文摘
天花的病原体,天花主要从自然被根除。然而,股市仍然存在;因此,有必要对相关的净化研究,最好是与非病原的模拟的。先前的研究显示牛痘病毒的反应相似,天花专业各种净化剂和热失活。本研究相比牛痘fowlpox病毒在相似的条件下,使用大天花病毒的消毒剂和温度数据已经存在。大多数消毒剂表现出对牛痘和fowlpox类似的效果,建议的效用fowlpox净化模拟的。失活动力学研究表明,fowlpox表现类似天花主要处理0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl醚、0.025%次氯酸钠,0.05%的次氯酸钠,和0.1%氯化cetyltrimethylammonium和0.05%苯扎氯铵,但是不同的反应0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚和40%乙醇。热失活的研究表明fowlpox是适合大天花病毒之间的热模拟的和。
1。介绍
痘病毒很大,双链DNA病毒,感染各种主机,fromcaterpillars到人类。他们是最大的动物病毒,brick-shape,从200年到400年不等的海里,宽170至200海里。由于规模庞大,痘病毒可以用光学显微镜,虽然病毒的细节仍不清楚。痘病毒基因组编码所需的基因复制和免疫调制,复制发生在宿主细胞的细胞质。基因组大大多数病毒相比,包含130 - 300 kb,这取决于病毒类型。DNA是一个T富人和线性的。不像大多数病毒,痘病毒编码的聚合酶(1]。
痘病毒分为两类:entomopox(昆虫感染)和chordopox(脊椎动物感染)。chordopox病毒进一步分为八类,包括orthopox,包括大天花病毒和牛痘病毒,和量很高,其中包括fowlpox病毒(2]。
大天花病毒,病毒引起的传染性疾病天花,被认为是历史上最具破坏性的病毒之一,影响为所有人类和杀死3亿人仅在20世纪(3]。这种疾病被认为是在1980年完全根除。然而,尽管大天花病毒不再存在于任何已知的动物水库和自然,股市仍保存在美国和俄罗斯。天花有20 - 30%致死率在未接种疫苗的人4),虽然对历史数据的分析表明,77.6%的病例仍然是防止严重疾病疫苗接种(70年之后5]。
牛痘病毒,长期以来被认为是大天花病毒的原型,一直作为一个模拟的和大天花病毒疫苗。他们表现出显著的序列相似性;然而,牛痘病毒不会引起疾病健康个体,可能因为天花病毒主要包含补强100倍的抑制剂比牛痘病毒(6]。然而,痘苗病毒在人类中仍然可以导致严重的感染,因此不是一种理想的模拟的。
本文的目的是调查是否fowlpox, chordopox家族的一员,也可以作为模拟的大天花病毒。Fowlpox病毒自然感染鸡和火鸡;然而,它不是传染给人类。Fowlpox病毒基因组组成的260个基因。65 260个基因,是守恒的同系物chordopox基因。由六聚体和灯火计算机程序相比,十六个fowlpox病毒基因大天花病毒最近的比赛。这些基因编码转录因子、rna聚合酶亚基、DNA修复、蛋白质修饰、蛋白质结构蛋白,免疫逃避。17 fowlpox病毒基因匹配的牛痘病毒(7]。
fowlpox基因组大约是70 - 100年kbp大于chordopox基因组。大型基因组是由于几个因素。首先,fowlpox基因组包含了多样的基因。多个基因编码细胞功能未知函数的显示与蛋白质同源性酵母、细菌、蛔虫,植物和人类。中发现的另一个基因显示类似的同源蛋白酵母、人类、番茄和果蝇。其次,fowlpox基因组包含宿主范围的基因,限制感染鸟类家族的成员。第三,该病毒如此之大是由于小说的存在细胞同系物(7]。
2。材料和方法
2.1。病毒株细胞系
牛痘病毒WR (vr - 119)和Fowlpox应变FPV-MDVgBH(默克的疾病疫苗株)(vr - 2330)从美国获得类型文化集合(写明ATCC马纳萨斯,弗吉尼亚州)。
BHK-21 (CCL-10) BSC-40细胞(crl - 2761)和UMNSAH / DF-1细胞(鸡胚胎成纤维细胞)(crl - 12203)也从写明ATCC获得。
2.2。牛痘病毒的病毒生产和斑块化验
牛痘病毒传播在BHK-21单层文化杜尔贝科修改鹰的介质(DMEM)含10% heat-inactivated胎牛血清(的边后卫)c .感染细胞收获和离心机在C 10分钟。颗粒在DMEM resuspended包含10%的边后卫,冻融三周期,用冰然后离心机在四分钟在C 10分钟。上层清液收集和效价在BSC-40细胞和所有实验描述作为病毒的来源。
镀BSC-40细胞密度每在六孔板细胞牛痘斑块化验。细胞被允许在一夜之间达到融合在DMEM包含10%的边后卫。吸收后,介质被删除,取而代之的是最小的重要介质SeaPlaque (MEM)包含5%的边后卫和1%琼脂糖。在感染后48小时,斑块是用结晶紫染色法为0.01%。斑块是计算,结果被报道在空斑形成单位每毫升(空斑形成单位/毫升)。
2.3。病毒生产和斑块Fowlpox病毒化验
Fowlpox病毒传播UMNSAH / DF-1单层文化DMEM含有10%的边后卫c .感染细胞收获和离心机在C 10分钟。球团矿在DMEM resuspended包含10%的边后卫,冻融三周期,用近4分钟在冰上,离心机在C 10分钟。上层清液的收集和效价UMNSAH / DF-1细胞和所有实验描述作为病毒的来源。
UMNSAH /镀DF-1细胞的密度在6孔板细胞每口井fowlpox空斑实验。细胞被允许在一夜之间达到融合C在DMEM包含10%的边后卫。吸收后,媒体被删除,取而代之的是50% MEM、DMEM 50%, 2.5%的边后卫,1% SeaPlaque琼脂糖。五天postinfection,斑块被可视化结晶紫染色法为0.01%。斑块数,结果被报道在空斑形成单位/毫升。
2.4。消毒的研究
下列消毒剂检测他们的功效和牛痘fowlpox病毒:乙醇(70%)、异丙醇(50%)、次氯酸钠(0.5%)、甲醛(30%)、苯扎氯铵(10%)、cetyltrimethylammonium氯的混合物(6.67%)和苯扎氯铵(3.33%),和碘的混合物(1.75%)和聚乙二醇nonylphenyl醚(10%)。消毒剂都准备在蒸馏中,去离子水,然后透过0.25m过滤器。
下列消毒剂的浓度是用来确定牛痘的失活动力学和fowlpox病毒:乙醇(40%)、次氯酸钠(0.05%和0.025%),cetyltrimethylammonium氯的混合物(0.1%)和苯扎氯铵(0.05%)、碘的混合物(0.1%)和聚乙二醇nonylphenyl醚(5.7%),和碘的混合物(0.05%)和聚乙二醇nonylphenyl醚(0.3%)。消毒剂都准备在蒸馏中,去离子水,然后透过0.25m过滤器。
上面描述的斑块化验了牛痘和fowlpox病毒之后确定消毒剂的活动,有微小的变化。牛痘fowlpox病毒稀释1:10在无菌水(控制)或消毒剂。测试治疗传染性的病毒,病毒的消毒剂处理1,3,5,10分钟。确定个人的失活动力学消毒剂,病毒治疗15、30、45、60、90、120、150和180秒。
2.5。热稳定性的研究
为了确定牛痘的热稳定性和fowlpox病毒在0.85%盐水稀释,pH值4.5,磷酸缓冲盐(PBS), pH值7.4,10%的脱脂牛奶,心浸液肉汤被Hahon和Kozikowski [8与大天花病毒)为他们的工作。解决方案是平衡C,C,C,C,然后播种与病毒,导致1:100稀释。样本删除(0)15、30、45、60分钟,冷却湿冰。上面描述的斑块分析被执行。
2.6。存储研究
整除牛痘和fowlpox病毒被储存在C和C的一个星期。一周后贮藏期,病毒稀释1:无菌PBS加热到100C被Hahon和Kozikowski [8]。样本在孵化C为0,15、30、45、60分钟。表示计算,样品被移除和冷却湿冰。上面描述的斑块分析被执行。
2.7。速率常数测定和化学钝化研究病毒半衰期
确定反应的顺序,如下图生产。确定一个一阶反应,图的病毒浓度与时间的自然对数。一个线性负斜率表示一阶反应。确定二阶反应,图1 /病毒的浓度和时间生产。一个线性斜率为正表示一个二阶的反应。
一阶反应的反应速率是决定使用以下方程:,在那里病毒的浓度在时间,,病毒的浓度在零的计算,然后呢是反应速率。二阶反应的反应速率是决定使用以下方程:,在那里病毒的浓度在时间,,病毒的浓度在零的计算,然后呢是反应速率。
病毒的半衰期()病毒显示一级反应速率决定使用以下方程:,在那里速率常数确定使用上述方程。的病毒显示二级反应速率决定使用以下方程:,在那里病毒的浓度在零的计算。
2.8。速率常数测定、病毒半衰期,(热激活),(活化熵)热失活的研究
速率常数和热失活研究病毒半衰期计算如上所述。Hahon的计算和Kozikowski [8被用来确定和。如图3,可能得到的自然对数的阿伦尼乌斯的阴谋值与绝对温度的倒数()。一条直线的斜率获得/ R,理想气体常数,的可以从计算。的单位是卡路里每摩尔。Hahon和Kozikowski8)描述使用艾林方程来求解。艾林方程如下:,在那里是玻尔兹曼常数,绝对温度,是板材的常数,是通用气体常数,反应的速率常数计算。的计算卡路里每摄氏度每摩尔。
3所示。结果
3.1。化学毒性
化学毒性分析由孵化BSC-40 UMNSAH / DF-1细胞和病毒的最高剂量的化学吸收时间BSC-40(一个小时,两个小时UMNSAH / DF-1)。孵化后,使用光学显微镜观察细胞形态。毒性效应被发现以确保细胞健康足以产生病毒蛋白,使感染过程发生。此外,毒性效应的决定很重要,以确保任何细胞死亡是由于病毒感染而不是化学治疗。
乙醇、异丙醇和次氯酸钠细胞系没有显著的影响。甲醛和表面活性的洗涤剂(苯扎氯铵、cetyltrimethylammonium氯、碘和聚乙二醇的混合nonylphenyl醚)对细胞有毒性作用在最高两个稀释,但细胞恢复和增长正常形态。
3.2。痘苗病毒失活和Fowlpox使用满员的化学物质
所有的化学品测试消毒牛痘病毒和fowlpox病毒(表1和2)。消毒发生在一分钟或更少的化学测试。积极的控制运行所有样品一式三份。对于每一个化学测试,一式三份测试板治疗病毒(积极控制)也培养的细胞上。为了使化学去污的计算的结果被认为是有效的,积极的控制效价平均1-log单元已知病毒的效价。这些结果都是相同的结果报告的田边,Hotta使用牛痘和大天花病毒(9]。
3.3。失活牛痘动力学和Fowlpox
选择的四种物质失活的动力学研究显示了田边和Hotta演示高viracidal属性至少浓度(9]。如图1、0.05%和0.025%次氯酸钠灭活治疗的15秒内牛痘病毒。30和45秒内治疗后,0.1%的碘和5.7%的聚乙二醇nonylphenyl cetyltrimethylammonium氯醚和0.1%和0.05%苯扎氯铵灭活牛痘病毒,分别。两种化学物质的浓度不够高导致完整病毒失活。三分钟后用40%的乙醇治疗,牛痘病毒效价下降了大约1-log空斑形成单位/毫升。尽管治疗三分钟0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚不完整导致失活,病毒滴度下降了5 log空斑形成单位/毫升单位。
40%的乙醇失活动力学研究中有所不同的数据报告的田边,Hotta9]。他们报告说,40%的酒精灭活天花和牛痘1分钟。最简单的解释的差异可能与病毒的纯度。纯化病毒灭活的速度比nonpurified病毒。这是证明了田边和Hotta大天花病毒。纯化大天花病毒病毒灭活1分钟内40%乙醇,而nonpurified文化是在三分钟内灭活。其次,田边和Hotta报道他们的数据百分比减少血小板计数。如果这里描述的40%的乙醇失活动力学在减少血小板计数,百分比会有60秒计算空斑减少95.4%,这一点上,田边和Hotta描述减少了100%。
Fowlpox病毒失活了牛痘病毒相似的配置文件。像牛痘病毒,0.05%和0.025%次氯酸钠fowlpox病毒灭活治疗的15秒内,如图2。15 - 45秒内治疗后,0.1%的碘和5.7%的聚乙二醇nonylphenyl cetyltrimethylammonium氯醚和0.1%和0.05%苯扎氯铵fowlpox灭活病毒,分别。失活的动能曲线为0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl cetyltrimethylammonium氯醚和0.1%和0.05%苯扎氯铵fowlpox类似于失活处理动力学曲线牛痘病毒处理相同的化学物质。像牛痘病毒,治疗3分钟用40%的乙醇和0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚不导致完整的fowlpox病毒失活。与40%乙醇治疗fowlpox病毒后三分钟,fowlpox病毒的浓度下降了大约₂空斑形成单位/毫升单位。Fowlpox病毒治疗0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚的效价下降大约1-log空斑形成单位/毫升单位后三分钟的治疗。
3.4。数据分析化学失活
失活速率常数计算了牛痘fowlpox病毒治疗与乙醇(40%)、次氯酸钠(0.05%和0.025%),cetyltrimethylammonium氯的混合物(0.1%)和苯扎氯铵(0.05%)、碘的混合物(0.1%)和聚乙二醇nonylphenyl醚(5.7%),和碘的混合物(0.05%)和聚乙二醇nonylphenyl醚(0.3%)。牛痘的计算速率常数和fowlpox病毒如表所示3。
总的来说,牛痘病毒表现出失活速率常数大于fowlpox病毒处理相同的化学物质。对于病毒失活反应时的顺序处理0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚是一个二级反应。病毒显示订单40%乙醇处理时的不同反应。牛痘病毒表现出一级反应,而fowlpox病毒表现出二阶反应。一阶反应是观察在牛痘和fowlpox病毒次氯酸钠处理0.05%和0.025%,0.1%氯化cetyltrimethylammonium和0.05%苯扎氯铵的混合物,和0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl醚。
牛痘fowlpox病毒治疗0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl醚、0.05%次氯酸钠、0.1%次氯酸钠,0.1% cetyltrimethylammonium氯和0.05%苯扎氯铵(表计算半衰期小于8.41秒3)。病毒半衰期的差异之间的两种病毒处理上述化学物质是不到两秒。当处理0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl醚、0.05%次氯酸钠,0.1%的次氯酸钠,0.1%氯化cetyltrimethylammonium和0.05%苯扎氯铵,fowlpox稍微半衰期大于牛痘病毒了1 - 2秒。
两个化学物质,牛痘病毒半衰期和fowlpox病毒大大不同。Fowlpox病毒治疗0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚半衰期倍的半衰期牛痘病毒相同的化学处理。然而,牛痘病毒40%乙醇处理有一个半衰期超过20倍fowlpox病毒处理相同的消毒剂。
3.5。牛痘的热失活和Fowlpox
3.5.1。稳定性研究中0.85%生理盐水
牛痘病毒完全灭活在0.85%盐水加热的时候出现c .大约2 log减少病毒效价的观察在牛痘稀释0.85%生理盐水和加热C,C和c .根据阿伦尼乌斯的阴谋牛痘病毒是每摩尔44138卡路里的0.85%生理盐水(见表4)。牛痘病毒不同,fowlpox病毒没有完全灭活在0.85%盐水加热的时候出现加热一小时后C, fowlpox病毒₂降低斑块。加热一小时后C,C,C, fowlpox病毒滴度并没有减少甚至1-log单位。的fowlpox病毒在0.85%盐水53481卡路里每摩尔在0.85%盐水(见表4)。活化熵(),牛痘病毒在0.85%盐水从67.61大卡/不等在65.85大卡/ C在C(见表5)。活化熵()fowlpox病毒在0.85%盐水范围从71.70大卡/在63.93大卡/ C在C(见表6)。
3.5.2。稳定性研究PBS, pH值7.4
在PBS牛痘fowlpox病毒行为相对,pH值7.4相比,他们的行为在0.85%盐水,pH值4.5。与牛痘病毒在0.85%的盐水完全灭活处理7.4 C,牛痘病毒在PBS, pH值是稳定的,只有减少₂单位超过60分钟的潜伏期。牛痘病毒加热一小时C,C,C下降了不到一个日志。计算在PBS牛痘病毒,pH值7.4,是34239卡路里每摩尔(见表4)。和牛痘病毒不同的是,在PBS fowlpox病毒被完全灭活,pH值7.4然而,在C,C,C fowlpox牛痘,与浓度稳定,减少由不到一个日志单位小时的潜伏期。计算在PBS fowlpox病毒,pH值7.4,是35868卡路里每摩尔(见表4)。活化熵()在PBS牛痘病毒,pH值7.4,范围从69.08大卡/在63.17大卡/ C在C(见表5)。活化熵()在PBS fowlpox病毒,范围从68.34大卡/ pH值7.4在62.45大卡/ C在C(见表6)。
3.5.3。稳定性研究中10%的脱脂牛奶
牛痘fowlpox病毒行为同样10%的脱脂牛奶加热后在一个解决方案。既不完全灭活病毒一小时后治疗C在10%脱脂牛奶,牛痘病毒滴度下降了4-log单位和fowlpox减少₂单位。一个小时后治疗在10%脱脂牛奶C,牛痘病毒滴度下降了₂单位,而fowlpox病毒滴度下降了一个日志。在较低的温度下(C和C)滴度只下降了一个日志单元fowlpox和牛痘病毒。计算牛痘病毒的10%脱脂牛奶是每摩尔44741卡路里;而计算fowlpox病毒10%脱脂牛奶是22378卡路里每摩尔(见表4)。活化熵(在脱脂牛奶),牛痘病毒从70.04大卡/不等在62.82大卡/ C在C(见表5)。活化熵(在脱脂牛奶)fowlpox病毒从67.74大卡/不等在65.12大卡/ C在C(见表6)。
3.5.4。稳定性研究心浸液肉汤
牛痘fowlpox病毒也表现得同样心浸液肉汤,失活曲线都差不多,而且在这两种病毒的事实显示减少液体在较低温度下聚合在这个测试。两种病毒,特别是在牛痘指出随着时间进程的深入,斑块大小显著下降和浓度之间实际上增加了30 - 45分钟的时间点。在30 - 45分钟的时间点,牛痘和fowlpox斑块大约10倍小于期间观察到空斑实验优化过程,在此期间该病毒没有经过化学处理或加热。这可能表明减少病毒聚合。然而60分钟计算,滴度下降到低于或类似于起始浓度测定和斑块大小返回到正常大小期间观察到空斑实验优化。
无论是牛痘病毒还是fowlpox病毒完全灭活C在脑心浸液肉汤。痘苗病毒滴度下降了4-log单位一小时孵化后心脏灌注肉汤,而fowlpox病毒滴度下降了₂单位一小时后孵化。在两个C和C fowlpox和牛痘病毒,病毒滴度并没有减少log-unit之一。计算牛痘病毒的心浸液肉汤是每摩尔95204卡路里;而计算fowlpox病毒心浸液肉汤是每摩尔65229卡路里(见表4)。活化熵(牛痘病毒的)心浸液肉汤范围从63.12大卡/在64.86大卡/ C在C(见表5)。活化熵()fowlpox病毒心浸液肉汤范围从73.95大卡/在63.55大卡/ C在C(见表6)。
3.6。存储研究
牛痘fowlpox病毒被存储为一个星期C或C,那么在PBS稀释,pH值7.4,灭活c .牛痘病毒比fowlpox更稳定的病毒都存储条件下(见图3)。后60分钟的加热C,存储在牛痘C显示3-log降低空斑形成单位。牛痘储存在C显示大约4-log减少空斑形成单位。虽然浓度下降,病毒潜伏期60分钟后仍然可行。反应订单同时存储的病毒C和C都是一阶反应。
Fowlpox牛痘病毒的不同显著稳定在PBS不同的储存条件(见图4)。最初,fowlpox病毒被加热C为60分钟;然而,一半通过潜伏期,没有可行的fowlpox病毒可以检测到(数据没有显示)。实验重复,而是酝酿病毒为60分钟C, fowlpox只是孵化15分钟c当孵化15分钟,失活动力学可以确定。当病毒存储C是灭活C,病毒滴度仅下跌约15分钟计算一个日志,然而,由30分钟计算,没有活跃的病毒能被探测到。当病毒存储C是灭活C,病毒滴度下降0.2日志单元内第一个15分钟,然而像示例存储C, 30分钟后没有活跃的病毒能被探测到。像牛痘病毒,fowlpox失活曲线都是一阶反应。
4所示。结论
牛痘病毒和大天花病毒有显著的序列同源性。病毒密切相关,被假定牛痘病毒可能会从天花病毒通过不断使牛和人类。因此,牛痘病毒数据之间共同工作和田边和Hotta9]和Hahon Kozikowski [8允许一个近似的比较的净化和热稳定性fowlpox和大天花病毒。
牛痘病毒是病毒特征已广泛种植多种细胞系,从猴子和仓鼠肾细胞、鸡胚成纤维细胞。Fowlpox,由于主机的存在限制病毒基因组中的基因,感染各种物种不像牛痘。基于文献搜索,fowlpox病毒通常是生长在主要鸡胚胎成纤维细胞(CEF)细胞。由于维护更加困难的本质主要细胞系,它已被证实在这工作fowlpox可以生长在一个不灭的CEF, UMNSAH / DF-1细胞系。尽管fowlpox病毒的浓度在1 - 2的顺序记录单位不到牛痘病毒的浓度,fowlpox病毒的最低浓度大约是由这些细胞空斑形成单位/毫升。牛痘病毒滴度的空斑形成单位/毫升范围。这项工作中所使用的病毒是细胞相关病毒细胞溶解的细胞。病毒然后离心去除任何细胞碎片,这是类似于田边的方式和Hotta准备天花主要用于自己的工作。病毒的纯度使用是一个重要因素。高纯度的病毒比原油提取的快速灭活病毒。牛痘的纯度和fowlpox病毒具有可比性,因为病毒收获方法非常类似于田边和Hotta描述的方法。
从本研究数据表明,fowlpox病毒是一种适合大天花病毒当使用消毒剂的消毒模拟的满员(他们通常会使用)。Fowlpox病毒和疫苗病毒都是1分钟内灭活当使用下列消毒剂:70%乙醇,异丙醇50%,0.5%的次氯酸钠,30%的甲醛,苯扎氯铵10%,6.67%氯化cetyltrimethylammonium和3.33%苯扎氯铵的混合物,和1.75%的碘和10%的聚乙二醇的混合nonylphenyl醚。
病毒失活与最小浓度相同的化学物质也研究了在目前的研究中,为了确定两种牛痘的失活动力学和fowlpox。第一原则,为每个病毒失活曲线和化学出现类似;然而数学分析的数据显示明显的差异对牛痘fowlpox病毒处理0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚和40%乙醇。
本研究中描述的反应订单都是一线和二阶衰变反应。一阶反应是观察和牛痘fowlpox病毒治疗0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl醚、次氯酸钠0.025%和0.05%,0.1%的氯化cetyltrimethylammonium和0.05%苯扎氯铵。牛痘病毒40%乙醇处理还显示一阶反应,而二阶反应是观察到病毒时处理0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚。Fowlpox病毒表现出二阶反应时0.05%的碘和0.3%的聚乙二醇处理nonylphenyl醚和40%乙醇。
一阶衰减反应时通常预期观察病毒动力学。然而,痘病毒的独特特性的进一步分析表明可能原因fowlpox病毒治疗的观察到二阶反应0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl乙醚和40%乙醇和牛痘病毒治疗0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚。首先,脊椎动物痘病毒有独特nongenetically激活的能力。在nongenetic复活,一个感染痘病毒粒子能够激活第二个灭活痘病毒粒子(1]。其次,痘病毒(就像许多其他病毒)倾向于聚集在解决方案。聚合的病毒不能中和抗体被称为持久性分数或nonneutralizable分数10]。研究表明,牛痘病毒处理氮芥bis (-chloroethyl)甲胺(氮芥),化学以病毒失活,可以治疗这个代理,当粒子聚合(4]。事实上,Jolik表明rabbitpox病毒处理氮芥仍能够充当“脱壳”代理的其他病毒灭活,但仍然基因完整,这是上述现象的nongenetic复活(11]。基于数据和发表的研究,可以得出结论,fowlpox可能发生聚合超过牛痘病毒在0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚和40%乙醇,导致nongenetic复活,因此,一个二阶反应。因此,二阶反应可能是由于这一事实fowlpox病毒粒子病毒聚集的中心可能是保护消毒剂和有能力的活性基因完整,但fowlpox灭活病毒粒子。
动力学分析进一步阐明失活异同牛痘和fowlpox病毒。速率常数,起始浓度的计算,病毒和病毒的浓度时,。的价值观不同,不超过0.7 1 / s牛痘fowlpox病毒治疗0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl醚、0.025%次氯酸钠、0.05%次氯酸钠,0.1% cetyltrimethylammonium氯和0.05%苯扎氯铵。然而,牛痘fowlpox病毒治疗0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚和40%乙醇显示出较大的差异值。这些观察到的差异可能是由于这样的事实:当用40%的乙醇,牛痘fowlpox经历一个二阶反应进行了一阶反应。当处理0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚,数据表明fowlpox病毒更稳定的消毒剂。
虽然是一个重要的变量值比较,这项工作的目的,该病毒半衰期(模拟的适用性的)值是一个更好的指标。这项工作的目的是确定fowlpox净化模拟的是一个适合小天花病毒,因此病毒会存活的时间比速度更重要的反应。基于表中提供的数据1,我们可以得出这样的结论:fowlpox是天花的合适的去污模拟的主要使用以下消毒剂浓度时用于失活动力学:0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl醚、0.025%次氯酸钠、0.05%次氯酸钠和0.1%苯扎氯铵氯化cetyltrimethylammonium和0.05%。类似的病毒半衰期和反应订单表明fowlpox和牛痘病毒进行类似的反应类似的时候。然而,fowlpox不是一个合适的去污模拟的天花主要在使用0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚和40%乙醇。两种病毒的反应顺序的差异40%乙醇是重要的因素。此外,牛痘更稳定的两倍,比fowlpox消毒剂。Fowlpox比牛痘病毒病毒是20倍稳定在0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚。
本文中给出的研究表明fowlpox是天花的合适的去污模拟的主要使用以下满员时消毒剂:70%乙醇、50%异丙醇,0.5%的次氯酸钠,30%的甲醛,苯扎氯铵10%,6.67%氯化cetyltrimethylammonium和3.33%苯扎氯铵的混合物和1.75%的碘和10%的聚乙二醇的混合nonylphenyl醚。Fowlpox病毒也是一个合适的失活动力学模拟的时候处理下列物质:0.1%碘和5.7%聚乙二醇nonylphenyl醚、0.025%次氯酸钠、0.05%次氯酸钠和0.1%氯化cetyltrimethylammonium和0.05%苯扎氯铵。Fowlpox病毒不是一个适合大天花病毒失活动力学模拟的时候处理下列物质:0.05%碘和0.3%聚乙二醇nonylphenyl醚和40%乙醇。知道大天花病毒的遗传和去污相似性和牛痘从先前的研究,fowlpox病毒已被证明是一个合适的天花主要通过相同的去污模拟的结果使用牛痘病毒作为共同的研究之间的联系。
像净化研究,牛痘病毒作为天花病毒之间的共性和fowlpox病毒热稳定性研究。Hahon和Kozikowski8)确定和天花的主要病毒在不同的缓冲区的温度C使用牛痘病毒c。之前的研究表明,牛痘病毒有一个范围的值从20000到90000卡路里每摩尔12]。有一个大天花病毒病毒值的范围被卡普兰(12]。计算值本文中描述的牛痘病毒和fowlpox病毒落入卡普兰描述的范围,除了牛痘病毒在脑心浸液肉汤加热。的差异摘要值与牛痘病毒在脑心浸液肉汤可能由于减少病毒聚合,这可能影响了失活和血小板计数。Hahon和Kozikowski8)没有提到减少聚合在大天花病毒病毒在脑心浸液肉汤加热;然而,它们大天花病毒样本存储在脑心浸液肉汤,在这项工作中使用的病毒存储在DMEM包含10%的边后卫。的值计算出牛痘病毒在0.85%盐水,pH值4.5,PBS, pH值7.4,10%脱脂牛奶对牛痘(描述的范围12)和大天花病毒病毒(8]。的值计算fowlpox病毒在0.85%盐水,pH值4.5,PBS, pH值7.4,10%的脱脂牛奶,描述的范围和脑心浸液肉汤牛痘(Kaplan)和大天花病毒病毒(8]。Hahon和Kozikowski8)还指出,“这是常见的找到的值10的100卡路里每摩尔对蛋白质的变性程度”。的值中描述这个工作对牛痘和fowlpox病毒远远在10 - 100卡路里每摩尔每摄氏度的范围内。
这些研究表明fowlpox可以作为热稳定性模拟的天花主要在0.85%盐水,pH值4.5,PBS, pH值7.4,10%的脱脂牛奶,心浸液在温度从肉汤Cc .温度以上C, fowlpox似乎没有牛痘病毒一样稳定。储存条件的研究证明,即使存储C, fowlpox快速加热时变性C相比,牛痘病毒。