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Michele Straka, Wifred Dela Cruz, Camille Blackmon, Oswald Johnson, Sara Stassen, David Streitman, Stephen Golden, David Stamilio, "B组链球菌的快速检测大肠杆菌实时荧光PCR检测羊水中微量元素",妇产科传染病学, 卷。12, 文章的ID986591, 5 页面, 2004. https://doi.org/10.1080/10647440400020679
B组链球菌的快速检测大肠杆菌实时荧光PCR检测羊水中微量元素
摘要
摘要目的:目的:建立实时荧光PCR技术早期检测羊膜腔细菌入侵的可靠性和有效性。方法:40例妊娠中期基因羊膜穿透术患者的羊水标本在37℃下孵育6 h,并在B组链球菌(GBS)和特异性培养基上培养大肠杆菌。同时,采用real-time荧光PCR (Roche LightCycler)对样品进行分析,使用设计的DNA引物和探针检测CAMP因子编码循环流化床基因和uidAGBS基因和大肠杆菌,分别。为阳性对照和模拟羊水定植,104 cfu/ml GBS和大肠杆菌接种无菌羊水,孵育6 h。利用商品化试剂盒通过两步沉淀法提取并纯化两种微生物的细菌基因组DNA。对25例非gbs和非gbs患者进行了实时荧光定量PCR检测大肠杆菌细菌物种。采用细菌基因组DNA连续稀释法确定各病原菌的检测下限。结果:所有患者样本均为阴性大肠杆菌培养和实时荧光定量PCR方法。羊水样本接种GBS和大肠杆菌均为实时PCR阳性,而除GBS或大肠杆菌化验结果为阴性。平均样品处理时间包括预富集步骤为7 h 40 min。DNA提取和PCR检测的平均成本为8.50美元/次。结论:实时荧光PCR是一种有效、可靠的检测羊水中特异性病原体的方法。该技术对低接种水平是敏感的。实时荧光PCR作为一种快速、可靠的检测GBS和GBS的方法,有可能影响临床管理大肠杆菌绒毛膜羊膜炎。
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