伐抵消船Arterialisation和正弦信号Capillarisation,减少肿瘤生长,延长小鼠肝细胞癌中生存

文摘

背景和目的。动脉血液供应和表型变化的正弦曲线描述肝脏血管在人类肝细胞癌(HCC)。我们调查了伐对肝脏的影响血管异常,在肝细胞癌肿瘤生长和生存。方法。我们对待转基因小鼠肝癌发展,特点是人类肝癌的血管异常相似,与普伐。结果。伐组生存时间更长和肝重量和结节表面是减少了。伐actin-positive动脉平滑肌细胞的数量减少和阻止了正弦信号异常,减少层粘连蛋白的表达,激活肝星状细胞新的高度表达,活跃。此外,伐抑制内皮细胞而不是肿瘤肝细胞功能。结论。伐减少血管异常,在肝细胞癌肿瘤生长和延长生存。这些结果代表新机制的他汀类药物对肿瘤血管生成的影响和潜在的目标治疗肝细胞癌。

1。介绍

肝细胞癌(HCC)是世界上第五个最常见的癌症,预后不良。血管异常的主要特征是大型和中等或低分化肝癌(1,2]。潜在的治疗,只能在高度选择病人。索拉非尼,口服multikinase抑制剂靶向受体参与血管生成和肿瘤生长,是唯一的全身治疗已显示出温和,但意义重大,提高生存时间在先进的肝细胞癌(3]。

参与各种机制间的耐药性,线粒体胆固醇可以调解抵抗化疗在肝细胞癌(4]。因此,他汀类药物,抑制3-hydroxy 3-methylglutaryl辅酶A还原酶(β),导致甲羟戊酸和胆固醇合成的减少(5),可能是有趣的使用结合常规治疗肝细胞癌。然而,临床试验使用他汀类药物在心血管治疗未能提供决定性的结果关于他们的抗癌效果6]。相比之下,最近的一项研究表明,他汀类药物治疗与显著减少肝癌的风险在糖尿病患者7]。因此,他汀类药物可能在肝细胞产生有益的影响,可能与自然关系针对肝细胞(8]。普伐他汀治疗,单独或与化疗相结合,提高了生存在晚期肝癌患者9,10]。

他汀类药物对血管生成的影响是不同的,取决于所使用的药物浓度和实验条件(11- - - - - -14]。他汀类药物降低farnesylation和小GTPase geranylgeranylation蛋白参与细胞生存、增殖和迁移15]。Ras和ρ,小GTP-binding蛋白质,是他汀类药物的主要目标(16]。通过防止细胞膜RhoA本地化,cerivastatin减少内皮细胞(ECs)迁移和减少血管生成在基底膜基质和绒毛膜尿囊的膜化验(17]。

福克曼四十年前描述的概念描述,肿瘤需要neovascularisation肿瘤生长(血管生成开关)似乎比想象的更复杂的(18]。一些肿瘤如肝癌不起源于无血管的组织(19,20.]。严重的肝血管异常描述人类肝细胞癌(1,2]。与主要门户静脉血液供应和有孔的正弦曲线存在于正常肝,arterialisation HCC中观察到,特点是强烈的动脉血液供应扩大动脉和动脉未配对,不与胆管。此外,在肿瘤结节,正弦曲线是无政府状态,融合,曲折和扩张。这些正弦曲线获得基底膜层粘连蛋白丰富,它们被激活肝星状细胞(hsc)以正弦曲线capillarisation。激活肝星状细胞表达平滑肌肌动蛋白(SMA)和生产proangiogenic因素(1,21)在正常的正弦曲线包围肝星状细胞只表达肌间线蛋白(1,2]。

本研究的目的是确定如果他汀类药物,通过防止肝脏血管异常,可能在HCC延缓肿瘤进展和延长生存。为了这个目的,我们使用了转基因小鼠肝癌发展的多步血管生成和肿瘤进展22]。在这个肝癌模型,我们先前描述的类似血管异常的人类肝细胞癌(23,24),表明PlGF封锁延迟肿瘤生长,减少arterialisation和正弦信号capillarisation [25]。

VEGF,切口,ephrin家庭发展起到关键作用的血管网络和动脉和静脉血管分化在胚胎和成年小鼠(26,27]。Delta-like 4配体在肝癌模型,新的高度受体的活性形式,和ephrin B2,表达了正弦内皮细胞(ECs),在HCC进展逐步调节和促进肝脏血管异常(23]。

这里,我们展示了一个大大延长生存率,减少肿瘤生长,rosuvastatin-treated肝癌而未经处理的小鼠肝癌。伐的过程减少arterialisation肝脏血管导致小动脉和阻止正弦信号capillarisation,层粘连蛋白和活跃的新的高度表达下降。此外,激活hepatite正弦曲线周围的星状细胞减少伐下治疗。

2。材料和方法

2.1。试剂

下面的抗体被用于西方印迹和免疫荧光染色实验:一个兔子,兔子antismooth肌肉肌动蛋白(SMA)和anti-HIF-1α(Abcam,剑桥,英国);老鼠antimouse CD31 (Pharmingen,正欲Le Pont de Claix法国);兔子anti-Notch4,认识到截断胞内域int3 /新的高度(北部、Euromedex Mundolsheim,法国和Abcam,剑桥,英国);山羊反β肌动蛋白(C11)(圣克鲁斯生物技术,CA)和兔antilaminin (l - 9393)(美国圣路易斯MIσ);和兔子antidesmin (rb - 9014) (Neomarker Inc .弗里蒙特CA;美国)。B抗体,二次抗体对西方墨迹:驴IgG-peroxidase和驴antirabbit IgG-peroxidase(杰克逊免疫研究实验室,西树林,PA,美国);C、二次抗体免疫染色:Alexa萤石488年和555年山羊antirabbit和Alexa萤石488年和555年驴anti-rat (Interchim、河曲、法国)。

2.2。转基因小鼠模型

转基因C57Bl6 / ASV-B雄性小鼠肝癌发展,在一个多步血管生成和肿瘤进展增生的肝细胞癌的扩散阶段,描述了在其他地方(22]。短暂,精确瞄准SV40 T早期区域表达的转基因小鼠的肝是通过使用700碱基对的抗凝血酶调控序列控制致癌基因的表达。肝癌的发展被限制在雄性老鼠backcrossed与C57BL / 6 j小鼠。老鼠,老鼠(6 /组),与普伐口服,每日(25毫克/公斤),从第四周到死亡,生存的研究。伐的选择是由其亲水的特性,用最小的肝代谢细胞色素P450系统(8]。苏木精和伊红染色(他),免疫荧光染色,和免疫印迹研究,4补充/组小鼠被杀,在扩散阶段(16周)获得肝脏样本。动物手术麻醉下进行,按照法国政府政策(服务Veterinaires de la桑特et de la生产Animale Ministere de l 'Agriculture)。

2.3。肝细胞与肝癌肝脏和细胞培养

从治疗肝癌肝脏肝细胞分离。过程是根据Riccalton-Banks (28]。肝癌小鼠(16周)与Xylasine anesthetised 20μg / g体重(拜耳、分立桑特animale,普托法国)+ 50克他命μg / g体重(Virbac,卡罗,法国)来执行剖腹手术和暴露门静脉。肝脏是通过门静脉灌注导管(22 g, Vygon、艺术品、法国)连接到一个蠕动泵。肝静脉分割。肝脏灌注(流量10毫升/分钟)250毫升灌注缓冲区(0.2 M氯化钠,氯化钾2.7毫米,0.7毫米Na₂HPO₄10毫米,消息灵通的pH值7.65)在37°C,紧随其后的是100毫升灌注缓冲与6.5毫米CaCl补充₂和20μg / ml Liberase (Penberg,罗氏诊断GmbH德国)在37°C 5毫升/分钟的流量。灌注后,肝脏被仔细切除和20毫升灌注冲洗两次缓冲区。肝胶囊剥落和肝脏中分离100毫升m199 - 10% FCS在37°C,分离细胞。原油细胞悬液过滤60便士。米米esh nylon screen (SCRYNEL NY60HC, VWR, Fontenay-sous-Bois, France) and sedimented for 30 minutes, at room temperature. The pellet, containing the hepatocyte fraction, was suspended in 100 ml M199-10% FCS and was washed four times (1000 rpm for 5 minutes). Hepatocytes (150 000 cells/cm²)在collagen-coated培养板(0.15毫克/毫升)(美国BD,贝德福德,MA)在dmem - 10% FCS + 4.5 g / l葡萄糖。微观形态学评价后,细胞分化良好型的出现,hepatocyte-like形态。肿瘤肝细胞被扩大,冻结在10% DMSO,保存在液氮中。解冻后,细胞进一步通道,用于实验。

隔绝人类内皮细胞(通过传代形成细胞的脐静脉和培养ebm2 - 20% FCS + 2 ng / ml FGF-2描述(23]。

2.4。细胞增殖和基底膜基质化验

细胞增殖检测,HUVECs(15 000个细胞/),在FCS ebm2 - 20%,和肿瘤肝细胞(50 000细胞/),在dmem - 4.5 g / l葡萄糖- 10% FCS,被播种在6-well文化板块。72小时后,细胞培养有或没有在10伐μ25米,μ米,100μM HUVECs和100年μ为肝细胞。细胞每24小时数(卡尔蔡司蔡司Axiovert 25日,Sartrouville,法国)。三个实验的结果均值±SD做一式五份。

基底膜基质化验,HUVECs(100 000个细胞/)被播种在基底膜基质凝胶(BD生物科学,勒桥Claix,法国)12-well文化板块,在FCS ebm2 - 20%,或没有伐(100μ米)。观察Capillary-like结构形成后18小时(蔡司,Axio观察者Z.1)。图片是使用数码相机获得(鲍默TXD14, Radeberg,德国)。三个实验进行重复。芽的数量与Histolab量化软件(维视,埃夫里市,法国)。三个实验的结果均值±SD在重复执行。

2.5。入侵检测

肿瘤肝细胞(75 000细胞/室),在无血清培养基,被播种在插入涂层与基底膜基质(BD生物科学),存在与否的伐(100μ米)。众议院750年充满了μl RPMI 1640含10% FCS诱导趋化作用。24小时后,nonmigrated细胞出现在参议院被轻轻刮掉,和贴壁细胞的下表面插入固定有甲醇,沾1%甲苯胺/ 1%硼砂溶液,与墨卡托统计软件(Explora新星,拉罗谢尔,法国)。结果(入侵细胞的数量)是三个实验的均值±SEM进行复制。

2.6。ρ激活试验

肿瘤肝细胞或HUVECs培养了两天有或没有伐(100μ米)。然后,细胞细胞溶解并激活RhoA G-Lisa工具测量,根据制造商的说明(细胞骨架Inc .,丹佛美国)。短暂,活跃,GTP-bound RhoA,但不是不活跃,蛋白形式,在生物样本结合rothekin-coated板。绑定活跃RhoA然后被孵化与特定anti-Rho主要抗体,紧随其后的是一个次要过氧化物酶抗体结合。结果,用吸光度(490海里)表示,三个实验的平均数±标准差是在重复执行。

2.7。蛋白质提取和免疫印迹

蛋白质提取肝脏活检(100 - 200毫克)是如前所述[23]。蛋白质浓度评估使用BCA试剂分析工具包(皮尔斯,罗克福德,生病,美国)。样品在4 x煮Laemmli缓冲区。蛋白质样本解决通过4%到12%梯度sds - page电泳预制凝胶(NuPage表达载体,Cergy Pontoise,法国)减少的条件下在拖把缓冲区(NuPage,英杰公司)。转让后,(iBlot传输设备,英杰公司),一夜之间,膜被孵化在4°C主要抗体新的高度(1/200),HIF-1α(1/1000)β肌动蛋白(1/400),用作内部加载控制,然后用适当的二次孵化抗体(1/50 000)。抗体与发射极耦合逻辑系统绑定了(皮尔斯,罗克福德,美国)。结果(平均±SEM)是正常的β肌动蛋白水平,表示为一个百分比的控制。

2.8。免疫荧光染色(如果)

肝脏部分准备如前所述[22]。主要抗体的问题却被忽略了,或者孵化超额阻断肽是一种消极的控制。肝脏部分是孵化主要抗体:单克隆鼠anti-CD31 (1/50), anti-laminin (1/100), anti-desmin (1/200), anti-Notch4(1/100),和anti-SMA(1/50),然后用适当的二次抗体(1/200)。所有疣状进行分析使用标准荧光显微镜(蔡司Axio观察者Z1,维视,埃夫里市,法国)。

染色面积和容器进行了量化使用Histolab软件(维视)盲调查员。结节大小是由面积测量/光场(3光学领域/肝)。CD31、层粘连蛋白、肌间线蛋白和SMA正弦表达测定面积测量/光场(3 - 4光学领域/肝脏)和SMA船船获得的密度是每节数。

2.9。统计分析

logrank测试进行生存时间。使用学生的数据统计分析t以及(Excel;微软),被认为是显著的(;;)。

3所示。结果

3.1。伐延长生存和延迟在肝癌小鼠肿瘤生长

Rosuvastatin-treated肝癌小鼠显示出比未经处理的小鼠肝癌大大延长存活时间。平均存活时间为195天(范围:193 - 198)在未经处理的小鼠组和216天(范围:214 - 220)rosuvastatin-treated肝癌小鼠组()(图1(一))。

在16周,显著增加肝脏重量是在未经处理的小鼠肝癌(g)与正常野生型小鼠(N) (g) ()(图1 (b))。伐治疗显著降低肝脏重量(克,)(图1 (b))和肝脏大小(图1 (c))。小结节出现在肝癌肝脏伐治疗(图1 (c))。

然后,我们分析了肝架构由他染色。在未经治疗的肝细胞癌的扩散阶段(16周),大型和肝组织内肿瘤结节融合在场(图1 (d))。相比之下,在16周,肝组织内小结节在场下伐治疗(图1 (d))。平均结节表面区域在rosuvastatin-treated显著降低肝细胞癌(毫米²)与未经治疗的肝癌肝脏(毫米²;)(图1 (e))。总之,这些结果表明,伐延迟HCC进展。

3.2。伐防止正弦肝癌肝脏中的异常情况

我们分析了正弦信号在正常肝脏和结节性和治疗和rosuvastatin-treated internodular地区肝癌肝脏(图2(一个))。如前所述(22薄),定期观察正弦网络在正常肝脏,同时融合,扩大,曲折的正弦曲线出现在治疗肝癌肝脏。这些正弦异常结节内显著多于在internodular区域(图2(一个))。正弦曲线不广泛扩大和混乱在治疗结节性和internodular地区而未经治疗的肝细胞癌(图2(一个))。

然后我们进行CD31染色(图2 (b))。非常模糊的表达CD31在正弦ECs规律的正弦网络存在于正常的肝脏(图2 (b))。相反,一个强大的表达CD31在ECs的扩大,曲折,在未经治疗的肝癌肝血窦异常(图2 (b))。有趣的是,血窦扩张更低更普通,一个较弱的CD31表达在正弦ECs伐治疗(图2 (b))。

伐显著降低正弦曲线表面区域。CD31-positive地区μ米²在未经治疗的肝癌肝脏和μ米²在rosuvastatin-treated肝细胞癌()(图2 (c))。

3.3。伐防止正弦信号Capillarisation肝癌肝脏

在正常肝脏,血窦有孔的容器,没有周皮细胞覆盖,但周围正常肝星状细胞(hsc)肌间线蛋白表达。在肝细胞癌中,血窦发展成毛细血管。他们获得一个基底膜层粘连蛋白丰富,四周都是激活肝星状细胞表达SMA (1,2,25]。

没有描述层粘连蛋白的表达在正常肝脏同时层粘连蛋白在治疗肝癌肝脏(图明显表达3(一个))。rosuvastatin-treated肝脏,弱层粘连蛋白染色观察(图3(一个))。此外,正弦曲线的形状和大小更定期伐下治疗,证实他和CD31染色(图3(一个))。然后,我们比较了平均表面未经处理和治疗肝癌肝脏laminin-positive正弦曲线。伐层粘连蛋白表达下降(laminin-positive领域:μ米²/字段与治疗μ米²/在未经治疗的肝癌肝脏()(图3 (d))。

那么,我们执行CD31 /肌间线蛋白和CD31 / SMA double-immunostainings,为了分析肝星状细胞表型。

壁画在正常肝脏、肌间线蛋白染色细胞在血管来自门户束和未激活的肝星状细胞(图3 (b),见图1 (a)在网上补充材料doi: 10.1155 / 2010/640797),而SMA染色仅动脉(图3 (c)补充图1 (b))。rosuvastatin-treated desmin-positive地区高(μ米²/字段)比未经处理的肝癌肝脏(μ米²/字段,)(图3 (e))。在正常肝脏、desmin-stained壁画细胞血管来自门户束和SMA-stained动脉平滑肌细胞(补充图1(一),1 (b)。CD31-positive正弦ECs周围的非活性表达肌间线蛋白在正常肝星状细胞,治疗和rosuvastatin-treated肝癌肝脏((补充图1 (a))当他们被激活肝星状细胞表达SMA只有在肝癌肝脏(补充图1 (b))。有趣的是,在rosuvastatin-treated肝癌肝脏、CD31-positive正弦ECs更强烈的非活性包围desmin-positive比未经处理的肝癌肝肝星状细胞(补充图1 (a))。

在正常肝脏、SMA沾在动脉平滑肌细胞(图3 (c))。伐显著降低了SMA-positive-activated肝星状细胞与未经治疗的肝细胞癌(数字3 (c)和3 (f))。的平均表面积SMA-positive肝星状细胞μ米²/字段与治疗μ米²/在未经治疗的肝癌肝脏()(图3 (f))。在治疗肝癌肝脏、CD31-positive正弦ECs不太强烈的包围SMA-positive-activated比未经处理的肝癌肝的肝星状细胞(补充图1 (b))。总之,这些数据表明伐损害HSC活化,防止正弦信号capillarisation肝癌。

3.4。伐防止Arterialisation肝癌肝脏

健康的肝脏的门静脉供应大多数肝血流量。相比之下,肝癌的特点是肝动脉血液供应的增加,导致动脉(数量的增加1,2,25]。

我们观察到伐减少的数量SMA-positive HCC与未经治疗的肝癌肝动脉(/毫米²/部分肝细胞癌与治疗/毫米²/部分未经处理的肝细胞癌,)(数据4(一)和4 (b))。

3.5。伐减少新的高度活跃的表达在正弦内皮细胞在肝细胞癌

我们以前报道,肿瘤正弦ECs改变其表型和表达活性形式的新的高度,动脉EC标记(23]。之前报道,新的高度表达的正弦ECs在肝癌肝脏(图5(一个))。更少的正弦曲线表达了新的高度与未经处理的相比,治疗肝癌肝脏(图5 (b))。通过免疫印迹,我们证明了伐显著降低活动新的高度的水平71% ()在肝细胞癌肝(图5 (c))。

3.6。伐减少HIF-1的表达α在肝细胞癌肝

我们以前HIF-1描述α信使是增加肝癌肝脏(22]。在这里,我们表明,通过免疫印迹,HIF-1α水平增加到%在肝癌肝与正常肝脏(图6)。与未经治疗的肝细胞癌相比,伐大大减少HIF-1α水平% ()在肝细胞癌肝(图6)。

3.7。伐对肿瘤没有影响肝细胞增殖,入侵,ρ活动

我们首先分析了如果延迟HCC进展与普伐在肿瘤肝细胞的影响。的数量Ki67阳性细胞/字段处理之间没有显著差异()和未经治疗的肝癌肝脏(),明显高于正常的肝脏(,)(数据7(一)和7 (b))。

伐(100μ米)没有体外对肿瘤肝细胞增殖的影响,入侵(数字7 (c)和7 (d))。

ρ是他汀类药物的目标,我们研究了在培养肿瘤肝细胞在体外激活ρ伐治疗。伐(100μ米)不修改ρ在肿瘤肝细胞(图的激活7 (e))。

因此,我们的研究结果表明,普伐不直接作用在肿瘤肝细胞。

3.8。伐抑制增殖、分化和HUVECsρ激活

那么,我们分析了HUVECs rosuvavastatin体外的影响。HUVEC增殖的抑制伐(10 - 100μ米)剂量和时间(图8(一个))。24小时后,伐抑制HUVEC增殖为所有浓度约25%。剂量依赖性的影响48和72小时后观察普伐。48小时后,伐显著抑制HUVEC增殖49% (),64% ()和78% ()10、25和100年μM,分别。72小时后,抑制达到66% (),76% ()和95% ()10、25和100年μ分别为M(图8(一个))。

在缺乏伐HUVECs分化成capillary-like结构高度支发芽网络在基底膜基质(图8 (b))。在伐HUVECS形成芽,芽的数量没有显著差异在治疗和rosuvastatin-treated HUVECS(图8 (c))。伐下治疗,HUVECs分化成绳子没有腔而不是capillary-like结构(图8 (b))。

类似的结果在与人类微血管基底膜基质扩散和管形成ECs(数据没有显示)。

然后,我们分析了在HUVECS伐对ρ激活的影响。伐抑制ρ激活81% ()在25μM和86% ()在100μM(图8 (d))。

4所示。讨论

Hypervascularity在人类肝细胞癌的特点是严重的肝脏血管异常动脉血液供应,增加定义为arterialisation,和表型正弦曲线的修改,定义为capillarisation [1,2]。在转基因小鼠肝癌发展的多步血管生成和肿瘤进展22),我们也报告了类似的船异常与人类肝细胞癌(23- - - - - -25]。因此,该模型是适合分析伐的影响在肝癌肝血管异常和肿瘤进展。索拉非尼是唯一批准的先进治疗肝细胞癌(3),我们决定在扩散阶段分析伐的影响(16周)肝癌的转基因肝癌模型。

在这里,我们表明,伐他体内,显著降低肿瘤生长,得分的肝脏重量和大小结节,并显著延长生存在转基因小鼠肝癌发展。抵抗化疗肝癌进展,肝内复发已报告被ρGTPase调制信号,他汀类药物的主要目标(29日,30.]。在其他啮齿动物肝癌模型,他汀类药物降低肿瘤进展,肺癌转移和微血管密度。但是,他汀类药物对生存的影响不成立(31日,32]。他汀类药物在肝细胞癌的有益作用可能与自然针对肝细胞(8]。有趣的是,增生的肝细胞的数量没有未经处理和rosuvastatin-treated肝细胞癌之间差异的肝脏。此外,伐不抑制,在体外肿瘤的扩散和入侵肝细胞肝癌肝脏和隔绝ρ在这些肝细胞的激活。

因此,我们关注伐的体内效应在肝癌肝血管。与主要门户静脉血液供应和高度有窗的正弦信号在正常肝脏、强烈的动脉血液供应与动脉未配对的增加和正弦信号的capillarisation船只正是HCC血管网络(1,2]。我们以前所示,通过超声测量和microarteriographic研究主要动脉血液供应与arterial-venous分流术在我们的模型中肝细胞癌(24]。此外,我们还展示了在这个模型中,肿瘤正弦曲线表达层粘连蛋白和肿瘤正弦ECs获得一个动脉表型(22,23]。这些相似性在人类肝细胞和肝血管网络在我们的模型中促使我们调查是否伐可能在HCC抵消肝血管异常。

在这里,我们表明,伐大大降低SMA-positive动脉的数量,建议伐防止arterialisation HCC的在我们的模型中。

我们还证明了伐抵消表型变化的正弦曲线。事实上,血窦不混乱,曲折,扩张,部分失去了基底膜层粘连蛋白在rosuvastatin-treated HCC丰富。正常的血窦,缺乏对周,SMA-positive desmin-positive hsc包围,而激活肝星状细胞是存在于肝细胞癌(1]。类似的异常也出现在我们的肝癌模型。事实上,desmin-positive肝星状细胞减少,同时激活SMA-positive肝星状细胞增加,肝细胞癌与正常肝脏。有趣的是,伐增加的数量未激活的desmin-positive肝星状细胞和减少的数量SMA-positive激活肝星状细胞在肝细胞癌。

Notch信号调节细胞增殖和分化和管制的表达描述切口在肝细胞癌(33]。超表达Notch1抑制肝癌细胞的生长的34]。Notch1的差别相比之下,对这些信号导致肝癌细胞生长抑制和凋亡35]。

Arterial-venous内皮细胞的命运是由VEGF和切口的家庭(26,36]。我们以前报道,VEGF-A / Dll4 /活动新的高度/ ephrine B2级联促进肝癌肝血管异常,新的高度只是表达肿瘤正弦ECs (23]。本构激活新的高度诱发成年老鼠动静脉畸形,特别是在肝脏37]。新的高度信号促进小鼠的肺和脑动静脉畸形(38,39]。从新的高度信号诱发血管异常,我们分析了活跃的肝脏表达新的高度而不是Notch1伐下治疗。在这里,我们表明,伐的水平减少新的高度的活性形式,用更少的Notch4-positive正弦曲线。这样的积极贡献新的高度表达,减少部分伐的有益作用在肝脏血管异常肝癌模型。

即使hypervascularity是肝细胞癌的标志、肝脏血管异常导致肝癌肝脏功能受损灌注和促进缺氧(1,25]。缺氧诱导血管生成细胞因子的合成,刺激肝细胞生长和抗治疗(40]。此外,激活肝星状细胞分泌血管生成因子和影响氧气交付(1,41,42]。支持这一假设,我们之前已经演示了HIF-1的增加α肝癌模型中的信使水平(22]。在这里,我们显示HIF-1的增加α蛋白质含量在未经治疗的肝细胞癌与正常肝脏。有趣的是,我们表明,HIF-1α是伐下受损的治疗。封锁这个周期可能会改善肝脏功能vascularisation并在肝癌治疗的效率。

据我们所知,这些影响的他汀类药物预防arterialisation和正弦信号在HCC capillarisation先前没有被报道。

他汀类药物可以促进或抑制EC体外血管生成(11- - - - - -14]。在这里,我们表明,伐抑制HUVECs增殖,扰乱毛细血管网络,但不发芽数,在人工基底膜,减少ρ的激活。

综上所述,我们的数据表明,伐防止capillarisation正弦曲线的arterialisation肝脏血管,这可能会导致减少在肝细胞癌肿瘤生长和更长的生存。伐抑制ECs但不是肿瘤肝细胞功能,这可能表明,伐目标内皮细胞而不是肿瘤肝细胞。这些结果代表了一个新的机制,他汀类药物在肝细胞癌肝血管正常化的影响并提出一个潜在的目标优化发达肝癌的治疗。

确认

本研究支持,在某种程度上,联赛的资助国家靠le癌症。作者承认博士r .宝卓统计分析,Lariboisiere医院产科提供的脐带,动物保健和伊夫小米。a . Tijeras-Raballand p Hainaud-Hakim, J.-O。Contreres贡献同样这项工作。

补充材料

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