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胃肠病学研究和实践
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胃肠病学研究和实践/2015年/文章
特殊的问题

小说在2014年消化系统恶性疾病分子靶点

把这个特殊的问题

研究文章|开放获取

体积 2015年 |文章的ID 568981年 | https://doi.org/10.1155/2015/568981

Sookhee爆炸,唱生病了张成泽,苏研李,易用门敏,Jieun Yun -秀金哦,常吸引李,恩乔Ae,库恩Na, Sugeun杨不Haeng李,李董Ki, ”当地的分子机制与紫杉醇洗脱膜药物输送胆汁和胰腺癌:新申请一个旧的药物”,胃肠病学研究和实践, 卷。2015年, 文章的ID568981年, 10 页面, 2015年。 https://doi.org/10.1155/2015/568981

当地的分子机制与紫杉醇洗脱膜药物输送胆汁和胰腺癌:新申请一个旧的药物

Sookhee爆炸,1 唱了张成泽,2 苏研李,1 易用门敏,1 Jieun云,3 秀金哦,3 常吸引李,3 恩Ae乔,4 库恩Na,5 Sugeun杨,6 唐Haeng李,7 和 李董Ki1

1医院内科,Gangnam遣散费,延世大学医学院712 Eonjuro,江南区,首尔135 - 720,韩国

2内科,Kangnam圣心医院,Hallym大学医学院,首尔,韩国

3Bioevaluation中心、韩国生物科学和生物技术研究所,Cheongwon,韩国

4研究和开发部门,Taewoong医疗有限公司Gimpo,韩国

5天主教大学生物学系,Bucheon,韩国

6新药物开发、医学院韩国仁荷大学,韩国仁川

7医学院的内科,韩国仁荷大学,韩国仁川

学术编辑器:Chunping江
收到了 2014年8月18日
修改后的 2014年10月06
接受 2014年10月07
发表 2015年4月23日

文摘

self-expanding金属支架植入(sem)是减轻患者患有恶性操作障碍与胆道和胰腺癌症有关。化疗agent-eluting支架已经开发出来,因为扫描电镜由肿瘤增长容易阻塞。我们最近报道说,紫杉醇洗脱sem提供增强的局部给药的动物模型。然而,对紫杉醇洗脱支架减弱肿瘤生长的分子机制。我们研究了信号转导途径的底层紫杉醇洗脱膜的抗增殖作用(PEM)植入轴承裸鼠胰腺癌、胆管癌肿瘤。分子和细胞变化进行了分析PEM-implanted胰腺/胆管癌异种移植肿瘤免疫印迹、免疫沉淀反应,免疫荧光。紫杉醇释放到肿瘤的数量和等离子体是由液体chromatography-tandem质谱法。紫杉醇的PEM及其扩散进入肿瘤抑制血管生成,涉及抑制哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)通过调节缺氧诱导因子(HIF-1)和细胞凋亡增加。此外,植入的PEM抑制肿瘤基质interaction-related表达的蛋白质如CD44、SPARC矩阵metalloproteinase-2,波形蛋白。当地交付PEM的紫杉醇抑制增长裸体小鼠的胰腺、胆管癌肿瘤抑制血管生成通过mTOR和诱导细胞凋亡信号通路。

1。介绍

恶性胆道梗阻与胆道癌,胰腺癌和其他当地的癌症。内镜胆道引流self-expanding金属支架(sem)是治疗的首选一个不可切除的患者减轻胆道梗阻(1,2]。金属支架paclitaxel-incorporated覆盖膜(MSCPM)已经被开发,促进抗肿瘤效应对肝外胆管癌、胆管壁,蔓延,维持支架通畅通过抑制肿瘤生长到扫描电镜(3- - - - - -7]。一个双层MSCPM了,胆汁耐科汉解释说聚四氟乙烯的内层和外层含药聚氨酯普朗尼克f - 127,有效的药物输送的表面活性剂。我们有报道说,紫杉醇洗脱支架与普朗尼克f - 127 10% (MSCPM-II;高龄Taewoong医疗有限公司,金浦、韩国)是安全的,提供增强的局部给药(LDD)动物模型(8]。MSCPM-II正在等待人类的应用程序。

紫杉醇的化学疗法的机制是稳定微管在有丝分裂和逮捕细胞生长9,10]。此外,紫杉醇抗血管新生和antimetastatic属性(11,12]。紫杉醇在癌症治疗的临床应用是相当有限的由于其从系统性管理可用性差13]。因此,许多一直努力开发一种紫杉醇交付系统,以增加其可用性肿瘤地点和最少的副作用而获得最大的治疗效果(14]。此外,紫杉醇对局部区域癌症治疗是有用的,因为它具有良好的药代动力学特征(例如,亲脂性的和快速的细胞吸收)(15]。介绍了紫杉醇洗脱覆盖金属支架,最近,可能防止阻塞肿瘤增长由于紫杉醇的抗肿瘤效应。紫杉醇洗脱支架所产生的不同的分子信号通路发挥抗增殖,proapoptotic,抗血管新生的影响在肿瘤尚未确定。

在目前的研究中,我们报告一个数量的分子途径和细胞机制与subtumoral植入的紫杉醇洗脱膜(PEM),这是相同的构成的外层MSCPM-II,抑制肿瘤的生长。我们分析了蛋白质概要通过免疫印迹和免疫沉淀反应分析和验证概要在胰腺癌和免疫荧光胆管癌异种移植肿瘤。然后我们探讨了抗增殖/凋亡/ PEM抗血管新生的影响,一个临床相关的药物洗脱支架确认在我们的研究中,揭示其潜在的治疗意义不实用的恶性胆道阻塞。

2。材料和方法

2.1。细胞系和抗体

人类胰腺癌细胞系PANC-1和CFPAC-1培养在杜尔贝科修改鹰的媒介和胆管细胞型肝癌细胞株HuCCT-1 SCK培养在rpmi - 1640。PANC-1 CFPAC-1细胞从写明ATCC购买(美国弗吉尼亚州马纳萨斯)。HuCCT-1 SCK细胞健康科学研究资源的获得银行Dae-Ghon金博士(日本大阪)和全北国立大学医学院和医院(全州、韩国),分别。细胞系都保持在37°C湿润孵化器有限公司为5%2。抗体S6K、phospho-S6K S6、phospho-S6 4 ebp1 phospho-4EBP1, caspase-3裂解,切,伯灵顿,荡妇,bcl - 2,细胞周期蛋白B1, HIF-1β、CD44、SPARC、波形蛋白,GAPDH从细胞信号技术。CD-31和VEGF从Abcam购买(美国Cambridge, MA)。HIF-1α、VEFGR2 / Flk-1 MMP-2是从圣克鲁斯生物技术获得的。

2.2。肿瘤异种移植和治疗

女性6-8-week-old无胸腺的裸小鼠从东方购买生物(Kyunggido、韩国)皮下异种移植。建立肿瘤异种移植模型,2×106细胞在200年被停职μL平原增长媒体(DMEM或rpmi - 1640)背侧皮肤和皮下注入空间。肿瘤是使用卡尺测量每隔一天,他们的卷由以下公式计算:0.5×长×宽2。动物的体重监控每隔一天。当肿瘤体积达到100毫米3的小鼠麻醉Zoletil的混合物(30毫克/公斤)和Rompun i.p(10毫克/公斤)。下面,到聚合物外科手术植入肿瘤。所有动物实验进行了符合政策的动物保健和使用委员会朝鲜研究所生物科学和生物技术。

2.3。制备紫杉醇洗脱膜

到聚合物使用模具制作的。简单地说,400毫克的聚合物溶解在10毫升的四氢呋喃(四氢呋喃)。普朗尼克f - 127(并不;40毫克)和1 - 10 wt %紫杉醇(PTX, 4-40 mg)溶解在四氢呋喃,然后添加到聚氨酯/四氢呋喃溶液和声波降解法和涡的混合。一个200μL整除的混合物注入dish-shape聚四氟乙烯模具。脱水紫杉醇洗脱盘状膜被小心地剥掉了聚四氟乙烯模具。此外,聚氨酯膜没有紫杉醇和并不(控制)或并不孤单(控制+并不)是由同样的方法制作的在活的有机体内控制。

2.4。免疫沉淀反应和免疫印迹分析

肿瘤粗碎和均质裂解缓冲包含100毫米三羟甲基氨基甲烷(pH值7.4)液,150毫米氯化钠,特里同x - 100 1%, 15%的甘油,1毫米PMSF,磷酸酶抑制剂混合物2和3(σ,圣路易斯,密苏里州,美国),和一个蛋白酶抑制剂混合物(σ)。匀浆是离心机在14000 rpm和4°C,和上层清液使用。蛋白质浓度估计使用Bio-Rad化验(Bio-Rad,慕尼黑,德国)。免疫沉淀反应、肿瘤溶解产物蛋白质(1毫克)与2孵化μ克anti-Bax或anti-Raptor抗体(细胞信号技术,丹弗斯、马、美国)表示16 h在4°C和沉淀50μL (TrueBlot anti-rabbit Ig IP珠子(美国eBioscience,圣地亚哥,CA)额外的3 h。然后,样本与裂解缓冲洗五次,SDS-loading样本缓冲了。肿瘤免疫沉淀反应和总溶解产物(30μg)分离NuPage 4 - 12%梯度Bis-Tris凝胶(美国纽约表达载体,大岛)。钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳后,被转移到蛋白质硝化纤维素膜(Bio-Rad)。这些墨迹被封锁在TBS 0.1% Tween-20缓冲区(TBST)含5%脱脂奶粉1 h在室温下。膜是孵化一夜之间在4°C以下主要抗体。与TBST洗过多次,膜与山羊孵化anti-mouse IgG-horse萝卜过氧化物酶(合)或山羊anti-rabbit IgG-HRP(圣克鲁斯生物技术、圣克鲁斯、钙、美国)在室温下1 h和TBST再洗。TrueBlot anti-rabbit Ig HRP-conjugated二级抗体(eBioscience)是用于检测coimmunoprecipitates Bim或低氧诱导因子(HIF) 1α墨迹与一种化学发光试剂(Bio-Rad)。GAPDH表达式用于正常蛋白质水平加载。分子量的大小标记(kilodaltons)左边表示。所有关键的印迹和免疫沉淀反应实验至少重复三次。

2.5。免疫荧光的肿瘤样本

肿瘤是沉浸在10月化合物(徕卡生物系统、里士满、钙、美国),在液态氮冷冻。的部分(5μ米)permeabilized,阻塞山羊抗血清为10%和0.25% Triton x - 100在PBS为60分钟,避免非特异性结合,随后孵化与兔子anti-cleaved caspase-3(1: 400),兔子anti-CD31(1: 400),或鼠标单克隆anti-vascular内皮生长因子受体2 (VEGFR2)(1: 400)抗体。接下来,部分与相应的清洗和进一步孵化alexa - 488共轭二次抗体(表达载体)。核与DAPI染色(表达载体)。荧光图像使用Axiovert 135年收购显微镜(美国纽约卡尔蔡司,Thornwood)。

2.6。免疫组织化学

肿瘤被删除并固定在10%磷酸盐甲醛在室温下直到切片。简单地说,所有的肿瘤都连续切片和组织部分(5μ从石蜡块获得米厚)与苏木精和伊红染色(圆))使用标准的组织学技术。

2.7。肿瘤组织中紫杉醇含量的测量液体Chromatography-Tandem质谱(质/女士)

肿瘤和血浆样本准备和紫杉醇浓度被质/ MS分析。短暂,包含卡马西平的样本中提取100%的乙腈作为内标,和色谱进行Xterra C18柱(50×2.1毫米身份证。,5μ米,水域,米尔福德,妈,美国)SecurityGuard C18列(2.0×4.0毫米身份证。,Phenomenex, Torrance, CA, USA) maintained at room temperature. The mobile phase was 95% v/v solvent A (deionized water containing 0.1% v/v formic acid)/5% v/v solvent B (acetonitrile containing 0.1% v/v formic acid) at a flow rate of 0.4 mL/min. A linear gradient of the two solvents was used: start at 95% A and hold for 0.5 min, ramp to 5% A to 0.6 min, and hold until 4 min. The flow rate was 0.4 mL/min throughout the gradient. The retention times of paclitaxel and the internal standard (IS) were 3.0 and 2.8 min, respectively. The electrospray ionization source was operated at 5500 V and 550°C. The samples were analyzed via multiple reaction monitoring. The monitoring ions were set asm / z876年 308年为紫杉醇和m / z237年 194点。每个通道的扫描停留时间是0.1秒。数据的采集和分析进行使用分析软件版本。1.5.2(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)。

2.8。统计分析

数据意味着±标准差。使用学生的统计分析t以及在适当的时候。当成立意义 。所有实验进行至少三次。

3所示。结果

3.1。胰腺或胆道的PEM降低增长在裸鼠异种移植肿瘤通过诱导细胞凋亡和内质网(ER)压力肿瘤

我们演示了此前紫杉醇洗脱sem含有10%普朗尼克酸f - 127 (MSCPM-II)提供增强的LDD来猪胆管(8]。因此,我们调查了底层PEM的抗增殖作用分子机制在肿瘤裸鼠移植。异种移植裸体小鼠植入普朗尼克酸(控制+并不),5%和10%的紫杉醇和普朗尼克酸(PTX +并不)洗脱膜(PEM),或光膜(控制)15 - 20天。首先,我们确定PEM植入肿瘤收缩引起的。我们观察到,PEM显然是有效的减少肿瘤的生长,而控制(光膜或并不只)(图1(一)S1和S2,补充数据在网上补充材料http://dx.doi.org/10.1155/2015/568981)。此外,没有主机毒性观察(数据未显示)。药物释放的研究显示大10倍浓度的紫杉醇在PEM比近端肿瘤远端PEM植入后15天,而血浆浓度的紫杉醇后膜植入仍低于下限的定量(图1 (b))。紫杉醇容易渗透到肿瘤的细胞质量由于其亲脂性的特性,导致药物在肿瘤组织的长期保留。这个结果表明,当地交付PTX肿瘤组织是有效减少肿瘤的生长没有检测到系统级别(补充图S3)。PEM-induced抑制肿瘤生长的意义和是否应该进一步研究细胞凋亡或坏死。他走时组织学分析显示增加相比,PEM-implanted肿瘤坏死与控制(图1 (c))。我们检查了PEM的影响apoptosis-related蛋白的表达在肿瘤溶解产物探索之间的联系PEM肿瘤回归和诱导细胞凋亡。由于bcl - 2家族蛋白成员线粒体凋亡通路的主要监管机构,我们检测bcl - 2家族蛋白的表达反应PEM植入到肿瘤。如图1 (d)proapoptotic蛋白的表达,伯灵顿(16和女子17增加肿瘤植入PEM。相比之下,PEM的差别引起对这些基因bcl - 2表达(图1 (d))。已经证明Bim启动激活的伯灵顿通过直接的交互在体外(16]。确认在活的有机体内伯灵顿和女子之间的互动、肿瘤溶解产物从控制或PEM-treated CFPAC-1异种移植肿瘤受到与伯灵顿抗体免疫沉淀反应,和绑定Bim被免疫印迹检测。我们发现增加存在剂量依赖的相关性在伯灵顿/ Bim绑定PEM-implanted肿瘤溶解产物(图1 (d))。免疫印迹显示的PEM诱导表达裂解caspase-3,细胞凋亡的特征,在异种移植肿瘤(图1 (e))。免疫荧光分析证实,PEM增加裂解caspase-3表达在肿瘤(图1 (f))。因为紫杉醇诱导线粒体凋亡和多余的ER应激(18),我们检查ER应激是否参与了PEM诱导的抑制肿瘤的生长。虽然与ER stress-mediated凋亡相关的完整的机制尚不清楚,下游ER应激信号可能与激活的c / EBP同源蛋白质(CCAAT-enhancer-binding蛋白质同源蛋白质(切),一个ER应激标志)(19]。如图1 (e)表达水平,切显著增加肿瘤植入PEM。这些结果表明,ER的PEM也通过感应抑制肿瘤的生长压力除了细胞凋亡。

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图1
紫杉醇洗脱膜(PEM)减少了肿瘤的生长,诱导细胞凋亡和内质网(ER)压力在异种移植肿瘤。(一)PEM (PTX 10% +并不)是植入肿瘤一旦SCK达到100毫米3。数据意味着±标准差(SD)。肿瘤大小测量PEM植入后在指定的时间点。(b)等离子体和肿瘤的紫杉醇浓度SCK带有裸体小鼠PEM植入后15天。紫杉醇含量在等离子体和肿瘤部分由质/女士。每个数据点代表五个老鼠±SD的平均值。PEM P,近端;PEM D,远端; ,最低限制的量化(LLOQ: 15.6 ng / mL)。原始数据的插图所示。(c)代表)彩色PEM-implanted HuCCT-1肿瘤。箭头,肿瘤细胞坏死。(d) CFPAC-1 PEM诱导细胞凋亡的肿瘤。CFPAC-1异种移植肿瘤治疗0 1和7天5% PEM和植入。bcl - 2,荡妇,伯灵顿的表情被免疫印迹检测到肿瘤溶解产物。伯灵顿和Bim免疫沉淀反应和伯灵顿(IP)。(e)的PEM诱导细胞凋亡和ER-stress HuCCT-1, CFPAC-1, PANC-1肿瘤。裂解caspase-3和排骨被免疫印迹检测到肿瘤溶解产物。 (f) Immunofluorescence staining of cleaved caspase-3 in SCK tumor tissue section from tumor treated with the PEM or control (+Plu). Green, cleaved caspase-3 and blue, nuclei stained with DAPI. Original magnification, ×40. Scale bar: 50 μm。
3.2。PEM减少在裸鼠异种移植肿瘤的生长抑制mTORC1信号和HIF-1监管

因为哺乳动物雷帕霉素靶复杂1 (mTORC1)信号通路参与细胞生长的规定(如氨基酸翻译,细胞周期,和血管生成和肿瘤发生20.- - - - - -22),我们推测是否PEM抑制mTORC1激活状态在肿瘤组织。正如预期的那样,我们发现减少的磷酸化p70S6K mTORC1目标,核糖体蛋白S6, eif4e结合蛋白1 (4 e - bp1)肿瘤溶解产物从肿瘤植入PEM相比之下,那些在控制肿瘤(数字2(一个)和2 (b))。我们还证实,总p70S6K和S6水平相似PEM-implanted和控制肿瘤(数字2(一个)和2 (b))。由于抑制mTORC1 PEM, HIF-1α和HIF-1β的蛋白质含量降低了PEM-implanted肿瘤(图2 (c))。因为激活HIF-1α通过mTOR被HIF-1之间的直接交互α和监管相关蛋白质mTOR(猛禽)[23),我们决定是否PEM封锁了猛禽和HIF-1之间的互动体内α。我们执行内源性免疫沉淀反应anti-Raptor抗体与anti-HIF-1 immunodetection紧随其后α。结果表明,PEM Raptor-HIF-1中断α相互作用在肿瘤剂量依赖性的方式(图2 (c))。细胞周期蛋白B1是调节亚基mitosis-phase促进因素,及其适当的监管是必不可少的有丝分裂的开始24),我们想知道细胞周期蛋白B1表达会减少PEM植入。如图2 (d)、细胞周期蛋白B1蛋白质含量明显降低肿瘤溶解产物从PEM-implanted肿瘤。Downregulation的细胞周期蛋白B1可能对有丝分裂负责逮捕和抑制肿瘤生长的PEM带有肿瘤的老鼠。这些结果表明,PEM调节有丝分裂细胞周期的阶段,在某种程度上,通过抑制mTORC1信号。

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图2
紫杉醇洗脱膜(PEM)植入抑制mTORC1激活和低氧诱导因子(HIF) 1监管在异种移植肿瘤。(一)西方墨点法phospho-S6K、S6K phospho-S6, S6, phospho-4EBP1, 4 ebp1肿瘤溶解产物的表达水平HuCCT-1肿瘤植入PEM或控制(+并不)(左)。相对量化的磷蛋白质表达水平显示在控制(灰条)或PEM(黑条)植入肿瘤。值修正为相应的总抗体蛋白 ; (右)。(b)西方墨点法phospho-S6K S6K表达水平的肿瘤溶解产物从PEM-implanted或显示肿瘤对照组(左)和phospho-S6K相对量化的表达水平 (右)。(c) HIF-1免疫印迹α和HIF-1β在蛋白质提取物显示肿瘤植入PEM或控制20天(左)。SCK异种移植肿瘤治疗0 5和7天10% PEM和植入。肿瘤蛋白溶菌产物是猛禽和HIF-1准备和分析α蛋白表达。免疫沉淀反应和免疫印迹检测内生Raptor-HIF-1α交互(右)。(d)的免疫印迹分析细胞周期蛋白B1表达水平在肿瘤溶解产物显示肿瘤治疗各种浓度的PEM (SCK 0、5、10%;CFPAC-1 0 1, 5%)。
3.3。PEM减少CD31在肿瘤和VEGFR2表达

由于肿瘤脉管系统在异种移植动物host-derived,我们研究了PEM LDD注入的方法是否在血管化中的作用。总评估肿瘤的老鼠接受PEM清楚地显示一个苍白的外观,减少血管化和肿瘤体积。相比之下,控制肿瘤出现血管(图越来越好3(一个))。肿瘤大小和重量在动物对待PEM (4-5-fold)明显低于那些在肿瘤控制(数据未显示)。PEM对应于确定肿瘤收缩的抑制血管生成,我们评估微血管密度在没有和CD31 PEM-treated通过检测肿瘤微血管的标志(25]。数据3(一个)和3 (b)表明,PEM下调CD31蛋白表达与控制肿瘤。处理的信号转导途径在PEM-implanted抑制肿瘤血管生成、VEGF蛋白水平测定肿瘤的控制或PEM-treated小鼠免疫印迹。内的VEGF蛋白含量降低了肿瘤溶解产物从PEM-implanted肿瘤(图3 (c))。尽管VEGF蛋白水平略有下降,PEM植入VEGFR2蛋白质的差别引起对这些方式存在剂量依赖的相关性SCK肿瘤(图3 (c))。免疫荧光分析证实,VEGFR2蛋白表达显著降低肿瘤从PEM-implanted老鼠,而不是减少肿瘤血管密度(图3 (b))。血管生成在肿瘤微环境是一个复杂的过程受到支持和抗血管新生因子由肿瘤细胞和基质间(26]。我们想知道是否PEM-mediated抗血管是由VEGFR2下游信号分子的变化。我们发现PEM-implanted肿瘤表现出降低水平的基质金属蛋白酶2 (27),细胞外基质(ECM)有辱人格的组成部分,相比之下,那些在控制肿瘤(图3 (e))。CD44的表达(28],它介导信息和cell-matrix交互,分泌酸性蛋白质,富含半胱氨酸(SPARC) [29日)、基质细胞标记和波形蛋白(30.间充质标记),减少PEM-implanted肿瘤相对于那些在控制肿瘤(图3 (e))。总的来说,这些结果表明,减少肿瘤脉管系统可以限制肿瘤细胞营养和氧气的供应,从而导致抗肿瘤效果。这些发现表明,PEM下调VEGF抑制血管生成,VEGFR2,形成血管和肿瘤基质interaction-related蛋白表达。

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图3
紫杉醇洗脱膜(PEM)植入减弱在异种移植肿瘤血管生成。(a)代表SCK肿瘤的形态学总值的照片裸体小鼠植入PEM或控制(+并不)膜为7天。 肿瘤;箭头,PEM;箭头,控制(+并不)膜(上)。免疫印迹CD31表达在肿瘤溶解产物显示肿瘤植入PEM或控制。(b)代表CD31免疫荧光分析在SCK肿瘤植入PEM或控制。图表显示的相对荧光强度CD31(右)。(c) PEM植入降低VEGF的表达在肿瘤溶解产物显示肿瘤(上)。VEGFR2表达式在SCK评估肿瘤组织与0,植入后5,10%的紫杉醇在PEM免疫印迹(低)。免疫荧光分析(d)代表VEGFR2从SCK肿瘤组织植入的PEM或控制和相对荧光强度VEGFR2(右)。((b)、(d))积极的蛋白质染色是绿色和核与DAPI染色蓝。 Original magnification, ×40. Scale bar: 50 μm。值意味着±标准差(SD)。 每组字段。 。(e) MMP-2 PEM植入对表达的影响,CD44, SPARC和波形蛋白蛋白质表明肿瘤。蛋白质是由免疫印迹检测使用表示抗体。

4所示。讨论

我们研究蛋白质概要文件在整个肿瘤从胰腺/胆管癌异种移植肿瘤小鼠PEM植入后调查LDD紫杉醇洗脱支架为背后的分子机制和衰减肿瘤生长的恶性胆道梗阻。药物洗脱支架可能理想的用于治疗的肝外胆管癌生长在胆管内壁。与胆道癌,胰腺癌的恶性胆道梗阻,出现从外在压缩,缺乏理由利用紫杉醇洗脱支架植入。然而,MSCPM-II可以预期有一个抗肿瘤效应的抑制肿瘤生长的系统性或放射治疗。创新的本地策略和长期交付批准化疗药物(如紫杉醇)从MSCPM-II不能动手术的恶性胆道梗阻患者正在接受调查。本地应用程序的化学治疗剂支架可以最小化代理的系统性副作用,同时最大化其浓度在胆管内。在这里,我们表明,PEM是一个设备,供应紫杉醇LDD肿瘤和抑制其增长。

癌症是细胞周期的放松管制的特点机械、自给自足的生长信号,生长抑制信号不敏感,逃避凋亡,组织入侵,转移,和持续的血管生成31日]。肿瘤进展需要血管生成,这通常是通过过程称为诱导,以应对缺氧血管生成开关(32- - - - - -35]。在这项研究中,我们表明,癌症信号转导途径改变了PEM植入胰腺癌、胆管癌异种移植肿瘤。

mTORC1包含猛禽,是作为招聘的支架蛋白磷酸化的底物mTORC1kinase域(36]。直接激活mTORC1调节蛋白质合成的磷酸化S6K和4 e - bp1 translation-initiating因素重要的帽依赖mRNA翻译和增加细胞周期进展所需的蛋白质水平,增殖和血管生成37- - - - - -39]。值得注意的是,PEM植入的差别引起对这些mTORC1,脱去磷酸phospho-S6K, phospho-S6, phospho-4E-BP1和抑制血管生成和肿瘤生长所需的蛋白质合成。

因为肿瘤的生长和转移是高度依赖增加微血管密度、血管的数量的减少,对于抗肿瘤反应至关重要。VEGF-VEGFR2各种下游信号分子的信号转导导致激活负责内皮细胞迁移、增殖和生存(25,40]。在蛋白质功能的许多变化发生在肿瘤进展,改变信息和cell-matrix附着力似乎发挥核心作用在促进肿瘤细胞迁移,入侵和转移(41]。正如所料,PEM植入阻止肿瘤的生长,影响血管化在胰腺和胆管癌模型。我们也观察到,PEM植入肿瘤异种移植肿瘤抑制肿瘤的生长,破坏入侵和转移的行为,包括epithelial-to-mesenchymal过渡和ECM的崩溃。因此,PEM诱导的肿瘤生长抑制异种移植肿瘤模型可以解释为行动的几种机制的组合,如抗增殖、proapoptotic,抗血管新生的影响。

应该讨论了本研究的局限性。因为恶性胆道梗阻的原位动物模型是不可用的,到目前为止,我们应该研究抗肿瘤作用的分子机制的PEM LDD作为皮下异种移植裸鼠。虽然几个策略(如荧光标记和放射性同位素标记方法)开发评价分布、渗透和分发药物从药物洗脱膜成肿瘤仍然是一个重大的挑战在癌症化疗,因为分布是由于几个因素相关药物的物理化学特性和肿瘤组织。还需要进一步的调查来确定药物分布的模式从一个药物洗脱膜变成肿瘤。紫杉醇是合适的化学治疗剂在药物洗脱支架由于其亲脂性的性格和广谱抗癌效果,但吉西他滨是临床首选治疗恶性胆道梗阻;因此,进一步改善亲水性代理(例如,吉西他滨)用于药物洗脱支架应该调查。

5。结论

我们报告,当地交付PEM的紫杉醇抑制增长的接种胰腺癌、胆管癌裸鼠通过抑制血管生成通过mTORC1 /诱导细胞凋亡信号通路。紫杉醇洗脱支架背后的分子机制的理解将改变范式为治疗恶性胆道阻塞患者的更成功。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

作者的贡献

概念和设计是由Sookhee爆炸,唱张成泽,李董Ki, Jieun云。提供研究材料或患者是由恩乔Ae,库恩Na, Sugeun杨,李Haeng。进行的数据收集和汇编Sookhee爆炸,苏研李,易用门敏,秀金哦,常吸引李,Jieun云。数据分析和解释由Sookhee爆炸,秀金哦,常吸引李,Jieun云。论文写作是由Sookhee爆炸,唱生病了张成泽,李董Ki。纸是由所有作者的最终批准。Sookhee爆炸和唱生病张成泽的贡献同样工作。

确认

这项工作是由韩国评估工业技术研究所(10044021 d . k . Lee)和由韩国知识经济部和KRIBB研究专项项目(j . Yun KCS3031413)资助。

补充材料

在这些动物毒性PEM被称量小鼠评估。但是一些减肥没有人死亡。大多数小鼠植入PEM经历了轻微的减肥(< 5%)在移植后2天。老鼠开始恢复体重PEM植入后6天。因此,基于观察体重没有观察到其他主机毒性。

  1. 补充数据

引用

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