为结直肠癌筛查粪便分子标记

文摘

尽管多个筛选技术,包括结肠镜检查,灵活的乙状结肠镜检查、放射成像,和粪便隐血检测,结直肠癌仍然是死亡的主要原因。随着这些技术的提高,他们对检测恶性病变的敏感性增加;然而,检测生成的前驱病变仍是有问题的,缺乏普遍接受的广泛使用。早期检测的准确、无创、有效的、简单易用的筛选技术是核心减少这种疾病的发病率和死亡率。最近的进步在粪便标本中分子标记的发展为其作为筛查工具是鼓舞人心的。基因突变和表观遗传改变,结果从carcinogenetic过程可以检测到coprocytobiology colonocytes剥落了从损伤到粪便物。这些标记显示有前途的敏感性和特异性的检测恶性和癌变前的病变也很流行一种无创性技术,代表整个结肠。在这篇文章中,我们总结的遗传和表观遗传的分子标记被认为是潜在的目标在结直肠癌的筛查。

1。介绍

在加拿大,尽管意识与筛查技术的提高,增加结直肠癌(CRC)是癌症死亡的第二大原因在男性和女性1]。当检测到阶段I或II时,手术治愈率的方法分别为90%和75%,(2,3];然而,检测通常是推迟到病人成为症状(4),这可能不会发生,直到2 - 3年后,届时病变通常是优质的5]。因此,检测癌前病变和早期CRC是至关重要的实现的终极目标筛选:由于CRC降低发病率和死亡率。理想的筛查技术应该(a)能够检测疾病可治愈的阶段,(b)高度敏感的和具体的,(c)能够引起参与率高,(d)便宜,(e)安全对病人和医生,(f)更有益的副作用,和(g)容易执行6,7]。当前的筛选技术不完成这些高尚的目标。

结肠镜检查是目前被认为CRC筛选的“黄金标准”;然而,尽管建议,不到60%的50岁以上的合格的个人经历这个测试(8]。因素包括病人不适,侵袭性、尴尬、高成本,和大量专业知识和设备可能需要所有限制这种筛选技术的吸引力(8,9]。灵活的乙状结肠镜检查(FS)表明承诺,确定先进的50 - 70%远端损伤(10];然而,大约1/3的太近端肿瘤检测(5)和过程是入侵,繁琐的病人(11]。非侵入性方法粪便隐血试验(FOBT)已经得到普及CRC作为检测工具。有两种技术隐血血红蛋白的检测:(一)化学/酶FOBT通过与血红素过氧化物酶的组织反应,经常依赖愈创木脂作为试剂,(b)免疫化学/使用人类抗体球蛋白免疫FOBT [12,13]。该技术减少了CRC死亡率15 - 33% (14,15];然而,它是有限的,因为它(a)可以发现任何网站包括胃出血或小肠,(b)可能会错误地与植物氧化酵素反应或血红素在红肉,和(c)只能检测积极出血病灶。因此,灵敏度前体病变如腺瘤位于低10 - 20%范围(10]。此外,经常出现假阴性和假阳性的结果。因此,筛选技术相结合的高敏感性和特异性为腺瘤和早期癌症,最小的侵袭性、安全性、可承受性,和可接受性的病人和医生是必需的(16]。结肠镜检查的重要优势之一是,除了检测恶性肿瘤,腺瘤和其他良性前体病变可以检测并移除。这将不仅减少结直肠癌的死亡率也减少这种疾病的发病率。这是一个值得注意的优势与FOBT相比,不能有效降低结直肠疾病的发病率。

在1989年首次观察到可行的胃肠道细胞可以从人类粪便中恢复过来,因此开始的科学coprocytobiology [17]。从那时起,CRC的自然历史的理解及其致癌途径得到了改善。预计增加理解,因此,这种改进的知识应该转化为更好的筛选技术,更准确和可接受的同时最小化他们的侵袭性5]。检测粪便标本是一种很有前途的分子标记的筛选技术。这种非侵入性测试表明较高的特异性和敏感性的检测癌前和恶性结直肠病变,与更大的病人的依从性。另外有人建议敏感性的很多这些分子标记可能会增加重复的测试在一个良好定义的筛选程序(18,19]。持续进化的研究基因组学、转录组、蛋白质组学、代谢组学和允许的持续识别潜在的成本效益,安全,和简单的分子标记20.]。对比这些测试可以困难由于方法论上的差异和人口研究[18]。在这篇文章中,我们总结了单和多板式分子标记在最近的文献描述。

2。材料和方法

使用PubMed和谷歌学术搜索英文文献检索都使用了文本短语“直肠癌”和“分子标记”发表在过去10年内(2000年以来)。文章将被限制在粪便/粪便样本。PubMed搜索列出的85篇文章,6470年列出的谷歌学术搜索条目。PubMed“相关文章”功能确定额外的45相关的文章。综述了参考列表从这些手稿,二级文章阅读和分析。文章选择仅限于粪便的遗传和表观遗传标记。总共约150篇文章被阅读,87终于纳入本文。我们开始本文简单介绍一下当前理解CRC的致癌作用通路的发展。

3所示。CRC的发展

了解致癌途径导致CRC的发展是必要的理解分子标记作为筛查工具的使用。在普通人群中大多数的癌症(85%)是零星的6],前体病变的早期识别可以提供机会介入致癌过程处于固化阶段。早期诊断是降低死亡率和发病率的核心。这些恶性肿瘤被认为由于致癌基因的突变的积累发展,肿瘤抑制基因和DNA错配修复基因(21]。传统上,三个独立通道发展的CRC已经描述。(我)染色体不稳定性的途径是最常见的序列CRC的发展,造成的全部或部分染色体丢失/突变(22]。假设一个步进式基因突变的积累,包括癌基因和肿瘤抑制基因,导致细胞异常更倾向于扩散和增长6]。提出的过程,与基因通常涉及,包括零星的基因的一个等位基因的突变(建议APC5号染色体上基因问),结果的形成发育异常的隐窝(23,24]。基因组不稳定性产生的增长优势变异细胞系允许克隆扩张(10]。突变的k -12号染色体上基因导致从一个早型腺瘤进展一个中间,然后晚型腺瘤。突变DCC5月18号染色体基因增强细胞生长和扩散。最后,一个TP5317号染色体突变在p在大腺瘤严重发育不良促进转换到一个癌(22,23]。另外建议增生性息肉,腺瘤一样,可以通过类似的阶梯式发展发展成恶性病变(25)通过锯齿状腺瘤中间(26]。据报道,锯齿状腺瘤和锯齿状的增生性息肉高突变的微卫星不稳定性和较低的利率APC, p53,k -(27]。建议20 - 30%的crc来自锯齿状息肉而非腺瘤。这些发生在一个更多的老年人口,经常站,使用内窥镜不太明显,有更快的增长潜力7]。(2)微卫星不稳定性的途径似乎发生在所有crc的12 - 15%。在这些患者中,DNA错配修复系统的主要结果在突变大poly-A-regions(大腺嘌呤tracts-BAT)和CA-repeats [10]。此外,该系统产生的突变失活的会影响所有的微卫星,不仅蝙蝠和CA-repeats。这种途径是在部分作进一步的解释7.1。(3)CRC的第三个发展模式包括2 - 3%不符合上述两类(10]。的表观遗传基因的启动子区域的甲基化过程中常见肿瘤,导致沉默的基因,也就是说,被“关掉”[22]。因此,肿瘤抑制基因的甲基化的发展可以促进细胞增殖,导致肿瘤的发展。甲基化的CpG岛的主要表观遗传变化之一参与CRC粪便标本中检测到的发病机制(2]。CRC的两种甲基化途径包括那些罕见的甲基化(CIMP−)和多个基因的异常甲基化(CIMP +)。这是进一步解释部分7.3在“表观遗传变化。”

这些通路的事件发生在一段时间,5 - 10年的保守估计是需要发展的CRC (26]。这个间隔因此提供了一个机会之窗检测腺瘤或早期CRC病变同时仍然处于早期可以治愈的阶段。确定哪些腺瘤会变成癌的可能很困难,超过50%的个人将开发腺瘤病变在他们的一生中只有6%会恶性转换(7]。区分这两种损伤识别和消除癌前息肉是最优筛选考试的一个关键特性,防止CRC-related死亡(28]。某些特征推断进展的风险更大。等因素严重发育不良、绒毛状组织学类型、大尺寸(≥1厘米),和病人的年龄是潜在恶性转化的风险指标(26,28]。识别这些特性的腺瘤性息肉及随后删除可能会减少CRC的发病率和死亡率在高危人群(29日]。尽管许多分子测试取得了相对灵敏度高癌变组织,测试来检测癌前病变等高危腺瘤尚未充分研究[20.]。进一步说,当前筛选仍然是无效的,因为只有37%的crc诊断癌症是本地化。这种低效率筛选可能是由于次优的敏感性,病人可接受性较低,资源要求限制或高可用性(29日]。

4所示。分子标记

理想的生物标志物的检测CRC和癌变前的病变(a)持续积极的“screen-relevant瘤”和消极的没有,(b)稳定尽管粪便毒性,从凳子上,(c)很容易恢复的,(d)可重复化验(30.]。与CRC的发展相关联的多个基因事件加上长期间隔最初的腺瘤/水螅似的事件和恶性病变显示角色早期诊断的分子标记。这些特定的变化发生在DNA、RNA和蛋白质可能作为生物标志物和作为筛查、诊断和预测和预后标记CRC。这些基因改变可能是由于基因突变、基因扩增,异常的DNA甲基化、染色质的修改(20.]。利用分子标记的最终目标是一个生物标记面板检测早期CRC的运营商或前体病变以减少这种高度普遍的癌症的发病率和死亡率。必须高度敏感和特定的分子标记。的甲基化标记,如雌激素受体和胰岛素样生长因子II可能发现CRC患者;然而,这样的甲基化在老化中另外常见结肠和因此是一个没有吸引力的标志(15]。应该定期释放的有效标记检测肿瘤或癌前病变,承受代谢降解,便于查阅和可衡量的从收集到的媒介7]。

这些标记可能被发现直接组织;然而,检索需要侵入性程序。最近,分析了检测遗传物质从CRC粪便标本。Sidransky et al ., 1992年,是第一个使用粪便样本来检测突变的CRC通过测试k -基因(31日]。在过去的三十年,一系列广泛的单一的遗传和表观遗传变化粪便样本中检测到已确定。同时,multimarker面板。第一multimarker小组发表八年后当Ahlquist等人(2000)发表了一篇与15点突变试验k - ras基因p53, APC, BAT-26和dna长(L-DNA) (32]。许多单一和多层面板被认为是潜在的基因分子标记在此总结。

5。Fecal-Based DNA测试的过程

Colonocytes出现结肠粘膜表面不断流下的腔结肠和排泄粪便的正常组成部分(6,17]。这些细胞脱落从隐窝的速度至少10¹⁰细胞每一天,每一个都有寿命的3 - 4天33]。每小时更新营业额1%,并在四天内整个结肠粘膜是重新5]。在19世纪首次观察到在结肠洗液脱落细胞可以用于CRC的诊断。当前进展coprocytobiology [17明白,在正常结肠,表皮脱落引发的细胞凋亡或女性与基底膜分离时(退化)。然而,恶性病变的基因和/或表观遗传变化防止这种破坏colonocytes,允许他们生存在凳子上。这可能是由于细胞增殖增加或减少信息或cell-basement膜粘连7]。此外,colonocytes清新的数量从恶性病变4-5-fold大于正常组织(5]。因此,在这些细胞保存肿瘤标记礼物。粪便中胆汁酸和细胞溶解的化合物可以溶解colonocytes并使DNA代谢活跃的微生物群落和粪便蛋白酶可能破坏材料和异化潜在的肿瘤标记物(7]。为了防止这种自然发生,立即添加DNA-stabilizing缓冲afterdefecation据报道,防止DNA降解好几天(34]。DNAase抑制剂在这些缓冲区防止退化这些标本的运输和储存,直到他们可以检查7]。体细胞抽样和恢复(SCSR)过程包括脱落的隔离colonocytes从一个小的粪便样本,可以收集和运输中一个独特的媒介在合适的温度下提供细胞数量的生物标志物的检测(17]。这些细胞在关键基因突变或改变蛋白质的产品可以分析与分子生物学或生物化学技术(21]。

开始分析,异常的遗传物质必须分开之前正常的人类DNA和细菌DNA扩增和检测分子标记(29日]。人类遗传物质在粪便标本是稀疏的,浓度中位数309 ng / g凳子(包括‚115 ng / g凳子)(35]。这只占0.01%的总DNA的遗传物质,其余部分包括基因材料结直肠微生物菌群,真核寄生虫和未消化的饮食仍是(7]。因此,必须丰富材料从凳子上检索PCR基因序列分析。放大后基因分子标记能被探测到。各种各样的方法来检测这些标记是超出了本文的范围,将不会讨论。

研究最优数量的粪便标本进行分子筛选考试没有发现额外的好处不止一个标本每个病人,93%的初步结果之间的一致性和所有后续分析未发现额外的突变在第二次或第三次检查(36]。由于粪便物质的异质性,,然而,重要的筛选包括整个粪便样本。根据病变的不同,可能存在标记在凳子上的不同部分,作为左半球肿瘤往往表面标记代表而在未成形的粪便从右结肠colonocytes可能被发现在整个样本(7]。

6。单一的遗传标记

四个最常见的粪便CRC包括基因研究喀斯特,TP53、APC、和DCC基因。检测DCC粪便标本中的突变不是深入研究;然而,喀斯特,TP53,和APC报道在英国文学,因为,例如,Calistri的研究报告吗k -和p53也同样在CRC患者和35%的改变吗APC突变是13%37]。这些基因现在详细讨论。

6.1。喀斯特基因

的喀斯特基因位于染色体的短臂上12和编码k -三磷酸鸟苷- - - - - - -(三磷酸鸟苷)结合蛋白在信号转导调控作用的增殖和分化6]。通常情况下,k -蛋白质水解三磷酸鸟苷,从而使得ras蛋白(6,38]。这是第一个分子标记研究粪便标本近30年前(31日]。这个基因的变异是更常见的在远端结肠病变(18]。激活的突变喀斯特可能导致不受控制的细胞增殖和抗EGFR-targeted疗法(39]。只有一个副本的需要这种基因突变导致不可控的细胞生长,k -是一个信号传感器(38]。这些突变的多数(70 - 80%)在密码子12,尽管他们可能发生在13和61密码子。粪便标本,k -突变已发现在35 - 42%的crc和大约50%的腺瘤大于1厘米(6]。这个标记是特异性的,因为它已经从形态学在粪便中发现正常结肠粘膜,自限性增生性息肉,nondysplastic异常地穴焦点(15]。另外,这个标志是CRC的非特异性,其粪便存在可能积极良性的,不相关的病理学等胰腺增生(5]。表1总结的敏感性和特异性喀斯特综述文献研究中可用下面简要讨论。

(我)Zhang et al。(2011)39]
毛细管电泳芯片的温度梯度(TGCE)技术用于检测突变k -粪便标本30 CRC患者和15名正常对照组。17/30 CRC患者证明k -变异(57%),和只有1/15控制变异,从而产生特异性为93%。

(二)简et al。(2007)40]
本研究探讨了作用的分子标记CRC的识别。k -12密码子突变被确定使用逆转录-聚合酶链反应(rt - pcr)和放大,限制性片段长度多态性分析,5%的“正常”控制,粪便和crc的41%。这些突变的病人年龄显著相关。

(3)Øgreid和哈姆雷(2007)27]
在这篇文章中,k -突变在粪便样本中检测到其内镜识别前18个月。

(iv) Rengucci et al。(2001)41]
46个CRC患者的粪便样本检索显示6阳性k -外显子2的突变:2外显子1和4。组织样本阳性这个突变的三分之一。

(v) Notarnicola et al。(2000)42]
k -突变检测在粪便样本26 CRC患者使用PCR扩增和限制性内切酶分析。粪便k -突变被发现在26.9%的情况下。

(vi) Smith-Ravin et al。(1995)43]
11零星的CRC患者粪便样本来进行分析拉与非放射性突变,allele-specific不匹配的方法。大约一半的粪便样本变异是积极的。

的使用喀斯特基因的分子标记并没有支持CRC检查几项研究[44,45]。虽然这个基因与CRC可以探测到一些人,通常是无效的在识别那些在这个癌症的风险增加发展中基于肿瘤出现前的病变。不相关的风险因素或高危个体的识别(44]。这个标记是一种常见的组件的多目标分析,如后所述。

6.2。TP53基因

阐明在adenoma-carcinoma通路,突变基因TP53最常发生在CRC的后期。这个基因位于染色体的短臂上17和编码基因p53,研究参与者在许多形式的人类致癌作用。可能发生突变的外显子5、6、7或86,45]。在p53突变,蛋白质是管制,导致基因组不稳定性增加和恶性发展。突变等粪便检查,已确定在50 - 70%的crc (5),64%的严重发育不良的息肉(10,4 - 26%的腺瘤(6]。冲突的结果关于这个突变的检出率存在的文献如下见过。

(我)Rengucci et al。(2001)41]
凳子和组织样本收到46个CRC患者。尽管在组织样本的37% ()这个标记,在粪便样本只有3例突变,两个外显子6上发现和一个外显子8。

(2)Notarnicola et al。(2000)42]
p53突变检测在粪便样本26 CRC患者使用PCR扩增和单链构象多态性。突变被发现在50%的情况下。

6.3。APC基因

的腺瘤息肉病杆菌(APC)第五对染色体上的基因是温度系数和编码APC“看门人”蛋白质负责的规定β连环蛋白,一个电感的促生长的基因Wnt信号通路(6]。APC的额外角色包括调节细胞粘附,细胞迁移,与微管和堵塞的细胞周期46)突变的APC基因发生早期adenoma-carcinoma序列和粪便检查报告发现在20 - 82%的腺瘤和52 - 60%的crc (6]。不像喀斯特和TP53突变是不限于一个小区域,可以在任何地方发生的前1600个密码子基因,(5尽管83%发生在序列的第一部分(10]。这些突变发生在继承和零星的形式的CRC (12]。样品检测的结果这个标记在下面列出了一些研究。

(我)Suceveanu et al。(2008)47]
在这项研究中(),15个外显子的APC突变基因进行了分析,确定了外显子4(9例),9(1例),13(6例),c和15(5例)和外显子5中没有发生,7、8、10、12、15。

(2)Traverso et al。(2002)48]
粪便样本的DNA纯化28 CRC患者,18与腺瘤(≥1厘米),和28名正常对照组。样本筛查APC蛋白质突变与数字截断。肿瘤患者突变出现在57%(26/46),在所有的控件。

6.4。额外的基因突变

额外的基因突变在粪便标本,探索文学包括以下。

(我)大同
结肠癌的删除(DCC)18号染色体的长臂上发现的基因,在正常情况下维护信息粘连。虽然在组织标本,研究其在粪便样本中表达仍缺乏研究和理解。在一项研究中,粪便分析、突变被报道在70%的crc,小腺瘤11 - 13%,至多60%的腺瘤与恶性病灶增强细胞生长和转移性传播6]。在这个领域进一步的研究需要阐明的潜在作用DCC作为分子标记。

(2)RPL19 [49]
的基因RPL19负责编码核糖体蛋白由于。粪便物的研究从44 CRC患者,15控制,和11结肠细胞系,定量实时逆转录PCR检测到7/24患者晚期CRC表示2倍比正常RPL19在结肠肿瘤组织,和晚期患者的平均粪便RPL19 mRNA水平也高于对照组。作者得出结论,RPL19蛋白表达增加有关先进CRC患者,这是检测粪便物。

(3)COL11A1 [47]
COL11A1基因编码的胶原蛋白α1链蛋白质。这个基因的突变CRC粪便中还没有得到深入研究。Suceveanu的研究(),粪便样本进行了变性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳。38个外显子16日,41岁,54岁,55岁,56和57进行了研究。外显子16,38岁和41未发现突变;然而,流离失所的乐队模式中检测出的外显子6例54岁,55岁,56和57。

(iv) cox - 2, Matrix-Metalloproteinase-7 mRNA (7]
粪便的突变分析cox - 2产生特异性为100%,敏感性为87%。分析矩阵metalloproteinase-7 mRNA在65%的患者中发现。可以检测到90%的crc这两个标记的总和。

(v)原癌基因p64,原癌基因p67, c-erbB2 [50]
Colonocytes粪便样本中分离出了15 CRC患者和15名正常对照组,并使用逆转录酶聚合酶链反应p64的原癌基因的表达,原癌基因p67,和c-erbb-2分别进行评估和组合。原癌基因p64表示在78.5%的CRC患者和只有13.3%的控制(敏感性86.7%)。原癌基因p67中检测出78.6%的CRC患者和13.3%的控制(敏感性86.7%),和c-erbb-2 CRC和控制之间的信使rna表达的差异不显著。在面板组合分析中,被发现的敏感性为64%,特异性为100%。

7所示。介绍了表观遗传变化

7.1。粪便微卫星不稳定

微卫星不稳定性(MSI)发生在短链DNA序列与串联重复模式(微卫星)进行长度变化由于失去功能的至少一个六错配修复基因(一种MSH2, PMS1 PMS2、MSH3 MSH6)导致突变的积累和复制的错误导致延长或缩短的微卫星6,12,22]。这些错误与微卫星标记等位基因复制可以确定,核苷酸序列存在于肿瘤DNA但不在正常的遗传物质(46]。在零星的CRC, MSI常伴随着错配修复基因的表观遗传沉默一种(12]。MSI通常与微卫星的影响基因的编码区(22]。这种不稳定性通常是在遗传性非息肉病性CRC患者发现腺瘤在CRC(> 90%和80%),但在零星的CRC少(15%)和腺瘤(5%)(5,22]。MSI可以带来一个更好的预后比stage-matched稳定肿瘤(12]。最常用的粪便MSI的标志是大腺嘌呤Tract-26 (BAT-2626日),一个轨迹重复腺嘌呤核苷酸位于MSH-2错配修复基因(5,22,24]。在右侧癌症近端结肠左曲,BAT-26是30 - 40%[的特性45]。这个粪便标记有一个近端crc的敏感性为40% (5),和更常用的多目标面板。

7.2。长DNA

长dna (L-DNA)基因序列,只要1800 - 2400碱基对可以在粪便标本中发现和用于检测CRC (6]。通过corpocytobiology技术(17],colonocytes脱落到从“正常”结肠内腔,核内切酶被激活在细胞凋亡过程中,分解细胞DNA片段的180 - 200碱基对。在CRC,细胞nonapoptotic;因此,当他们从肿瘤脱落,他们没有受到这种变性,可以从粪便样本检索(22]。使用荧光L-DNA方法,作者放大粪便的DNA,发现CRC的平均值是64 ng(范围0 - 731 ng)相比,0 ng(范围0 - 246 ng)健康控制。本研究进一步发现,截止值的25 ng,敏感性为79%,特异性89%可以达到粪便测试(51]。这是一致的另一项研究纯化DNA从粪便样本,发现DNA片段CRC患者高分子量比从控制(> 18/24可能发现乐队)(52]。的使用作为粪便筛查工具,L-DNA存储期间通常是不稳定的;然而,添加一个缓冲DNAase抑制剂似乎补救这个问题。这是探索了通过使用一个实时邹等人运算器为量化粪便L-DNA PCR分析。作者发现平均下降75% L-DNA水平nonbuffered粪便标本中第一天,然而,外加一个EDTA缓冲区,DNA的完整性保存。CRC L-DNA不是特定的,它的存在在粪便样本可能是由于上消化道癌症或炎症性肠病(53]。在Abbaszadegan的研究中,发现L-DNA CRC患者粪便样本的64% ((控制)的特异性95%)[54]。

7.3。甲基化标记

的主要表观遗传变化之一参与CRC的发病机制,可在粪便标本中发现的甲基化是CpG岛(2]。CRC可分为两个亚型:那些罕见的甲基化(称为CIMP−)和多个基因的异常甲基化(CIMP +)。CIMP或“CpG岛methylator表型”越来越被认为是一个临床和病因不同的组有自己的流行病学、组织学和分子特性。更频繁地CIMP-positive crc通常有一个突变k -但更少的突变基因TP53(55- - - - - -57]。

在这个过程中,保持酶的转移从一个甲基胞嘧啶的甲基供体S-adenosylmethionine carbon-5的位置(26]。甲基化的胞嘧啶残基负责他们的转录失活58]。他们经常发现在翻译第一外显子或基因的启动子区域负责调节细胞增殖、凋亡、DNA修复(2,29日]。尽管可能有数百hypermethylated基因,只有少数CRC的发展发挥显著的功能作用,因此潜在的分子标记(29日]。

通过使用methyl-binding域蛋白质列捕捉甲基化DNA,灵敏度明显已被证明是没有增加负面影响特异性(59]。检测基因突变可能是一个挑战,因为单个基因可以通过多种机制或突变灭活突变在不同的位置。相比之下,在甲基化,它通常是相同的残留监管区域的特定基因的癌症的目标,从而促进筛选试验设计(60]。DNA甲基化模式已发现在早期阶段的tumourigenesis相同或更大的基因突变频率。在大多数CRC的特定甲基化基因是有吸引力的候选分子检测在粪便样本7]。一些作者认为,高成本和相对较低的灵敏度与检测相关的DNA突变阻止它的实用性在以人群为基础的测试;然而,methylation-based测试被认为是敏感的检测CRC和越来越多的特定标记代表后生签名确认。这些粪便标志物有吸引力的筛查工具由于其高患病率在早期肿瘤和可预测性分析目标基因启动子区域(35]。另外这些粪便筛查可能作为早期疾病标志物,预后指标,预测治疗反应(61年]。全基因组分析为目标表观遗传基因的识别提供了一个广泛的标记的候选人名单,从大量详细研究了粪便样本(11]。

8。单一的表观遗传标记

8.1。SFRP2

的SFRP2基因负责编码frizzled-related分泌蛋白2 (SFRP2)。它是其中一个SFRP肿瘤抑制基因负责糖蛋白分泌抑制Wnt tumourigenic通路(62年]。因此,当SFRP基因沉默,Wnt /β连环蛋白信号通路被激活。这个基因包含一个地区富含半胱氨酸残基,可以在CRC,甲基化,因此用作粪便分子标记。stool-based筛查发现了这种基因的甲基化在77 - 90%的crc amplifiable DNA。缺乏特异性23%的“健康”控制被发现在这个位点甲基化。这可能是解释为焦点的理解癌变前的异常的蓄水池,常规结肠镜检查是发现不了的,可能是hypermethylated在这个网站15]。许多研究已经调查了这个基因的甲基化是一个潜在的粪便分子标记。总结结果的敏感性和特异性,这些研究是在表2并简要讨论如下。

(我)唐et al。(2011)63年]
凳子、血清和组织样本从169年CRC患者,63年先进的腺瘤,46 nonadenomatous息肉,30“法线与MS-PCR检索和分析了人类DNA检测甲基化的SFRP2。crc,组织分析的灵敏度最高(88.2%),紧随其后的是凳子(84%)和血清DNA (66.9%)。甲基化的SFRP腺瘤不明显,敏感性为65.1%,46%,和6.4%,分别。控制/正常,检测很低,为0%,6.7%,0%,组织,凳子,血清。组织样本的整体这个标记的特异性为34.9%,在凳子上54%,血清中是93.7%。

(2)王、唐(2008)(64年]
CRC患者(),腺瘤≥1厘米()、增生性息肉()和“正常”()提供凳子和组织样本。实时PCR荧光技术被用来分析SFRP2基因与临床病理的相关性。粪便标本的敏感性为87.0% (60/69)CRC, 61.8%为腺瘤(21/34),42.3%(11/26)为增生性息肉。两个“正常”的患者甲基化SFRP2在他们的粪便标本。甲基化的基因没有明显与性别、年龄、肿瘤分期、网站,淋巴结状态或组织学分级。

(3)Oberwalder et al。(2008)26]
甲基化状态由MethyLight对比结直肠息肉患者和那些消极的结肠镜检查。没有一个健康的控制有这个基因的甲基化。33%的增生性息肉和腺瘤的46%为甲基化阳性。这些作者得出的结论是,SFRP2是最敏感的fecal-based单个dna分子标记的CRC的识别。

黄(iv) et al。(2007) (62年]
甲基化的SFRP2被发现在94.2%,52.4%,37.5%,和16.7%的CRC患者腺瘤,分别增生性息肉、溃疡性结肠炎,。控制,“健康”主题,只有1/24的粪便分析显示该基因的甲基化。

(v)穆勒et al。(2004)65年]
的敏感性为90%,特异性77%的人报告SFRP2在这项研究中分别研究44基因的甲基化状态。当重复粪便DNA-independent测试集(),发现77%的敏感性和特异性。作者得出结论的甲基化SFRP2是一个敏感的单一识别CRC的dna标记。

8.2。波形蛋白

的波形蛋白基因负责编码一个中间丝蛋白成分,通常不是在结肠上皮细胞中表达2]。正常情况下波形蛋白表达在mesenchymal-derived细胞包括成纤维细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞、内皮细胞(66年]。这个基因通常是甲基化和转录活跃在正常上皮隐窝细胞(55]。总共只需要4 ng的人类DNA内的粪便标本的检测甲基化波形蛋白当使用methyl-binding捕获域(MBD)蛋白质和蛋白螯合到色谱柱(nickel-agarose矩阵35]。下面的研究突出了实用性的粪便标记。

(我)Ned et al。(2011)66年]
一个商用粪便DNA测试ColoSure已经被开发出来,它检测甲基化的波形蛋白基因。仍然没有公布的数据在这个测试的敏感性和特异性。

(2)门敏et al。(2009)29日]
与腺瘤60个人CRC, 52岁,37岁正常对照组进行调查波形蛋白甲基化使用methylation-specific与特别设计的引物PCR (MS-PCR)。CRC的敏感性为38.3%和15.4%,腺瘤。

(3)Itzkowitz et al。(2007)34]
缓冲粪便样本从40 CRC患者和122名正常对照组,这些作者发现检测波形蛋白甲基化导致敏感性72.5%,特异性86.9%。

(iv)陈et al。(2005) (2]
一项研究关注粪便检测波形蛋白94年进行甲基化使用MS-PCR CRC患者和198名正常对照组。本研究利用MS-PCR确定波形蛋白的甲基化状态外显子1粪便DNA CRC患者和“健康”控制进行了比较。整体灵敏度46%是记录(43/94),特异性为90%(10%的粪便DNA样本从控制波形蛋白甲基化阳性)。

8.3。管理、MLH-1和CDKN2A

的基因管理,MLH-1和CKDN2A已经被提议作为潜在的粪便分子标记。在一项研究中,粪便从“健康”()、腺瘤()和CRC (甲基化的研究methylguanine DNA甲基转移酶(管理)和人类傻瓜我homolog-1 (hMLH-1)。甲基化检测粪便样本中51.7%和30.0%的CRC,与腺瘤的36%和11%。通过添加波形蛋白甲基化检测,结合CRC的敏感性为75%,腺瘤是59.6%,特异性是86.5% (29日]。

第二项研究评估的甲基化状态管理、MLH-1和CDKN2A在结肠腺和增生性息肉。的管理,CDKN2A,MLH-1基因甲基化在48%、31%和0%的腺瘤和16%,27%,10%的人没有检测到病态。Tubulovillous和绒毛状腺瘤是更频繁地甲基化与管状腺瘤。腺瘤和至少一个甲基化通常是大于病变没有甲基化(15.6毫米和7.0毫米)。这些发现表明这些基因的甲基化可能导致恶化的息肉癌(25]。

额外的表观遗传改变,一直在探索文学包括以下。

(我)2 q14.2 (EN1 SCTR INHBB) [61年]
的基因2 q14.2港口三个CpG岛已经与这个基因的启动子区域:EN1 SCTR, INHBB。在研究远程表观遗传这种基因的沉默的程度,至少其中一个三CpG岛被甲基化在crc的90%。最常见的甲基化启动子区域EN1,沉默中观察到73%的crc和腺瘤的40%。SCTR也与高水平的甲基化相关癌(53%)和腺瘤(33%)。INHBB低甲基化,发现只有25%的crc和腺瘤的病人。EN1和INHBB建议在早期CRC被关联到一个预后差;然而,进一步的调查建议。亚硫酸氢治疗融化曲线从粪便DNA分析被用来检测甲基化EN1和总体敏感性27%,特异性97%被发现。作者认为,表观遗传基因的抑制2 q14.2在CRC频繁,甲基化被认为是一个次要的发生。

(2)ITGA4 [67年]
在全基因组搜索使用甲基化基因芯片分析,ITGA4被发现在75%的结肠癌和92%的crc的腺瘤诊断特异性为79%。因此,作者总结道ITGA4是一个潜在的粪便dna对CRC疾病的预测标志。

(3)GATA4和GATA559]
转录因子GATA-4和GATA-5编码的基因GATA4和GATA5,分别。在正常的身体,这些转录因子对胃肠道的正常发育至关重要,在CRC的进化。这个基因的甲基化导致损失的表达已经被记载在原发性结直肠,胃、食管、肺癌、卵巢癌、胰腺癌。相比其他基因等APC、好管理、HLTF p16,RASSFIA甲基化的GATA4/5分别赋予更高的敏感性和特异性。GATA4甲基化越来越普遍了GATA5。从两个独立的一系列CRC患者粪便DNA (CRC,控制)显示GATA451 - 71%的敏感性和特异性为84 - 93%。因此,得出结论GATA4是一个潜在的CRC筛选分子标记。甲基化的GATA4/5没有明显与tumour-node转移有关,阶段,肿瘤位置、性别、年龄诊断、组织学类型,或肿瘤。

(四)HIC1 [15]
的HIC1基因编码蛋白hypermethylated-in-cancer-1 (HIC1)。这个基因的启动子,17号染色体上的本地化p13.3往往是CRC的甲基化,而不是衰老或正常结肠组织。粪便检查CRC hypermethylatedHIC1基因检测与FOBT展示了有前景的结果表观遗传标记在26个CRC患者,与腺瘤13(≥1厘米),与增生性息肉9,9慢性炎症性肠病,32名正常对照组。甲基化HIC1启动子DNA中没有检测到任何的粪便标本“正常”或增生性息肉。特异性为98%。CRC-derived样本的42%和31%的大肠癌腺瘤的阳性标记,略高于FOBT的灵敏度通常报道。

(v) miR-34b / c和mir - 148 (68年]
小分子核糖核酸(microrna)非编码rna大约22个核苷酸长度负责调制的转录后的活动,针对信使rna抑制基因表达。microrna的基因被认为在肿瘤细胞生物学中发挥重要作用,如甲基化被认为对CRC驱动息肉的发生和发展。调查的甲基化miR-34b / c和mir - 148 a CRC调查了5-aza-2′脱氧胞苷和MS-PCR。28 CRC患者,与高档发育不良12,39正常对照组进行了研究。miR-34b / c甲基化被发现在75%的CRC粪便标本和16%的高档发育异常的息肉。mir - 148 a,女性性趋势,年龄较大,整体存活率下降被发现与这些表观遗传变化有关。

(vi) OSMR [69年]
制瘤素M受体,β(OSMR)是一个为制瘤素M受体,细胞因子白细胞介素- 6的家庭成员显示抑制多种癌通过抑制细胞增殖。结果表明,甲基化的OSMR中检测出在26/69 CRC患者的大便(敏感性38%)的特异性为95% (77/81)。一个统计上的显著差异指出CRC患者和对照组之间。阶段II CRC,粪便样本的56%OSMR甲基化(15/27),第三阶段为44% (8/18)。

(七)P16 (54]
在研究45个人与CRC和20名健康(25),甲基化的p16在20%的患者中发现,特异性为100%。

(八)TFPI2 [70年]
组织因子途径抑制剂2 (TFPI2)通常是一个多肽能抑制因子凝血级联的Xa和花絮。使用MS-PCR,粪便这种蛋白质的基因启动子的甲基化进行,实时荧光定量运算器PCR用于确定L-DNA数量。从CRC患者粪便样本检索()、腺瘤()和健康对照组()。这种粪便分子标记的特异性为100%,敏感性为68.3%。这种粪便标志物结合L-DNA分析时,灵敏度为86.7%。

(x) NDRG4 [71年]
NDRG416 q21-q22.3染色体上的基因编码的蛋白质相同的名称,N-Myc downstream-regulated基因4 (NMDRG-4)。与许多CpG岛promoter-methylated基因特定的近端或远端肿瘤,甲基化的基因存在于病变在两个站点。这个基因的启动子的甲基化体现在CRC患者粪便()和正常控制(使用定量MS-PCR)评估。这标志了敏感性为61%,特异性为93%。

(十一)SFRP-1 [72年]
这个基因的甲基化检测到29 CRC患者,与腺瘤,7和17名正常对照组用MS-PCR特别设计的引物对甲基化/ unmethylated启动子序列SFRP1。这标志了一个整体的敏感性为89%,特异性为86%,和一个显著差异是结直肠肿瘤患者与正常对照组之间。

9。Multimarker面板

与单一基因化验往往产生敏感性和特异性癌变前的和恶性结直肠病变低于预期,一些研究已经转向multimarker面板的发展。到目前为止,没有任何一个分子标记已被确认是在所有crc表示,这些病变的遗传异质性表明,一组分子标记可能更适合筛选的目的(4,6,7,73年]。研究结合遗传和表观遗传标记为结直肠病变显示更高的灵敏度,虽然常常以牺牲特异性(74年]。各种组合标记的企图;然而,数量和身份的标记包括为了获得所需的敏感性和特异性无显著增加成本仍然待定(22]。下面讨论的一般研究multimaker板。

9.1。PreGen +

研究multimarker面板现在商用PreGen +名义。PreGen +自2003年以来在美国可用,包括21点突变k -(k12p。1,k12p.2, k12p.3),APC(876 - 2、1306 - 1309、1312 - 1,1367,1378,1379 - 3,1450,1465 - 8,1554),和p53(175 p。2,245p.1, 245p.2, 248p.1, 248p.2, 273p.1, 273p.2, 282p.1) combined with BAT-26 and a DNA integrity assay (DIA) to detect abnormalities in the apoptosis pathway and detect L-DNA [23]。这个小组调查了几个作者,他们的研究结果总结在表3下面简要讨论。

(我)Ahlquist et al。(2000)32]
第一个目标面板只有15标记研究喀斯特/ APC / p53+ BAT-26和印度。Freezer-archived 22 CRC患者的粪便样本,与腺瘤11(≥1厘米),和28正常检索,sequence-specific混合捕获用于隔离人类DNA。CRC的敏感性为91%和82%,腺瘤被报道,特异性为93%。

(2)伯杰et al。(2003)75年]
这些作者使用一组19的突变k - ras基因p53,,和APC和BAT-26删除评估潜在的粪便检查。粪便标本100例没有左半球肿瘤远端脾曲进行了分析。83%的样本阳性突变。

(3)伯杰et al。(2003)76年]
这项研究不包括L-DNA的测定;然而,19标记p53、APC、和喀斯特连同BAT-26的突变检测在先进的结肠息肉直径大于1厘米。这些息肉演示了一个或多个突变的28/32(88%)的敏感性。突变出现在喀斯特(59%),APC(33%)和p53(22%)而不是BAT-26。

(iv)泰戈尔et al。(2003)23]
八十年晚期CRC患者和212名对照提供了粪便样本,分析了使用这个面板的分子标记。面板是能够识别入侵crc和57.1%的性腺瘤的63.5%,85.7%的高档发育不良。记录患者的特异性为96.2%没有colorectum的病变。

(v)品牌et al。(2004)36]
十六个CRC患者提供粪便样本在前三次手术切除。样本21的突变分析p53、APC、和k -BAT-26和删除。一个或多个突变被确定在11/16例(69%)在第一个标本,结果之间有93%的一致性和积极性在连续的凳子19/21的病人。69%的敏感性被确认在第一次样品,和86%后续粪便样本已从最初的相同的突变,以93%的整体一致性之间的初始和后续粪便分析。作者得出结论,一个标本是充分的粪便DNA分子的筛选。

(vi) Imperiale et al。(2004)77年]
4404名参与者提交的粪便样本中使用这个面板进行DNA分析,接受FOBT (Hemoccult II)和结肠镜检查。这个分子标记面板检测到16/31侵袭性癌症的敏感性51.6%,13/40与腺瘤和高档发育异常的敏感性为32.5%。这个面板整体特异性为94.4%。总的来说这些结果比研究中的FOBT更敏感。

(七)Syngal et al。(2006)78年]
91 CRC患者()和性腺瘤()手术前给了粪便样本,然后1 - 3和6 - 9个月。使用这个23-marker面板三个标本进行了分析。CRC标本敏感性63%,腺瘤占26%。47%的样品有两个或多个基因突变检测。喀斯特最经常被变异(41%),比近端和远端病变更有可能有一个积极的测试。1 - 3个月术后18%的患者得到了积极的结果,只有阳性DIA 12/14。许多与这些没有DIA异常治疗之前,建议化疗和手术可能L-DNA增加。6 - 9个月大的只有7%,仍为正值,表明切除肿瘤病变导致DNA异常消失。

(八)伯杰et al。(2006)79年]
本研究调查了影响商业凳子筛查模式对提高坚持CRC建议和CRC和腺瘤患者的识别。从1211名参与者,87%发现标本收集过程容易执行,和91%报告说,他们可能会再次使用测试。凳子上发现异常与异常的检测在结肠镜检查病人的49%。

9.2。波形蛋白+ DIA

的结合波形蛋白甲基化和L-DNA的存在,被DIA,已经检查了在接下来的研究。

(我)Itzkowitz et al。(2007)34]
四十CRC患者和122名正常/控制提供粪便样本,立即保存缓冲区。凝胶捕捉和分析使用两个单独的面板:(A) 22基因标记DIA和(b)的组合波形蛋白DIA。结合(b)取得了最高的结果,与整体的敏感性为87.5%,特异性为82%。

(2)Itzkowitz et al。(2008)8]
在后续的研究中,有42 CRC患者和241名正常对照组化验的甲基化波形蛋白和印度。波形蛋白评估MS-PCR andDIA实时PCR。结合他们的CRC的敏感性为86%,特异性为82%。

额外multimarker板已经在文献中包括以下调查。

(3)k -、p53和APC (80年]
Corpocytobiology技术利用粪便物colonocytes 116 CRC患者和83名正常对照者进行了细胞学检查和DNA分析。整体被记录的敏感性为71%,特异性为88%。

(iv)k -APC,波形蛋白(81年]
上的点突变喀斯特,扫描突变集群区域APC,和波形蛋白甲基化已经合并创建一个分子标记鉴定(面板2)测试对商业23-marker PreGen面板(1)多中心前瞻性triple-blinded试验。共有3764名成年人接受了筛查结肠镜检查,两个FOBTs,这两种分子凳板进行分析。在组织考试,几乎所有标本分析包含至少一个标记从新近提出的面板(# 2)而不到三分之二的组织标本包含标记从商业面板(# 1)。恢复这些分子标记在凳子上几乎是平等的两面板之间(板2和1 39%和40%,分别地)。粪便DNA测试进行了粪便样本69 54 screen-relevant性腺瘤患者和正常对照组。面板2产生了积极的利率高于面板1,分别为43%和20%,其中包括CRC(58%和25%)和腺瘤(45%和13%)。

(v)k -、BAT-26和TP53(82年]
粪便DNA 51 CRC患者被检索,突变p53、喀斯特、和BAT-26被确定。CRC的面板的敏感性是71%。

(vi) APC, BAT-26 L-DNA [83年]
57 CRC患者和正常对照组44粪便样本用于测试提供了这个小组。粪便物质来自37个病人(65%)的至少一个包含改变这些分子标记。这个小组发现有14%比FOBT更高的灵敏度。

(七)RASSF2 SFRP2 [58]
研究SFRP2结合甲基化RASSF2由于他们的高甲基化率在结肠癌和胃癌症。788结直肠和胃肿瘤标本检索以及296年粪便标本肿瘤患者和控制。广泛的甲基化SFRP2和RASSF2在结直肠肿瘤更常见,敏感性为75% CRC患者和44%的晚期腺瘤。高false-positivity率10.6%,特异性的检测被发现89.4%。

(八)RARB2 p16、管理和APC (74年]
这四个基因的启动子甲基化分析了最初的粪便样本12 CRC患者,20与结直肠腺瘤,然后从一个额外的82名患者(20名健康与炎症性肠病16 20与腺瘤和癌26)。分析了第一组与MS-PCR第二methylation-specific融化曲线分析(MS-MCA)。第一组的灵敏度达到了75%(9/12例)和癌与腺瘤和60% (12/20)。在第二组,62%的癌(16/26)和40%(8/20)腺瘤被检测到。的RARB2标记是积极的,13%(2/15)患者的粪便样本的炎症性肠病。没有甲基化检测到“正常”组。

APC、ATM hMLH1、SFRP2 HLTF,管理,问题,cox - 2 (84年]
CRC患者的粪便样本(),结肠直肠息肉()和正常对照组(结肠镜检查前收集)。使用MS-PCR甲基化的APC、ATM、hMLH1 sFRP2 HLTF,管理,和问题进行了分析,用rt - pcr检测cox - 2 mRNA。这种组合的灵敏度达到了75%的CRC和腺瘤的68%。90%的特异性实现3正常控制患者阳性至少一个标记。cox - 2只发现在50%的癌症和腺瘤患者的4%。

ITGA4 SFRP2, p16 (85年]
这种组合的标记被用来评估患者粪便标本30 CRC,与腺瘤25,31健康对照组。分别,ITGA4 SFRP2,和p16被发现在36.7%、60.0%、和40.0%的crc和16.0%,44.0%,和24.0%的腺瘤,分别。结合,这多面板产生的敏感性在腺瘤CRC的70.0%和72.0%。这种组合产生一个整体的特异性为96.8%。

10。凳子上的优势测试

测试的优点粪便样本分子标记作为癌前和早期CRC是多因素疾病的筛检试验。这些包括以下。

10.1。改进的敏感性和特异性

先前建立的无创性筛查技术FOBT及其所有子公司依靠血液的存在来源于肿瘤在凳子上。并发症可能导致这个便血,如活跃痔疮或光学纤维损伤,可能会混淆(86年]。与出血可能是间歇性的,colonocytes不断被释放,因此一个标本是足够的22,73年,87年]。血入侵是CRC的更常见的在以后的阶段;然而,肿瘤细胞释放到结肠内腔(早些时候发生7]。敏感性和特异性的粪便DNA检测率高对许多标记(86年]。特异性是增强的,因为与血清测试,DNA不进入血液循环,提高敏感性可能导致大量的DNA释放CRC较正常(22,73年]。这个检查可以准确区分从纯粹的良性腺瘤,潜在转换实体。心理医生和病人由于福利相比更少的假阳性FOBT可能导致改善验收和合规CRC检查(86年]。

10.2。完整的屏幕

粪便标本包含遗传物质的代表整个结肠,而只乙状结肠镜检查到达远端第三(86年]。一项研究发现83%的crc 20-biomarker面板是敏感察觉到灵活的乙状结肠镜检查(75年)筛查间隔可能增加癌症和前体腺瘤可以检测到86年]。

10.3。少量的样品

微量DNA可以使用PCR检测和放大在billionfold [73年,87年]。这些可以评估突变。

10.4。病人友好

饮食和药物需要限制在这个筛选;因此,病人的依从性是预期的增加(22,81年]。的过程更有耐心友好,无损伤,不需要宣泄的准备,而不需要一个办公室访问是标本可以邮寄和存储73年,86年]。在一个缓冲区,粪便样本没有退化(运输和存储22,87年]。障碍,如旅游、设备能力,劳动力下降在patient-regulated样本收集过程(8,73年,86年]。

10.5。易用性

在一项研究发现87%的病人测试容易执行,91%的人表示他们愿意把它再次在未来79年]。

10.6。经济

CRC检查的总体成本负担可能减少由于数量有限的结肠镜检查。这些考试可能会增加之间的时间间隔,和更好的识别患者需要侵入性检查会更加精确,减少不必要的结肠镜检查的成本(5,23,86年]。

11。缺点/凳子上测试的挑战

最大的挑战在粪便筛查CRC是识别和选择单个或面板具有高敏感性和特异性的分子标记。许多分子标记已确定的目标和组合;然而,哪些使用和多少人仍未定义。这是进一步复杂化的理解,标记使用越多,成本越高(86年]。目前,分子检测粪便标本是昂贵的比FOBT [4),与第一个粪便DNA分析达到市场售价795美元(28]。成本可能会进一步升高的劳动力intensiveness一些基因的提取和描述方法的分析(73年]。然而,成本问题,虽然非常重要,很难解决。进一步,对当前FOBT等侵入性测试,执行时间有显著差异的分子遗传分析。困境依然存在有关精度测试与他们的成本/收益的大规模使用;这些挑战在很大程度上仍未解决。这种精确的方法是必要的,以提高敏感性和特异性。

胆汁盐、血红蛋白降解产物和复杂的多糖在粪便标本中可以作为PCR抑制剂,因此需要特殊的技巧来规避这种并发症(58]。最后,利率相对较高的假阳性和假阴性结果限制这些测试的准确性,从而限制其广泛使用。假阴性可能是由于pcr检测考试不随检测hypermethylated DNA或由于缺少一个小腺瘤。错:阳性结果的四个潜在原因包括(i)实验条件的理想标准,(ii)的生物种群之间的差异得到了正常的粪便样本,(3)生存的低水平的DNA甲基化在正常组织,及(iv)甲基化基因的检测从结肠正常/异常的地穴焦点而不是相关病变(55]。

12。未来

检测癌前和早期的CRC是改善患者预后的核心。目前筛选技术提高了他们对癌症病变的敏感性;然而,检测的前体腺瘤可能成为恶性仍然是一个挑战。粪便标本的使用分子标记已日益成为一个潜在的筛查工具。提出了多个标记,有一些非常有前途的敏感性和特异性,需要进一步验证才能被考虑广义广泛使用。更敏感的PCR凳子保护策略和更改其他因素,可能会改善这些研究的结果(28]。一旦一个/多个面板的生物标志物(s)已确定,与大样本前瞻性研究以证据为基础的统计评估所需尺寸。这些测试应该包括并行FOBT出于比较目的(19]。在不久的将来,这些技术可能扩展到检测supracolonic aerodigestive癌症和援助在炎症性肠病的诊断30.]。粪便分子标记有固有的潜在的识别不仅恶性肿瘤,而且良性precursor-malignant实体具有高敏感性和特异性,从而更进一步降低结直肠癌的发病率和死亡率的终极目标(7]。

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