转录后的抑制Lipopolysaccharide-Stimulated中年小鼠巨噬细胞的炎症反应:一个可能的角色真核起始因子2α

文摘

巨噬细胞炎性反应细菌组件的强度随着年龄的增长逐渐减少。考虑到减少蛋白质合成率是一种常见的与年龄相关的生化变化,这部分是靠增加真核起始因子2的磷酸化α(eIF-2α),我们调查的恶化负责巨噬细胞炎症反应机制,特别关注的与年龄相关的生化变化中年老鼠。腹膜巨噬细胞与丽江(年轻)和饭(中年)雄性BALB / c小鼠刺激与脂多糖(LPS)。尽管LPS-stimulated分泌肿瘤坏死因子-α(肿瘤坏死因子-α)由中年老鼠巨噬细胞明显低于从年轻的老鼠,有限合伙人在TNF水平,引起显著增加α信使rna中年以及年轻小鼠的巨噬细胞。此外,有限合伙人诱发类似c-Jun n端激酶的磷酸化水平(物)和核因子-κB (NF -κ在中青年小鼠B)。相比之下,磷酸化eIF-2的基础水平α从高于中年老鼠巨噬细胞,巨噬细胞从年轻的老鼠。Salubrinal磷酸酶活性的抑制剂,脱去磷酸eIF-2α,抑制LPS-stimulated炎症反应在小鼠巨噬细胞细胞株RAW264.7。这些结果表明,转录后的抑制巨噬细胞炎症反应在中年需要eIF-2的磷酸化α。

1。介绍

增加对感染性疾病的易感性是年龄的特点和与各种免疫细胞的功能(1- - - - - -6]。在这些细胞巨噬细胞,在第一行扮演关键角色的宿主防御病原微生物(1- - - - - -6]。巨噬细胞使用toll样受体(TLR)亚型的细胞表面识别各种病原体组件,如脂多糖(LPS);随后激活下游的细胞内信号导致的生产和分泌促炎介质,包括肿瘤坏死因子-α(肿瘤坏死因子-α)[7]。急性炎症促进积累和激活免疫细胞的感染病灶。

生产水平LPS-induced inflammatory-promoting细胞因子通过与老化(巨噬细胞逐渐减少8,9]。以前发现的缺陷的细胞内信号转导的下游TLR在advanced-aged (18-24-month-old)老鼠。例如,细胞表面的腹膜和advanced-aged小鼠脾脏巨噬细胞显示减少TLR4 coreceptor CD14的水平(9,10]。Advanced-aged老鼠也显示减少细胞内信号蛋白的水平,如增殖蛋白激酶(MAPK)和c-Jun n端激酶(物),相比之下,年轻的老鼠(11,12]。此外,DNA微阵列分析表明抑制TLR信号通路的基因负责核因子-κB (NF -κB)激活advanced-aged老鼠(13]。然而,巨噬细胞炎症反应的机制负责衰减在中年老鼠尚未完全阐明。

大部分蛋白质合成率下降是最常见的一种与年龄相关的生物化学变化14,15]。信使核糖核酸的翻译成蛋白质是由物理交互methionyl tRNA专业的起始(Met-tRNAi),几个真核起始因子(eIF)子单元,和40 s核糖体16]。的eIF子单元,磷酸化Ser51 eIF-2α竞争性抑制eIF-2B的国内生产总值(GDP) /三磷酸鸟苷交换催化活性;这进一步抑制绑定Met-tRNAi复杂的mRNA和随后的蛋白质合成17,18]。与年轻的老鼠相比,表达高水平的磷酸化eIF-2 advanced-aged老鼠α及其激酶,双链依赖rna的蛋白激酶(PKR)在肝脏和肾脏19]。水平的磷酸化eIF-2α大脑皮层的中年老鼠是高于年轻老鼠(20.]。相比之下,有一个报告,磷酸化的各种eIF子单元,包括eIF-2α,减少了在不同老化鼠组织(21]。然而,目前尚不清楚年龄如何影响eIF-2的磷酸化α在巨噬细胞和eIF-2什么角色α在LPS-stimulated巨噬细胞炎症反应。

为了更好地理解的分子机制负责巨噬细胞炎症反应与年龄相关的恶化,我们检查了LPS-stimulated TNF -的生产α在蛋白质和mRNA水平;物LPS-stimulated磷酸化,NF -κB抑制剂κBα(我κBα);和磷酸化形式的eIF-2的水平α从丽江和PKR居民腹膜巨噬细胞(年轻)和12个月大的雄性BALB / c小鼠(中年)。此外,阐明eIF-2活动形式的功能作用α我们检查了salubrinal的影响,特定于eIF-2磷酸酶的选择性抑制剂α(22- - - - - -24),LPS-stimulated小鼠巨噬细胞的炎症反应细胞株RAW264.7。

2。材料和方法

2.1。老鼠

两个月(年轻)和饭(中年)雄性BALB / c小鼠(对于每一个年龄段)从查尔斯河实验室购买(日本神奈川)和参照了一个星期,以便适应新的环境。老鼠被单独安置在塑料笼子里的温度第23 - 25°C和50 - 60%的相对湿度与一个固定的光/暗周期(光07:00晚7:00 h和黑暗从19:00至07:00 h) (25,26]。食物(CE-2立方类型;克丽日本,东京、日本)和自来水煮沸后随意(25,26]。所有动物保健和实验程序委员会批准的动物保健,伦理,和使用在早稻田大学(2013 - a031)数量和执行按照指导原则的动物保健和使用委员会批准的生理学会的日本,基于1964年的赫尔辛基宣言。

2.2。细胞制备和文化

适应时期,后腹膜细胞收获从小鼠的腹腔灌洗与冰冷的杜尔贝科的磷酸盐(DPBS;Nissui制药、日本东京)[27- - - - - -29日]。细胞在RPMI1640 resuspended介质(Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)补充heat-inactivated 2%胎牛血清(的边后卫;擤鼻涕、Nuaille、法国),100单位/毫升青霉素、链霉素和100毫克/毫升(Nacalai Tesque,京都,日本)。四只老鼠的细胞池,因为居民的腹腔巨噬细胞的数量一个老鼠实验的不足(27- - - - - -29日]。细胞密度被调整至2×10⁶细胞/毫升,腹膜细胞培养在37°C湿润孵化器,包含5%的股份有限公司₂以空气为2 h,使巨噬细胞坚持表面的细胞培养板(25- - - - - -29日]。不依从细胞被移除后,细胞培养有或没有100 ng / mL有限合伙人大肠杆菌(大肠杆菌055年):B5 (Sigma-Aldrich) 6 h。

2.3。酶联免疫吸附试验(ELISA)

收集细胞培养上清液,离心5分钟300×g,并存储在−80°C,供以后使用。肿瘤坏死因子-的浓度α在上层清液使用Quantikine ELISA测定小鼠肿瘤坏死因子-α免疫测定(研发系统,明尼阿波利斯,美国)。

2.4。反向Transcriptase-Polymerase连锁反应(rt - pcr)

细胞总RNA提取和纯化的细胞使用RNAiso +(豆类生物、志贺、日本)。细胞总RNA的一个微克是转换为单链cDNA使用Transcriptor合成第一链cDNA工具包(罗氏应用科学,印第安纳波利斯,美国)。互补脱氧核糖核酸(1μL)受到了PCR使用前Taq DNA聚合酶(豆类生物)和放大了以下步骤:变性在94°C,持续30秒,退火55°C,持续30秒,然后在72°C扩展了30秒。在这项研究中使用的引物是列在表中1。PCR产品在1.5%琼脂糖凝胶电泳中含有1μg / mL溴化乙锭,然后是可视化和量化使用las - 3000发光图像分析仪(富士胶片、东京、日本)。

2.5。西方墨点法

的细胞被洗了三次DPBS (Nissui),然后整个细胞蛋白提取与裂解缓冲包含10毫米三羟甲基氨基甲烷HCl液pH值(7.8),1%诺乃清洁剂p 40, 0.15 M氯化钠,1毫米乙二胺四乙酸(EDTA)补充完整EDTA-free蛋白酶抑制剂鸡尾酒平板(罗氏应用科学)和EDTA-free磷酸酶抑制剂鸡尾酒(Nacalai Tesque)。细胞总蛋白(10μ在37°C g)是孵化1 h在示例缓冲区,包含75毫米三羟甲基氨基甲烷HCl液pH值(6.8),0.6%十二烷基硫酸钠(SDS)、15%甘油、7.5%β巯基乙醇,9μg / mL溴酚蓝,然后是通过8%或10% SDS-polyacrylamide凝胶电泳分离。转移后聚乙二烯二氟化物膜(通用电气医疗集团,白金汉郡,英国),膜被5%牛血清白蛋白。主要的抗体β肌动蛋白、phospho-JNK物、phospho-p65 p65 phospho-IκBα,我κBα,phospho-eIF-2α,eIF-2αglyceraldehyde-3-phosphate脱氢酶(GAPDH),蛋白激酶RNA-like内质网激酶(活跃)(细胞信号技术,丹弗斯,妈,美国),phospho-PKR或PKR(美国圣克鲁斯生物技术、达拉斯、TX)应用变换稀释。二次抗体(辣根过氧化物酶-(合)共轭AffiniPure山羊Anti-Rabbit免疫球蛋白;杰克逊免疫研究实验室,西树林,PA,美国)应用1/5,000稀释。膜是孵化与清晰的西方ECL衬底(Bio-Rad实验室、大力神、钙、美国),和目标蛋白质被可视化和量化使用las - 3000发光图像分析仪(富士)。

2.6。细胞系和文化

小鼠巨噬细胞的细胞株RAW264.7得到从美式文化集合(美国弗吉尼亚州马纳萨斯)和在杜尔贝科的修改鹰培养基培养(Sigma-Aldrich)补充10% heat-inactivated的边后卫(擤鼻涕),100单位/毫升青霉素、链霉素和100毫克/毫升(Nacalai Tesque)。上面描述的是那些使用的培养条件。细胞与100 ng / mL LPS刺激的10μM salubrinal (Calbiochem、圣地亚哥、钙、美国)或二甲亚砜(DMSO)仅6 h。细胞培养上清液的化验和细胞信使rna和蛋白质进行如上所述。

2.7。统计分析

提出了实验数据的平均值±标准平均误差(SEM)。对等组是由单向方差分析测试手段。事后比较来确定之间的显著差异进行了三组或更多使用Bonferroni测试。差异被认为是重要的时候。

3所示。结果

3.1。转录后的抑制TNF - LPS-Stimulated生产α腹膜巨噬细胞由中年老鼠

我们首先检查LPS-stimulated TNF -的生产α由中青年小鼠腹腔巨噬细胞分离。肿瘤坏死因子-的浓度αLPS-stimulated文化上层清液的细胞从中年老鼠明显低于年轻老鼠(图1(一))。然而,有限合伙人引起了更高水平的增加肿瘤坏死因子-α信使rna在细胞中年老鼠比细胞小老鼠(图1 (b))。这些结果表明,中年的发病与转录后的抑制TNF - LPS-stimulated生产α腹膜巨噬细胞。

3.2。激活物和NF -κB信号由有限合伙人在腹膜巨噬细胞从中年老鼠

验证信号转导由LPS受体TLR4在中年老鼠巨噬细胞,我们接下来LPS-stimulated磷酸化意味着相比,p46子单元的物,NF - p65亚基κB,和我κBα蛋白质中青年小鼠的巨噬细胞。巨噬细胞从中年以及年轻小鼠诱发类似物的磷酸化水平意味着亚基在应对有限合伙人(图2(一个)),总表达水平比较小鼠的巨噬细胞收集两个年龄组(图2 (b))。暴露在LPS引起类似的磷酸化水平的增加物的p46单元从中青年小鼠巨噬细胞(图2 (c))。尽管在细胞水平的磷酸化p65中年老鼠低于从年轻的老鼠没有LPS刺激的,水平的磷酸化p65增加到相同的程度上接触后的两组样本有限合伙人(图3(一个))。此外,LPS刺激类似水平的磷酸化和退化的我κBα从年轻或中年老鼠巨噬细胞(数字3 (b)和3 (c))。这些结果表明正常激活物和NF -κB信号由有限合伙人在腹膜巨噬细胞从中年老鼠。

3.3。腹膜巨噬细胞从中年老鼠eIF-2水平更高α磷酸化比年轻的老鼠

鉴于磷酸化Ser51 eIF-2α降低利率的蛋白质翻译(17,18相比),我们接下来eIF-2的磷酸化形式的表达水平α和它的激酶(PKR)中青年小鼠的巨噬细胞。在缺乏有限合伙人,磷酸化Ser51 eIF-2α在中年老鼠的细胞是高于从年轻的老鼠(图4(一))。接触有限合伙人的磷酸化水平降低Ser51两组巨噬细胞,尽管中年小鼠的巨噬细胞的磷酸化水平高于年轻小鼠的巨噬细胞(图4(一))。然而,没有明显的信使rna表达水平的差异ATF1,eIF-2的目标基因α中年和青年之间,老鼠(图5(一个))。此外,从中年老鼠巨噬细胞含有更多PKR比年轻的老鼠没有有限合伙人(图4 (b)),PKR磷酸化水平在两组小鼠的巨噬细胞与PKR(图的水平一致4 (c))。另一方面,由于接触有限合伙人、PKR的总体水平是高巨噬细胞从中年老鼠比年轻的老鼠(图4 (b)),尽管PKR的磷酸化水平降低巨噬细胞从中年老鼠比年轻老鼠(图4 (c))。巨噬细胞从中年老鼠也包含更多的活跃,eIF-2其他激酶α,比年轻的老鼠没有有限合伙人(图5 (b))。

3.4。药物抑制eIF-2α抑制了脱磷酸化LPS-Stimulated RAW264.7细胞的炎症反应

阐明eIF-2的活动形式的功能作用α在LPS-stimulated炎症反应,salubrinal LPS-stimulated肿瘤坏死因子——的影响α产品和细胞内信号转导在RAW264.7细胞检查。Salubrinal eIF-2的磷酸化的增加引起的α在有限合伙人(图的缺失6(一))或在有限合伙人的存在(图6 (c)),TNF的表达水平α信使rna没有受到salubrinal在相同的实验条件(图6 (b))。肿瘤坏死因子-的分泌物α从细胞也不影响抑制剂(数据没有显示)。治疗引起的巨噬细胞与salubrinal LPS-stimulated分泌的显著抑制肿瘤坏死因子-α(图7(一))。然而,治疗salubrinal并不影响LPS-induced增加丰富的肿瘤坏死因子-α信使rna(图7 (b))。此外,LPS-stimulated磷酸化物意味着亚基是同样诱发响应有限合伙人无论salubrinal(人物的存在7 (c)和7 (d))。

4所示。讨论

减毒巨噬细胞炎症反应的分子机制对致病因素一直在探索主要advanced-aged老鼠(1- - - - - -13]。这些研究主要集中在减少与年龄相关的TLR亚型的表达水平,其coreceptors如CD14、下游信号蛋白如MAPK和物(9- - - - - -13]。例如,信使rna表达水平的TLR在脾和thioglycollate-elicited腹膜巨噬细胞亚型18-24-month-old C57BL / 6小鼠显著低于从2-3-month-old同行30.]。此外,在腹膜表面CD14和脾巨噬细胞是低advanced-aged BALB / c和C57BL / 6小鼠比在年轻时(9,10]。尽管早些时候的报道的年龄依赖性降低利率和LPS-stimulated TNF - CD14表达α分泌(8,9),细胞内分子事件的细节从中年老鼠巨噬细胞尚未完全阐明。

在这项研究中,我们首先证明了水平LPS-stimulated TNF -α腹膜巨噬细胞分泌的居民从中年老鼠低于年轻的老鼠。这个结果与之前报道的发现是一致的(8,9,31日]。然而,我们也表明TNF的表达水平α信使rna在细胞中年增加以应对有限合伙人大大超过细胞从年轻的老鼠。这些结果表明,LPS-stimulated巨噬细胞炎症反应在转录后的减毒水平中年老鼠。

这个设想是由我们额外发现LPS-stimulated增加物的大小和NF -κB信号在中年和青年小鼠巨噬细胞是可比的。的丰度和LPS-stimulated磷酸化水平意味着物p46子单元,以及LPS-stimulated激活NF -κB,都是低advanced-aged BALB / c小鼠比年轻的同行(11,12]。我们的研究结果与之前报道的观察,表明老化与逐渐减少的水平LPS-stimulated生产促炎介质的巨噬细胞,尽管可想而知,与年龄相关的变化的机械基础advanced-aged和中年老鼠之间是不同的。

减少总体蛋白质合成率是最常见的一种与年龄相关的生化变化(14,15]。蛋白质合成的速度部分由eIF蛋白质家族成员的活动。例如,eIF-2磷酸化α在Ser51减少mRNA翻译(17,18]。我们观察到更高水平的磷酸化Ser51 eIF-2α在中年小鼠的巨噬细胞巨噬细胞从年轻的老鼠。此外,我们的药理实验,涉及eIF-2α磷酸酶抑制剂salubrinal证明增加eIF-2的磷酸化α防止LPS-stimulated TNF -α分泌抑制TNF的感应α信使rna和TLR4信号。这些结果表明功能作用增加eIF-2的磷酸化α与年龄相关的衰减的巨噬细胞炎症反应。

另一方面,没有明显差异ATF4 mRNA的表达水平之间的中年和年轻的老鼠。我们的在体外研究表明,ATF4 mRNA的表达水平相对当eIF-2 RAW264.7细胞增加了约1.1倍α磷酸化细胞增加了2.0倍的治疗10μM salubrinal 6 h(数据没有显示)。因此,可以想象,增加eIF-2的磷酸化α在中年老鼠是温和的,不达到最低阈值的转录激活。此外,抑制salubrinal对LPS-stimulated TNF -α在巨噬细胞分泌相对低于观察到中年老鼠。从这些结果,其他eIF亚基的表达和/或其他监管系统负责mRNA翻译等哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)途径也可以在受损老化(14,15]。

总丰度和整体水平的磷酸化PKR、eIF-2α激酶,在巨噬细胞从中年老鼠比年轻的老鼠。这些发现与以前的报告是一致的与年龄有关的upregulation PKR表达式和eIF-2α磷酸化在各种组织中,提出,这些变化可能是适应性反应与年龄相关的细胞的压力,包括氧化应激(19]。因此,激活PKR基因启动子的H₂O₂治疗中演示了Jurkat t淋巴球[32]。未来的研究可能会阐明氧化应激的影响PKR / eIF-2α路径和确定抗氧化剂能提高老年性激活的巨噬细胞炎症反应的途径和相关的衰减。此外,活跃的总丰度蛋白显示出类似的倾向增加PKR的相比,这表明eIF-2磷酸化的增加α在老化可能是由内质网的功能调制。

接触有限合伙人增加了丰富的观察的磷酸化形式PKR在巨噬细胞年轻老鼠和eIF-2磷酸化水平降低α除了PKR表明LPS激活因素,比如eIF-2α磷酸酶。此外,PKR LPS-induced磷酸化水平降低巨噬细胞从中年老鼠相比,年轻的老鼠显示与年龄有关的症状的恶化的健壮性LPS-stimulated激活的途径。

总之,LPS-stimulated巨噬细胞炎症反应被抑制在中年老鼠转录后的水平。eIF-2率的增加α磷酸化可能导致巨噬细胞炎症反应与年龄相关的衰减。

利益冲突

作者都没有任何利益冲突。

确认

这项研究的部分支持由年轻科学家的补助金(B)(24790593, 2012 - 2013年,K.S.)教育部,文化、体育、科技、日本、和补助金从全球卓越中心的博士项目,体育科学研究生院,早稻田大学(2009 - 2013,K.I.),从教育部,文化、体育、科技、日本。

引用

1. c . r . Dunston和h·r·格里菲思”老龄化对巨噬细胞的影响toll样受体介导反应对抗病原体,”临床和实验免疫学,卷161,不。3、407 - 416年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. c·r·戈麦斯诉Nomellini d e . Faunce和e·j·科瓦奇“先天免疫和衰老。”实验老年学,43卷,不。8,718 - 728年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. e·j·科瓦奇j·l·帕尔默,c·f·福丁,t .费洛浦用Jr .) d·r·戈尔茨坦,P.-J。”林惇,衰老和先天免疫在鼠标:内在和外在因素的影响,“免疫学的趋势,30卷,不。7,319 - 324年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. 答:熊猫,a . Arjona大肠Sapey et al .,“人类天生的免疫衰老:老年免疫的原因和后果,”免疫学的趋势,30卷,不。7,325 - 333年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. a·c·肖s乔希·h·格林伍德,a .熊猫和j . m .主,“先天免疫系统的老化,”当前舆论免疫学,22卷,不。4、507 - 513年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. d . Weiskopf b·温伯格,b . Grubeck-Loebenstein“衰老的免疫系统,”移植国际,22卷,不。11日,第1050 - 1041页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. t·卡瓦依和美国彰toll样受体及其与其他先天感染和免疫受体,相声”免疫力,34卷,不。5,637 - 650年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. m·l·科胡特d s Senchina k·s·马登,a·e·马丁·d·l·费尔和j·a·莫伊尼汉”年龄对巨噬细胞功能的影响随组织网站,兴奋剂的本质,和锻炼行为,”实验老年学,39卷,不。9日,第1360 - 1347页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. v . l .织女星,r·德·卡波,a . de Maio“年龄和热量限制饮食的混杂因素,修改对脂多糖C57BL / 6小鼠腹腔巨噬细胞,”冲击,22卷,不。3、248 - 253年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. r . l . Chelvarajan s·m·柯林斯j . m . van Willigen和s . Bondada”睡着时的多糖抗原的年长老鼠巨噬细胞功能缺陷的结果,“《白细胞生物学,卷77,不。4、503 - 512年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. e d》, j .羚d e . Faunce和e·j·科瓦奇,“年龄相关性toll样受体4-mediated减少促炎细胞因子的生产和增殖蛋白激酶表达,“《白细胞生物学,卷75,不。2、342 - 349年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. e d》, m·j·米b t . Cutro和e·j·科瓦奇“老化负面倾斜巨噬细胞TLR2, TLR4-mediated炎性反应,而不影响IL-2-stimulated通路”衰老的机制和发展,卷126,不。12日,第1313 - 1305页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. d . r . l . Chelvarajan y . Liu Popa et al .,“分子基础的与年龄有关的细胞因子失调LPS-stimulated巨噬细胞,”《白细胞生物学,卷79,不。6,1314 - 1327年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. s . i s藤”,合成,修改,和蛋白质周转老化,“实验老年学没有,卷。31日。1 - 2,33-47,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. s . i s藤、a . Derventzi和b·f·c·克拉克“蛋白质合成、转译后的修改和老化,“纽约科学院上卷。663年,48 - 62年,1992页。视图:谷歌学术搜索
16. m·莫雷尔j .女装设计师c . Lafay-Chebassier m . Paccalin g .页面,“PKR、双链依赖rna的蛋白激酶作为阿尔茨海默氏症的一个关键目标,“细胞和分子医学杂志》上,13卷,不。8,1476 - 1488年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. t·e·德弗j j。陈,g . n .理发师et al .,“哺乳动物真核起始因素2α蛋白质激酶功能代替GCN2激酶GCN4平移控制机制的酵母,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷90,不。10日,4616 - 4620年,1993页。视图:谷歌学术搜索
18. t . Krishnamoorthy g . d . Pavitt f, t·e·德弗和a·g·Hinnebusch”紧密绑定的磷酸化α在起始因子2 (eIF2的亚基α)管理单元所需的鸟嘌呤核苷酸交换因子eIF2B抑制翻译起始,”分子和细胞生物学,21卷,不。15日,第5030 - 5018页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. w·Ladiges j·莫顿、c·布莱克和m·盖尔”组织的具体表达式PKR蛋白激酶在老化B6D2F1老鼠,”衰老的机制和发展,卷114,不。2、123 - 132年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. y戈夫、d . m . Michaelson和k . Rosenblum”载脂蛋白eϵ4与eIF2相关联α磷酸化和受损的学习在年轻的老鼠,”神经生物学和衰老,34卷,不。3、863 - 872年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. s·g·侯赛因和k . v . a . Ramaiah eIF2减少α蛋白质磷酸化和增加proapoptotic老化,”生物化学和生物物理研究通信,卷355,不。2、365 - 370年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. k .总裁:海岬,h .横田,“抑制osteoclastogenesis通过磷酸化真核翻译起始因子2α,”骨和矿物质代谢》期刊上没有,卷。31日。6,618 - 628年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. p . Tsaytler和a . Bertolotti”利用选择性的蛋白质磷酸酶1药理干预,”2月期刊,卷280,不。2、766 - 770年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. p . Tsaytler惠普哈丁,d .罗恩和a . Bertolotti“选择性抑制的调节亚基蛋白磷酸酶1恢复proteostasis,”科学,卷332,不。6025年,第94 - 91页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. k . Shirato t . Kizaki t .樱井et al .,“低氧诱导因子- 1α抑制巨噬细胞清道夫受体1的表达。”弗鲁格档案,卷459,不。1,第103 - 93页,2009。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. k . Shirato佐藤,m .佐藤y Hashizume, k . Tachiyashiki, k . Imaizumi。”β₂受体激动剂双氯醇胺抑制细菌脾巨噬细胞表达高水平的巨噬细胞的吞噬作用受体与胶原结构,”生物与制药公告,36卷,不。3、475 - 480年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. 已经雕刻。伊藤,t . Kizaki y Hitomi et al .,”下调β2-adrenergic受体表达由巨噬细胞运动训练可以增加il - 12生产LPS刺激后,“生物化学和生物物理研究通信,卷322,不。3、979 - 984年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. t . Kizaki t Maegawa餐馆,则t .樱井et al .,“自愿运动肥胖相关炎症通过胃促生长素表达的巨噬细胞,”生物化学和生物物理研究通信,卷413,不。3、454 - 459年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. t . Kizaki t . Takemasa t .樱井et al .,”改编的巨噬细胞运动训练改善先天免疫,”生物化学和生物物理研究通信,卷372,不。1,第156 - 152页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. m . Renshaw j .罗克韦尔c . Engleman a . Gewirtz j . Katz和s . Sambhara“前沿:toll样受体表达和功能受损老化,“免疫学杂志,卷169,不。9日,第4701 - 4697页,2002年。视图:谷歌学术搜索
31. y太阳,h·李·m·f·杨w·舒m . j .太阳和y徐脂多糖引起的老化对内毒素耐受的影响来自Porphyromonas gingivalis和大肠杆菌”,《公共科学图书馆•综合》,7卷,不。6篇文章ID e39224 2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. C.-W。巴西,工程学系。李,S.-Y。崔,“氧化应激诱发PKR-dependent通过干扰素-细胞凋亡γ在Jurkat T细胞激活信号,”生物化学和生物物理研究通信,卷377,不。3、1001 - 1006年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2014肯Shirato和Kazuhiko Imaizumi。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。