文摘

糖尿病被腹腔注射链脲霉素诱导(35毫克/公斤体重)在所有五组的大鼠在高脂肪饮食喂养2周。2型糖尿病Nerium-oleander -(没有)管理组收到了没有馏分油剂量的3.75,37.5,375μ0.5 g / mL蒸馏水(没有- 0.1,1号,10号,职责);阳性对照组格列本脲0.6毫克/公斤体重/ d了填喂法每天12周。2型糖尿病负对照组没有治疗。没有馏分油管理降低空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗、总胆固醇、低密度脂蛋白、硬化指数、triglyceride-HDL比率,胰岛素和瘦素水平。改善β细胞功能和高密度脂蛋白浓度观察没有使用。高密度脂蛋白在总胆固醇的比例没有类似于健康的组织控制。10号馏分油增强mRNA的表达过氧物酶体proliferator-activated-receptor (PPAR -)α,β,γ在脂肪组织和PPAR -α- - - - - -γ在肝脏。这些发现来自两个在活的有机体内和在体外研究表明,相当多的有益影响的馏分油政府375剂量μ0.5克/毫升蒸馏水可能提供新方法治疗策略,目标在2型糖尿病患者脂肪和葡萄糖代谢。

1。介绍

集群被称为代谢综合征的病理,包括肥胖、胰岛素抵抗(IR)、2型糖尿病和心血管疾病(CVD),已经成为对人类健康最严重的威胁之一。肥胖的发生率显著增加在世界的大部分地区,导致了这种疾病集群的出现,尤其是胰岛素抵抗和2型糖尿病1]。

红外与许多疾病包括肥胖、代谢综合征、2型糖尿病,脂肪代谢障碍,多囊卵巢综合征,慢性感染。红外光谱的总体发病率报道是10 - 25% (2]。IR的主要特点是在脂肪组织,抑制脂类分解吸收的葡萄糖由肌肉受损,抑制糖质新生(2]。

红外通常先于公开的2型糖尿病的发病和补偿最初由高胰岛素血症3]。但这种慢性分泌大量的胰岛素来克服组织不敏感可以本身最终导致β细胞失败和发生高血糖症(4]。

在红外,内脏脂肪组织抵抗胰岛素的antilipolytic效果,因此释放过量的FFA。一个主要因素的发展红外太多循环的脂肪酸。胰岛素抵抗肥胖和/或2型糖尿病患者中发现了一个缺陷在线粒体氧化磷酸化与甘油三酯和相关的脂质分子的堆积在肌肉5]。

在2型糖尿病,血糖水平升高血脂异常的显然是一个重要的次要原因易感病人,和穷人的控制glycaemia有时会导致深刻的dyslipidaemia,包括hypertriglyceridaemia和低高密度脂蛋白(HDL)血浓度(6]。持续高血糖2型糖尿病诱发macrovascular和微血管并发症。在最近的一份报告中,世界卫生组织和国际糖尿病联合会发现大约80%的糖尿病发病率和死亡率是由于糖尿病心肌病与糖尿病血脂异常密切相关(7]。

血液低密度脂蛋白(LDL)水平在糖尿病患者可能有些误导;糖尿病患者可能增加的比例小致密低密度脂蛋白粒子和硬化的风险,增加患者与非糖尿病患者相比类似血液低密度脂蛋白的水平。此外,患者,密集的低密度脂小通常也会降低低密度脂蛋白和甘油三酯水平升高,这可能会进一步增加动脉粥样硬化风险(6]。

植物衍生品与传说的血糖过低的特性已经被使用在世界各地的民间医学和传统治疗系统(8]。今天许多现代药物用于传统医学也有天然植物的起源。其中,二甲双胍是源自于开花植物Galega officinalis(山羊或法国丁香街),这是一个常见的传统治疗糖尿病(9]。

夹竹桃(夹竹桃夹竹桃,NO)夹竹桃的家人(夹竹桃科)生长在葡萄牙南部整个地中海沿岸开始在西方,在叙利亚,在西部和南部安纳托利亚的河床。中枢神经系统有镇静作用的活动(10和剂量依赖性强心的作用11没有展出的研究。不也被用于治疗癌症的12]。石川et al。13)据报道,餐后血糖上升麦芽糖和蔗糖装载在非糖尿病患者健康的老鼠时降低了热水提取的夹竹桃indicum叶子。最近配体的过氧物酶体proliferator-activated受体(PPARs),葡萄糖和脂类代谢中发挥关键作用被定义为新的胰岛素敏化药物和降血脂药一类。

在目前的研究中,我们调查了没有馏分油在高血糖和血脂异常的影响及其对肝脏和脂肪组织的活动PPARs 2型糖尿病大鼠。

2。材料和方法

2.1。获得冻干和剂量管理

没有植物收集新的芽中March-September时期从土耳其地中海区域,确认和验证的生物学。首先收集植物被切碎的新鲜竹笋,适当的添加蒸馏水。混合物被加热在耐热容器中。液体开始蒸发后,容器盖子覆盖,蒸汽分离其他清洁玻璃容器,使其接触表面用冷水冷却。没有冻干馏分油在小玻璃瓶用lyophilizator(20毫升)。冻干没有溶解在馏分油浓度的7.5,75年和750年μg / mL蒸馏水。

2.2。动物

八十名男性的雄性sd大鼠中(10 - 12周)被分配给代谢笼单独在一个自动环境湿度(%)、温度(°C)和光照周期(12:12)控制房间。动物从实验研究中心获得Akdeniz大学的医学院,安塔利亚、土耳其和分成八组。每个健康组有六个老鼠;其他实验群体有十个老鼠。商用大鼠正常饮食和水有随意饮食操纵之前所有的动物。实验在动物实验伦理委员会批准的协议Selcuk大学的土耳其。

2.3。诱导的糖尿病

2周后喂食高脂肪的饮食,糖尿病是由单个intra-peritoneal诱导禁食动物注射链脲霉素(STZ)(35毫克/公斤体重)溶解在柠檬酸缓冲(pH值4.5)(14)当只有缓冲受到控制。在注射STZ后一个星期,有16.65的老鼠更易/ L (300 mg / dL) nonfasting血糖水平被认为是2型糖尿病。美国化学物质从σ(MO)另有说明。

2.4。饮食、饲养和实验设计

健康的控制(C)和健康的控制管理的最高水平的(CNO-10)组颗粒虽然高脂肪饮食正常组(高频)和其他所有2型糖尿病组高脂肪饮食的58%从动物脂肪代谢提供能量。饮食正常的营养物质颗粒干物质89%,粗蛋白21%,代谢能量2850千卡/公斤,粗纤维5%,蛋氨酸和cystein 0.75%,钙1.0 - -2.0%,磷0.5 - -1.0%,钠0.5%(最适条件提要、土耳其)。高脂肪饮食的细节成分表中给出1。

诱导糖尿病后,动物被随机分配到五个组,其中一个没有任何治疗(D);其他组有活性物质填喂法一天一次的12周的治疗期。

实验小组根据饮食和政府用于动物表表示2。

2.5。采样和分析方法

每个动物都指出周刊》的体重变化。虽然空腹血样来自所有大鼠尾静脉通过实验,每隔15天的结果表3和4只是最后的抽样。约0.5毫升全血从每个动物在EDTA管收集分析糖化血红蛋白的实验。剩余的血液被收集和离心分离血清。血清样本分析立即空腹血糖(FBG)、总胆固醇(total-C),高密度脂蛋白,低密度脂蛋白、甘油三酯、碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)通过使用商用比色诊断包(IL测试,仪器实验室、米兰、意大利)通过自动分析器(ILab 300、米兰、意大利)。采样后的动物在所有测试组是在全身麻醉下实施安乐死与硫喷妥钠(50毫克/公斤体重)之后最终的取样时间。肝脏和白色脂肪组织样本subcutan脂肪组织被要求条件下,保持。

红外光谱是由稳态模型评估的评估和HOMA-IR表达。数据HOMA-IR (HOMA-IR:空腹胰岛素(μU /毫升)空腹血糖(更易/ L) / 22.5), HOMA -β细胞功能β(HOMA -β(%):(20空腹胰岛素(μU /毫升)/{空腹血糖(更易/ L)- - - - - -3.5})(15),粥样硬化指数(AI:([Total-C]−(高密度脂蛋白))/(高密度脂蛋白))(16在total-C),高密度脂蛋白%,甘油三酯和高密度脂蛋白比计算的研究团体。

美国马血清胰岛素(DRG、微孔)和瘦素(研发、MN、美国)水平分析ELISA根据设备程序。

2.6。评价PPAR -α,β,γ信使rna表达

提取总RNA, oligo-dT第一链cDNA合成。逆转录聚合酶链反应(rt - pcr)是使用一个热循环系统,执行特定的引物PPAR -αPPAR -γ,β肌动蛋白(罗氏诊断、Rotkreuz、瑞士)。β肌动蛋白是作为内部控制。

2.7。统计分析

结果提出了的意思扫描电镜。在活的有机体内数据分析单向方差分析后跟一个多重比较检验(邓肯博士后的测试)使用SPSS 17.0(美国芝加哥SPSS)。差异被认为是重要的小于0.05。还Kruskall沃利斯和曼惠特尼-测试(使用这些数据不是正态分布)被用来确定统计上的差异在体外之间的数据组。使用皮尔逊相关系数的相关统计数据进行评估。

3所示。结果

表3显示值的体重,光纤光栅,糖化血红蛋白,total-C,高密度脂蛋白,低密度脂蛋白、甘油三酯,AI,高密度脂蛋白total-C %,甘油三酸酯的高密度脂蛋白比所有研究群体。胰岛素、瘦素的数据、HOMA-IR HOMA -β高山,AST和ALT在桌子上4。

没有观察到在胃肠道功能紊乱或不治疗后。虽然是糖尿病,体重的相当大的海拔没有估计治疗组相比,D和G ()。CNO-10体重数值低于C(表3)。光纤光栅水平显著减少了使用没有相比,D和G ()。在光纤光栅的提高的同时,显著降低糖化血红蛋白在动物管理。如表所示3,其他所有糖尿病组血糖过多的和糖化血红蛋白明显高于健康组和糖尿病组()。尽管有高脂肪饮食,1号和10号显示类似total-C浓度相比,C (、表3)。Total-C是在高频CNO-10和更高的数值低于C。

高密度脂蛋白的增加价值被发现在没有- 0.1和10号相比,C (、表3)。所有没有方案和G的减少影响低密度脂蛋白浓度明显,值是类似于健康组()。低密度脂蛋白水平在2型糖尿病一号和10号组明显低于D ()。高密度脂蛋白百分比的total-C没有类似于C - 0.1和第一组()和高密度脂蛋白最高百分比估计在10号健康和糖尿病组CNO-10除外。甘油三酯浓度最低的是发现在CNO-10健康的老鼠。

AI的相似性方面没有明显的团体健康组(、表3)。10号在AI显著的降低效果相比,D、G - 0.1, 1号()。

triglyceride-HDL显著减少比率都没有方案相比,D (、表3)。这些减少的影响没有明显的比,结果是类似于C ()。在CNO-10 Triglyceride-HDL比率低数值,在高频高于c .类似的结果在G和D指出Triglyceride-HDL比率。

当我们评估胰岛素水平,没有看到数据的降糖药效果没有显著减少胰岛素浓度相比,D (、表4)。尽管胰岛素水平在所有没有数值高于其他群体健康的对照组,结果在统计学上类似与组()。胰岛素水平下降了G和数据没有不同与所有没有组织和健康组织()。有胰岛素水平下降26.72% CNO-10相比,C。

瘦素水平的所有没有组健康对照组相比没有显著差异()。几乎两倍增加被估计在其他糖尿病组相比,所有没有治疗组(、表4)

计算HOMA-IR没有明显低于在G组和D (、表4)。没有治疗胰岛素敏感性得到了改进。也数值最低的胰岛素抵抗在CNO-10被发现。

HOMA -β显著受损组D和g .改善β细胞功能在所有没有类似于组织和健康组织的值(、表4)。

D(最高的高山活动被发现、表4)。所有没有治疗剂量减少高山活动相比,D ()。G的高山活动是所有没有方案(类似于)。10号政府减少AST活动相比,D ()。ALT升高活动,与C相比,观察在D和G (、表4)。

PCR引物序列,协议和产品尺寸表5。PCR产物的琼脂糖凝胶电泳图所示1(一)和2(一个)。每个乐队的密度评价戴安娜V1.6和Aida 2.4.3分析程序(Raytest成像系统、德国)和肝脏和脂肪组织的比例PPAR -α,β,γ信使rna表达式β肌动蛋白给出数据1 (b),1 (c),1 (d),2 (b),2 (c),2 (d),分别。

在肝脏,PPAR -α信使rna表达减少D C(相比),而它的表达增加10号治疗组()。PPAR -β信使rna表达增加没有- 0.1 ()治疗组相比,d . PPAR -γmRNA表达增加不治疗组剂量依赖的方式但10号组没有显著的增加相比,C ()。

在脂肪组织,PPAR -α和- - - - - -β信使rna表达增加10号组相比,C和糖尿病大鼠()。增加PPAR -γ信使rna表达更加突出在10号治疗组相比,C和糖尿病组()。在实验期间,政府的联合药物和胰岛素没有问题。

4所示。讨论

定量研究,尤其是DCCT,定义了糖化Hb和平均血糖之间的关系(17]。糖尿病患者的血管疾病的增加被认为是由于代谢异常的有害影响,如高血糖、胰岛素抵抗、血脂异常,和先进的糖化终端产品(18,19]。在糖尿病,糖化血红蛋白水平预测微血管并发症的风险(20.)和血糖控制的糖化血红蛋白低于7%将减少微血管并发症以及可能降低风险macrovascular疾病(21]。

最重要的结果的光纤光栅是没有管理组表现出一个水平接近数据从C,这个条件是确认获得上述组的糖化血红蛋白水平。

没有治疗显著降低糖化血红蛋白水平与健康组,当格列本脲没有显著的影响。没有治疗降低糖化血红蛋白15.97,15.94,19.54%,没有- 0.1,1号,10号,分别相比,d .没有方案也减少了光纤光栅相比其他糖尿病组织的审判。因此,不可能是有利于减少微血管和macrovascular 2型糖尿病的风险。

HOMA-IR是一个独立的预测2型糖尿病和心血管疾病的改善IR不仅可能有利影响血糖控制也在2型糖尿病患者心血管疾病(22]。

没有政府导致显著降低胰岛素水平和HOMA-IR相比,D,观察到g .改善β细胞功能(HOMA -β)在所有剂量成立但没有改善是显而易见的- 0.1。

HOMA -β是在CNO-10数值高于c没有改善血糖控制的评估数据显示胰岛素促分泌素和敏化效果。

血脂异常与糖尿病有关的新陈代谢和代谢综合征,特点是所谓proatherogenic血液血脂,包括低水平的高密度脂蛋白,增加了检测,血清甘油三酯与vldl [23]。事实上,高甘油三酯血症被认为是动脉粥样硬化的重要危险因素,随后在2型糖尿病患者心血管并发症24]。

粥样硬化指数最近被提议作为等离子体atherogenicity的标志,因为它增加人们患冠心病和与低密度脂蛋白颗粒大小呈负相关25]。冠心病的风险增加代谢综合征患者表明胰岛素抵抗状态是患没有伴随的海拔在血糖和糖化血红蛋白(26,27]。目前的数据显示,所有没有政府最高数值减少人工智能,但管理水平显著降低atherogenicity血液相比其他糖尿病组。

意味着HOMA-IR和人工智能之间的正相关关系(,意思是糖化血红蛋白和AI(之间),也,)表明,改善血糖水平和胰岛素受体敏感性可能支持下降atherogenicity和心血管并发症的2型糖尿病患者使用没有馏分。此外,高度显著正相关性HOMA-IR和甘油三酸酯水平(,)和倾向的甘油三酸酯的降低政府表示不可能有一个良好的有利于葡萄糖和脂类代谢的影响从HOMA-IR推断结果。

硬化的高甘油三酯和高密度脂蛋白之间的联系是由于更高的triglyceride-rich血浆浓度,VLDL产生小,密集的脂质交换期间的低密度脂蛋白和脂解作用。这些低密度脂蛋白粒子积聚在流通,形成小,密集的高密度脂蛋白粒子进行加速分解代谢,从而完成硬化的圆(28,29日]。

C的显著的相似性水平尤其是total-C 1号和10号管理和低密度脂蛋白浓度在所有没有糖尿病的治疗方案支持脂质没有降低的影响。

患糖尿病血脂异常包括一个整体增加粒子识别,通过测量载脂蛋白B,和优势的密度小的低密度脂蛋白粒子(表型B)。高甘油三酯脂蛋白胆固醇与低密度脂蛋白表型比B,高密度脂蛋白粒子小,红外(30.- - - - - -32),发现一个强大的独立的指标广泛的冠状动脉疾病(33]。

根据上面的解释,甘油三酯比高密度脂蛋白本文结果表明没有治疗可能防止广泛的冠状动脉疾病由于减少患颗粒自比发现统计上也很类似于c的比例,在健康的老鼠,没有使甘油三酯降低高密度脂蛋白比。

血液中高密度脂蛋白含量被认为是“护心”,自从apo-A-containing高密度脂蛋白粒子帮助胆固醇运送到肝脏从外围组织,以及远离相关巨噬细胞胆固醇在血管壁沉积。然而,这种保护作用可能不是完全是因为胆固醇运输。例如,HDL可能对血管壁产生直接的抗氧化和抗炎作用[6]。

减少甘油三酸酯水平提升高密度脂蛋白的浓度尤其在一起没有C - 0.1和10号组相比显著的影响不超过2型糖尿病大鼠的血脂异常。血清高密度脂蛋白胆固醇的比例使用total-C心血管风险的一个标志(34]。所有没有与治疗水平HDL百分比增加total-C但非常重要的发现出现在唐宁街10号与其他糖尿病患者虽然高密度脂蛋白的降低百分比total-C糖尿病组估计特别是在G和d数值增加高密度脂蛋白百分比的total-C CNO-10相比,C还指示的有益作用没有健康个体的脂质代谢。所有这些积极的结果在降低的影响不可能表明减少动脉粥样硬化的危险因素和随后的2型糖尿病心血管并发症。

瘦素是由脂肪组织分泌的一种激素主要和充足的能量是一个信号。它减少食物摄取和增加能量消耗,从而间接促进胰岛素敏感性。下丘脑瘦素效应是由其行动和直接在目标组织(肌肉、性腺、细胞和肝)。在正常情况下保持体重,瘦素浓度与全身脂肪量呈正相关。短期食物不足,血瘦素水平降低,相反的是,对短期吃得过多。可溶性瘦素受体被认为是重要的运输或通过血脑屏障(BBB),和运输的饱和或障碍的瘦素受体信号转导可能是瘦素抵抗的原因(2]。所以,重要的D和G的瘦素水平升高,除了没有治疗的人外,反映瘦素抵抗和/或胰岛素抵抗状态。瘦素在诱导胰岛素抵抗的影响表现出了积极的联系意味着HOMA-IR和瘦素(,在这个研究。

没有积极影响瘦素水平和被发现类似于健康的控制水平。这种不寻常的结果表明,没有可能有助于补偿能量代谢的改善瘦素和胰岛素水平,和HOMA-IR HOMA -β在2型糖尿病。

甘油三酯瘦素抗性的一个重要原因是由运输受损在BBB [35]。在这个研究中,积极的意思是甘油三酸酯和瘦素水平之间的相关性被发现(,)。这些数据可能表明高甘油三酸酯水平导致高血瘦素水平在D和G组。

许多研究已经报道,ALT, AST,和/或GGT水平独立预测2型糖尿病的事件,代谢综合征和心血管疾病36]。此外,这些标记已被证明与胰岛素抵抗的间接措施包括空腹胰岛素水平和HOMA-IR [37,38)自ALT独立与胰岛素抵抗有关,一种并不昂贵的方式提高对象的识别与胰岛素抵抗39]。

AST活动的减少在10号明显相比,D D的ALT活性明显高于C组但没有类似于组与C ()。同时,意味着ALT活性呈正相关,HOMA-IR (,)。

尽管高山活动没有不同的2型糖尿病和非糖尿病的患者之间40),增加的高山活动报道ketotic和nonketotic糖尿病大鼠主要是由于增加肠道和骨/肝高山同工酶(41]。所有没有方案表现出有益的影响降低2型糖尿病大鼠的高山活动。肝酶的结果通过使用剂量显示没有没有有害影响肝功能。

在啮齿动物中,脂肪组织PPAR -γ信使rna和蛋白质水平降低隔夜后迅速(42,43]STZ-induced糖尿病[42),这是符合PPAR -胰岛素的刺激效果γ表达式[44]。此外,长期进食高脂肪饮食增加PPAR -γ在脂肪组织表达,而禁食刺激尤其是肝脏PPAR -α表达在啮齿动物42,43]。

过度的PPAR -β和- - - - - -γ在脂肪组织可能表明10号组剂量降低胰岛素抵抗的影响和间接降低动脉粥样硬化的风险是通过脂肪酸的存储脂肪细胞(45和调节脂肪细胞的分化46]。

显著增加PPAR- - - - - -α在肝脏和脂肪组织表达表明,10号10号集团剂量调节脂肪酸氧化系统上可能有重要影响,脂蛋白合成,和炎症反应46]。

单一的代理促进PPAR -α和PPAR -γ激动理论上可以提供显著的好处在改善dyslipidaemia和降低高血糖症,从而减少这些心血管风险因素与2型糖尿病和代谢综合征有关。此外,这样的治疗可以减少潜在的胰岛素抵抗和有助于打破这个循环的改变葡萄糖和脂类代谢,促进2型糖尿病(6]。

它被认为增加肝脏脂肪酸氧化的超表达肝PPAR -α(46)不要使用太多的脂肪从脂肪组织也对能源和储存脂肪酸在脂肪细胞脂肪组织过度PPAR -γ(45没有治疗动物的胰岛素改善行动。这一进步预防体重损失没有治疗动物因antilipolitic糖尿病的胰岛素相比,不受控制的效果。这种效果是没有统计上显著的特别是在唐宁街10号组。HOMA-IR和HOMA -β结果也支持这一改进。

也拉下来10号剂量对体重的影响可能与过度的PPAR -α和- - - - - -β在脂肪组织的健康老鼠因为过度的PPAR -β特别是在脂肪组织减少脂肪酸水平和防止肥胖47]。此外PPAR -α和PPAR -β都积极参与能源燃烧;PPAR -α在脂肪酸氧化中起着至关重要的作用,因此负责能量消耗;PPAR- - - - - -β也增强了脂肪酸分解代谢和能量在骨骼肌和脂肪组织解偶联,最近肝脏所示(46]。

5。结论

特别是10号集团的相当大的有利影响治疗剂量的375(无馏出物管理μ0.51克/毫升蒸馏水/ d)对葡萄糖代谢,胰岛素抵抗,insulinotropic活动,瘦素,血脂异常,肝酶,PPARs可能指出的胰岛素样作用没有和提供新的方法治疗策略目标脂肪和葡萄糖代谢最终leadind减少2型糖尿病的慢性微血管并发症和macrovascular事件如心血管疾病的风险。此外,这个浓度不可能预防和控制血糖和血脂水平升高的其余的人口。

确认

这项工作是支持的科学技术研究委员会土耳其(项目没有。107啊,222)。还研究结果应用于土耳其专利研究所(应用程序没有。2009/00312)和专利合作条约(应用程序没有。PCT / TR2009/000013)。所有作者完全公开,没有金融或道德的利益冲突。