mir - 182 - 5 - p调节通过针对RCAN1肝癌细胞生长

文摘

调节器的钙调磷酸酶1 (RCAN1)是一种内源性蛋白参与调节多种癌症的发生和进展,但目前,人们对其潜在的机制知之甚少。本研究调查的功能和机制RCAN1和mir - 182 - 5 - p在肝癌细胞中。在这项研究中,可靠的数据表明,RCAN1抑制细胞增殖,迁移,入侵,肝癌细胞周期的进展。此外,RCAN1被指出的表达受上游调节器mir - 182 - 5 - p,和mir - 182 - 5 - p在肝癌细胞显著高表达。在此基础上,通过细胞实验进一步证明,mir - 182 - 5 - p促进肝癌细胞生长,差别通过RCAN1对这些显示RCAN1可能是一个新的生物标志物和肝癌的诊断和治疗的目标。

1。介绍

根据癌症统计,20201),肝癌是癌症相关死亡的第二大原因,发病率增长最快的速度从2007年到2016年每年2% - -3%。此外,肝癌患者的5年生存率只有18%在随访期间(从2009年到2015年1]。最新的研究认为,肝癌几乎发展慢性肝病患者,由肝损伤的恶性循环,炎症和再生,通常跨越几十年(2]。肝癌是确定高度异构,预后差和反应效率低的治疗药物3,4]。尽管最近的进步在疾病诊断和治疗,肝癌患者的长期预后仍然是穷人。此外,肝癌的复发和转移的分子机制仍然是难以捉摸的。因此,进一步探索具有重要意义准确的生物标志物和更有效的治疗肝癌的目标。

调节器的钙调磷酸酶1 (RCAN1)是一种内源性蛋白与钙调磷酸酶(可以)然后干扰可以使核能因子激活T细胞(NFAT)抑制其功能5]。RCAN1位于21号染色体q22.12, RCAN1的超表达可以诱导神经细胞凋亡(6]。最近的研究显示,RCAN1阻碍了内皮细胞的增殖和血管生成7),负责监管大多数人类癌症的恶性发展。大数十名优秀的评论描述RCAN1大大妨碍细胞增殖,迁移和入侵肝癌(8- - - - - -10]。然而,针对这种基因的调控机制是很少报道。因此,探讨肝癌RCAN1可能的监管机制提供理论支持RCAN1癌症调节器。

小分子核糖核酸(microrna)很小,非编码RNA分子,扮演一个关键角色在调节基因表达的调节目标基因。研究提供了一些证据,microrna经常在肿瘤组织中特异表达和参与多种肿瘤的过程,如细胞增殖、凋亡、迁移和入侵(11,12]。最近的研究显示,microrna影响扩散,迁移,入侵,肝癌细胞的凋亡。例如,mir - 222加速通过BBC3肝癌细胞增殖和迁移;mir - 498抑制肝癌的入侵和迁移ZEB2 [13,14]。此外,许多研究显示,microrna影响肝癌组织和细胞的耐药性。例如,mir - 93促进肝癌的索拉非尼阻力影响PTEN / CDKN1A [15,16]。因此,microrna是有前途的治疗肝癌的新目标17]。mir - 182 - 5 - p, miR-183/96/182集群成员,作为高优先级的microrna在肝癌和相关不同癌症作为癌基因和肿瘤抑制基因。例如,mir - 182 - 5 - p被确定为致癌基因在卵巢癌18],乳腺癌[19),和黑素瘤20.),但在肾细胞癌(肿瘤抑制21,22)和胶质母细胞瘤(23,24]。此外,upregulation mir - 182 - 5 - p被证明为肝癌患者的诊断和预后价值(25]。尽管mir - 182 - 5 - p的作用在肿瘤进展进行了广泛的研究,研究的分子机制mir - 182 - 5 - p在肝癌的发生和进展仍然不足,需要进一步调查。

在这项研究中,我们通过生物信息学分析发现RCAN1差异在肝癌组织中表达下调,有RCAN1失调之间的关系和肝癌患者预后不良。我们的实验结果也表明了,mir - 182 - 5 - p可能下调RCAN1的表达,从而促进肝癌的进展。

2。材料和方法

2.1。生物信息学分析

成熟的microrna表达谱(50正常样本,375癌症样本)和mrna(50正常样本,374癌症样本),以及相关的临床资料,从TCGA-LIHC下载数据集(https://portal.gdc.cancer.gov/)。RCAN1在正常组织和癌组织的表达检测基于下载数据, - - - - - -用于验证测试。患者分为高、低表达组根据RCAN1表达水平的中位数在所有肿瘤样本,然后进行使用和生存分析“生存”包。同时,单向方差分析(方差分析)应用于分析RCAN1表达式之间的关系和临床阶段的肿瘤样本。“磨边机”包采用微分分析得到差异表达microrna (DEmiRNAs) ( , )。澄清上游调节器microrna的肝癌的RCAN1 mirDIP (http://ophid.utoronto.ca/mirDIP# r / index . jsp)和母星(http://starbase.sysu.edu.cn/)数据库咨询。基于竞争的内源性RNA(龙头)假设目标mRNA microrna的负相关,与调节DEmiRNAs预测microrna是分割的。皮尔逊相关分析是获得microrna和RCAN1获得最强的研究目标microrna与RCAN1负相关。然后,TCGA的microrna的表达样本进一步澄清 - - - - - -执行测试来确定统计学意义。

2.2。细胞培养

本研究采用以下细胞系:人类正常肝细胞株hl - 7702 [L-02] (BNCC100012),肝癌细胞株smmc - 7721 (BNCC338089) HepG2 (BNCC338070) Huh-7 (BNCC337690)和Hep3b (BNCC337952)。所有的细胞系都从希伯来文名字购买文化集合(BNCC,中国)。smmc - 7721, HepG2、Huh-7 Hep3b细胞系都在杜尔贝科的修改鹰培养基培养(DMEM)(中国BNCC BNCC351841) 10%胎牛血清的边后卫,而hl - 7702 (L-02)细胞株培养rpmi - 1640中(中国BNCC BNCC341471)补充10%的边后卫。所有的细胞系都保持在一个孵化器在37°C公司为5%₂。

2.3。细胞转染

RCAN1过表达向量pcDNA3.1-RCAN1 (oe-RCAN1), mir - 182 - 5 - p模仿(miR-mimic),负控制向量pcDNA3.1 (oe-NC)和控制模拟(miR-NC)都获得GenePharma(上海,中国)。研究的影响mir - 182 - 5 - p和RCAN1细胞增殖,迁移和入侵,Hep3b细胞在相应的培养基培养至少24小时,用磷酸盐(PBS, pH值7.4)。然后,细胞受到转染使用Lipofectamine 2000(英杰公司)根据制造商的协议和顺序在相应的培养基培养在37°C公司为5%₂。

2.4。实时定量聚合酶链反应(存在)

从细胞总RNA分离使用试剂盒试剂(表达载体)遵循制造商的指示。RNA提取每一组量化了NanoDrop分光光度计(美国NanoDrop威尔明顿·德·),然后互补DNA(互补)由逆转录合成装备(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)。合成的互补与SYBR绿色实时PCR反应混合液稀释(Toyobo、东京、日本)/放大指令。接下来,存在运行在应用生物系统公司®7500实时PCR系统(热费希尔科学、沃尔瑟姆,MA)的表达式mir - 182 - 5 - p和RCAN1 mRNA, U6,β分别肌动蛋白应用于内部参考。的相对表达mir - 182 - 5 - p和RCAN1 mRNA分析了对照组和实验组之间通过2^{- - - - - -ΔΔCt}价值。实验进行了一式三份,重复三次。引物序列详细表1。

2.5。细胞计数Kit-8 (CCK-8)测定

CCK-8分析评估Hep3b肝癌细胞系的细胞增殖。细胞被播种到96孔板( 细胞/一夜之间)。后,CCK-8试剂(σ,圣路易斯,密苏里州,美国)被添加到每个在0,24日,48岁,72,和96 h转染后,紧随其后的是2 h的细胞孵化在37°C。光密度(OD)在450纳米测量与enzyme-labeled仪器(Bio-Rad、大力神、钙、美国)。

2.6。伤口愈合实验

首先,肝癌细胞Hep3b ( )一夜之间被接种到6-well板。然后,细胞单层刮了100μL无菌吸管,紧随其后的是一个无血清培养基的添加进一步的文化。接下来,伤口拍摄用显微镜,观察细胞迁移在0和24 h。最后,使用ImageJ伤口愈合的百分比计算。

2.7。Transwell入侵检测

细胞通过Transwell试验分析了入侵。Hep3b细胞( 细胞无血清培养系统/毫升)被放置在参议院(美国纽约合演,康宁)涂层与基底膜基质(BD生物科学,圣何塞、钙、美国),同时加入一定量serum-supplemented介质降低室。文化在37°C, 24小时后没有通过膜的细胞用棉签轻轻擦拭。细胞在基底膜和4%多聚甲醛固定的10分钟,与结晶紫染色(σ),然后在显微镜下计数(奥林巴斯、东京、日本)。随机选择三个字段,每个字段计算细胞的平均数量。

2.8。免疫印迹

根据制造商的指示,总蛋白提取使用radio-immunoprecipitation分析(里帕)裂解缓冲(Beyotime、上海、中国)。分离后10%钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳(sds - page),蛋白质被转移到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜。膜是孵化一夜之间在4°C以下主要抗体:兔子anti-RCAN1(英国Abcam),兔抗β肌动蛋白(英国Abcam)。与主要抗体,孵化后膜与0.1% TBST洗3次,每次10分钟。孕育了膜在室温下与二次抗体2 h山羊anti-rabbit免疫球蛋白g h和l(合)与PBST缓冲区(英国Abcam)和洗3次,每次10分钟。蛋白表达检测使用一个增强化学发光工具包(美国通用电气医疗集团,芝加哥,IL)β肌动蛋白作为内部参考。

2.9。Dual-Luciferase报告基因分析

野生型(WT) RCAN1 3 - - - - - -UTR序列扩增并克隆到pmirGLO记者(Promega)生成RCAN1-WT质粒向量。豆类的MutanBEST工具包(豆类)构建突变(傻瓜)RCAN1 3处理 - - - - - -UTR质粒向量(RCAN1-MUT)。然后,RCAN1-WT /狗记者向量和miR-mimic / miR-NC cotransfected Hep3b细胞Lipofectamine 2000(热费希尔科学)。细胞转染48 h后,荧光素酶的活动被荧光素酶报告基因系统评估(Promega)。

2.10。流式细胞术

每组肝癌细胞Hep3b收集,用胰蛋白酶处理,一夜之间在7%乙醇固定在4°C。在寒冷的PBS洗3次后,这些细胞被resuspended 1包含40毫升PBSμgπ和100μg核糖核酸酶A (Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州)在37°C孵化的30分钟。样品使用BD FACSAria III细胞分选仪进行分析(美国加利福尼亚州圣何塞)。

2.11。统计分析

所有的数据收集从至少两个或三个独立的实验。GraphPad棱镜7是用于统计分析。所有测量数据都表示为 ,在两组之间的差异的统计意义所决定的 - - - - - -测试。 被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。RCAN1特别是肝癌细胞低表达

TCGA-LIHC如上所述的基因表达数据集,RCAN1表现出高度在肝癌组织中表达下降(图1(一))。生存分析显示,其低表达预后不良(图表示1 (b))。此外,RCAN1有显著相关性肝癌的临床阶段(图1 (c))。接下来,RCAN1的表达在人类正常肝细胞株hl - 7702和四个肝癌细胞株smmc - 7721, HepG2, Huh-7, Hep3b评估中存在。它可以发现RCAN1 mRNA的表达在肝癌细胞株显著下降(图1 (d))。然后,免疫印迹结果表示的表达式RCAN1蛋白在肝癌细胞株突出表达下调(图1 (e))。上述结果显示,RCAN1非常卑微的肝癌细胞中表达。更好地探索RCAN1的机制在肝癌细胞中,最低的Hep3b细胞系的表达RCAN1被选为后续实验。

3.2。过度的RCAN1妨碍了肝癌细胞的发展

RCAN1过表达Hep3b细胞建立了研究RCAN1在肝癌细胞的作用。转染效率在不同的治疗组中存在测量完成。结果显示,RCAN1 oe-RCAN1组的表达显著调节(图2(一个)),表明所构造的细胞可以被随后的实验。然后,它是通过CCK-8试验说明,过度的RCAN1明显抑制Hep3b扩散(图2 (b))。接下来,Transwell化验是练习来检测是否RCAN1调节肝癌细胞的入侵,它来到细胞的入侵能力明显降低过度的RCAN1(图2 (c))。此外,过表达的抑制作用RCAN1肝癌细胞的迁移能力被伤口愈合实验(图还显示2 (d))。此外,在通过流式细胞仪分析细胞周期,RCAN1可能阻碍G1-S过渡的细胞,从而抑制细胞进行有丝分裂。因此,它可以看到的超表达RCAN1断然地阻碍Hep3b细胞周期的进展(图2 (e))。这些结果表明,过度的RCAN1压抑的细胞增殖,迁移,入侵,肝癌细胞周期的进展。

3.3。mir - 182 - 5 - p是肝癌细胞中高度表达

为了调查RCAN1的上游调控机制在肝癌细胞中,126年DEmiRNAs包含122年调节和4表达下调基因首先通过生物信息学分析,TCGA(图3(一个))。然后,上游的microrna RCAN1预测通过mirDIP和母星数据库。预测的microrna与122年调节交叉DEmiRNAs获得2 microrna与RCAN1结合位点(图3 (b))。皮尔森相关分析显示出,RCAN1和mir - 182 - 5 - p与高皮尔逊相关系数呈负相关(图3 (c))。TCGA所显示的数据,与正常组织相比,肝癌组织有明显表达升高mir - 182 - 5 - p(图3 (d))。因此,本研究把mir - 182 - 5 - p为研究对象。最后,mir - 182 - 5 - p的表达的四个肝癌细胞系和人类正常肝细胞株hl - 7702测量中存在。结果也澄清,mir - 182 - 5 - p的表达在肝癌细胞株显著调节(图3 (e))。上述结果表明,mir - 182 - 5 - p是肝癌细胞中高度表达,它可能会作为癌基因在肝癌细胞的发展。

3.4。mir - 182 - 5 - p目标RCAN1在肝癌细胞

进一步验证的分子调控RCAN1 mir - 182 - 5 - p,有针对性的结合位点的mir - 182 - 5 - p RCAN1 3通过生物信息学(图UTR预测和发现4(一))。然后,mir - 182之间的绑定关系- 5 - p和RCAN1验证了通过dual-luciferase报告基因分析。这说明过度mir - 182 - 5 - p与RCAN1-WT抑制了细胞的荧光素酶活性,而对细胞的荧光素酶活性没有影响RCAN1-MUT(图4 (b))。然后,RCAN1 mRNA的表达在不同转染组Hep3b细胞系的评估中存在。结果展示,这是大大减少mir - 182 - 5 - p过表达细胞(图4 (c))。免疫印迹RCAN1还表示,蛋白表达下降显著的过度mir - 182 - 5 - p(图4 (d))。上述结果提出,mir - 182 - 5 - p阻碍RCAN1在肝癌细胞的表达目标RCAN1。

3.5。mir - 182 - 5 - p通过针对RCAN1促进细胞肝癌的进展

探索是否mir - 182 - 5 - p参与肝癌细胞功能的调控目标RCAN1,与过表达RCAN1细胞系( )同时或细胞系中mir - 182 - 5 - p和RCAN1 ( )被建造。首先,观察每组RCAN1的表达中存在和免疫印迹。据披露的RCAN1 mRNA和蛋白表达 组显著增加,然后降低 集团(数据5(一个)和5 (b))。CCK-8化验显示,过度的RCAN1显著减少肝癌细胞的增殖能力,而过度mir - 182 - 5 - p和RCAN1同时减少RCAN1进行靶向治疗对细胞增殖的抑制作用(图5 (c))。接下来,肝癌细胞的迁移和入侵在每个转染组进一步通过伤口愈合实验来测试和Transwell化验。它来到癌症细胞的迁徙和入侵能力显著降低RCAN1的过度表达,而抑制作用明显恢复当mir - 182 - 5 - p和RCAN1中并发(数字5 (d)和5 (e))。此外,流式细胞术也证实RCAN1阻止细胞进行有丝分裂阻断的过渡G1期细胞S期,这明显抑制Hep3b细胞的细胞周期进展,而压抑的进展与中获救mir - 182 - 5 - p和RCAN1(图5 (f))。总之,我们的研究传达,mir - 182 - 5 - p促进细胞增殖,迁移,细胞周期进程入侵,肝癌的靶向RCAN1表达式。

4所示。讨论

肝癌是世界上第五个最常见的癌症死亡率上升(26]。肝癌治疗的主要挑战包括肝内复发和转移,导致一个惨淡的预后27]。先前的研究证明,microrna扮演一个关键的角色在肝癌细胞的发生和发展。例如,mir - 498 (14],miR-34a [28],miR-26b [29日],mir - 196 a [30.),和其他microrna断然地低表达在肝癌细胞,可以用作生物标记。因此,我们在分子水平上探索治疗方法寻找潜在生物标志物和治疗靶点。

最初,我们从数据从生物信息学数据库检索RCAN1特别低表达在肝癌组织中。存在和免疫印迹显示RCAN1 mRNA和蛋白表达水平的肝癌细胞明显低于在正常人类肝细胞,表明RCAN1可能参与调节肝癌的进展。进一步的功能性实验表现出过度的RCAN1抑制细胞增殖,迁移,入侵,肝癌细胞周期的进展。因此,RCAN1作为肿瘤抑制控制肝癌的发生和进展。以前,是记录RCAN1作为肿瘤抑制各种癌症。例如,RCAN1明显低表达在口腔鳞状细胞癌,而mir - 103 - a - 3 - p直接目标RCAN1促进细胞增殖,迁移和入侵31日];RCAN1在肝细胞癌(HCC)由circADAMTS14表达下调,mir - 572调解癌细胞的发展(32]。本研究进一步澄清,RCAN1可能作为肿瘤抑制肝癌细胞阻碍细胞的发生和发展。

mir - 182 - 5 - p作为基因与复杂的函数可以作为癌基因和肿瘤抑制基因在不同癌症。研究说明,mir - 182 - 5 - p刺激肾细胞癌的扩散通过激活一种蛋白激酶/ FOXO3a信号通路(21];mir - 182 - 5 - p加速口腔鳞状细胞癌的生长通过抑制CAMK2N1 [33];mir - 182 - 5 - p消除卵巢癌细胞增殖和迁移,通过针对BNIP3 [34];mir - 182 - 5 - p减轻结肠直肠癌的扩散和转移目标MTDH [35]。王等人。36)宣布,mir - 182 - 5 - p促进肝癌转移的靶向转移抑制因子1 (MTSS1)。在这项研究中,我们透露,mir - 182 - 5 - p明显高表达于肝癌组织和细胞系,通过生物信息学分析和存在。此外,dual-luciferase报告基因分析进一步证明了有针对性的绑定关系mir - 182 - 5 p和RCAN1而存在和免疫印迹也证实,RCAN1信使rna和蛋白质是负面受mir - 182 - 5 - p。救援实验发现,过度的RCAN1明显阻碍了细胞增殖,迁移,入侵和肝癌细胞周期的进展,而overexpressing mir - 182 - 5 - p和RCAN1同时削弱了这种抑制作用。这些结果加深了我们对调控机制的理解,mir - 182 - 5 - p在肝癌细胞中。在肝癌的治疗中,mir - 182 - 5 - p的表达异常可能是一个有价值的生物标志物和候选指标。

这项研究中,总之,证实,mir - 182 - 5 - p之间的关系和RCAN1可能影响肝癌细胞的发展。然而,这项研究仍然受到一定的限制。例如,本研究只证实RCAN1的影响和mir - 182 - 5 - p在扩散,迁移,肝癌细胞的入侵在体外细胞实验,而mir - 182 - 5的预后价值- p为肝癌患者没有完全通过临床研究证实。事实上,许多研究显示,microrna能影响病人的预后等各种形式直接影响癌症的转移和入侵或通过影响耐药(37,38]。有一项研究表明患者高mir - 182 - 5 - p的表达在不同癌症,如乳腺癌[39和胰腺癌40),有更短的生存时间。本研究推测,mir - 182 - 5 - p的表达具有逆与肝癌患者的预后。然而,需要进行进一步的临床实验证实的预后价值mir - 182 - 5 - p肝癌患者。在未来,我们的团队将进一步调查的应用价值mir - 182 - 5 - p在肝癌的预后的预测。

托托认为,这些研究结果表明,mir - 182 - 5 - p / RCAN1可能在肝癌诊断的潜力,和RCAN1受上游调节器mir - 182 - 5 - p作为肿瘤抑制。这项研究显示,第一次的监管机制之间的交互mir - 182 - 5 - p和潜在RCAN1肝癌的进展,这可能提供优越的治疗机会。

数据可用性

没有数据被用来支持本研究。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

所有作者导致数据分析、起草和修改这篇文章,给了最后批准的版本发布,并同意负责所有方面的工作。林建兴郑和东阳市吴同样这项工作。

引用

1. r·l·西格尔,k·d·米勒和a . Jemal癌症统计数据,2020年,“CA:临床医生的癌症杂志》上,卷70,不。1,7-30,2020页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. l . x Yu和r·f·施瓦贝”肠道微生物和肝癌:机制和临床翻译,“自然评论。胃肠病学和肝脏病学,14卷,不。9日,第539 - 527页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. z z秋h . Li Zhang et al .,“药物基因组景观在人类肝癌,”癌症细胞,36卷,不。2,页179 - 193。e11, 2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. m .奖赏,r·s·芬恩美国秦et al .,“Lenvatinib与索拉非尼在不可切除的肝细胞癌患者的一线治疗:一个随机三期non-inferiority审判,”《柳叶刀》,卷391,不。10126年,第1173 - 1163页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. g . b . Chan Greenan、f·麦肯,t -艾伦伯格”标识的肽片段DSCR1竞争性抑制磷酸酶活性在体外和体内,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷102,不。37岁,13075 - 13080年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. 吴x, y, b . Chen等人“监管机构的钙调磷酸酶1 (RCAN1)通过caspase-3激活促进神经细胞凋亡,”《生物化学》杂志上,卷286,不。11日,第9062 - 9049页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. t .南城,m .三浦w . c . Aird和t .玉”Thrombin-induced autoinhibitory因素,唐氏综合症关键区域1,变弱NFAT-dependent血管内皮细胞粘附molecule-1表达式和炎症,”《生物化学》杂志上,卷281,不。29日,第20520 - 20503页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. g . h, c . Wang Jin et al .,“监管机构的钙调磷酸酶1基因同种型4,抑制在肝细胞癌,防止扩散,迁移,侵入性肿瘤细胞的活性和原位肿瘤的转移通过抑制核易位NFAT1,”胃肠病学,卷153,不。3、799 - 811页。e33, 2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. c . Wang m . Saji s e . Justiniano et al .,“RCAN1-4甲状腺肿瘤的生长和转移抑制基因,”江森自控的洞察力,卷2,不。5篇文章e90651 2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 施,x, l .曹国伟et al .,“综合分析的关键基因,小分子核糖核酸和长非编码rna在肝细胞癌中,“2月开放的生物,8卷,不。9日,第1436 - 1424页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. a . Fendler k·荣格,“小分子核糖核酸作为泌尿肿瘤新的诊断和预后的生物标志物,”肿瘤形成的关键评论,18卷,不。4、289 - 302年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. a . Fendler c .斯蒂芬·g·m·尤瑟夫和k·荣格,“小分子核糖核酸作为泌尿肿瘤信号转导的监管机构,”临床化学卷,57号7,954 - 968年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. z . Liu j .太阳,b . Liu m .赵e .邢和c .党”microrna - 222促进肝癌细胞增殖,迁移和入侵,抑制细胞凋亡,针对BBC3,”国际分子医学杂志》上,42卷,第148 - 141页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. 张x, x, g . Ge et al .,“miR498抑制肝癌的发展和转移目标ZEB2,”肿瘤的报道41卷,第1648 - 1638页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. l·l·魏x Wang Lv et al .,“小分子核糖核酸的新兴角色和长非编码rna在肝细胞癌耐药,“分子癌症,18卷,不。1,p。147年,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. k .太h . Hoshino王j . et al .,“微- 93激活c-Met / PI3K / Akt通路活动通过直接抑制肝细胞癌PTEN和CDKN1A”Oncotarget》第六卷,没有。5,3211 - 3224年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. a . Gnoni d . Santini m . Scartozzi et al .,“对索拉非尼治疗肝细胞癌:表观遗传学,小分子核糖核酸和微环境。有光在隧道的尽头?”专家意见的治疗目标,19卷,不。12日,第1635 - 1623页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. 徐x、b•阿尤布z刘et al .,“Anti-miR182降低卵巢癌负担,入侵和转移:一个体内研究原位裸鼠异种移植,”分子癌症治疗,13卷,不。7,1729 - 1739年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. c . p . Li盛,黄l . et al .,“mir - 183 / -96/-182集群上调在大多数乳腺癌和增加细胞增殖和迁移,”乳腺癌研究,16卷,不。6,473年,页2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. Segura m . f . d . Hanniford s Menendez et al .,“异常mir - 182表达促进黑色素瘤转移通过压抑FOXO3和microphthalmia-associated转录因子,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷106,不。6,1814 - 1819年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. s . x, j . Wu李et al .,“Downregulation微rna - 182 - 5 - p导致肾细胞癌扩散通过激活一种蛋白激酶/ FOXO3a信号通路,”分子癌症,13卷,不。1,p。109年,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. 李x, h . l .崔j .冯和风扇,“微- 182抑制透明细胞肾细胞癌由针对IGF1R迁移和入侵,”赘生物,卷63,不。5,717 - 725年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. Kouri f . m . c . Ritner, a . h . Stegh”microrna - 182和胶质母细胞瘤表型的监管-向miRNA-based精密疗法,”细胞周期,14卷,不。24日,第3800 - 3794页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. Kouri f·m·l·a·赫尔利w·l·丹尼尔et al。”mir - 182集成了细胞凋亡、生长和分化程序在胶质母细胞瘤,”基因与发展卷,29号7,732 - 745年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. 曹f . l . Chen, y, j .邵和f·王,“血清mir - 182和mir - 331 - 3 - p在肝细胞癌患者的诊断和预后标记,”肿瘤生物学,36卷,不。10日,7439 - 7447年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. s . Negoita e . j .封地,a Mariotto et al .,“年度报告的国家地位的癌症,第二部分:最近前列腺癌疾病趋势和特征的变化,“癌症,卷124,不。13日,2801 - 2814年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. a·g·信号和h . b . El-Serag”,从流行病学预防肝细胞癌:将知识转化为实践,“临床胃肠病学和肝脏病学,13卷,不。12日,第2151 - 2140页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. h·f·张,y . c . Wang和y . d .汉”微rna - 34重组葡萄糖代谢的抑制肝癌细胞生长,”分子医学报告,17卷,第4489 - 4483页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. y冯、l . l .祖茂堂和l .张“MicroRNA-26b抑制人类肝癌的肿瘤的生长通过PI3K / Akt和NF -κB / MMP-9 / VEGF通路。”肿瘤的报道39卷,第2296 - 2288页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. j·l·杨f . Peng秦,h .周和b . Wang”Downregulation微rna - 196 a的抑制人肝癌细胞增殖和针对FOXO1入侵,”肿瘤的报道,38卷,不。4、2148 - 2154年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. g . ZHANG张y, z . CHEN t . LI y包,和美国,“抑制mir - 103 - a - 3 - p抑制扩散通过针对RCAN1在口腔鳞状细胞癌的细胞,”赘生物,卷67,不。3、461 - 472年,2020页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. h . c .歌曲,d . Li刘et al .,“竞争内生环状RNA ADAMTS14抑制肝癌进展通过调节微RNA - 572 /调节器钙调磷酸酶1日”细胞生理学杂志,卷234,不。3、2460 - 2470年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. c . c . n . Li南x y中et al .,“mir - 182 - 5 - p促进口腔鳞状细胞癌的增长通过抑制CAMK2N1,”细胞生理学和生物化学卷,49号4、1329 - 1341年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. x n, s . d .阴y,和l·陈,“mir - 182 - 5 - p抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移目标BNIP3,”欧洲医学和药理科学审查,23卷,第3276 - 3270页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. y y, z l .张黄,k . n . Zhang和熊,”mir - 182 - 5 - p抑制增殖和转移的结直肠癌靶向MTDH,”欧洲医学和药理科学审查,23卷,不。4、1494 - 1501年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. j·j·j . Wang Li沈,c . Wang l·杨和x张,“微- 182会使转移抑制因子1和有助于肝细胞癌的转移,“BMC癌症,12卷,不。1,2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. o . Brunetti a . Gnoni a Licchetta et al .,“预测和预后因素与索拉非尼治疗肝癌患者,”药物(考纳斯),55卷,不。10,707年,页2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. m·曹问:a . b .你x·d·朱et al .,“修正:mir - 182 - 5 - p压抑FOXO3a促进肝癌进展,”血液学和肿瘤学杂志》上,11卷,不。1,56页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. y s .赵w·c·杨,h·w·新,j . x汉和s . g .妈,“mir - 182 - 5 - p击倒目标PTEN抑制细胞增殖和对乳腺癌细胞的入侵,”延世医学杂志,60卷,不。2、148 - 157年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. c .李x du,美国大et al .,“GPC1受mir - 96 - 5 - p,而不是mir - 182 - 5 - p,胰脏癌细胞增殖的抑制作用,”国际分子科学杂志》上,15卷,不。4、6314 - 6327年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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