miR-21小说是一种很有前途的生物标志物在胃癌患者淋巴结转移

文摘

背景。胃癌(GC)是一个重要的世界各地的恶性疾病。小分子核糖核酸(microrna)异常与各种癌症的致癌作用。在目前的研究中,我们审查miR-21表达在人类胃癌淋巴结转移,并试图揭示其与临床病理的关系数据,尤其是淋巴结转移。材料和方法。的表达水平miR-21 GC患者的肿瘤标本通过rt - pcr量化。miR-21水平和多种临床病理因素之间的相关性被Mann-Whitney测试,然后检查kaplan meier生存分析和操作特性(ROC)分析。结果。miR-21的表达水平高GC比那些没有淋巴结转移患者淋巴结转移()。miR-21的表达水平与组织学类型显著相关,T台、淋巴结转移和pTNM阶段。GC患者总体生存率低调节miR-21表达明显高于高调节miR-21 ()。结论。之间的密切联系有牵连miR-21and淋巴结转移升高,这可能被利用作为一个实际生物标志物在GC患者淋巴结转移。

1。介绍

胃癌(GC)是全球第四最常见恶性肿瘤,是第二个最常见的癌症死亡原因(1]。尽管许多进步GC疗法,GC患者的预后仍然不能令人满意。因为在日本的早期检测筛查项目,生存是好的(52%),而生存在美国,欧洲,中国通常只有20 - 25%的延迟诊断(2]。五年存活率先进或转移性胃癌近5 - 20%,平均总生存期是不到1年(3,4]。因此,有必要找到预后标记可以准确显示GC的生物学特性和供应早期诊断和预测临床结果的证据,以提高GC患者的临床管理。诊断和手术技术的进步,基于肿瘤外科决定了舞台(5,6]。为了调整手术治疗,有必要评估临床分期和肿瘤浸润深度。然而,预测淋巴结转移的方法,另一个重要的预后因素,尚未建立。

小分子核糖核酸(microrna),一种小型研讨会的非编码RNA的核苷酸,可以与他们的目标信使RNA干扰翻译通过促进信使RNA降解或阻止翻译通过绑定部分同源性目标mRNA 39-untranslated地区(7,8]。据报道,microrna扮演了一个重要的角色在人类代谢等生物过程,各种分化、细胞增殖和细胞凋亡。异常的microrna的提出各种癌症的致癌作用,表明microrna可以作为癌症的分子生物标志物的诊断和预测预后的9- - - - - -12]。MiR-21据报道已经升高在多个人类实体肿瘤包括肺癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结肠癌、胰腺癌和各自的邻近正常组织。同时,血清miR-21还发现在许多癌症中如弥漫型大b细胞淋巴瘤、卵巢癌、前列腺癌、乳腺癌。证据支持的假设miR-21中央oncomiR [13- - - - - -16]。

在目前的研究中,我们探索miR-21表达及其与胃癌临床病理因素的关系。此外,我们还确定miR-21表达淋巴结可能是分子生物标志物预测GC的淋巴结转移患者。

2。材料和方法

2.1。病人和样品

肿瘤标本和正常控制组织收集从86年病人手术治疗胃经病理组织切片证实为腺癌的手术,南京第二人民医院、上海第六人民医院和上海普陀医院,从2006年1月至2008年12月。没有一个病人已经由化疗或放疗前接受手术切除。转移性淋巴结也收获在胃切除术。临床阶段的GC的基础上评估肿瘤淋巴结转移(TNM)国际抗癌联盟推荐的分类系统。对准确N分期,超过15淋巴结收集在一个病人通过仔细的手工触诊。人口统计学和临床病理的患者来自患者电子病历的细节。机构审查委员会批准的这项研究是南京第二人民医院、上海第六人民医院,上海普陀医院。书面通知同意的是获得从每个参与者。

2.2。RNA提取和存在

从冷冻标本使用试剂盒提取的总RNA(表达载体)制造商的指导。总RNA中筛选了100毫升,储存在−20°C。5毫升的RNA是用来测量miR-21的表达式定量RT - pcr(存在)TaqManH microrna逆转录工具包和TaqManH microrna assay-specific RT引物对miR-21根据制造商的指示(应用生物系统公司,培育城市,CA)。Let-7a作为内部控制的表达。实时PCR进行与各3毫升的cDNA StepOnePlus实时PCR系统(应用生物系统公司,培育城市,CA)重复。值被定义为PCR的循环次数的荧光信号穿过阈值。的差异内部控制和miR-21was视为之间的值。的区别是值之间的配对标本。代表了指数的值,这意味着褶皱变化表达式。

2.3。统计分析

差异miR-21和不同临床因素之间的相关性被Mann-Whitney评估分析、配对t以及线性回归,kaplan meier生存分析。确定的程度miR-21可以有效分离不同的临床价值构造子集,生成操作特性(ROC)分析,敏感性和特异性的最佳分界点”指的是那些价值最大化ROC曲线下的面积(AUC)。数据分析是通过使用R统计软件环境(版本2.14.1;R发展核心团队,维也纳,奥地利)。所有统计测试是双面的,小于0。被认为是具有统计学意义的价值。

3所示。结果

3.1。表达式的miR-21 GC标本

的表达水平,分析了miR-21存在。内部控制的表达水平,Let-7a显示,三组之间无显著差异(数据没有显示)。我们发现显著差异正常对照组和患者之间没有淋巴结转移()。此外,有显著增加miR-21表达水平与正常对照组相比,患者淋巴结转移和无淋巴结转移患者(图1(一))。截止值5.12是最好的杰出患者淋巴结转移和无淋巴结转移,和AUC值为0.79(图1 (b))。

3.2。miR-21表达的相关性与GC患者临床病理因素

miR-21被发现高度调节的表达在30 86例(34.9%),而剩下的56例(65.1%)被划分低上调表达。探讨临床意义表达的上调miR-21, miR-21和临床病理因素之间的关系进一步评估。如表所示1、高上调miR-21表情似乎更多的组织学类型(显著相关)、T台(),淋巴结转移()和pTNM阶段(在单变量分析。多变量分析发现pTNM阶段()和淋巴结转移()具有统计学意义。

3.3。miR-21表达与预后的相关性GC的病人

患者的总体生存率或无淋巴结转移和低或高上调表达的miR-21统计估计。如图2,患者总生存时间中值高低差异miR-21表达水平几乎是11.2和13.8个月,分别。生存这两组之间差异具有统计学意义()。我们发现有淋巴结转移的患者之间没有显著差异和高上调表达miR-21和无淋巴结转移和低上调表达miR-21 ()。

4所示。讨论

发展敏感和特定微创定制管理癌症的分子生物标志物在临床肿瘤是一个重大的挑战。许多研究表明,microrna可能作为潜在的人类恶性肿瘤分子生物标志物。尽管许多研究已发表调查异常microrna的表达水平的影响肿瘤发生,只有缺乏报告处理microrna淋巴结转移患者的临床影响(17- - - - - -21]。因此,识别的microrna表达患者淋巴结转移将有助于促进GC的临床管理。

在这项研究中,我们建立了miR-21潜力的肿瘤组织作为淋巴结转移的生物标志物。使用中存在,miR-21被确认在GC高度调节患者淋巴结转移患者相比无淋巴结转移()。ROC曲线表明,AUC值几乎是0.8,这表明miR-21的表达水平可能被用来预测淋巴结转移患者的GC。陈等人报告的一项研究还显示,miR-21的过表达在大多数胃癌病人(22]。此外,miR-21及其前体已报告在许多人类恶性肿瘤,调节包括胰腺癌、乳腺癌、大肠癌、肺癌恶性胶质瘤,(20.,23,24]。

调节的分子机制的表达在GC miR-21很少报道,特别是评估之间的相关性的报道miR-21表达水平和临床分期,淋巴结转移和预后的GC的病人。证据是来自最近发表报告。MCF-7细胞抑制miR-21,过表达miR-21,可以增加细胞凋亡,减少细胞增殖,击倒的miR-21胶质母细胞瘤细胞还显示,这microrna的具有抗凋亡作用[25,26]。此外,两个直接目标miR-21 PDCD4 maspin,这可能降低恶性肿瘤的转移,被发现(27]。一起采取了其他的证据,一个可能的假设miR-21作为癌基因的作用,包括增殖、细胞周期、转移和化学敏感性肿瘤细胞的靶向等肿瘤抑制基因PTEN、MARCKS, PDCD4, Cdc25A [28- - - - - -31日]。然而,进一步的研究应该设计调查的分子机制改变表达式的因果miR-21 GC。

本研究我们接下来关注潜在关系的表达水平上调miR-21 GC和各种临床病理的因素,以及病人的预后。值得注意的是,高miR-21显著差异表达水平与组织学类型、T台,淋巴结转移,pTNM阶段,贫困患者的总体生存GC。miR-21的高上调表达与淋巴结转移GCs表明其上调收购过程中肿瘤恶化,尤其是在收购转移的潜力。这些结果表明,miR-21可作为预后的标志GC病人的预后。然而,陈等人没有发布的报告显示,高表达miR-21影响胃癌患者的临床预后[22]。一个潜在的重要的原因是,病人群体太小,发现统计上的显著差异,它只包括24组< 2倍和13个病人分别2倍高表达。与此同时,我们的研究设计也不同于报告陈等。在我们的研究中,我们主要研究了miR-21表达与淋巴结转移GC, 56和30 GC与淋巴结转移患者没有和包含在目前的研究中,分别在研究报道陈et al .,只有2和35 GC没有和淋巴结转移的病人,了。其他研究者也报道miR-21expression在人类癌症的临床意义。燕等人报道,miR-21超表达是与特定的乳腺癌临床病理的特点,先进的肿瘤分期、淋巴结转移,和穷人生存的患者(20.]。其他报告显示,肺癌miR-21表达明显与先进TNM阶段,出现淋巴结转移,而且总生存期(24]。这个结果表明miR-21表达水平可用于预测的临床结果。当然,还需要进一步的前瞻性研究与一个更大的群体来确认其GC患者的预后意义。

总之,高上调表达miR-21在GC与淋巴结转移有关。此外,miR-21可能的表达水平也对GC病人潜在的预后因子。还需要进一步的研究来验证miR-21表达在胃癌的影响,包括转移和预后。

引用

1. a . Jemal f·布雷,m . m .中心,j . Ferlay e·沃德·d·福尔曼,“全球癌症统计数据,”CA癌症期刊对临床医师,卷61,不。2、69 - 90年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. h·h·Hartgrink e·p·詹森n . c . van Grieken和c·j·范·德·“胃癌”,《柳叶刀》,卷374,不。9688年,第490 - 477页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. f·卡曼加、通用多尔和w·f·安德森,”模式的癌症的发生率、死亡率和患病率在五大洲:定义优先级降低癌症世界不同地理区域之间的差距,“临床肿瘤学杂志,24卷,不。14日,第2150 - 2137页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. w·a·d·瓦格纳Grothe, j .一颗心去坐落,克雷贝尔g . a . Grothey和w·e·Fleig“化疗在晚期胃癌:系统回顾和荟萃分析基于聚合数据,”临床肿瘤学杂志,24卷,不。18日,第2909 - 2903页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. f·j·t·许m . s . Liu王et al .,“标准八旬老人和中胃癌根治性胃切除术:是短期的手术结果和长期生存很大吗?”胃肠外科杂志》,16卷,不。4、728 - 737年,2012页。视图:谷歌学术搜索
6. 王x和h .梁”,一些问题在胃癌的外科治疗,”中国癌症杂志卷,29号4、369 - 373年,2010页。视图:谷歌学术搜索
7. 诉安布罗斯·”,动物小分子核糖核酸的功能。”自然,卷431,不。7006年,第355 - 350页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. d . p . x Ke, c . m . Liu Liu和c c .梁”小分子核糖核酸:基因调控网络的关键参与者,”当前化学生物学的观点,7卷,不。4、516 - 523年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. 罗x、b . Burwinkel道,和h·布伦纳,“微rna签名:结直肠癌的新生物标志物吗?”癌症流行病学生物标记和预防,20卷,不。7,1272 - 1286年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. m . Skrzypski r . Dziadziuszko, j .前来“MicroRNA在肺癌的诊断和治疗,”突变的研究,卷717,不。1 - 2,25-31,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. 曹l .赵、陈x和y,“微的新角色:致癌作用和临床应用在癌症,”Biochimica et Biophysica学报,43卷,不。11日,第839 - 831页,2011年。视图:谷歌学术搜索
12. r·蒙克和g . a . Calin微rna分析癌症。”临床科学,卷121,不。4、141 - 158年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. l·m·摩尔和w·张,“针对胶质瘤miR-21:小RNA与巨大的潜力,”专家意见的治疗目标,14卷,不。11日,第1257 - 1247页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. s . d . Sekuklu m·t·a·多诺霍,c·斯皮兰”miR-21致癌过程的主要监管机构,”生化社会事务,37卷,不。4、918 - 925年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. a . m . Krichevsky和g . gabriele“miR-21:小多方面的RNA,”细胞和分子医学杂志》上,13卷,不。1,39-53,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. p . p .麦地那,m . Nolde和f . j .松弛”OncomiR上瘾的体内模型microRNA-21-induced pre-B-cell淋巴瘤,”自然,卷467,不。7311年,第90 - 86页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. z l . Chen x h .赵j·w·王et al .,“微- 92 a促进人类食管鳞状细胞癌的淋巴结转移通过钙”生物化学杂志,卷286,不。12日,第10734 - 10725页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. 张x y . x, y, b·f·张c .问:杨x m . Chen和h·j·高,“初始微rna表达谱的研究结肠癌淋巴结转移,”消化疾病杂志,11卷,不。1、50、2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. z . m .黄j .杨x y沈et al .,“微rna表达谱发生结肠组织中与结肠癌的淋巴结转移有关,”消化疾病杂志,10卷,不。3、188 - 194年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. l . x, x f .黄问:邵et al .,“微miR-21超表达在人类乳腺癌与先进的临床分期,淋巴结转移和患者预后不良,”核糖核酸,14卷,不。11日,第2360 - 2348页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. z . Wang y l .他s . r . Cai et al .,“表达与预后的影响PRL-3在胃癌的淋巴结转移:使用人工微rna干扰,其分子机制研究”国际癌症杂志》上,卷123,不。6,1439 - 1447年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. a·f·c·w·s·h·Chan Wu y, c . w .太极和w·c·林”miR-21 microRNA表达在人类胃癌及其临床协会”抗癌的研究,28卷,不。2、907 - 911年,2008页。视图:谷歌学术搜索
23. p·m·佩雷拉j.p.品牌,a·r·苏亚雷斯l . Carreto和m·a·s·桑托斯,“微rna表达可变性在人类宫颈组织,”《公共科学图书馆•综合》,5卷,不。7篇文章ID e11780 2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. h . b . x z . Wang扁,j . r . Wang z . x Cheng k . m . Wang和w . De,“血清miRNA-21预后意义表达人类非小细胞肺癌,”肿瘤外科杂志》,卷104,不。7,847 - 851年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. m . l . Si s .朱h . Wu z, f . Wu和y y莫,“miR-21-mediated肿瘤的生长。”致癌基因,26卷,不。19日,2799 - 2803年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. a . m . j . a . Chan Krichevsky, k . s . Kosik”MicroRNA-21人类胶质母细胞瘤细胞的凋亡因素,”癌症研究,卷65,不。14日,第6033 - 6029页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. 问:姚明,h .徐问:问:张先生,h .周和l . h .曲”MicroRNA-21促进细胞增殖和程序性细胞死亡的下调表达4 (PDCD4)海拉宫颈癌细胞,”生物化学和生物物理研究通信,卷388,不。3、539 - 542年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. 杨x, y卢f . Wang z崔,黄和y”MicroRNA-21促进细胞增殖,入侵和迁移能力通过抑制卵巢上皮癌PTEN蛋白的表达,“国际分子医学杂志》上,26卷,不。6,819 - 827年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. t·李·d·李,j·沙,p .太阳,黄和y”MicroRNA-21 MARCKS直接目标和促进前列腺癌细胞凋亡抵抗和入侵,”生物化学和生物物理研究通信,卷383,不。3、280 - 285年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. m . Fassan m . Pizzi l·贾科梅利et al .,“PDCD4核损失负与miR-21水平结肠致癌作用,”菲尔绍档案,卷458,不。4、413 - 419年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. f . p . Wang邹,z . et al .,“microRNA-21负调节Cdc25A和结肠癌细胞细胞周期进展,”癌症研究,卷69,不。20日,第8165 - 8157页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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