鼠,抗生素测试组)收到了PBS prechallenge每日3天,和治疗剂量的氨苄青霉素(25毫克/克)15分钟postchallenge。治疗剂量和挑战的细菌都是由口腔填喂法0.1毫升PBS。后再次称重,每个老鼠都牺牲在7天有限公司₂吸入颈椎脱位紧随其后。牺牲后,(我)的左下叶肝脏,整个脾脏(2),(3)一个5厘米长段小肠,盲肠(iv), (v)粪便大肠的问题每个老鼠体重,放置在单独的整除(5毫升)的冷PBS和应变的浓度Lm370确定如下所述。同时,粪便物被冻结,随后分析了描述微生物群资料(见下文)。每天在短期研究体重测量。

长期(90天)的研究中,每个老鼠体重和随机分配到两组(15只老鼠/组):组1(测试老鼠)收到ListShield两周一次的,在他们的饮用水,ca的浓度。10⁵空斑形成单位/毫升;和组2(控制老鼠)收到包含PBS两周一次的饮用水。每组5只老鼠被公司牺牲₂吸入后颈椎脱臼30天,60、90后第一个ListShield摄入。最后体重测量之前,肝脏,脾脏,和小肠组织被移除,进行组织病理学检查更改。标本unclotted血液和粪便物得到90天从每个鼠标。前分析浓度的各种白细胞(WBC),而后者被冻结了,随后分析了描述微生物群资料(见下文)。

2.5。l . monocytogenes枚举和噬菌体滴度

组织的内部器官和粪便物在杜尔贝科的PBS (pH值7.0)组织均质器,和整除(0.1毫升)的每个准备蔓延,一式两份,氧化物平皿上补充了萘啶酸(50 ng / ml)。盘子被孵化(30°C, 48 h),可行的数量l . monocytogenes估计标准菌落计数、和浓度表示为CFU / g(标本的数量。浓度测定ListShield噬菌体的过滤通过0.45的样品m过滤器和通过分析使用标准的瘟疫计数测定滤液(36]。

2.6。枚举的白细胞

的浓度粒细胞(中性粒细胞、嗜碱粒细胞和嗜酸性粒细胞)和无颗粒白细胞(淋巴细胞和单核细胞)测定血液样本来自小鼠的长期研究。分析了在动物设施的监督下一名兽医病理学家。

2.7。微生物群变性梯度凝胶电泳(DGGE)配置文件

细菌基因组DNA分离从大型肠内容如前所述37]。457 - bp片段的V6 V8地区细菌16 s rDNA基因与引物U968-GC放大(公司治理文化20 GGG公司治理文化GCC 20 GGC GGG GCG GGG GCA CGG GGG棉酚公司治理文化棉酚棉酚有条件现金援助TAC)和L1401 (GCG TGT GTA CAA广汽CC),描述Zoetendal et al。38]。DGGE执行在一个8% (wt /卷)用变性聚丙烯酰胺凝胶梯度从40%到50%不等的顶部和底部的凝胶,分别为(100%变性条件定义为7 M尿素和甲酰胺40%)。电泳后(16 h, 65 V, 60°C),凝胶是沾赛博绿色(Novex,圣地亚哥,CA)和扫描/分析数量和多样性数据库软件(Bio-Rad大力神,CA)。

2.8。统计分析

差异的重要性l . monocytogenes浓度测试和对照组的小鼠在埃克塞尔女士决定使用双尾测试。微生物群的亲缘资料计算使用皮尔逊相关系数和凝胶分析软件包多样性数据库(Bio-Rad大力神,CA)。微生物群多样性决定利用香农维纳指数和辛普森多样性指数。

3所示。结果

动物模型类似于人类的李氏杆菌病是目前不可用。因此,我们使用一个简化的模型小鼠口服单剂量的强饲法的挑战l . monocytogenes应变Lm370年。l . monocytogenes坚持至少3天,动物的所有未经处理的小鼠脾脏和肝脏转移。45的老鼠接受pbs组的两只老鼠,两只老鼠ampicillin-treated组和一个鼠标ListShield-treated组的过早去世,可能从腹部穿刺在口腔填喂法。这些老鼠被排除在分析之外。因此,数据来自13个老鼠在接受pbs /对照组8 ampicillin-treated测试组的老鼠,老鼠19 ListShield-treated测试组成员被保留在短期内学习。

体重组没有差异时随机化。在三天的挑战l . monocytogenes老鼠在PBS治疗和氨苄青霉素治疗组损失了10%的体重(图1)。相比之下,ListShield治疗组的小鼠保持体重;减肥这些组之间的差异具有统计学意义()。身体减肥治疗的小鼠与PBS和氨苄青霉素是由于腹泻后不久,观察细菌挑战和验尸。因此,我们发现治疗l . monocytogenes特殊技能噬菌体制剂(ListShield),但不与PBS或氨苄青霉素,显著降低腹泻减肥有关。

所有的挑战老鼠牺牲在7天(4天postchallenge)和应变的浓度Lm370测定肝脏、脾脏和肠道。的水平Lm370年的所有检查标本显著降低(ListShield)——比PBS和ampicillin-treated团体治疗小鼠(图2)。的Lm370年组织浓度的氨苄青霉素和ListShield-treated老鼠类似(差异不显著;),表明两种治疗方法都有效的减少l . monocytogenes殖民/感染小鼠模型。我们监测持久性的噬菌体在粪球和盲肠的内容。然而,噬菌体浓度低于检测的局限性分析表明噬菌体扩增在肠道环境是有限的。

在验尸,我们观察到的老鼠与氨苄青霉素治疗,但不是那些ListShield对待,表现出水汪汪的大肠道内容和扩大盲肠。这个观察表明,广谱抗生素(氨苄青霉素),同时减少了l . monocytogenes水平,可影响正常肠道微生物群,这导致了我们观察到的腹泻和体重减轻。因为一个剂量的氨苄青霉素足以消除大多数细菌挑战,我们只服用抗生素后的挑战。重要的是,氨苄青霉素治疗的不利影响胃肠道微生物群的老鼠比老鼠更明显接收三个ListShield postchallenge剂量。为了进一步评估这个可能性,我们使用16 s rRNA-based DGGE描述并比较肠道中的微生物群档案内容的三组。一些DGGE乐队的强度是ampicillin-treated组增加,这表明ampicillin-treatment过度生长的一些正常的肠道细菌引起的。然而,这暗示总体微生物群的多样性差异不显著时,决定使用香农维纳和辛普森多样性指数()。

确定潜在的副作用的长期噬菌体管理,我们进行了90天——长ListShield研究(通过饮用水供应)对整体健康和肠道菌群的老鼠没有感染l . monocytogenes。在天0,30、60、90的长期研究中,老鼠的平均体重组成ListShield测试组没有明显不同于小鼠的PBS对照组。90天后,ListShield测试小鼠的白细胞浓度没有显著不同于PBS控制老鼠(图3)。同时,血液化学和组织病理学总值没有显示异常(表1)。我们发现一个小淋巴细胞浸润增加十二指肠和lmp - 102组轻度皮炎。这些发现表明小总体健康状况的变化。


	肾脏	肝	脾	肺	心	胃	十二指肠	皮肤	血

美国公共电视台	N	N	N	N	N	N	N	N	N
lmp - 102	N	N	N	N	N	N	我	D	N

的溶解性活动ListShield仅限于目标l . monocytogenes菌株,制备不溶解在体外的21株我们检查的其他细菌物种。我们体内赞同这些观察数据:口服ListShield不改变正常的胃肠道微生物群的多样性。虽然DGGE分析揭示了一些差异DGGE乐队ListShield组粪便微生物群的资料;总体多样性PBS控制老鼠相似(图4)。

4所示。讨论

的理由我们的研究是基于常规的假说,长期摄入噬菌体(例如,类似于益生菌制剂消耗作为日常饮食的一部分)可以安全地用于水平显著降低特定细菌病原体的哺乳动物胃肠道(GI)束和减少内脏转位。之间的关键区别传统的方法用于基于细菌的益生菌和我们目前的方法phage-based准备是前者介绍不致病的细菌进入消化道,以提高免疫平衡殖民抵抗;然而,后者直接从胃肠道中删除特定的病原菌。

在我们使用的动物模型研究不密切模仿人类李氏杆菌病;因此,推断的潜在可比功效ListShield和氨苄青霉素预防和治疗人类疾病不能。ListShield管理在高剂量感染李斯特菌后不久。同时,李斯特菌的数量的胃肠道人类宿主很低使噬菌体感染周期的维护困难传播。我们观察到一个大的变化病原体负载在个人老鼠可能掩盖统计上显著的增加l . monocytogenes在脾脏组织ListShield组相比,氨苄青霉素组(图2)。然而,我们的数据做(i)表明,口服ListShield可以显著减少可行l . monocytogenes在胃肠道和网状内皮系统(如肝脏和脾脏)口服感染的老鼠,和(2)支持我们的假设probiotic-type噬菌体管理能够显著减少致病细菌宿主体内殖民。

观察ListShield没有溶解任何非l . monocytogenes菌株将给定的已知的高特异性噬菌体的宿主菌株。我们的数据提供了进一步支持这一想法。在相同的情况下,我们的微生物群分析没有透露DGGE概要文件之间的显著差异的粪便微生物群ListShield测试老鼠和PBS控制老鼠。虽然DGGE的敏感性不是最优我们获得的数据在我们的体外敏感性ListShield考试,以及短期和长期的体内研究表明,口服摄入ListShield影响大肠的微生物群的整体构成比氨苄青霉素摄入更少。总体而言,我们的研究结果表明,(我)使用噬菌体可能是同样有效的减少但温和的方法比使用抗生素l . monocytogenes殖民/易位,(ii) ListShield可以接种到小鼠没有任何可检测的副作用相对较长的一段时间(至少90天)。我们的方法使用噬菌体作为专门针对益生菌对胃肠道细菌病原体可能有一些重要的公共卫生意义,它可以提供一个有效的和温和的方法来预防或减少疾病的严重程度所致l . monocytogenes,可能其他食源性或水传播的病原体有口服的入口门户,需要短期或长期的殖民的消化道引起疾病。

确认

当前的研究(不支持部分由一个奖项。1 r43at003236-01a1)从国家补充和替代医学中心,国家卫生研究院(a . Sulakvelidze)。t . Abuladze Intralytix和a . Sulakvelidze持有股票兴趣,Inc .马里兰生物科技公司参与的开发和商业化phage-based产品。作者感谢阿诺德Kreger社论援助。ListShield中包含的噬菌体,并使用噬菌体来减少或消除殖民的胃肠道有潜在致病性细菌,我们专利的主题是7507571年和7459272年,分别。

引用

j . a . Vanderhoof和r . j .年轻,“当前和潜在的益生菌,使用”年报过敏、哮喘和免疫学,卷93,不。5,33-37,2004页。视图:谷歌学术搜索
f . Guarner“肠道菌群在健康和疾病,”消化,卷73,补充1,5 - 12,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
f . Guarner J.-R。Malagelada”,在健康和疾病肠道菌群,”《柳叶刀》,卷361,不。9356年,第519 - 512页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
g·c·奥沙利文,p .凯利,s . O ' halloran et al .,“益生菌:一个新兴疗法。”当前的药物设计,11卷,不。1,3 - 10,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
f . Salvini l . Granieri l . Gemmellaro和m . Giovannini“益生菌、益生元、儿童健康:我们要去哪里?”国际医学研究杂志》上,32卷,不。2、97 - 108年,2004页。视图:谷歌学术搜索
j . a . Hawrelak s p·迈尔斯,“肠道失调的原因:回顾”,替代医学检查,9卷,不。2、180 - 197年,2004页。视图:谷歌学术搜索
g . Perdigon a de莫雷诺·勒布朗,j .瓦尔迪兹和m . Rachid”酸奶在预防结肠癌,”欧洲临床营养学杂志》上卷,56补充3,65 - 68年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
m·p·塔兰托,g . Perdigon m·美第奇和g·f·德·瓦尔迪兹号”动物模型体内评价降低胆固醇的乳酸细菌,”分子生物学方法卷,268年,第422 - 417页,2004年。视图:谷歌学术搜索
h . Brussow和e·库特”噬菌体生态学”噬菌体:生物学和应用程序、大肠库特和a . Sulakvelidze Eds。,pp. 129–163, CRC Press, Boca Raton, Fla, USA, 2005.视图:谷歌学术搜索
w . o . k . Grabow和p . Coubrough实际直接空斑实验大肠杆菌噬菌体在饮水100毫升样品,”应用与环境微生物学,52卷,不。3、430 - 433年,1986页。视图:谷歌学术搜索
r .艾蒙和y提醒,“一个简单、快速、敏感的存在/没有检测饮用水中检测噬菌体,”应用细菌学杂志,卷74,不。4、490 - 496年,1993页。视图:谷歌学术搜索
r .艾蒙r . Araujo y提醒,f·卢塞纳,胜选,j . Jofre“噬菌体饮用水肠道细菌的分布在两个国家的比较,“应用微生物学杂志,卷83,不。5,627 - 633年,1997页。视图:谷歌学术搜索
r . m . Araujo a . Puig j . Lasobras f·卢塞纳,胜选,j . Jofre“噬菌体淡水肠道细菌的不同级别的粪便污染,“应用微生物学杂志,卷82,不。3、281 - 286年,1997页。视图:谷歌学术搜索
o .马瑞医生,刘贤美Borsheim g . Bratbak和m . Heldal”高发现在水生环境中,大量的病毒”自然,卷340,不。6233年,第468 - 467页,1989年。视图:谷歌学术搜索
f . Rohwer说道,“全球噬菌体多样性”,细胞,卷113,不。2,p。141年,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
j . Lasobras j . Dellunde j . Jofre, f·卢塞纳,胜选“噬菌体的存在和水平提出的代理指标肠病毒在不同类型的污泥,”应用微生物学杂志,卷86,不。4、723 - 729年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
h . Brussow r·w·亨德里克斯,“噬菌体基因组学:小即是美”,细胞,卷108,不。1、13 - 16,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
m . Gautier a .鲁阿尔·萨默和r . Briandet”发生的丙酸菌属freudenreichii噬菌体在瑞士奶酪。”应用与环境微生物学,卷61,不。7,2572 - 2576年,1995页。视图:谷歌学术搜索
F.-C。许,Y.-S。c . Shieh和m . d . Sobsey肠噬菌体作为潜在的粪便指标牛肉和家禽肉类,”《食品保护,卷65,不。1,第99 - 93页,2002。视图:谷歌学术搜索
j·e·肯尼迪,c . i魏和j·l·Oblinger“食品中大肠杆菌噬菌体的枚举方法,”应用与环境微生物学,51卷,不。5,956 - 962年,1986页。视图:谷歌学术搜索
j·e·肯尼迪,j·l·Oblinger和g . Bitton”复苏的大肠杆菌噬菌体鸡肉、猪肉香肠和熟食肉类,”《食品保护卷,47号8,623 - 626年,1984页。视图:谷歌学术搜索
p·a·惠特曼和r·t·马歇尔”描述的两个好寒性的假单胞菌噬菌体牛肉隔绝,“应用微生物学,22卷,不。3、463 - 468年,1971页。视图:谷歌学术搜索
p·a·惠特曼和r·t·马歇尔“隔离好寒性的bacteriophage-host系统从冷藏食品,”应用微生物学,22卷,不。2、220 - 223年,1971页。视图:谷歌学术搜索
m·布莱巴特休森,b .毡合et al .,“宏基因组分析的无教养的病毒社区从人类粪便,”细菌学期刊,卷185,不。20日,第6223 - 6220页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
g . Bachrach m . Leizerovici-Zigmond a . Zlotkin r . Naor d·斯坦伯格,噬菌体隔离从人类唾液,“在应用微生物学字母,36卷,不。1,50-53,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
a . Sulakvelidze和e·库特“噬菌体治疗人类,”噬菌体:生物学和应用程序、大肠库特和a . Sulakvelidze Eds。,pp. 381–436, CRC Press, Boca Raton, Fla, USA, 2005.视图:谷歌学术搜索
a . Sulakvelidze z Alavidze, j·g·莫里斯Jr .)“噬菌体疗法,”抗菌药物和化疗,45卷,不。3、649 - 659年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
a . Sulakvelidze p·巴罗,“噬菌体疗法在动物和农业综合企业,”噬菌体:生物学和应用程序、大肠库特和a . Sulakvelidze Eds。,pp. 335–380, CRC Press, Boca Raton, Fla, USA, 2005.视图:谷歌学术搜索
c . r .美林、d .肖勒和s . l . Adhya“噬菌体疗法在西方医学的前景。”自然评论药物发现,卷2,不。6,489 - 497年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
k . Ho”噬菌体治疗细菌感染:重燃的记忆没有抗生素的时代,“视角在生物学和医学,44卷,不。1,硕士论文,2001页。视图:谷歌学术搜索
j . Alisky k . Iczkowski a拉波波特,n . Troitsky“噬菌体展示承诺作为抗菌药物,”杂志的感染,36卷,不。1,5 - 15,1998页。视图:谷歌学术搜索
w·c·萨默斯(lawrence Summers)“噬菌体疗法”,年度回顾的微生物学,55卷,第451 - 437页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
a . Bruttin和h . Brussow“人类志愿者接受大肠杆菌T4噬菌体口头:安全测试的噬菌体疗法,”抗菌药物和化疗卷,49号7,2874 - 2878年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
e . Denou a . Bruttin c . Barretto c . Ngom-Bru h . Brussow和s . Zuber“T4噬菌体对大肠杆菌腹泻:潜力和问题,“病毒学卷。388年,21 - 30,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
m·h·亚当斯方法,研究细菌病毒、噬菌体,世界科学出版社,伦敦,英国,1959年。
m·h·亚当斯枚举的噬菌体粒子,噬菌体,世界科学出版社,伦敦,英国,1959年。
d·n·米勒,j·e·科比,e·l·马德森和w . c . Ghiorse”评价和优化DNA的提取和纯化过程对土壤和沉积物样品,”应用与环境微生物学,卷65,不。11日,第4724 - 4715页,1999年。视图:谷歌学术搜索
e . g . Zoetendal公元l . Akkermans和w·m·德·沃斯·“温度梯度凝胶电泳分析16 s rRNA从人类粪便样本显示稳定的活性细菌和宿主专一性的社区,”应用与环境微生物学,卷64,不。10日,3854 - 3859年,1998页。视图:谷歌学术搜索

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噬菌体政府减少的浓度单核细胞增多性李斯特氏菌在胃肠道和易位在实验感染小鼠脾脏和肝脏

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