肥大细胞密度积极类胰蛋白酶与血管生成在胰腺导管腺癌患者在接受手术

文摘

背景。文献资料表明,肥大细胞等细胞(MCs),参与血管生成。MCs可以刺激血管生成的几个proangiogenic通过释放细胞因子存储在他们的细胞质。特别是MCs可以释放类胰蛋白酶,有力在活的有机体内和在体外proangiogenic因素。不过几乎没有什么可用的数据关于MCs积极的角色在原发性胰腺癌血管生成类胰蛋白酶。本研究分析了MCs和主要从病人肿瘤组织血管生成影响胰腺导管腺癌(PDAC)。方法。患者一系列31 PDAC阶段(通过与胰腺癌症分期第七版)被选中,然后接受手术。肿瘤组织样本进行评估通过免疫组织化学和图像分析方法的数量的MCs积极类胰蛋白酶(MCDPT)区域被MCs积极占领类胰蛋白酶(MCAPT)、微血管密度(MVD)和血管内皮(EA)。上述参数相互关联和主要临床病理的特点。结果。MCDPT之间的显著相关性,MCAPT、MVD和EA组由皮尔森的发现以及分析(范围从0.69到0.81;值从0.001到0.003不等)。没有发现其他显著相关。结论。我们的试验数据表明,MCs积极PDAC血管生成类胰蛋白酶可能扮演一个角色,他们可以进一步评价作为一种新的肿瘤生物标志物和抗血管新生疗法的目标。

1。介绍

炎症细胞如巨噬细胞、淋巴细胞和肥大细胞(mc),在肿瘤血管生成中发挥重要作用的血管生成细胞因子存储在他们的细胞质。MCs参与实验诱导肿瘤新生血管形成,积累发病前肿瘤细胞附近的血管生成,并参与原发性肿瘤的转移扩散。MCs干预在血管生成过程中释放出古典proangiogenic因素,如血管内皮生长因子(VEGF)、胸苷磷酸化酶(TP),纤维母细胞生长因子2 (FGF-2)和模proangiogenic因素,即存储在他们的类胰蛋白酶分泌颗粒(1- - - - - -9]。MCs的作用已被广泛研究的良性病变,在动物和人类的癌症,如瘢痕疙瘩,肥大细胞肿瘤,头部和颈部,大肠癌,胃,肺和皮肤的恶性肿瘤,表明MCs密度与肿瘤血管生成的程度高度相关(10- - - - - -14]。最近的数据表明,MCs密度与血管生成和发展的胰腺癌患者(15,16]。然而,没有发表关于相关数据的每个其他MCs密度积极类胰蛋白酶(MCDPT)区域被MCs积极占领类胰蛋白酶(MCAPT)、微血管密度(MVD)、血管内皮区域(EA)和主要临床病理特征主要影响患者的肿瘤组织。为此,我们进行了一项前瞻性研究的一系列31胰腺导管腺癌患者进行手术后一直(PDACP)阶段(通过与胰腺癌症分期第七版)。肿瘤组织样本进行评估通过免疫组织化学和图像分析方法,获得MCDPT之间的显著相关性,MCAPT, MVD和EA组。我们的试验数据表明,MCs积极PDAC血管生成类胰蛋白酶可能扮演一个角色,他们可以进一步评价作为一种新的肿瘤生物标志物和抗血管新生疗法的目标。

2。患者和方法

2.1。病人

选择患者的临床病理学特征总结表1。共有31 PDACP患者接受潜在的治疗切除。手术方法是使用胰十二指肠、远端胰腺切除术和全胰切除术与淋巴结解剖。患者举行据美国癌症联合委员会第七版(AJCC-TNM)分类和世界卫生组织分类(2000版本)是用于病理分级。所有病人没有远处转移计算机断层扫描和十个病人接受了新辅助治疗基于吉西他滨或FOLFIRINOX。这项研究是通过“板牙主宰”医院的伦理委员会,“大希腊”大学,Catanzaro,从每个登记患者签署知情同意。

2.2。免疫组织化学

MCDPT评估、MCAPT MVD和三层biotin-avidin-peroxidase EA系统是利用17]。简单地说,4μ米厚的串行部分formalin-fixed和石蜡包埋手术切除肿瘤样本deparaffinised。对抗原检索,部分微波在500 W 10分钟,之后内源性过氧化物酶活性被3%的过氧化氢溶液。接下来,相邻的幻灯片是单克隆抗体孵育anti-CD31(克隆JC70a;Dako)稀释1:30分钟在室温和anti-tryptase 40(克隆AA1;Dako、斯特鲁普、丹麦)稀释1:100 1小时在室温下。使用生物素化的二次抗体结合抗体是视觉效果,avidin-biotin过氧化物酶复杂,快红了。核复染色了吉尔的苏木精2号(美国Polysciences沃灵顿,PA)。主要抗体是省略了负控制。

2.3。的形态学分析

一个图像分析系统(Semiquantimet 400尼康)工作。

血管的五大部分的区域(“热点”)选择的低倍镜下和MCDPT(图1(一))和个人(图1 (b))被数×400放大(0.19毫米²区域;数据2(一个)和2 (b))(GR和新西兰)1]。单一的红点的内皮细胞,内皮细胞集群和微血管,显然分开相邻的微血管,肿瘤细胞和其他结缔组织元素计算(17]。坏死不考虑计算的领域。在串行部分每一个MC积极类胰蛋白酶的计算。单一的红点的内皮细胞和红色MCs积极类胰蛋白酶也评估的应用面积×400放大(0.19毫米²区)(17]。最后的形态细节MCs积极类胰蛋白酶和内皮细胞被观察到1000年石油(数字放大3(一个)和3 (b))。

2.4。统计分析

MCDPT之间的线性相关性,MCAPT、MVD和EA组量化的皮尔森相关系数()。MCDPT之间的相关性,MCAPT、MVD和EA组和卡方检验的主要临床病理特点进行分析。在所有的分析被认为是显著的。所有统计分析进行SPSS统计软件包(SPSS, Inc .,芝加哥,IL)。

3所示。结果

免疫组织化学染色用抗体anti-CD31和anti-tryptase允许高度血管浸润癌组织的示范;MCs积极类胰蛋白酶是可识别的,通常他们都位于血管周的位置(图3(一个))。

平均值±1 SD的所有组织评估参数表2。MCDPT和MVD之间有显著相关性(;),MCAPT与MVD之间(;MCDPT和EA(之间),;MCAPT和EA(之间),;)、MVD与EA (;MCDPT和MCAPT(之间),;)(图4)。没有相关有关MCDPT, MCAPT, MVD, EA,主要临床病理的特性被发现。

4所示。讨论

已经证明了MCs的参与肿瘤血管生成几个动物模型和人类恶性肿瘤(10- - - - - -14,18- - - - - -20.]。

MCs通过几个因素招募并激活由肿瘤细胞分泌,如c - kit受体或干细胞因子,VEGF, FGF-2, TP。在肿瘤微环境,MCs分泌明胶酶A和B,反过来,降解细胞外基质,释放存储血管生成因子(21- - - - - -33]。

另一方面,MCs可以通过几个proangiogenic因素诱导血管生成存储在他们的分泌颗粒,如VEGF、FGF-2,肿瘤坏死因子α,白介素8、转化生长因子β,肝素、类胰蛋白酶。与过去,参与肿瘤血管生成刺激血管管的形成在体外和在活的有机体内实验模型也是一个兴奋剂杆的血管内皮细胞,诱导血管生成。有趣的是在几个人类恶性肿瘤而不是胰腺癌,MCDPT和MCAPT与肿瘤血管生成有关。在这方面实验结果表明MCDPT可能促进胰腺癌细胞导致胰腺肿瘤进展(34- - - - - -40]。

公布的数据从埃斯波西托et al。41]显示单核炎症细胞的非特异性免疫反应在胰腺癌组织和招募他们能够刺激血管生成和癌症进展。

在本试验研究中,我们评估了MCDPT之间的相关性,MCAPT, MVD, EA在一系列31 PDACP接受手术,我们的结果显示一个类胰蛋白酶和微血管床之间的联系。我们发现这种相关性在双道:第一个方面的积极类胰蛋白酶细胞和微血管应用和第二方面的积极类胰蛋白酶的扩展区和微血管应用区。为了避免MCDPT评估方法论的偏见,MCAPT, MVD, EA已经完成通过×400倍的放大的图像分析系统定义良好的微观面积0.19毫米²正如前面发表在其他肿瘤类型(1]。我们初步数据达成一致的生物类胰蛋白酶的作用作为一个强大的proangiogenic因素。用这种方式我们建议从MCs类胰蛋白酶可能也扮演一个角色在胰腺肿瘤组织血管生成。进一步项研究一系列大的患者将需要确认我们的第一个结果。在这种背景下,MCs积极的评价类胰蛋白酶可能在胰腺癌小说替代血管生成标记能够预测血管生成索引。我们还假设停止胰腺血管生成抑制肥大细胞脱颗粒通过c - kit针对类胰蛋白酶抑制剂或通过gabexate甲磺酸盐或nafamostat甲磺酸盐42- - - - - -45]。进一步的研究在更大系列的病人等待关于这个非常有趣的话题。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

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