文摘

由绑定的高亲和性维生素D受体(VDR),维生素D的异质二聚体复杂形式retinoid-X-receptor (RXR)。两个基因的变化已被证明修改肾细胞癌(RCC)的风险。因此,我们调查是否论述和RXRA多态性修改RCC风险之间的关联和频率的膳食摄入富含维生素D和钙的食物,和职业紫外线暴露在碾压混凝土中777和1035控制来自中欧和东欧。积极的协会之间观察到在这个人口增加膳食摄入酸奶的频率,而逆协会观察鸡蛋摄入频率。RXRA多态性, 的编码序列、修改特定的维生素D丰富的食物和碾压混凝土之间的关联的风险,RXRA多态性位于内含子1和4,修改关联与特定的富含钙的食品。结果表明,变异RXRA基因修改观察RCC风险之间的关联和钙和维生素D的摄入量。

1。介绍

吸烟、肥胖和高血压是行之有效的风险因素的肾细胞癌(RCC) [1,2]。其他危险因素如饮食实践被牵连,尽管报道不一致的结果通常是针对特定饮食组件(1,3]。然而饮食富含水果和蔬菜通常被证明能减少碾压混凝土风险可能通过抗氧化效果,而食用油炸食品通常被证明增加可能是由于潜在的致癌风险的影响丙烯酰胺(1- - - - - -3]。最近,流行病学研究表明,维生素D,这是发现在食品(维生素D2和D3)和生产后的身体暴露在紫外线(UV)太阳光(维生素D3),可能与RCC风险负相关(4- - - - - -7]。

维生素D2和D3在随后肝脏和肾脏羟化形成活性维生素D (1,25 (OH)2D3)[8]。膳食维生素D的摄入量占一个小(大约10%)比例的维生素D水平(8- - - - - -10]。然而,膳食摄入维生素D和维生素D丰富的食物可能发挥作用在确定维生素D以来RCC风险与抗癌的特性和主要是肾脏内的代谢(8,11]。

虽然维生素D的确切抗癌的机制并不完全理解,维生素D及其代谢产物被认为阻碍致癌作用通过刺激细胞分化,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,并抑制侵袭性血管生成和转移11- - - - - -14]。维生素D是由绑定到维生素D受体(论述),转录因子核激素受体家族的一部分。形成一个异质二聚体复杂retinoid-X-receptor (RXR)基因,论述可以调节其他基因参与细胞的转录调控,增长,免疫(13,15,16]。大多数流行病学研究一般关注论述基因,但是最近,我们评估了139个单核苷酸多态性(snp)在8个基因的维生素D通路,发现一个重要的碾压混凝土之间的联系和在某些风险论述和RXRA遗传变异(17]。

考虑到肾脏是维生素D代谢和活动的最重要的器官和钙稳态,在肾脏、钙已被证明影响活性维生素D水平(8,17),调查RCC膳食维生素D和钙的病因是高度相关的。因此,我们调查是否常见的遗传变异论述和RXRA我们观察到,这两个基因与RCC风险显著相关,修改肾癌风险之间的关联和频率的膳食摄入富含维生素D和钙的食物。此外,我们还探讨这些基因是否修改职业紫外线照射和碾压混凝土的风险,因为最近我们报道一个重要逆协会职业紫外线照射和RCC风险男性参与者之间在这个人口(18),因为全世界的大多数人从太阳获得大部分的维生素D水平(8- - - - - -10]。分析中进行了病例和控制来自中欧和东欧,一个地区碾压混凝土率最高的国家之一的全球和区域食品不定期强化钙与维生素D或(19]。

2。材料和方法

2.1。研究人群

细节关于这个研究人口以前描述(20.]。简单地说,从1999年到2003年,一个以医院为基础的病例对照研究进行了碾压混凝土的七个中心在中欧和东欧的四个国家(俄罗斯,莫斯科;布加勒斯特,罗马尼亚;罗兹,波兰;布拉格,奥,Ceske-Budejovice,布尔诺,捷克共和国)。情况下,20到88岁,包括新诊断的患者(3个月内)组织学证实RCC (IDC-O-2代码C64)居住在该研究领域至少一年。控制中心都是频率匹配情况下年龄( 年)、性别和居住地。控件中选择对象承认为住院病人或病人在同一家医院为例,与non-tobacco-related条件,包括感染(1.1%)、血液(3.2%)、内分泌(2.0%)、精神(1.4%)、神经系统(11.2%)、眼科、耳(14.5%)、心血管疾病(9.6%)、肺(3.9%)、胃肠道(18.7%)、皮肤(2.8%)、整形或疾病(8.9%)、泌尿生殖器的(良性前列腺增生)(3.8%)、产科或围产期(0.1%)、受伤或中毒(3.0%),和其他(15.9%)。没有一个单一的疾病由超过20%的对照组。此外,并行的控制也招募了肺和头部和颈部癌症的研究[21,22]。1097事件中,组织学证实RCC病例和1476控制纳入本研究。合适的数量和质量得到基因组DNA的777例(70.8%)符合条件的碾压混凝土的一个子集和1035年(70.1%)控制进入了我们的研究。反应率在研究中心参与范围从90.0%到98.6%的情况下,从90.3%到96.1%的控制。所有科目提供书面知情同意。本研究机构审查委员会批准所有参与中心。

2.2。饮食摄入量

膳食评估之前的细节描述(23]。简单地说,面试官被训练在每个中心进行面对面的采访情况下住院期间和控制使用标准的问卷调查。问卷调查人口学特征、癌症家族史,烟草消费的历史,和饮食习惯。食物频率问卷是由23食品,研究人员选择的共识在规划阶段的研究,进一步验证在试点阶段,要求参与者的名字(常见的食品没有指定23]。各组食物摄入量的频率为每一项评估,每月少于一次,每周少于一次,每周1到2次,每周3到5次,每天。使用一个标准化的问卷的研究中心,从一个常见的英文版本翻译,然后backtranslated成英文,以确保初始翻译的有效性。调查问卷是两个不同的时期:重复 在面试之前,和 前一年1989年政治和市场变化在俄罗斯(1991)。今年全年数据之前采访和政治变革之前被外推到代表一生平均摄入量的得分乘以每个时间段的数量年参与者还活着的时间,然后求和时间分数和除以总个人的年龄如前所述。

在这项研究中,维生素D的摄入频率丰富的食物包括肝、鸡蛋和鱼组合为每个参与者创建一个新的膳食暴露变量总维生素D摄入频率。钙以来报道影响维生素D水平和某些癌症的风险8),摄入频率的奶酪、牛奶和酸奶也结合每个参与者创建一个新的总钙摄入频率暴露变量。在这项研究中,具体细节关于鱼的类型,奶酪,牛奶,等等消耗是不可用;因此,每个食品类别认为平等权重结合时估计总维生素D或总钙一生平均摄入量的频率。很少的食物自然含有维生素D和(美国)在美国和加拿大,强化食品是维生素D的常见来源(8,9]。然而,在大多数国家,比如在欧洲中部和东部,食物富含维生素D和钙。因此摄入维生素D的主要来源是富含脂肪的鱼类,如鲭鱼、鲑鱼,而钙摄入量的主要来源主要是乳制品(7- - - - - -9]。所有膳食摄入频率在这项研究中评估了在tertiles基于饮食摄入量的频率控制。

2.3。职业紫外线照射

终身职业信息工作了至少12个月的持续时间也是确定面试中通过使用通用职业问卷。为每个任务收集的数据包括标题、详细的任务,和类型的雇主,以及开始和结束工作。这些数据被用来创建一个从(JEM)分类每个研究对象的估计职业暴露在阳光下;杰姆是其他地方的详细描述(18]。职业评估之间的关系估计接触阳光,RCC风险和维生素D通路基因的变化,累积暴露在所有工作(计算时间(年)x频率中点x接触强度为每个工作和求和所有工作)评估。自职业紫外线照射和RCC风险之间的关系在这个人口以前观察到的只有男性18),评估基因变异,职业紫外线照射,RCC风险只是提出了男性参与者。这些风险敞口和RCC风险之间的关系也是探索女性参与者;然而没有观察到协会(数据没有显示)。绝对风险矩阵是用来评估RCC风险之间的关系和累积职业基于tertiles紫外线照射的暴露水平在男性控制。

2.4。实验室程序

基因组DNA从全血中提取巴菲外套使用标准酚氯仿法在美国国家癌症研究所(NCI)实验室。进行了基因分型与GoldenGate益生元池(OPA)测定Illumina公司(www.illumina.com)。DNA样本RCC病例和控制编码和随机聚合酶链反应(PCR)板块的基因分析。5%重复的随机样本中被选为质量控制和分发盘子基因分型。

如前所报道在这个人口(17),对面的十个snp论述基因(rs11574027、rs4760648 rs2853564、rs2254210和rs886441)RXRA基因(rs100791、rs3118523 rs748964、rs3118536和rs10776909),明显与RCC进一步风险评估在这项研究中,看看snp修改RCC风险之间的关联和饮食或职业紫外线照射。标记snp最初选择提供80%到90%的覆盖整个基因组区域的兴趣和适用,而产生的单核苷酸多态性被选为他们的假定的功能意义。所有单核苷酸多态性变异等位基因频率的选择分析至少5%据NCI SNP500Cancer数据库(http://snp500cancer.nci.nih.gov)[24)基因分型结果,验证试验NCI核心设施(CGF) (http://cgf.nci.nih.gov/home.cfm)。重复的DNA样本之间的和合率从93%到100%不等,完成率从98%到100%不等。基因型频率在控制没有不同于预期的哈迪温伯格平衡比例( )。

2.5。统计分析

选择的分布特点和已知RCC风险因素(性别、年龄、吸烟习惯、自我报告的高血压状态,身体质量指数(BMI)、癌症家族史的居住国,和特定的饮食变量)之间的比较情况下使用卡方检验和控制。优势比(ORs)和95%置信区间(CIs) 95%使用无条件的逻辑回归计算估计单个snp和碾压混凝土之间的关联风险。

SNP变异进行评估使用占主导地位的模型使用瓦尔德卡方检验是否存在的变异等位基因(0,1)。职业紫外线照射在tertiles评估计算的接触男性患病率控制。所有回归模型调整年龄、性别、研究中心、吸烟状态(,从不)、BMI和自我报告的高血压状态。

论述和RXRA单体型确定之前(17]分析了风险与碾压混凝土使用Haplostats (R版本测试盒框;http://www.r-project.org)[25]。常见的单(之间的关联 5%频率)和RCC风险进行评估计算口服补液盐和95%独联体使用最常见的单体型类别作为参考。交互测试通过比较回归模型和没有交互术语使用似然比检验(轻轨车)。饮食组件之间的交互,选择论述和RXRAsnp, RCC风险只是评估总钙、维生素D,和食物摄入频率组发现统计与碾压混凝土(即风险有关。、鸡蛋和酸奶)。

所有分析进行占据9.0除非另有说明(占据公司,大学城,TX)。

3所示。结果

表1提供了一个描述基因分型研究的参与者和碾压混凝土的风险因素。病例和对照组相比在年龄和性别;然而,情况更有可能有多余的体重指数( 30公斤/米2),自我报告的高血压,有一级亲属患癌症。在调整年龄、体重指数、高血压、研究中心和性与吸烟的关系不再是观察(26]。

表1
一般特征的基因分型的参与者。

维生素D的摄入频率之间的关联和富含钙的食物和RCC风险组参与者如表所示2。统计上显著的减少碾压混凝土风险和增加消费频率观察鸡蛋(Ppip coburn = .02点)。观察边缘显著减少碾压混凝土风险增加消费频率总维生素D (Ppip coburn = .09点)。相比之下,观察RCC风险增加而增加消费频率的酸奶(Ppip coburn = .04点)。

表2
RCC风险,饮食中富含维生素D和钙的食物摄入频率组参与者。

碾压混凝土的风险之间的联系,RXRAsnp,维生素D摄入鸡蛋和总频率如表所示3。逆关联RCC风险和主题之间观察野生型rs1007971 (Ppip coburn = . 05), rs3118523 (Ppip coburn = . 01), rs748964 (Ppip coburn = . 01), rs3118536 (Ppip coburn = .02点)和rs10776909 (Ppip coburn = . 05)RXRA基因型相比,患者至少1等位基因变体。然而,分层后鸡蛋摄入量,减少碾压混凝土风险和增加消费频率观察鸡蛋的主题 1变种rs1007971 ( ),rs3118523 ( ),rs748964 ( ),rs3118536 ( )和rs10776909 (Ppip coburn = 04)的等位基因RXRA基因。只有重要的交互RXRA单核苷酸多态性位于下游, 的编码序列,rs1007971 (P互动= . 01),rs3118523 (P互动= . 01),rs748964 (P互动= . 01)。虽然没有统计学意义,一个较弱的逆RCC风险之间的联系和总维生素D(基于肝、鸡蛋和鱼)摄入频率观察。没有任何的协会之间的观察论述单核苷酸多态性和饮食消费的频率鸡蛋或总维生素D(数据未显示)。

表3
RXRAsnp修改饮食摄入量之间的联系频率的维生素D丰富的食物和肾细胞癌的风险。

碾压混凝土的风险之间的联系,RXRAsnp,摄入酸奶和总钙的频率如表所示4。积极的协会之间的观察RCC风险和增加消费频率与野生型酸奶的参与者CCrs3118538 (Ppip coburn = . 01)CCrs10776909 (Ppip coburn = . 01)等位基因的RXRA基因;rs10776909位于基因内区1也大幅修改膳食摄入酸奶和碾压混凝土的频率之间的关联风险(P互动= .04点)。同样,观察RCC风险增加科目的总钙摄入频率增加野生型CCrs3118538 (Ppip coburn = . 05)CCrs10776909 (Ppip coburn = 02)等位基因。显著的交互作用对snp都观察位于内含子1和4,内RXRA基因。摄入酸奶或频率之间没有观察协会总钙和其他单核苷酸多态性( )之前与RCC风险在这项研究中17]。

表4
的影响RXRAsnp膳食摄入富含钙的食物的频率和肾细胞癌的风险。

以前我们观察到显著减少(38%)在RCC风险职业男性参与者暴露于紫外线(18]。在这项研究中,无论是论述也不RXRAsnp修改了观察协会(数据未显示);但是,某些论述单,以前与RCC风险在这项研究中18),发现修改RCC风险之间的关联和职业男性参与者(表中紫外线照射5)。男性的VDR A-G-C(rs2254210 rs2853564, rs4760648)单体型明显增加(OR = 1.27;肾癌的风险95% ci = 1.03 - -1.57)相比,男性最常见的referent单体型G-A-T。单职业分层的紫外线类别时,只有男性最高紫外线照射类别相同论述单体型,A-G-C被证明有一个风险明显更强的提高碾压混凝土(OR = 1.70;95% ci = 1.14 - -2.53)与参照单体型的男性相比,G-A-T。之间没有关联论述单,RCC职业风险和累积接触紫外线是男性受试者中观察到的最低或中间紫外线类别。一个边缘显著的之间的相互作用也被观察到论述单、职业紫外线照射和RCC风险(P互动= 0。06)。

表5
论述单和碾压混凝土在男性中分层的累积风险

4所示。讨论

在这项研究中,减少了RCC风险观察鸡蛋消费频率的增加而增加碾压混凝土与增加酸奶的消费频率观察风险。分层后论述和RXRA基因型,前面两个基因与RCC风险在这项研究中17),只RXRA基因变异修改RCC风险之间的关联和消费频率的鸡蛋,酸奶,和总钙。RXRA单核苷酸多态性 编码序列的修改协会intronic时摄入鸡蛋的频率RXRA单核苷酸多态性修改协会酸奶和总钙的摄入频率。没有关联论述或RXRA基因型与职业观察紫外线照射和RCC风险RCC男性参与者先前观察到的低风险增加职业照射(18];然而,当论述单检查男性受试者的最高累计职业与紫外线照射类别A-G-C VDR单体型相比风险显著增加RCC referent的男性受试者G-A-T单体型。

众多研究建立了饮食与癌症风险之间的联系或进展,因此世界癌症研究基金会最近承认,吸烟后,饮食可能是第二个最重要的贡献者全球癌症负担的(27]。同时,膳食摄入维生素D构成总需求(维生素D的一小部分8,9),研究表明,维生素D的摄入量可能扮演重要的角色在决定癌症风险(5,28]。这是特别重要的地区紫外线暴露水平季节性变化。总的来说,大多数流行病学研究调查碾压混凝土之间的关系风险和维生素D或富含钙的食物已经不一致,一般零(23,28- - - - - -32]。类似于我们现在的结果在这项研究中,一个意大利767 RCC病例和1534例对照的病例对照研究观察到的一个重要的逆膳食维生素D摄入量之间的联系,基于78项食物频率问卷,和RCC风险(5]。然而,加拿大碾压混凝土早期病例对照研究显示没有摄入协会个人富含维生素D的食物(即。、鱼和鸡蛋)或钙(即。、牛奶、日记和奶酪)[28]。相比之下,补充钙摄入量的研究显示显著降低碾压混凝土与风险增加摄入量的年数(28]。

虽然没有报告到目前为止,研究碾压混凝土之间的关系风险,饮食摄入的维生素D或富含钙的食物,和维生素D基因变异,已报告的结果论述单核苷酸多态性和其他癌症。例如,两个大肠癌病例对照研究,一个在美国33),一个在英国34),观察降低癌症风险增加摄入富含维生素D和钙的食物,与纯合子的参与者论述变体(聚,检验局和/或ApaI)等位基因相比,参与者与野生型等位基因。相比之下,美国病例对照研究报道增加结直肠癌风险增加维生素D的摄入与变异纯合子的主题论述(检验局BB)等位基因35]。没有维生素D摄入量之间的联系,论述多态性(TaqI,检验局,FokI,ApaI和/或聚)和淋巴瘤(36和乳腺癌的风险37),在两个独立的美国的研究报道。

流行病学研究调查维生素D通路基因多态性是否修改癌症风险之间的关系和紫外线照射前后矛盾。与我们的研究结果相似,紫外线照射和之间的协会论述单由rs2254210 SNP的报道在最近英国的前列腺癌病例对照研究。四个论述单核苷酸多态性在两个单体型块区域显示大幅增加紫外线照射(较低的男性罹患癌症的风险38]。然而,逆关联其他五个时被报道在这个人口论述单核苷酸多态性检测与紫外线照射和患前列腺癌的风险39]。同样,在美国前列腺癌的病例对照研究,减少观察患者罹患癌症的风险FokI和TaqI FFtt单体型学科中最高的紫外线照射类别(40]。

我们的研究增加了有限的流行病学证据表明,钙和维生素D(从饮食摄入量或紫外线照射)论述和RXRA维生素D通路基因可能在RCC病因中发挥作用。维生素D的生物活性是由一种高亲和性受体,船舶,配体依赖性转录因子作为一个,形成一个异质二聚体RXR(13,15,16,41]。这VDR-RXR异质二聚体复杂指向的维生素D-responsive元件在启动子区域1,25-regulated基因(13,15,16,41]。不同的多态性论述推测导致变异的基因论述表达和导致循环活性维生素D水平的变化(4]。出于这个原因,流行病学研究表明,组织特定的维生素D通路基因的表达功能的主要机制参与连接维生素D状况和抗癌的作用,25 (OH)2D3(42];因此,降低肾癌的风险可能与循环25 (OH) D水平更高,维生素D的存储形式为肾组织提供底物合成1,25 (OH)2D3(43]。RXRA另一方面可能在维生素D活动发挥重要作用,特别是食物来源,因为这个基因可以调节胆固醇(44],在鸡蛋和酸奶,丰富的食物组发现统计与肾癌的风险相关。RXRA调节脂肪酸和胆固醇代谢通过肠道吸收胆固醇和胆汁酸合成(44]。胆固醇代谢与伴随动脉粥样硬化有关,与高血压和心血管疾病的风险有关,碾压混凝土的已知风险因素45]。

优势我们的研究包括使用感兴趣的人类基因组单体型图标记基因(80 - 90%)基因组覆盖率高 和 目标基因。本研究中也观察到的高参与率新诊断的组织学检查确诊病例和收集生物材料从一个高比例的科目。本研究的样本量大,提供足够的统计能力检测相对较小的关联;然而,能力检测基因-环境交互作用是有限的,需要谨慎解释结果。

固有的局限性我们的研究包括(1)nondifferential饮食回忆偏倚的可能性,(2)可能的误分类的维生素D和钙的摄入量,(3)无法控制总热量摄入等潜在的混杂因素,这可能偏差结果远离零,(4)缺乏数据关于饮食补充维生素D和钙,和(5)有限公司统计基因-环境相互作用。此外,18.7%的选择控制患者承认与胃肠道条件,这可能潜在影响饮食习惯这样,影响研究结果。局限性源于职业紫外线照射的估计18),如nondifferential、不准确或不完整的召回所有职业的历史也可能有偏见的结果。虽然医院病例对照研究潜在的局限性,由于可能存在的差异与人口控制,这些研究可以提高响应率的激烈,因此生物标本的收藏减少偏见的可能性的评估基因-环境相互作用[46]。虽然人们普遍认为,血清25 (OH)维生素D水平维生素D现状的最佳指标,半衰期较短的生化标记和单一度量值25 (OH)维生素D可能不能反映长期状态,将重要的癌症研究。此外,维生素D状况postdiagnosis可能反映了病例中而不是历史的维生素D水平的参与者在他们健康。最后,尽管全球P值评估之前这些基因(17),我们不能完全排除假阳性结果的可能性,在这项研究中由于多重比较。

总之,常见变异论述和RXRA基因修改RCC风险之间的关联和消费频率富含维生素D和钙的食物,和职业紫外线照射。额外的研究与大样本大小和彻底的基因组的报道论述和RXRA通路基因,足够动力来调查基因-环境相互作用,还需要进一步证实了这些结果,并提供洞察的作用在RCC病因钙和维生素D。