文摘
背景。广泛的证据,由模型内皮一氧化氮合酶基因(NOS3)基因敲除小鼠支持内皮功能障碍的作用在代谢综合征(MS)的发病机理。的目标是。本研究的目的是评估的角色−786 t / C多态性女士和评估之前报道的病因与吸烟。方法。根据国际糖尿病联合会2005年标准,我们招募了随机没有女士与女士152例,75例。结果。等位基因和基因型频率在两组之间没有显著差异。总胆固醇水平(CHOLT)和颈动脉内膜-中膜厚度明显高于−786 cc的比如,相比tc 786−−786 tt的病人。关于吸烟现状,−786 c等位基因与CHOLT高于−786 t等位基因。结论。我们的研究表明−786 t / C多态性的假定的角色发展的高胆固醇血症,患者MS,这可能会增强吸烟。
1。介绍
代谢综合征(MS)是一个聚类实体,表现为肥胖、高血压、高血糖、血脂异常、胰岛素抵抗。的定义创建女士为了表明患者心血管并发症和2型糖尿病的风险增加。目前建议MS诊断标准被提出的国家胆固醇教育计划(NCEP),第三成人治疗小组(ATP III),和2005年国际糖尿病联合会(IDF 2005)。
动脉粥样硬化病变的并发症可能是女士,因引起的内皮功能障碍和降低一氧化氮(NO)的生产。没有合成一氧化氮合酶(以挪士),编码NOS3基因,并显示抗炎,常和抗增殖作用(1]。最近的研究也表明NOS3基因敲除小鼠血脂异常发展,胰岛素抵抗,降低胰岛素依赖型葡萄糖吸收在骨骼肌和脂肪组织,和高血压,模仿的表型[女士2- - - - - -5]。在人类NOS3基因位于7 q35-36拥有几个多态性变异。几份研究报告表明之间的潜在联系NOS3基因多态性和[女士6- - - - - -8]。功能多态性在启动子区域(−786 t / C)可能会改变NOS3基因表达(9,10),导致降低生物合成的(11]。尽管−786 t / C多态性的影响似乎建立了关于几个心血管终点,其确切作用女士的病因仍不清楚。
除了遗传风险因子,动脉粥样硬化血管损伤可能发生由于修改的,环境的侮辱。此外,越来越多的证据表明基因×环境交互的角色(G×E)在多因素疾病的病因包括女士,2型糖尿病和动脉粥样硬化(12]。这个概念后,吸烟可以直接减少以挪士活动和增强内皮功能障碍。然而,这可能改变取决于NOS3基因型(13]。
本研究的目的是评估−786 t / C多态性与女士之间的联系,并评估假定的G×E与吸烟。
2。材料和方法
2.1。主题
我们随机招募了227名男性没有任何以前的治疗血脂异常,糖尿病或心血管疾病。为了避免潜在的荷尔蒙的影响和评估认为性别可能是血管事件的风险因素,我们有限的研究雄性个体。所有受试者白种人,在铜冶炼厂工作,和来自同一地理区域。书面知情同意了所有的志愿者在当地伦理委员会的批准。
人体测量是由训练有素的医务人员,包括体重、身高、腰围和臀围。人体测量的基础上测量,腰臀比(WHR)和身体质量指数(BMI)计算。高血压的诊断是基于血压测量在一个安静的房间躺下后15分钟,这期间至少进行两次两个或三个不同的约会。糖尿病2型或空腹血糖受损诊断使用标准。甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOLT)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平估计根据标准协议。生化测量的复合面板进行了两组的所有科目,包括凝固参数(国际标准化比率、凝血酶原指数和纤维蛋白原浓度),激素浓度(促甲状腺素、睾酮、胰岛素)、c反应蛋白(CRP)、尿酸(UA)、瘦素和脂联素浓度。
主题,完成IDF 2005 MS,标准研究小组招募了雄(152)和其他人,没有临床和生化特征被注册成女士对照组(75男性)。
2.2。DNA提取和基因型分析
遗传分析根据PCR-RFLP执行协议,被导演今村昌平et al。14)用下面的寡核苷酸引物:5′猫TCT GGG AAC TGT-3作为序列和5′′gtc AGC AGA插科打诨法3′反向序列。PCR产物被消化利用MspI限制性内切核酸酶和可视化在2.5%琼脂糖凝胶。
2.3。统计数据
统计分析已经完成使用STATISTICA v 9.0软件。卡方检验已被用于评估遗传连锁−786 t / C多态性与临床参数的平均值女士关于−786 t / C多态性在克鲁斯卡尔-沃利斯检验进行了分析。基线特征和吸烟的影响在使用Mann-Whitney CHOLT和IMT评估测试。
3所示。结果
特征的研究和控制集团如表所示1。基因型和等位基因频率展示在表2。−786 t / C多态性分布的差异之间的MS患者和健康受试者不显著。
分析是临床参数对−786 t / C多态性研究小组揭示了重要的结果(表中3)。CHOLT女士科目之间有明显的差异−786 t / C基因型是统计学意义(−786 tt: 5.44更易/ L,−786 tc: 5.47更易/ L, 786−cc: 5.78更易/ L;)。同样,左派和右派IMT都显著降低在786 tt比如−,与786 tc和−−相比786 cc的患者(左IMT: 0.56厘米,0.57厘米,0.65厘米的职责。和正确的IMT: 0.54厘米,0.58厘米,0.65厘米resp。,)。
吸烟之间的交互和研究多态性在两组同时评估,揭示了重要的结果就只有CHOLT(表4)。目前吸烟的患病率是59.2%(90例)的研究小组,对照组62.6%(47科目)。CHOLT明显高于(786年−tc吸烟者(5.74更易/ L)与tc 786−不吸烟者相比(5.3更易/ L)。CHOLT更高()还发现−786 cc吸烟者(5.66 mmo / L)比786年−cc不吸烟者(85更易/ L)。之间的差异CHOLT−786 tt吸烟者和−786 tt不吸烟者不显著(5.28更易/ L和5.08更易与L,)。关于等位基因载体地位,−786 t等位基因与显著降低()关于−CHOLT 786 c等位基因(5.23更易/ L和5.73更易/ L)。值得注意的是平均值的CHOLT主题之间没有显著差异与不同基因型对吸烟者和非吸烟者(数据没有显示)。
4所示。讨论
我们的研究没有揭示重大协会−786 t / C多态性与阈下的结果可能出现女士的研究设计的局限性,来自样本大小。然而,有趣的结果有关的临床参数我们女士证实了假定的−786 t / C多态性影响动脉粥样硬化病变通过测量颈动脉IMT。这些发现符合先前公布的数据,根据不同的成像的MS患者动脉粥样硬化指数包括主动脉和外围波速(15)或踝肱指数(16]。根据先前公布的数据,来自转录的研究,这显然是无法解释的是否−786 t / C多态性可能减少的表达NOS3基因和导致减少没有释放9,17,18]。宫本茂et al。19发现这种现象的潜在机制。他们观察到,只有−786 c变体是复制的目标蛋白A1,带着一长串dna结合转录因子抑制转录的NOS3体外。
所带来的新奇的发现,我们的研究中,问题的影响在CHOLT−786 t / C,在−明显高于786 cc的比如,相比与其他基因型。新兴的数据显示,NOS3基因敲除小鼠显示高胆固醇血症等临床特征[女士5,20.]。虽然没有活动之间的直接联系和脂质代谢尚不清楚,我们假设−786 t / C多态性的影响NOS3基因的临床特征包括女士胆固醇代谢可能会比整个基因的敲除那么严重。此外,女士的遗传病因源于过多的适度效应之间的相互作用位点,这损害的不同临床参数聚类实体。因此,唯一的临床结果从这项研究改变CHOLT和IMT的担忧。
此外,我们评估可能的G×E交互通过评估和吸烟之间的合作−786 t / C多态性。根据我们的结果,−786 t / C多态性的影响可能会增强烟草烟雾成分。统计分析显示重大CHOLT之间的相关性和−786 t / C多态性与吸烟现状。吸烟和之间的交互NOS3多态性在几个研究已经评估对冠状动脉疾病(21,22),外周动脉疾病(16),和脑血管事件(23]。此外,吸烟本身可能影响没有释放24,25]。根据当前的知识,暴露于香烟烟雾成分可能损害以挪士活动各种机制包括活性氧的释放,造成以挪士解偶联(26),针对NOS3基因表达(27,28),改变以挪士通过交互的磷酸化蛋白激酶C (29日四氢生物蝶呤],以及加速分解代谢,即eNOS-cofactor [30.]。本研究的限制是,我们没有评估活动吸烟的假定的影响存在剂量依赖的相关性。但是,先前的研究表明,重和轻度吸烟者可能会显示类似的有害影响没有生物合成(31日]。
5。结论
我们的研究结果支持−786 t / C多态性的影响而且女士的临床特征,本研究启示了没有发展的高胆固醇血症的作用。研究了多态性可能改变NOS3基因表达,导致脂质dysmetabolism。因此,观察−786 t / C多态性对动脉粥样硬化的影响指数不仅可能构成内皮损伤的直接影响,但也可能出现由于CHOLT升高。另一方面,−786 c等位基因可能会加强吸烟有害的影响。然而,这个G×E相互作用的确切机制需要进一步调查。
确认
执行本研究由于来源提供的波兰社会的遗传学,Abo血型Grazyna Tarnowska Boreysza公司和Sigma-Aldrich公司。