Ozonated芦荟精华素油有效的增加成纤维细胞和胶原蛋白的数量增厚全层皮肤缺损的愈合反应

文摘

客观的。本研究旨在考察ozonated的有效性芦荟精华素石油的伤口愈合反应全层缺损组织Sprague-Dawley老鼠,评估胶原厚度和成纤维细胞的数量。方法。这是一个实验研究方法使用对照组和治疗组后测控制组设计。结果表明,胶原蛋白在伤口倾向于增加厚度,评估3天7天使用马森的三色的染色和显微镜评估。结果。有显著差异的数量成纤维细胞之间的控制和治疗组两天使用单向克鲁斯卡尔-沃利斯检验测试3和7,价值 ,导致组织之间的显著差异在伤口的大小减少。进一步的事后分析使用Mann-Whitney测试表明对照组和治疗组之间的显著差异(P0, P1和P3, P4、P5 P8,票数,P10)的价值 。结论。Ozonated芦荟精华素石油是有效增加全层缺损的愈合反应,导致成纤维细胞和胶原蛋白的数量增厚的增加,反过来加速伤口愈合Sprague-Dawley老鼠。

1。介绍

全层伤口是一种伤害,时间跨度从表皮,真皮,脂肪层,筋膜,甚至到骨头里1]。纤维母细胞增殖发生从第四天到创伤后21天。在这个阶段,platelet-rich-fibrin矩阵和巨噬细胞逐渐被肉芽组织取代,组成集群的成纤维细胞,巨噬细胞和内皮细胞形成细胞外基质和新血管形成。在纤维素增生阶段,伤口是由炎症细胞、成纤维细胞和胶原蛋白,形成红色的组织,崎岖不平的表面称为肉芽组织。胶原蛋白是由成纤维细胞在增殖阶段,有助于重塑和链接的伤口,让皮肤有抗拉强度,以及作为一个框架和支架运动的成纤维细胞和其他细胞在伤口愈合过程。成纤维细胞帮助分解纤维蛋白凝块,形成一个新细胞外基质(ECM),与胶原蛋白结构的形成(2]。成纤维细胞的主要功能之一,myofibroblasts是促进更大的伤口大小减少通过提供一个收缩力量,汇集了两条边的伤口3]。

芦荟精华素已经证明,通过调节炎症,提高伤口愈合提供更大的伤口大小减少,上皮形成和改善伤口。芦荟精华素还可以改善伤口愈合,促进成纤维细胞和角质细胞增殖和迁移4]。病变处理芦荟精华素有更好的生化、形态和伤口的生物力学特性,即。,增加最大载荷、极限强度、弹性模量。臭氧治疗是一种另类疗法,可以用作消毒剂和能引起强烈的氧化应激,从而刺激细胞和器官的保护机制。吻合的治疗使用局部臭氧政府相同的有效性与透明质酸凝胶治疗,但更有效阻止hyperpigmented病变。臭氧疗法能灭活细菌通过破坏细菌细胞信封通过氧化磷脂和脂蛋白,抑制真菌生长,破坏病毒衣壳,干扰细菌的生殖周期(5]。臭氧疗法可以作为辅助或替代标准治疗患者的各种类型的伤害(5]。

本研究报告使用ozonated臭氧的影响政府芦荟精华素石油在Sprague-Dawley加速全层缺损的愈合时间大鼠成纤维细胞和胶原蛋白的数量评估厚度。

2。方法

本研究只是一个后续测试的实验研究随机对照组设计检查的影响芦荟精华素成纤维细胞和胶原厚度。在这项研究中使用的动物是男性Sprague-Dawley老鼠,用下面的入选标准:男性Sprague-Dawley老鼠岁2个月,有健康状态(活动),重250±50克,没有可观察到的异常。在实验室老鼠的环境适应一周在单独的笼子里有12个小时的光和12小时的黑暗。在研究过程中,样本保持在室温条件下,光照12小时,美联储充分。Ozonated芦荟精华素获得等离子体Diponegoro大学的研究实验室,印度尼西亚,这是来自集中臭氧和芦荟精华素石油。ozonated油的样本被送往测试使用光谱仪或溶解臭氧仪设备。的臭氧水平ozonated石油通过滴定法测定碘化钾。

2.1。程序

2.1.1。伤口切口

老鼠雕刻背面直径1厘米为全层缺损模型。全层缺损的伤口切开,老鼠与ketamine-xylazine麻醉麻醉混合(氯胺酮80毫克/公斤体重;甲苯噻嗪10毫克/公斤体重)腹腔内注射。老鼠被放置在左侧卧位的位置。圆伤口的老鼠,直径1厘米。伤口是脂carnosus的底部。

2.1.2。生产Ozonated芦荟精华素

ozonated的制造和测试芦荟精华素进行了等离子体研究中心(中华人民共和国),Diponegoro大学,印度尼西亚。芦荟精华素通过提取石油芦荟精华素叶子与250毫升丙酮24小时索氏仪器。解决方案被旋转蒸发器40岁那么集中^oC和室温之后。的工具用于生产ozonated石油是臭氧发生器(臭氧发生器在房子由等离子体研究中心,生产Diponegoro大学)和磁搅拌器。臭氧出口连接到一个抗氧化作用与扩散器软管用来增加臭氧吸收石油的有效性。磁力搅拌器被用来促进臭氧溶解过程分为石油。本研究中使用的油芦荟精华素提取。臭氧溶解成芦荟精华素体积的40 cc在每个周期和一个氧流量的1.5升/分钟的臭氧浓度3360 ppm。臭氧化过程的持续时间取决于ozonated油的浓度从30到60到120分钟。在这个实验中,ozonated石油浓度是600毫克/毫升,1200毫克/毫升和1800毫克/毫升。ozonated石油经历了过氧化值(PV)评估。表1显示了PV浓度在每一个臭氧浓度剂量用于实验。

2.1.3。实验程序

芦荟精华素、庆大霉素和ozonated芦荟精华素石油被应用于伤口一天一次,覆盖整个伤口表面为每个处理。

2.2。治疗组

(我)阳性对照组(P1和P6):全层缺损愈合组,nonozonated芦荟精华素石油是老鼠的管理(2)阳性对照组(P2和P7):庆大霉素为治疗组1作为标准治疗(3)P3组:治疗组1中,受试者收到了ozonated芦荟精华素油含有600毫克的臭氧治疗,3天终止(iv)P4组:治疗组2中,受试者收到了ozonated芦荟精华素油含有1200毫克的臭氧治疗,3天终止(v)集团P5:治疗组3,受试者收到了ozonated芦荟精华素油含有1800毫克的臭氧治疗,3天终止(vi)P8组:治疗组1中,受试者收到了ozonated芦荟精华素油含有600毫克的臭氧治疗,7天终止(七)治疗组2组票数,受试者收到了ozonated芦荟精华素油含有1200毫克的臭氧治疗,7天终止(八)P10组:治疗组3,受试者收到了ozonated芦荟精华素油含有1800毫克的臭氧治疗,7天终止

老鼠的治疗终止根据研究设计在每组每天3和7。伤口组织被切割的伤口,包括正常皮肤组织中最大的部分。切除组织立即被分散在纸上,让它更容易使用切片机切。之后,在10%的缓冲福尔马林固定和嵌入在石蜡块,然后切割成4 - 6微米的厚度与圆)染色组织病理学检查。成纤维细胞计数是由两个独立的审查员根据细胞形态使用Optilab Pro (Miconos、印尼)。染色和考核的胶原蛋白和纤维母细胞进行了解剖病理学实验室,医学院,意大利Sebelas Maret,独奏。

2.3。统计分析

使用计算机软件进行数据分析。本研究利用克鲁斯卡尔-沃利斯检验以确定是否存在显著差异的得分超过一组的变量,通过比较治疗组的数据。使用Shapiro-Wilk正常测试的数据进行了测试。

由于数据的非正态的分布,利用克鲁斯卡尔-沃利斯检验的非参数检验。的p价值被认为是重要的 。如果统计检验表明失败拒绝H₀(组)之间无显著差异,不会进行事后分析。与此同时,如果发现显著差异,Mann-Whitney测试执行。Mann-Whitney测试如果方差的显著差异进行观察(意义 )。

2.4。伦理批准

本研究获得了道德健康研究伦理委员会批准的医学院,Diponegoro大学,没有。132 / EC / H / KEPK / FK-UNDIP / X / 2019。所有实验动物管理和照顾符合动物福利的标准。

3所示。结果

观察成纤维细胞的结果提出了表2- - - - - -4。从克鲁斯卡尔-沃利斯检验紧随其后的是事后分析使用Mann-Whitney测试,发现成纤维细胞的数量在全层皮肤缺损倾向于增加使用1800毫克ozonated伤口护理芦荟油而伤口护理只接收芦荟精华素石油(K1 +和P3) 3×110.6天(39.2 - -157.2)µ米²第七天,242.2 (168.8 -265)µ米²。管理ozonated芦荟精华素石油Sprague-Dawley每组的大鼠全层缺损组织已经发现提高成纤维细胞的数量。显然,管理一定剂量的ozonated芦荟精华素石油(1200毫克和1800毫克)治疗组3天(P4 P5)和治疗组在7天(P9 P10)明显导致了更多的成纤维细胞在伤口愈合过程中,相比ozonated管理工作芦荟精华素石油的剂量600毫克(P3和P8), 110.6 (38 - 116.8)µ米²110.6 (39.2 - -157.2)µ米²,7天169.2 (97 - 204.8)µ米²168.8和242.2 (-265)µ米²106.6(57 - 117)相比,µ米²141.6 (78.2 - -208.6)µ米²。成纤维细胞的数量可能会增加使用ozonated伤口愈合过程芦荟精华素石油与伤口愈合使用庆大霉素(K2 +)。然而,P4和P5之间没有显著差异。这表明ozonated的管理芦荟精华素石油有一个显著的影响提高伤口愈合反应全层缺陷,导致增加Sprague-Dawley鼠成纤维细胞的数量。

3.1。视觉观察成纤维细胞的描述

是观察成纤维细胞的数量在第三天变化根据每个组P1(对照组芦荟精华素油),P2与庆大霉素(对照组),P3 (ozonated给出的治疗组芦荟精华素石油的剂量600毫克),P4 ozonated(治疗组芦荟精华素石油的剂量1200毫克),P5 ozonated(治疗组芦荟精华素石油的剂量1800毫克(图)1)。

与此同时,成纤维细胞的数量在7天的P6组(对照组芦荟精华素油),P7与庆大霉素(对照组),与ozonated P8(治疗组芦荟精华素石油的剂量600毫克),与ozonated票数(治疗组芦荟精华素石油的剂量1200毫克),并与ozonated P10(治疗组芦荟精华素石油在一个剂量1800毫克)增加ozonated的第三天相比芦荟精华素政府(图2)。

从上面的两张图片可以看出,成纤维细胞的数量在P4和P5 3天及P9 P10 7天,显示成纤维细胞的数量的增加在伤口愈合。

3.2。胶原厚度

正常的测试是第一前提参数检验的统计检验。正常测试的结果如表所示5和6。克鲁斯卡尔-沃利斯的结果值为0.115时表示 至少显示无显著差异的两个治疗组。

图3阐述了胶原蛋白在每个组的厚度在3天P1(对照组芦荟精华素油),P2与庆大霉素(对照组),P3与ozonated(治疗组芦荟精华素石油剂量600毫克的剂量),与ozonated P4(治疗组芦荟精华素石油的剂量1200毫克),P5 (ozonated治疗芦荟精华素石油的剂量1800毫克)。是观察胶原厚度改善由于ozonated的效果芦荟精华素石油(图3)。

与此同时,在图4,胶原厚度在7天P6将根据每个组(对照组芦荟精华素油),P7与庆大霉素(对照组),与ozonated P8(治疗组芦荟精华素石油的剂量600毫克),与ozonated票数(治疗组芦荟精华素石油的剂量1200毫克),并与ozonated P10(治疗组芦荟精华素石油的剂量1800毫克)。有胶原厚度的增加是由于ozonated的效果芦荟精华素石油(图4)。

4所示。讨论

管理ozonated芦荟精华素石油有影响提高伤口愈合反应全层缺陷,导致成纤维细胞和胶原蛋白的数量的增加厚度,进而加速伤口愈合Sprague-Dawley老鼠。这也支持我们之前发现ozonated芦荟精华素石油巨噬细胞数量增加,上皮形成过程(6]。

这项研究的结果表明,胶原蛋白的全层缺损ozonated对待芦荟精华素石油比治疗更厚芦荟精华素石油和庆大霉素药膏。Ozonated芦荟精华素石油增加活性氧(ROS)和活性氮物种(RNS)绕的网站,如血小板、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和角化细胞,作为伤口愈合激进分子(7]。成纤维细胞在伤口部位会产生胶原蛋白,这是一个未分化间充质细胞。成纤维细胞会产生黏多糖、脯氨酸和aminoglycine酸,作为基本原料的胶原纤维,控制伤口边缘(8]。

成纤维细胞是主要的细胞在增殖阶段扮演重要角色在提供细胞外基质作为框架角化细胞迁移(9]。更高的成纤维细胞在治疗组导致更快的上皮形成积极控制伤口组相比,治疗组的数据1和2。伤口大小进行统计分析比较对照组和治疗组,揭示了成纤维细胞的数量增加治疗组。

在增殖阶段,伤口炎症细胞,成纤维细胞和胶原蛋白,形成红色的组织,崎岖不平的表面称为肉芽组织。随后,伤口边缘的上皮细胞组成的基底细胞分离的基础和填补伤口表面向外移动。网站是那么充满新细胞有丝分裂形成的过程。迁移过程只发生在较低或平面的方向。这个过程只有停止后上皮细胞相互连接,包括伤口表面。一旦关闭,伤口表面的纤维素增生阶段肉芽组织的形成也将停止和成熟过程开始于重构阶段。

胶原蛋白3和7天的观察是厚的比阳性对照组治疗组。在正常组织中,矩阵metalloproteinase-1的分泌和活动(金属蛋白酶- 1)很低,但在受伤或发炎组织生产和金属蛋白酶- 1的分泌就会增加。这是这项研究的结果证实了胶原蛋白在治疗组厚天因为ozonated 3和7的观察芦荟精华素能抑制金属蛋白酶- 1生产胶原蛋白合成增加。

的影响芦荟精华素在伤口愈合评估胶原厚度和Sprague-Dawley鼠成纤维细胞的数量。胶原厚度计算3和7天使用范Gieson和评估在毫米和显微镜下拍照使用Optilab pro (Miconos、印尼)。同时,计算成纤维细胞的数量进行3和7天治疗后,评估使用范Gieson的染色和显微镜下评估与平方微米区域(400 x放大µ米²)。

成纤维细胞的数量在全层缺损ozonated对待芦荟精华素石油高于处理芦荟精华素石油和庆大霉素软膏。一些之前的研究表明,臭氧在伤口愈合中起着重要的作用和抗菌活性10]。Ozonated药膏增加活性氧(ROS)伤口部位作为二级信使对各种免疫细胞和nonlymphoid细胞参与伤口修复的过程,在协调中起着关键作用淋巴细胞伤口的招聘网站和有效的组织修复。ROS也能够调节血管(血管),形成优化血液灌注到伤口愈合区域(11]。关于免疫,ROS行为通过吞噬细胞产生大量活性氧杀死病原体的出现在伤口,导致细菌的伤害。大量活性氧诱导的如上所述指ROS破裂,这是一种呼吸爆发之前大量的耗氧量。呼吸爆发导致大量释放活性氧和RNS,杀死病原体吞噬了这些细胞。细胞在伤口愈合,如血小板、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞和角化细胞使用ROS和RNS激进分子在伤口愈合11]。因此,活性氧可用于治疗慢性伤口很难治疗(11]。

这项研究的限制包括卫生的多样性的老鼠,这个影响伤口愈合的过程。此外,伤口愈合的阶段发生在天3和7的抽样由于不能确定合理的差异之间的伤口愈合过程Sprague-Dawley老鼠和人类。需要进一步的研究包括在体外实验中是否ozonated芦荟精华素治疗直接影响成纤维细胞增殖来支持我们的发现。

5。结论

ozonated管理芦荟精华素石油在1800毫克剂量的臭氧全层缺损的成纤维细胞数量大大增加,与集团收到这样的剂量成纤维细胞数显著高于对照组,只给出了芦荟精华素石油和庆大霉素和没有显著差异的低剂量ozonated相比芦荟精华素石油集团。ozonated管理芦荟精华素油显著提高胶原厚度在全层缺损创伤治疗组与对照组相比,那只是芦荟精华素石油和庆大霉素,没有显著差异胶原蛋白组给予高剂量ozonated之间的厚度芦荟精华素与低剂量组。

数据可用性

Excel数据用于支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

作者想表达自己的感激之情等离子体研究中心(CPR), Diponegoro大学,一直以来。这项研究由医学院,Diponegoro大学。

引用

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