围产期死亡率与积极后期文化常见的口腔菌群

文摘

介绍。调查是否孕产妇口腔菌群可能参与子宫内感染和随后的死产或新生儿死亡,可能因此被发现在胎儿和新生儿尸检细菌培养。方法。回顾性研究的后期考试从开户到12/31/2010寻找细菌培养阳性常见口腔菌群从心脏血液或肺组织。孕妇年龄、孕周、新生儿死亡年龄,胎盘和胎儿/新生儿组织病理学结果收集。结果。在研究期间1197年后期考试336(861死产和新生儿死亡)在我们医院进行妊娠年龄从40 + 13周。文化有利于口腔菌群被确定在24尸体解剖包括20纯和8混合生长(26/227,11.5%),发现在16个死产和8个新生儿。显微镜检查时,这些16死产显示8感染和炎症的特点在胎儿和胎盘。7新生儿出生后72小时内死亡6纯隔离和1混合,和6与胎儿和胎盘炎症。结论。纯粹的隔离与组织学证据表明炎症/感染口腔菌群在胎盘和胎儿或婴儿建议一个强大的孕产妇牙周疾病和围产期死亡之间的联系。

1。介绍

感染的主要原因是早产、死胎、新生儿死亡(1- - - - - -5]。感染和炎症反应发病的过程中扮演重要角色导致不良妊娠结局。大多数宫内感染是由细菌引起的,最常见的物种通常生殖道植物的一部分。Nongenital束生物如口腔中也可以填充子宫内的环境通过血液播散或oral-genital联系(3,5]。因此,潜在的感染来源可以是母亲和她的搭档。可能的孕产妇牙周疾病和不良妊娠结局的关系已经引起了相当大的关注3,6- - - - - -9]。

宫内感染和炎症反应可以通过不同的方法检查。这些包括文化——和基于nonculture检测微生物和炎性细胞因子的测量羊水,胎盘和血液或组织从母亲或新生儿。的解剖、组织学检查功能的感染和/或炎症可以执行在胎盘或胎儿组织。在一个简化的方式,绒毛膜羊膜炎可以被视为母亲的炎症反应的证据。Funisitis、脐带的炎症和血管炎胎儿胎盘的胎儿血管单位可以被视为组织学为胎儿炎症反应标记。受感染的羊水可以吞下胎儿在子宫内,沉淀在肺和胃肠道炎症细胞。孕产妇和胎儿的存在炎症反应,炎症细胞在胎儿组织和/或胎儿组织和血培养阳性有时也被称为羊水感染综合症(AFIS) (10]。

先前的研究已经应用这些方法来检查孕产妇牙周疾病之间的关系和羊水或胎血培养从早产、死产9,11- - - - - -13]。Goepfert等人将孕产妇口腔疾病与文化和胎盘/脐带血胎盘组织学的研究却发现,无论是与牙周疾病相关(13]。然而,尽管牙周疾病已被证明是死胎的危险因素(14,15),很少有研究调查常见的口腔菌群的存在在死产或新生儿死亡病例尸检细菌培养72小时内出生的9,12]。

我们假设,如果口腔菌群参与宫内感染和随后的死产或新生儿死亡,这些细菌可能会出现在胎儿或新生儿组织或血液。目前的研究旨在探索潜在的口腔菌群之间的联系和不良妊娠结果通过调查细菌培养结果围产儿尸检。这项研究是进一步与组织学特性的胎盘和胎儿/新生儿的感染和炎症组织。

2。材料和方法

这是一个单个机构进行的回顾性研究通过图表回顾(IRB没有批准。10 - 0129)。我们医院是三级保健中心的孕妇中,80%以上的交付全州范围内发生。后期检查的死产和新生儿进行标准部门协议后,包括抽样从心脏血培养和常规肺组织文化16]。

2.1。细菌培养和鉴定

病人标本细菌培养在各种媒体使用一个标准化的方法。肺上执行文化BAP羊血(血琼脂5%),MacConkey琼脂,巧克力琼脂、巯乙酸可约BAP和肉汤。所有的盘子都孵化18 - 24小时35°C公司5%₂,除了可约软面包卷,孵化的厌氧菌罐在35°C。肺文化板块培养4天,每天检查。

血培养包括一瓶小儿有氧和成年厌氧瓶。如果数量很少的血,只接种小儿有氧瓶,这是有效的仅为1毫升的血液。血培养瓶中孵化BacT /警报®(BioMerieux)连续监测血培养系统5天。阳性血培养转移到软面包卷,巧克力琼脂,MacConkey琼脂板上。这些盘子是孵化18 - 24小时35°C公司5%₂。可约血琼脂板是在厌氧罐接种和孵化35°C。

Vitek - 2®(BioMerieux)自动识别系统用于识别大多数革兰氏阴性肠道杆菌,假单胞菌,和其他nonlactose发酵革兰阴性杆菌和革兰氏阳性球菌等葡萄球菌物种和链球菌物种。酵母分离也确认Vitek - 2系统。快速™系统用于识别厌氧细菌的革兰氏阳性杆菌,嗜血杆菌物种,奈瑟氏菌属物种。

2.2。研究设计

机构审查委员会批准后(IRB),后期检查记录(PMs,尸体解剖)在开户12/31/2010寻找积极从胎儿心脏血液细菌培养或胎儿的肺部组织。相关临床资料包括母亲的年龄、胎龄(GA)出生时,在新生儿死亡实足年龄,胎盘和胎儿/新生儿组织病理学为每个这些病例的收集。

常见的口腔菌群,所显示Socransky et al。17),包括已知的牙周病原体等Aggregatibacter actinomycetemcomitans,Porphyromonas gingivalis,Tannerella连翘,梅毒denticola,梭菌属nucleatum,普氏菌媒介物,Eikenella corrodens,真细菌nodatum;革兰氏阳性细菌,如链球菌sanguis,突变体,轻的,唾液链球菌;和其他革兰氏阴性厌氧菌等弯曲杆菌腹直肌。

3所示。结果

在研究期间,1197 pm 336(861死产和新生儿死亡)在我们医院进行遗传算法从40 + 13周。其中,227例(19%)产生了积极的血液和/或肺文化,包括62年165死产和新生儿。积极培养口腔菌群被确定在24例,包括18纯和8混合生长(多个物种隔离;26/227,11.5%)、8 16死产和新生儿死亡中发现的细菌培养在以下总结死胎和新生儿死亡的尸检从2000年到2011年。

细菌培养在围产儿尸检。有1197例尸体解剖检查妊娠年龄从40 + 13周:(我)861死产(S)和336年新生儿死亡(N),(2)227(19%,165年代和62 n)与积极的后期细菌培养,(3)24 (10%,16 s和8 n)例口腔菌群的积极文化(一些尸体解剖的情况下取得了超过一个积极的细菌培养),(iv)18文化越来越多的纯菌种,(v)8文化日益增长的混合细菌物种。

Histopathology-Bacterial文化相关性。有16个死产(平均妊娠年龄22周):(我)8 AFIS,(2)5与胎盘炎症,(3)3没有感染或炎症的组织学特征。

还有8新生儿死亡:(我)7死后的72小时内出生,(2)6 AFIS,(3)6用纯细菌隔离,(iv)1混合文化的结果。

其中24例,19例(79.2%)表现出在胎儿感染和炎症的组织学特征和/或胎盘组织。

16个死胎的尸检(中位GA 22周),16后期细菌培养口腔菌群的物种。显微镜检查胎儿和胎盘组织在这些情况下披露与AFIS 8,与胎盘炎症,5和3没有组织学炎症。7新生儿出生后72小时内死亡(中位GA 21周)增长6纯隔离和1混合文化,和6例AFIS。总结了所有24例临床病理结果表1。


情况下	主要解剖诊断	胎盘发现炎症	血培养	肺的文化	其他文化	交货方式	遗传算法	胎儿的性别	长度的生存	垫的年龄	孕产妇医疗或产科的历史

1	AFIS、变形特性和正常的CG	急性绒毛膜羊膜炎。急性血管炎绒毛膜板。	美国sanguis	没有一个	没有一个	Unk	17	F	0	35	异常的血栓形成倾向。怀孕3损失:首先在22周损失;特纳氏综合征;这是第二个损失。第三与正常CG。
2	极端的早熟,AFIS	急性绒毛膜羊膜炎。革兰氏阳性球菌对革兰氏染色剂。	美国缓和的	没有增长	没有一个	VD	20.	米	15分钟	35	妊娠期糖尿病
3	AFIS	坏死性急性绒毛膜羊膜炎。药物的急性血管炎和funisitis脐带。	唾液链球菌	唾液链球菌	没有一个	VD	19	F	0	29日
4	IUFD导致不能确定	没有一个	没有增长	肠球菌物种,消化链球菌属	没有一个	Unk	16	F	0	34	母亲的肥胖
5	AFIS	急性绒毛膜羊膜炎。药物的急性血管炎和funisitis脐带。急性血管炎绒毛膜板。	美国缓和的	美国缓和的	没有一个	VD	35	F	0	21
6	AFIS,极度早产	急性绒毛膜羊膜炎。	普氏菌的物种	没有增长	没有一个	VD	22	米	15分钟	19
7	变形特性,AFIS	坏死性急性绒毛膜羊膜炎。药物的急性血管炎和funisitis脐带。急性血管炎绒毛膜板。	不采取	s . sanguis s .草绿色组,p . anaerobius	没有一个	VD	19	F	0	37
8	宫内感染	急性绒毛膜羊膜炎。急性血管炎和funisitis的脐带。	消化链球菌属物种	没有增长	普氏菌从胎盘	VD	22	米	0	20.
9	待定	没有一个	美国缓和的	没有增长	没有一个	VD	21	F	0	30.
10	AFIS	胎儿羊水感染炎症反应的证据。	梭菌属的物种	没有增长	没有一个	VD	22	米	0	24
11	称18三体综合症	没有提交的胎盘	美国epidermidis	s . epidermidis缓和的	没有一个	C / S	36	F	22天	31日
12	极端的早熟,AFIS	严重的坏死性急性绒毛膜羊膜炎。急性血管炎和funisitis的脐带。	梭菌属	没有一个	没有一个	VD	22	F	5个小时	22
13	AFIS	坏死性急性绒毛膜羊膜炎。药物的急性血管炎和funisitis脐带。急性血管炎绒毛膜板。	不采取	1 +凝固酶阴性葡萄球菌。3 +消化链球菌属物种和4 +乳酸菌种类	没有一个	VD	40 +	F	0	20.	没有产前护理(不知道怀孕)。肾功能衰竭和深静脉血栓形成。对减肥药物。
14	AFIS	急性绒毛膜羊膜炎。药物的急性血管炎和funisitis脐带。急性血管炎绒毛膜板。	(−)厌氧革兰氏细菌,梭状回类型,挑剔的	没有增长	没有一个	VD	38	F	0	30.
15	双胞胎输血综合征	没有一个	anginosus和消化链球菌属	凝固酶阴性葡萄球菌	没有一个	C / S	30.	Unk	0	24
16	IUGR、中断、宫内感染,没有炎症出现胎儿组织	胎儿宫内感染炎症反应的证据。	轻的和粪大肠	没有一个	没有一个	VD	28	米	0	33	以前怀孕23周的损失。Antiphospholipid综合症、预防性肝素和阿司匹林。
17	胎儿宫内感染炎症反应,没有炎症出现胎儿组织	急性绒毛膜羊膜炎。1-vessel急性血管炎的脐带。	粪大肠和缓和的	没有一个	GBS尿液中	VD	27	F	0	35	氨苄青霉素GBS的尿液。之前与足月妊娠高血压。甲状腺功能减退,levoxyl日报。
18	胎儿宫内感染炎症反应,没有炎症出现胎儿组织	急性绒毛膜羊膜炎。1-vessel急性血管炎的脐带。急性血管炎绒毛膜板。	变异链球菌	没有一个	没有一个	VD	15	F	0	23	G3P0。宫颈环扎术。两次怀孕中期的损失
19	极早熟,没有炎症出现胎儿组织	急性绒毛膜羊膜炎。1-vessel急性血管炎和funisitis的脐带。急性血管炎绒毛膜板。	美国缓和的	没有一个	没有一个	VD	19 +	米	3小时40分钟	33
20.	AFIS	急性坏死性绒毛膜羊膜炎的双胞胎	大肠corrodens	大肠corrodens	没有一个	Unk	23	F	> 10分钟	14	牙龈出血
21	AFIS	急性绒毛膜羊膜炎。药物的急性血管炎和funisitis脐带。急性血管炎绒毛膜板。	美国缓和的	美国缓和的		Unk	36 +	米	0	32
22	AFIS	急性绒毛膜羊膜炎。船舶的急性血管炎和funisitis脐带。		轻的,s . sanguis	没有一个	VD	19 +	F	2小时	30.	G4P0。宫颈环扎术。预防性抗生素
23	AFIS	急性绒毛膜羊膜炎。	没有一个	普氏菌bivia	没有一个	Unk	21	米	2小时	15
24	胎儿缺氧	没有提交的胎盘	没有一个	普氏菌bivia	没有一个	C / S	31日	米	0	20.	妊娠高血压,柳胺苄心定

AFIS,羊水感染综合症;CG,细胞遗传学;C / S,剖腹产;F,女;GA,胎龄;GBS, B组链球菌;IUFD宫内胎儿死亡;米,男;垫,孕产妇;Unk,未知;VD,阴道分娩。

数据1和2展示代表胎盘和胎儿组织的显微照片。急性炎症存在于胎盘膜和绒毛膜板,符合急性绒毛膜羊膜炎和暗示母亲的炎症反应。当胎儿绒毛膜板或脐带血管,胎儿炎症反应。

(一)

(b)

(c)

(一)

(b)

(c)

孤立的微生物及其microbiological-histological的频率相关性报道在表2。美国缓和的6例9文化隔绝,包括2 4死产和新生儿在4小时内死亡。在3例,有纯细菌分离与感染/炎症组织学特征(即在胎儿和胎盘组织。AFIS)。消化链球菌属物种从5例孤立一个死胎增长AFIS的纯培养和显示功能。一个死胎,立即一个新生儿死亡midgestation展出普氏菌相关AFIS。三个文化增长美国sanguis其中一个纯粹的隔离与死胎AFIS。其他微生物在单独的情况下被发现。


微生物	病例数与积极的文化	纯粹的文化	混合的文化	例AFIS	例纯文化和AFIS	例胎盘发现炎症	情况下没有组织学炎症的证据	请注意

美国缓和的	9	5	4	4	3	3	1	情况下没有提交的胎盘
消化链球菌属	5	1	4	2	1	1	2
普氏菌	4	4	0	2	2	1	0	情况下没有提交的胎盘
美国sanguis	3	1	2	3	1	1	0
梭菌属	2	2	0	2	2	0	0
唾液链球菌	1	1	0	1	1	0	0
美国anginosus	1	0	1	0	0	0	0	情况下没有提交的胎盘
变异链球菌	1	1	0	0	0	1	0
大肠corrodens	1	1	0	1	1	0	0

4所示。讨论

在研究期间的11年里,细菌物种被认为是常见的口腔菌群被确定在26个文化从24尸检,发生率2% (24/1197)。十一个尸检了纯粹的口腔细菌种类和有感染或炎症的组织学特征在胎儿和胎盘组织,建议文化有利于口腔菌群之间的关联和宫内感染在这些情况下立即死产或新生儿死亡。

最常见的物种隔离链球菌,这是孤立的从6例(图九文化1和表2)。链球菌是一种D组吗链球菌和瀑布的伞下草绿色集团链球菌。口腔链球菌集团(轻的系统组)目前由九个公认的物种,尽管该集团传统上难以分类,命名的变化频繁。有几个严重的新生儿感染的报道,通过这组合成灭亡(18]。有趣的是,这些新生儿感染发生在出生后72小时内,这意味着这些细菌可能有一个母亲的起源。

美国sanguis是正常的口腔菌群的一部分,改变牙菌斑,使它不太适合居住其他的吗链球菌导致蛀牙。唾液链球菌是孤立的从一个死胎纯隔离来自血液和肺部组织。在解剖诊断羊水感染综合症(AFIS)。唾液链球菌在嘴和上呼吸道出生后不久,因此人类口中的原则共生的细菌。它是孤立的作为一个纯粹的文化与AFIS。美国anginosus被隔离在一个混合文化的血液的双胞胎输血综合征。虽然看来污染发生在当前的情况下,这个物种曾被解剖,胎盘,胎儿组织细菌培养从midgestation堕胎19]。变异链球菌通常被发现在人类口腔龋齿的主要原因和蛀牙。在最近的研究中,变异链球菌被发现是一个纯粹的隔离从血液从15周获得胎死腹中。胎盘演示功能的孕产妇和胎儿的炎症反应。虽然我们没有调查草绿色集团链球菌在当前的研究中,一项研究声称它是新生儿败血症的一个原因,频率仅次于GBS (20.]。有一系列案例从我们研究所文化从18围产儿尸检增长美国草绿色14年期间(21]。

除了链球菌物种,第二个最常见的隔离在我们的研究中消化链球菌属物种,发现5例(一个纯粹和四个混合)。这是一个属厌氧的革兰氏阳性共生的生物体在嘴巴,皮肤、胃肠道,阴道和尿道。普氏菌物种,原名拟杆菌melaninogenicus是人类病原体与牙周疾病和上呼吸道感染。在最近的研究中,普氏菌物种隔绝的胎儿肺AFIS情况下,肺的31-week死胎中没有可供检查胎盘,和从22-week死胎胎盘文化展示孕产妇和胎儿胎盘炎症反应。

梭菌属是属厌氧的革兰氏阴性杆菌是常见的人类的口咽。在我们的研究中,这是一个纯粹的隔离从两例胎儿血液AFIS。这些物种是病原体,不仅与牙周疾病,溃疡性结肠炎和结肠癌。汉等人发现了相同的梭菌属16 s rDNA超越和龈下的斑块样本和胎儿肺和胃,因此建立胎儿感染的来源是微生物(9]。海勒等人发现丝状微生物一致梭菌属sp.在胎盘中使用Warthin-Starry污渍三例死产2年期间在一个医院。没有微生物鉴定(22]。在另一项研究中,汉族f . nucleatum是最常见的口腔物种与不良妊娠结果(23]。

Kostadinov Pinar,也从我们的研究所报道的新生儿死亡Eikenella corrodens(12]。Eikenella corrodens是口腔菌群的一部分,通常在感染包括人类咬伤(图2)。

有越来越多的证据支持孕产妇口腔菌群和子宫内环境之间的交互;怀孕会导致口腔细菌的变更条件,和口腔菌群可能会影响怀孕的结果(24,25]。Oral-genital接触使局势进一步复杂化。先前的研究显示,常见的口腔细菌被隔绝羊水(26和胎盘27),有几个死产的案例报告的后期文化增长口腔菌群(9,12]。Microbiological-histological相关分析是必要建立口腔细菌感染和死胎之间的因果关系。这项研究表明,常见的口腔菌群种类可以从后期细菌培养分离的死产或新生儿死亡。这些隔离除了组织学证据表明炎症在胎盘和胎儿/新生儿组织建议一个强大的协会之间存在口腔菌群在子宫内环境和围产期死亡。

由于口腔卫生和牙齿图表是不包括在产前护理的实践,本研究的一个限制是孕产妇牙周疾病数据的缺乏。考虑到可能的孕产妇口腔菌群之间的联系和胎儿/新生儿死亡,包括口腔和牙齿可能是明智的评估作为产前管理的一部分。

最重要的限制目前的研究是依赖细菌培养;因此我们不能够阐明挑剔的细菌的发生在我们的情况下(即。物种,不能使用标准的实验室培养的方法)。汉等人一个不文明的口头报告Bergeyella应变在羊水中早产(28]。DiGiulio等人结合核糖体DNA鉴定技术和传统文化的报告更大的患病率和羊水的微生物多样性相比仅靠文化。他们可以建立一个联系和组织学绒毛膜羊膜炎funisitis PCR阳性结果,以及羊水微生物之间的因果关系和早产29日]。分子检测的微生物也可以用来揭示相似联想通过测试样品从口腔和羊水30.,31日]。组织学检测微生物也可以用于分子识别(32]。

因此,未来的前瞻性研究结合分子检测技术和传统文化识别母亲的口腔里的细菌,羊水,胎儿组织,与组织学的研究胎盘(死产的胎儿的情况下),可以提供更有说服力的证据之间的因果关系宫内感染口腔细菌和死胎。这些知识可能进一步导致孕期保健的改善。

信息披露

这部分研究报告作为海报在儿科病理学会的年度会议上,温哥华,CA, 2012年3月17 - 18日。

相互竞争的利益

作者报告没有利益冲突。

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