文摘
我们调查分析干扰antithyroglobulin抗体(TgAb)甲状腺球蛋白(Tg)测量并试图测量Tg浓度转换为真正的Tg浓度用数学方程包括TgAb的浓度。方法。Tg测定immunoradiometric化验和TgAb放射免疫化验法。实验样本混合Tg和TgAb标准解决方案或混合产生的病人的血清Tg或高TgAb高。数学方程的预测预期Tg浓度测量Tg和TgAb浓度推断。Tg浓度计算公式与预期的Tg浓度。结果。测量Tg浓度的样品高TgAb远远低于他们的预期Tg浓度。级TgAb干扰Tg分析显示与TgAb浓度正相关。数学方程的估计预期的Tg浓度使用Tg和TgAb浓度测量成功地推导和计算Tg浓度显示良好的相关性与预期Tg浓度。结论。估计真正的数学方程推导了Tg浓度使用测量Tg和TgAb浓度。Tg浓度计算方程可能比测量更有价值的使用Tg浓度在分化型甲状腺癌患者。
1。介绍
甲状腺球蛋白(Tg)糖蛋白合成在正常或恶性甲状腺滤泡细胞,是一种残留或复发性分化型甲状腺癌的重要标志。察觉Tg是一个标准的建立缺乏持久的肿瘤或复发在分化型甲状腺癌患者接受全甲状腺切除术和残余消融与放射碘[1,2]。Tg是最敏感的标志检测分化型甲状腺癌的复发;然而,antithyroglobulin抗体的存在(TgAb)干扰Tg的测量;因此,Tg分析有限或根本没有发展的干涉TgAb和发展的方法清除TgAb Tg是保证测量之前1,3,4]。直到现在,没有TgAb-proof Tg分析(Tg测定没有影响TgAb)已经可用,TgAb的存在使测量Tg浓度低于真实的浓度(4- - - - - -6]。
在分化型甲状腺癌患者接受了治疗治疗,总甲状腺切除术之后,大剂量放射碘消融,切断的Tg值性能检测的成像研究持续的疾病或复发是可变的,根据TSH的状态和测量的浓度TgAb [1]。尽管缺乏国际共识关于适当的Tg切断值残留或复发性疾病(7),几乎所有的机构或医师有自己的切断根据TSH值预测持续或复发性疾病状态(刺激或不刺激)。另一个需要考虑的因素在解释测量Tg值TgAb的存在与否,最强的血清学的因素干涉可用Tg分析的准确性(3,8]。测量TSH-stimulated Tg可能导致未能识别重大TgAb持续或复发性肿瘤患者。影响力的大小TgAb Tg的测量是显示相关的浓度测量TgAb [4]。此外,它也已经知道,Tg等容易影响不如其他immunometric化验。最近,Locsei等人报道,减少测量Tg浓度增加羊TgAb electrochemiluninometric Tg分析和影响的大小是重要的甚至在参考值范围(9]。
在这项研究中,作者评估了Tg TgAb对测量的影响,建立了一个数学方程估计真正的Tg浓度在不同浓度的TgAb利用实验数据,采用Tg和TgAb测量的标准解决方案套件和病人的血清Tg或TgAb高。
2。材料和方法
2.1。Tg测量
Tg是衡量immunoradiometric化验(厄玛)使用商业试剂组(Dynotest Tg-plus;勃拉姆斯Diagnostica,柏林,德国,检出限;0.08 ng / mL,测量范围;250 ng / mL)根据制造商的建议。由制造商描述的方法如下。标准溶液或实验血清(100μL)与多克隆TgAb涂用移液器吸取到试管。管子在室温下培养18个小时,和洗两次2毫升的清洗解决方案。管是颠倒的吸墨纸上至少10分钟。管再次转向右侧,紧随其后的是200μL (125年标单克隆TgAb。管是孵化2 - 3小时在室温下用颤抖的(300 - 400 rpm),紧随其后的是洗两次2毫升的清洗解决方案。管又颠倒在吸墨纸至少10分钟。然后测量每个管的放射性。Tg浓度获得使用标准曲线推导出使用标准的解决方案。
2.2。TgAb测量
TgAb测量了放射免疫检定法(RIA)使用一套商业试剂(Dynotest anti-Tgn;勃拉姆斯Diagnostica,柏林,德国,检出限;5.5 U /毫升,测量范围;~ 2000 U /毫升)根据制造商的建议。由制造厂商描述的方法如下:标准溶液或测试血清(20μL)与多克隆anti-TgAb涂用移液器吸取到试管,紧随其后的是200μL (125年标Tg管。管是孵化2小时在室温下用颤抖的(300 - 400 rpm),其次是洗涤三次,洗2毫升的解决方案。管子可以颠倒吸墨纸至少10分钟。然后测量每个管的放射性。TgAb获得使用浓度标准曲线推导出使用标准的解决方案。
2.3。实验样品的制备
几个Tg浓度标准解决方案(4.0,20.0,100.0,和250.0 ng / mL, Dynotest Tg-plus)和几个TgAb标准浓度的解决方案(20.0,60.0,200.0,600.0,和2000.0 U /毫升,Dynotest anti-Tgn)准备。为了生成实验样品含有不同浓度的Tg和TgAb,涨跌互现(表相同体积的标准解决方案1)。血清样本含有不同浓度的Tg(9.3, 37.6, 221.9,和492.0 ng / mL)与低水平的TgAb (< 20 U /毫升)和含有不同浓度的血清样本TgAb(7.0, 10.4, 37.5, 1286.0,和1860.0 U /毫升)没有收集Tg (< 0.1 ng / mL)。所有的血清样本来自分化型甲状腺癌患者。为了生成实验样品与不同浓度的Tg和TgAb,相同体积的血清样本也混合(表2)。为了测试Tg浓度测量的重现性实验样本,三重样本准备每一实验样品的浓度产生使用标准的解决方案或病人的血清。
2.4。统计和推理预测真正的Tg的方程
Tg测量的重现性进行了测试。Tg的TgAb对测量的影响进行了分析和公式预测预期的(真正)Tg浓度测量Tg和TgAb浓度推断使用SAS程序(9.22版本,SAS研究所Inc .卡里,数控,美国)。被认为是显著的。
3所示。结果
3.1。Tg测量的重现性
Tg测量的重现性实验样品一式三份样品的浓度进行生产使用标准溶液或病人的血清是优秀的。变异系数实验样品生产使用标准的解决方案%(0 ~ 14.82)(组内相关系数= 0.998)。变异系数实验产生了利用患者的血清样本%(0.87 ~ 11.21)(组内相关系数= 0.999)。
3.2。TgAb对测量的影响的Tg使用标准样品产生的解决方案
Tg浓度测量显示增加的比例下降TgAb浓度在每一个样品生产使用标准的解决方案。测量Tg浓度样品的最低浓度(10 U /毫升)的TgAb高于预期的Tg浓度的样品。然而,高Tg浓度测量样本TgAb低于预期Tg浓度(表3,图1)。
3.3。TgAb对测量的影响从病人的血清Tg使用样品生产
测量Tg浓度显示下降增加TgAb每个样本用例血清浓度。测量了Tg浓度对所有样品被发现是低于预期Tg浓度(表4,图2)。
3.4。Tg浓度方程预测的预期
获得的数据与标准溶液用于推导方程的预测预期的Tg浓度测量Tg和TgAb浓度使用SAS程序。 计算Tg浓度被认为是更类似于预期Tg浓度比Tg浓度,测量和计算Tg与预期Tg浓度之间的相关性被发现优秀的(,)(数据3和4)。
(一)
(b)
(一)
(b)
此外,获得的数据与病人血清用于推导方程的预测预期的Tg浓度测量Tg和TgAb浓度使用SAS程序。 计算Tg浓度被认为是更类似于预期Tg浓度比Tg浓度,测量和计算Tg与预期Tg浓度之间的相关性被发现优秀的(,)(数据3和4)。
4所示。讨论
虽然大部分的分化型甲状腺癌患者明显呈现由最初的治疗,无病大约15%经历持续或复发性肿瘤(10,11]。持久的疾病或复发可以通过测量血清Tg,预测一个敏感的和特定的分化型甲状腺癌的肿瘤标志物检测。目前,切断值2 ng / mL的内生TSH或重组人类TSH-stimulation被认为代表重大风险(1,10]。然而,切断值从2到30 ng / mL,例如,10 ng / mL,也被应用于其他临床研究7,12]。
可检测TgAb报道与持久性相关的抗原刺激,和高达40%的分化型甲状腺癌患者阳性TgAb [13- - - - - -15]。一些报道表明,持久性的TgAb积极性可能建议持续或复发性疾病在某些情况下的分化型甲状腺癌;然而,其他研究已经报道TgAb水平和疾病之间没有相关性的持久性(16,17]。因此,最重要的临床问题对高血清浓度TgAb干扰Tg化验的结果在分化型甲状腺癌患者复发的工作(8,14,17,18]。
内源性TgAb已知干扰测量的Tg method-dependent方式;因此,预测Tg一定TgAb条件下也可以method-dependent [5]。数据发现文献中表明在TgAb面前,Tg值取决于immunoradiometric分析通常是低于实际价值,即使TgAb非常低的浓度(5,9,19]。在先前的报道中,我们观察到一个错误的低Tg值根据TgAb的存在,测量和显示正相关程度的浓度TgAb [3,4]。在最近的研究中,影响TgAb Tg测试与实验测量的样品由Tg和TgAb标准解决方案或病人的血清。两种不同方程预测真实Tg值成功推导出测试结果,和病人血清的方程将更适合于临床应用。根据目前的研究发现,真正在高浓度的TgAb Tg值测量值的两倍多。血清与真正的Tg值4.7 ng / mL可以测量2 ng / mL样品含有TgAb 1860 U /毫升的浓度。它可以认为测量患者Tg值4.7 ng / mL的Tg和TgAb大于1860 U /毫升可能小于2.0 ng / mL的Tg使用Tg测定。结果,当应用Tg切断2.0 ng / mL的价值,可以并被错误地归类为低风险病人疾病复发或持续。血清与真正的Tg值18.5 ng / mL可以测量9.1 ng / mL样品含有TgAb 1286 U /毫升的浓度。也可以认为测量患者Tg值18.5 ng / mL的Tg和TgAb大于1286 U /毫升可能小于10 ng / mL的Tg使用Tg测定。结果,当应用Tg切断10 ng / mL的价值,可以并被错误地归类为低风险病人疾病复发或持续。
高发病率的积极TgAb分化型甲状腺癌患者,与一般人群相比,已经被报道。此外,一些病人有高浓度的TgAb14,18]。考虑到当前的研究结果,一些患者边缘型Tg值可被误诊为低风险组,因此不会接受进一步的诊断评估检测疾病复发或持续。管理可以延迟和预后的疾病的病人可能比患者诊断早期复发或持续的疾病。
决定时考虑TgAb Tg值的临床意义的存在与否已基本TgAb只(1,20.]。它被普遍认为,TgAb效价测量低于临床阈值将不会显著影响Tg结果;然而,最近的研究表明,TgAb切断会影响以下Tg结果(19,21]。最近,Locsei等人也报告说,测量病人血清Tg值可以影响混合羊TgAb TgAb参考值范围的浓度和推导出方程估计真正的Tg浓度使用TgAb浓度相同的样本(9]。他们证明了Tg TgAb影响测量的一般概念;然而,它们的方程不能普遍应用于临床实践由于羊TgAb和人类TgAb之间的区别。验证人类TgAb TgAb影响使用,不是羊TgAb,是必要的。
在目前的研究中,我们使用人类TgAb从病人的血清Tg的影响评估的Tg分析,同样验证了重大影响人类TgAb Tg测定在参考范围内。本研究的结果表明,人类TgAb浓度参考值范围也可以极大降低Tg值,测量和高浓度的TgAb可能导致测量Tg值更低;因此,发展的方法,供临床医生考虑到使用伴随低或高的浓度测定TgAb Tg值测量的临床意义是一个紧迫的问题。在与实验中使用病人的血清,低浓度的TgAb产生过高的Tg在实验中使用的标准解决方案,并说明原因并不是表现在当前的研究中。
已知的大小影响不仅取决于分析方法的类,而且Tg抗原决定基的类型被病人的TgAb [16,18,22]。因此,开发一个方程可以应用于所有分析方法和所有病人可能不可能。在这项研究中,有一个大的许多实际点的偏差曲线符合数据1和2的反演计算,表明真正的Tg值根据方程在某些病人可能给完全错误的结果。偏差可能源于interpatient变异性的影响大小与患者TgAb的异质性。然而,目前的研究结果表明,计算的Tg值方程通常是接近真实的Tg值比测量Tg值。根据结果,纠正Tg值比测量方程可能是更有价值的Tg值预测的存在或复发癌分化型甲状腺癌患者的病变。然而,事实上,临床验证研究需要实现方法允许医生在临床实验室实践。
这项研究有一定的局限性。首先,尽管努力规范甲状腺球蛋白分析物在试验平台上,平台之间的差异仍然存在,可以相关基因多态性介绍蛋白质一级结构的变化,蛋白质糖基化途径这可能导致变量处理,修改,或交联6,8]。TgAb化验的结果也是已知抗原决定基不整合的模式,特别是在病人没有甲状腺炎(23]。方程将根据试验平台用于测量不同Tg和TgAb不能通用。因此,机构的方程必须由特定的Tg和TgAb化验使用。第二,我们没有评估TgAb的Tg对测量的影响。真正的Tg值估计使用Tg和TgAb值衡量,真正的TgAb值应该插入方程。Tg的影响还应该考虑TgAb试验(18]。第三,预期Tg和TgAb值可能不准确的样本用例血清TgAb由于血清中Tg的存在和存在TgAb血清Tg,尽管他们在效价非常低。第四,在这项研究中,我们使用只有四个浓度的Tg和五个TgAb浓度。因此,方程的公式估算真实Tg浓度不是最准确,还需要进一步的研究,以开发最准确的方程估计真正的Tg浓度使用Tg和TgAb浓度测量。
总之,来自本研究的发现表明一个数学方程预测真正的Tg浓度使用Tg和TgAb浓度测量。真正的Tg浓度方程计算的可能更有价值比测量Tg值预测存在残留或复发性恶性病变在分化型甲状腺癌患者。
利益冲突
作者没有利益冲突。
确认
这项工作是(A102132 A111345)赠款支持韩国卫生技术研发项目,卫生和福利部,韩国,核工业的资助研发项目通过韩国国家研究基金会(NRF)由教育部、科学和技术(没有。2012 m2a2a7014020),韩国国家研究基金会的资助(NRF)授予由韩国政府资助(最高明的)(没有。2012 - 0004878,2012 - 0004879)。