文摘
背景。阴道毛滴虫(t .鞘突)感染一直被认为是性传播疾病中具有明显影响女性健康的生育时期尤其如此。方法。成熟女性年龄18 - 45岁的234名女性参加的妇产科门诊的卡El艾尼医院参与了一项横断面研究。采取阴道拭子受到湿山显微镜,吉姆沙染色剂,改性钻石的文化,和嵌套式聚合酶链反应(nPCR)放大。多属性和层次分析流程进行了检测实验室效用。单变量和多变量分析进行检测多个风险因素可能是相关的毛滴虫感染。结果。基于nPCR,滴虫病的患病率是26.9%。潮湿的山,吉姆沙染色剂和文化特异性显示100%,但较低的灵敏度(分别为28.57%、28.57%和57.14%)。多变量分析,nPCR显示诊断性能和文化的最高等级最低等级。对于单变量分析,有显著的相关性t .鞘突感染和阴道分泌物、烧灼感、性交困难,使用宫内节育器(IUD) (值< 0.05)。结论。的常规筛查滴虫病使用nPCR可靠、敏感、和具体。也可以在经济上被视为一个更合适的选择批量筛选。显著较高的感染被报道在IUD用户相比,避孕套或hormonal-based方法。
1。背景
全球滴虫病,最常见的性传播传染病,主要发生在妇女生育期间,造成的t .鞘突,厌氧鞭毛泌尿生殖寄生虫1]。虽然它是一种可治愈的感染,它会导致不良健康后果2]。根据世卫组织,每年大约有1.43亿新发病例(3]。
男,感染大多是无症状或者它可能只是小小的尿道分泌物(4]。女性的感染可能是无症状的,或者它与广泛的有关临床续集包括阴道炎的症状、尿道炎、宫颈炎、盆腔炎、异位妊娠、甚至不孕(5,6]。
最近,t .鞘突感染与收购艾滋病和癌症风险增加。重治疗怀孕期间感染与胎膜早破有关,早产和低出生体重7]。
许多风险因素可能影响滴虫病的流行病学,包括年龄、居住、社会文化水平、教育、婚姻状态和使用避孕方法的类型(IUD /使用避孕套或其他使用避孕药),存在和阴道分泌物的类型,使用的药物,和其它性传播感染的历史8]。
的诊断t .鞘突感染是困难的,因为其症状模仿其它性传播感染和它需要确认测试。诊断是由传统的直接微湿的山,染色,或文化准备。其他诊断方法包括免疫学检测,或核酸分析也被9]。
本研究主要针对确定的流行t .鞘突感染和可能的相关风险因素尤其是女性的避孕方法参加妇产科门诊诊所的卡Al艾尼医学院的开罗,埃及,使用传统的直接湿挂载显微镜检查,吉姆沙染色剂,钻石的媒体文化和嵌套PCR分析。此外,多属性分析和层次分析法的诊断方法基于他们的实验室诊断产量和效用是一个次要的结果。
2。材料和方法
2.1。研究设计
伦理批准后由医学院伦理委员会Kafrelsheikh大学,每个病人的知情同意了。
横断面研究超过240女性参加妇产科门诊的卡El艾尼医院从2018年5月到2019年4月。但6样本洒在准备统计做了超过234只样品。
女性纳入研究从18岁到45岁结婚避孕,抱怨任何妇科投诉像阴道分泌物,烧灼感,外阴瘙痒,性交困难或排尿困难。
设计问卷是为了记录个人、避孕和临床历史,包括没有任何医学疾病。
孕妇,更年期,最近阴道灌洗,或性交在过去2天前抽样和女性与过去的历史管理的抗生素,antiprotozoal治疗,或类固醇在过去两周被排除在外。
2.2。样品采集和处理
每个参与者被无菌nonlubricated窥器检查,和三个阴道拭子从阴道后穹窿的商业无菌拭子准备;所有样本检查如下:(1)湿显微镜和染色染色
拭子是保存在3毫升无菌磷酸盐(PBS)对湿山显微镜幻灯片立即进行能动的营养体和染色染色。(2)文化(修改钻石的介质)
第二个拭子是立即接种到含有培养基培养管根据(6]。(3)嵌套PCR试验
第三拭子立即被筛选了磷酸盐和保存在-20°C,直到进一步的分子表面的污迹。
基因组DNA的提取使用DNA提取:DNA提取使用QIAamp®DNA迷你工具根据制造商的指示。提取的DNA的纯度和浓度测量使用荧光计。检查所有的样品是通过使用根据(nPCR针对肌动蛋白基因10),用引物列在下表中1,循环条件如下:最初的变性步骤5分钟在95°C其次是35周期95°C的变性30年代,退火在55°C的主要反应和52°C嵌套一个45 s在72°C的放大和扩展产品可视化与1.5%琼脂糖凝胶电泳和紫外透照器下可视化。
2.3。统计分析
数据编码、列表和分析使用统计软件包SPSS版本25日和数据被认为是具有统计学意义值< 0.05。敏感性,特异性,阳性预测值,阴性预测值,计算精度,kappa协议测试的诊断产量3与nPCR使用测试。多属性效用理论和层次分析法都是用来评估实验室的效用和使用的诊断性能诊断程序根据(11]。
3所示。结果
3.1。潮湿的山和染色结果nPCR
总共有234妇女被包含在我们的研究中。检查他们的阴道拭子使用潮湿的山和吉姆沙染色剂显示18例(7.7%)阳性样本,文化成功检测积极性36(15.4%),而nPCR检测63份阳性样本(26.9%)(图1和表2)。
3诊断技术的性能相比使用nPCR化验结果作为金标准(表3)。
湿山显微镜和染色染色显示低灵敏度(28.57%)和实质性的协议(0.8)相比,高灵敏度的培养法(57.14%)和完美的协议(0.88),但它们都显示高特异性(100%)。
3.2。多属性和层次分析法的结果
分析排名结果使用层次分析法确定最佳实验室检测选项显示nPCR排名最高(11.9),其次是湿山显微镜方法(9.8),然后吉姆沙染色剂的方法(9.1),(5.4)(表最后的文化方法4)。
3.3。单变量和多变量分析的多重危险因素
大多数病例抱怨阴道分泌物(61)(26%),和研究变量的单变量分析表明有显著关联t .鞘突感染和阴道分泌物的存在,烧灼感,性交困难(值= 0.001、0.001和0.004,分别)(表5)。
关于避孕方法,滴虫病之间有显著相关性,通常使用避孕措施( )和IUD特别( )。
这些变量受到多变量分析使用逻辑回归显示之间的统计相关性感染滴虫病的概率和阴道分泌物的存在( , , - - - - - -1.278),烧灼感( , , - - - - - -0.431),性交困难( , , 宫内节育器的使用比例最高(-0.374),除了使用 , , - - - - - -0.291)。
4所示。讨论
直到今天,已经很少强调降低率的重要性t .鞘突感染,尽管它与艾滋病毒有关收购(12]。
常规尝试目标的检测和治疗滴虫病由于其最近获得了极大的兴趣与妇科和产科不良结果,不育和艾滋病毒感染13]。然而,毛滴虫感染吸引发展中国家尽管很少关注其不良续集生殖健康;这可能是因为大多数感染是无症状除了穷人的负担诊断技术(14]。
在目前的研究中,普遍存在的t .鞘突感染研究人群使用nPCR的确是高,26.9%。
尽管这可能是由于我们选择的研究人群,这也是一个长期存在的迹象感染我们的社区;缺乏认识和常规实验室检测可能加剧了问题在埃及;的患病率在5%到91.3%之间变化2]。
报告发病率的差异可能是由于不同的目标人群在研究中,社会文化因素,年龄,月经周期阶段,与其他性传播感染合并感染,标本类型、收集和处理,可用的诊断技术和测试解释(15]。
虽然湿挂载/染色和文化显示高特异性(100%),前两种方法显示可怜的敏感性和培养法显示中度敏感,很多情况下可能逃脱诊断。这是按照其他研究[15,16]。灵敏度的减少可能是由于多个采样的需要无疑是耗时的,需要多个专业。
湿挂载/染色显示适度的协议而培养法显示与nPCR实质性协议。
这是在分歧与(13]报告一个贫穷的协议PCR试验作为黄金标准和潮湿的显微镜。
在目前的研究中,多属性分析排名nPCR排名最高的,其次是湿山显微镜方法,然后吉姆沙染色剂的方法,最后培养法。
虽然湿山是最广泛使用的诊断方法,因为它很简单,快速、实用,且相对便宜,有明确的证据表明,这是一个不可靠和不满意筛选试验耗时,需要专家;由于难以区分从阴道上皮细胞的细胞核或嗜中性粒细胞,样品应该在20分钟内检查,也取决于感染的严重程度(17]。此外,它显然是来记录,修改后的钻石文化可以作为实验室检测选项但它既昂贵又费时,并且需要大量的孵化器。此外,它不是在所有的实验室(4]。
根据获得的结果,nPCR可以作为一个有吸引力的诊断选项,因为它可以用于批量样本诊断和它是一种有效的应变打字技术,可以帮助理解遗传多样性的本质和范围t .鞘突协助在流行病学控制程序。
这些研究结果表明,有滴虫病和阴道分泌物之间的统计相关性,烧灼感,性交困难。这是按照其他研究在尼日利亚(17],Aethiopia [18)、巴西(19),和埃及(15]。
发现有一个使用避孕方法和滴虫病之间的统计相关性,和多变量分析揭示了统计协会使用IUD避孕套和激素的方法。这是按照([18,20.][21),但其他报道,荷尔蒙避孕是与滴虫病密切相关22]。
与我们的相反,(19)没有发现滴虫病患病率之间的关联和使用避孕和阴道分泌物的存在。
这项研究的限制是,我们在进一步的研究中需要包括无症状妇女三分之一感染可能是无症状的。此外,不同的基因型差异毛滴虫隔离及其相关症状和无症状的患者应该在未来调查工作。
5。结论
t .鞘突在我们社区虽然高回收率仍然被忽视。所以,努力需要集成的筛查项目生殖健康和计划生育。
应该做更多的研究在更大的样本量,不同的地理区域,社会文化水平。伟大的要注意评估无症状的疾病,怀孕女性及其续集在孕产妇和胎儿的结果。
虽然湿山、染色和文化方法有很多优势,他们有许多缺点。所以,PCR方法提供了一个可靠、敏感、特定的检测工具。
数据可用性
所有的数据都是可以从corressponding作者在合理的原因。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
资金
这项工作是支持作者的基金。