文摘
卡拉胶、硫酸多糖是由某些种类的海洋红海藻,已被作为一种重要的食物来源,饲料,抗生素剂在历史上由于他们所谓的人类健康的好处。本研究旨在获得的多糖Hypnea valentiae和描述的生物应用。卡拉胶是通过红外特征,理化性质,AFM,抗菌,抗氧化剂,和抗凝功能;此外,甲醇的杀灭幼虫的效果从海藻中提取生成埃及伊蚊幼虫在不同浓度。分子对接实验进行了计算寻找分子洞察力的大分子和小分子的交互使用滑翔对接用薛定谔软件。抗菌区不同浓度的抑制作用比40毫克/毫升更高的活动对细菌病原体。卡拉胶在所有抗氧化活动强烈,与激进的整体抗氧化(70.1±0.61%),享年250岁μ克/毫升浓度被展出。DPPH的清除是有效的抑制(65.74±0.58%)激进的浓度达到160μg / mL和羟基清除(65.72±0.60%)的活动集中的125μg / mL被展出。抗凝活动(APPT和PT)卡拉胶的部分进行测试。h . valentiae和硫酸肝素显示更高的APTT活动(106.50 IU 25μg / mL)相比,PT测试(57.86 IU 25μg / mL)和甲醇提取更高的杀灭幼虫的活动埃及伊蚊(LC50= 99.675μg / mL)。在这项研究中,利用通过角叉菜胶在体外和在网上分子对接研究对抗菌、抗氧化剂和抗凝属性。结果建立了卡拉胶的潜力是一个替代来源控制mosquitocidal房地产在未来。此外,卡拉胶对多个目标的分子对接结果7−−6千卡每摩尔绑定得分。发现的角叉菜在体外来在网上研究需要进一步验证的临床证据。
1。介绍
海洋macroorganisms功能多样化的生物活性化合物的丰富来源,发挥积极作用在人类营养和健康。海藻硫酸多糖的主要来源,粒子被广泛用于食品、饲料和药物,由于其流变特性作为胶凝和稳定剂(1,2]。硫酸多糖有大量的生物和生理活动,包括抗血栓形成的(3),抗凝剂(4),抗氧化剂(5,抗糖尿病的6),抗菌7),免疫调节8,9],抗病毒[10,抗炎11],antinociceptive [12,13,抗肿瘤14),和促炎效应(15,16]。硫酸多糖包括agarans、半乳糖体和卡拉胶也可以丰富。其中,卡拉胶是一种通用的偏差的线性,硫酸半乳糖体来源于种红色海藻(17]。各种调查海藻及其提取物的抗氧化和抗凝属性已发表(18,19]。藻类多糖必须显示为一个重要的角色为自由基拾荒者和抗氧化剂的氧化损伤的保护生物体在当前政府和抗凝血剂长期以来一直用于治疗血液透析期间和手术,以及治疗弥散性血管内凝血,在各种各样的障碍和血栓形成在体外血液检测(20.,21]。蚊子,如埃及伊蚊,是最致命的,因为他们作为一个向量为各种不同的疾病,包括登革热、疟疾、黄热病、丝虫病、和其他类型的基孔肯雅热以及Zika病毒(22- - - - - -25]。此外,海藻硫酸多糖提取包含初级和次级代谢物包括生物活性的化学物质,可降解成无害的产品;它可能在蚊子幼虫有效控制(26,27]。
标准的新的治疗方法是复杂,精疲力尽,昂贵,费时、费力。分子对接等计算方法合理化中发挥了关键作用药物发现的道路,为了克服这些障碍。分子对接功能成为一个有前途的药物研究工具,从药物图书馆有效地筛选候选人28]。在这样的研究中,最终的目标是找到有效治疗从海藻中提取的卡拉胶分子。它对抗菌求值、抗凝和抗氧化活性使用滑翔对接薛定谔的大师平台软件(薛定谔释放2021 - 2:大师,薛定谔,LLC纽约,纽约,2021)。此外,卡拉胶复合是利用的效率在体外验证对上述的目标。卡拉胶是一种硫酸多糖,通过提取从红色海藻的物种。它已经广泛应用于食品工业、农业、药物输送、组织工程、生物传感器的应用。因此,本研究调查了隔离和卡拉胶提取摘要介绍活动h . valentiae描述的结构属性使用傅里叶变换红外(ir)光谱,13C核磁共振(NMR)和原子力显微镜(AFM)光谱分析和评价的生物属性,如抗氧化、抗菌、抗凝剂与活动在网上分子对接分析。
2。材料和方法
2.1。收集和提取样本
红色的海藻,h . valentiae(Turnur),收集从Mandapam (Lat。09年177°28′n,长。79°18′536 e)位于东南海岸线Ramanathapuram,泰米尔纳德邦,印度。海藻标本编号是1759。与海水样本正确清洗去除所有不受欢迎的污染物,如砂粒子和附生植物,然后用自来水彻底清洁丢弃所有盐表面上。水被抽离,海藻是摊在吸墨纸吸收剩余的水分被shade-dried之前在室温下了3天,粉碎成细粉。硫酸多糖提取完成后,过程评估的海藻粉100克、分别浸泡在丙酮和甲醇溶剂在7:3两天瓶在200转10分钟。这个过程重复两次,确保干生物量。这种生物质干燥成粉末分散在1 L的0.1 M盐酸为24小时在室温下不断搅拌。上面的颗粒是reextracted,上层清液池。上层清液在一夜之间保持在4°C,沉淀的两卷绝对1:1和搅拌连续15分钟,然后收集沉淀分离卡拉胶凝胶和蒸馏水。卡拉胶凝胶完全浸泡在96%的酒精1 h和不断搅拌。 The carrageenan gel was separated from alcohol and distilled water by filtration. Subsequently, the mixture was centrifuged at 5000 rpm for 10 min, and the supernatant was neutralized with 1.0 M NaOH and poured in 100 mL of methanol. The carrageenan was freeze-dried by using a membrane at 70°C for a 24 h duration which was performed for further processing [29日]。
2.2。结构分析
使用α红外分光光度计及其技术、傅立叶变换红外光谱被用来确定官能团的卡拉胶多糖(30.]。描述的补充13理化性质。的13卡拉胶的理化性质的10毫克溶解在0.5毫升溶液D2啊,这是记录在27°C NMR光谱力量模型400 MHz光谱仪。质子化学位移在ppm (ppm)表示。这种物质在蒸馏水稀释混合解决方案之前200年μg / mL卡拉胶在0.2 M氢氧化钠。角叉菜胶解决方案被允许平衡1 h与盐酸与氢氧化钠中和之前(pH∼6 - 7)。0.22解决方案被通过μm过滤和放置在1厘米新鲜清洁的玻璃板上表面(样卷∼60μL)。样本干大约16 h在环境条件。成像的AFM在24 h(卡拉胶进行沉积,避免样品污染。
2.3。抗菌活性
抗菌研究进行了两个革兰氏阳性细菌(粪肠球菌(MTCC 439)和金黄色葡萄球菌(96年MTCC))和革兰氏阴性细菌(大肠杆菌(MTCC 443)和铜绿假单胞菌(741年MTCC))。所有细菌都从研究实验室获得,微生物学,Periyar大学,印度。积极的控制包括链霉素。细菌培养都在35°C孵化24小时(31日]。
2.4。Antibiofilm活动
确定海藻的影响甲醇提取物对antibiofilm活动,约3.5毫升的营养肉汤和1.5毫升的细菌培养被添加到无菌试管。10毫克的样本添加不同浓度的甲醇提取物(10年,20年,30、40、50μg / mL),另外给到每个管。所有的管子都在颤抖的孵化器孵化24小时37°C。孵化后,管都是用蒸馏水洗净。所有的管子都breeze-dried几分钟,加入5毫升的结晶紫在37°C,然后孵化1 h。孵化后,我们放弃了结晶紫的管子,用蒸馏水洗了他们。5毫升的95.0%乙醇添加到所有的试管和被紫外可见分光光度计(OD在595海里32),分别。antibiofilm活动使用比例的公式计算:
2.5。抗氧化活性测定
2.5.1。总抗氧化性质
样品的抗氧化活动被phosphomolybdenum复杂的形成根据评估方法(33]。约0.5毫升样品提取增加了3毫升的试剂溶液(0.6 M硫酸,28 mM磷酸钠,钼酸铵和4毫米)。遮满了试管箔和孵化在95°C水浴90分钟。样品冷却到室温后,混合物的吸光度为695 nm试剂空白。报告结果平均值表示为毫克AAE / g样本。
2.6。对彻底清除体外的试验
2.6.1。清除DPPH活动(2,2-Diphenyl-1-picryl Hydrazyl)
纯化多糖的DPPH-free自由基清除活性评估使用Q-sepharose阴离子交换色谱法,正如前面所描述的技术(29日,34用细微的修改。解决方案3毫升的0.1毫米methanolic DPPH准备的解决方案。相应的空白样品的底部钻具组合和L-ascorbic酸是由增加100μ克/毫升。样品的变色与适当的空白测定517海里孵化后30分钟30°C使用紫外可见分光光度计在黑暗中。样品的自由基清除活性计算使用以下方程: 在哪里一个1是控制和吸收一个2是样品的吸收。
2.6.2。氢氧自由基清除实验
海带多糖的能力对清除羟基自由基是评估使用芬顿反应(Fe2 ++ H2O2⟶菲3 ++哦−根据描述的修改方法[+哦)35]。甲醇提取物的蒸发瓶。反应混合物中含有1毫升(EDTA)解决方案,0.5毫升的EDTA(0.018%),和1毫升的DMSO (0.85% v / v 0.1磷酸盐缓冲剂,pH值7.4),和0.5毫升的抗坏血酸(0.22%)被添加到每个管。解决方案是在37°C孵化15分钟,和黄色的存在测量spectrophotometrically对空白样品在510海里。没有样本的混合物作为一个控制。清除活动计算由以下方程: 在哪里一个0是控制,一个1是样品的吸收一个2是没有水杨酸钠的吸收。
2.7。抗凝血活性
2.7.1。激活局部血栓形成质时间(APTT)
卡拉胶的分数,APTT计算使用修改后的版本的方法报道(36]。积极的和消极的控制是肝素的浓度5 g / mL w / v氯化钠和0.9%,分别。
2.7.2。凝血酶原时间(PT)
的方法37也用于确定PT,做了一些调整。设备也是程序执行同样的程序在APTT的决心。每个poor-platelet等离子体和卡拉胶溶液的混合物是孵化为3分钟37°C。然后,0.6毫升prewarmed PT添加试剂,血栓形成的时间也观察和重复三次。积极的和消极的控制,分别为肝素钠和氯化钠被利用。
2.8。分子对接
分子对接研究配体准备:卡拉胶结构从PubChem检索数据库(71597331)在一个三维结构文件(SDF)格式,而且,使用LigPrep模块结构优化薛定谔的大师(12.8 v)。OPLS4力场被应用,并获得了32个不同国家的立体异构现象(薛定谔释放2021 - 2:LigPrep,薛定谔,LLC纽约,纽约,2021)。
蛋白质的准备:我们需要评估抗氧化(2 c0d & 5 b6m),抗菌(1 jij & 2 xct),对硫酸多糖和抗凝(5 e8e)活动计算。蛋白质的三维结构从数据库检索的蛋白质数据库(PDB)。x射线晶体结构导入大师使用蛋白质制备向导,和这个模块有助于解决失踪的氢键,形成二硫键,和优化(薛定谔释放2021 - 2:蛋白质制备向导;薛定谔,Epik LLC,纽约,纽约,2021;影响,薛定谔,LLC,纽约,纽约;'薛定谔,LLC,纽约,纽约,2021)。
分子对接使用滑翔方案执行(配体对接)薛定谔套件。标准的精确对接方法应用和执行postdocking最小化和分析的结果造成观众薛定谔释放2021 - 2:滑翔,薛定谔,LLC纽约,纽约,2021年。
2.9。蚊子文化和杀灭幼虫的活动
埃及伊蚊收集蚊子幼虫从印度医学Research-Vector控制研究中心理事会印度泰米尔纳德邦马杜赖。蚊子幼虫被喂以研磨成粉的混合物包含3:1的比例狗饼干和啤酒酵母重复代在25 - 30°C。根据所使用的过程,成年蚊子被保持在标准环境条件下幼虫(38]。在这个过程中,对四龄幼虫死亡率进行了分析(22,39]。幼虫的影响的测试甲醇提取物对蚊子的幼虫从海藻中提取的埃及伊蚊涉及10毫克的样本在不同浓度为50,100,200,500μl . 20幼虫被添加到250毫升蒸馏水在一式三份,1毫升DMSO作为负控制H2o .死仔数,幼虫死亡的比例估计24和48 h后复制的风险。利润分析是用来计算平均LC50和信用证90年(致死浓度)值的副本。
2.10。统计分析
结果检查使用单向分析计算LC50,信用证90年,和95%的置信范围上的信心和较低的信心和标准方差值均值SD(方差分析)。星号( ,( ,和 )代表一个从控制显著差异( ,( ,和 )。
3所示。结果
卡拉胶的傅立叶变换红外光谱被孤立于红色海藻h . valentiae和卡拉胶的吸收带典型的波数之间的1000和3500厘米−1清楚地强调了官能团在所有的样品(图分析1、表1)。峰值为3457.74厘米−1与地伸展H-bonding振动显示醇类和酚类化合物。烷烃的存在揭示了相似的山峰在2349.36厘米−1。此外,观察到1687.22厘米−1被归因于烯烃。脂族胺有吸收峰位置在1187.22厘米−1确认- C≡C -。光谱观察1222.18厘米−1表示不对称拉伸的年代,硫酸的存在(40]。乐队在1222.18 - -1030.72厘米−1拉伸的切断归因于醇、羧酸、酯类和醚类。碳氢键伸展振动表示烷烃的存在之间的带1444.61厘米−1。3的C-O-C 6-anhydro-L-galactose振动被分配到的峰值920.72厘米−1。芳基碳氢键伸展振动所述峰值845.44厘米−1。最后一个峰值,似乎是650.30厘米−1有关- c≡碳氢键:碳氢键弯曲烷烃的存在。卡拉胶的核磁共振光谱提供了更多的结构表征,如图所示2分别和乐队赋值的样本h . valentiae多糖。NMR可以用来展示不同的角叉菜胶单元的存在。NMR谱也是一个复杂的聚合物质子信号从异头(78.30 ppm),和环碳(70.16 ppm)被分配到3,6 -α-L-anhydrogalactose。信号被分配的h - 75.02 ppm,被分配到的β-D-galactose联系α-L-galactose-6-sulfate。在102.86 ppm信号是归因于羧基β-D-galactose。
研究了卡拉胶的表面形貌的帮助下在接触模式下AFM测量。卡拉胶的AFM图像软模板和亮点(图所示3(一个))。此外,卡拉胶的地形可以观察到高峰和低谷分布在地表。除此之外,大量的变形形状更大尺寸还可以看到在卡拉胶的AFM图像(图3 (b))。AFM是重要来源检测的形态和大小角叉菜胶大分子来自0.0到0.7μm。卡拉胶粒子的平均高度从0.00到0.72不等μ米也指出。
(一)
(b)
甲醇提取物的抗菌活性是评价抗病原菌可能导致人类感染。的甲醇提取物h . valentiae抑制活动对E。粪,金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,和铜绿假单胞菌被确认。致病性细菌的抑制在不同浓度的甲醇提取物相比40毫克/毫升高抑制活动对四种致病菌中获得(图中所示的结果4)和表2,分别。甲醇提取物的抗菌潜力取决于渗透到细菌细胞的能力通过细菌的细胞壁。此外,甲醇提取了最低抑制细菌的影响对克+ ve应变而不是克−应变。因此,目前的研究,提取了高显著抗菌对革兰氏阴性细菌抑制活性比革兰氏阳性细菌。
(一)
(b)
(c)
(d)
甲醇提取物的antibiofilm活动h . valentiae研究了细菌对污渍基于潜力粪大肠克+ ve和铜绿假单胞菌克−ve细菌活动获得的结果见表3,分别。不同浓度的甲醇提取物(10年,20年,30、40、50μg / mL)进行了测试。最高的活动反对在50 antibiofilm活动(11.1±0.885μg / mL)甲醇提取记录粪大肠。在P。绿脓杆菌,生物膜活性的抑制率为14.3±0.979,50μ克/毫升甲醇提取物的浓度。抑制的百分比粪大肠活动影响甲醇提取显著高于铜绿假单胞菌。目前的研究调查的antibiofilm活动h . valentiae提取细菌活动对两种不同的菌株。
总抗氧化活性测定硫酸多糖的抗氧化能力进行评估h . valentiae提取物。角叉菜胶提取显示减少总抗氧化清除自由基活性(70.1±0.61%),享年250岁μ克/毫升浓度而不是在其他50 - 250的浓度μg / mL的展示活动。根据调查结果显示(表4),并注意到,卡拉胶被发现明显高于总抗氧化活性与L-ascorbic酸(87.22±0.80%)和底部钻具组合(81.99±0.75%)。反激进主义的分析是通过测量吸光度的DPPH自由基的抑制作用。海藻硫酸多糖的提取显示更高的抑制活性的自由基DPPH清除(65.74±0.58%)值为160μ克/毫升浓度而不是在其他的浓度。结果显示(表所示4),角叉菜胶潜在的自由基清除活性的化合物相比L-ascorbic酸(82.05±0.73%)和底部钻具组合(79.01±0.70%),证明有效的DPPH中和活动。
氢自由基清除实验被用来确定羟基(OH)的抑制自由基形成,和结果表明,硫酸多糖的清除活动显著增加浓度。卡拉胶的提取抑制过氧化氢清除活动哦,激进的(65.72±0.60%)在125年μ克/毫升浓度而不是其他浓度的25 - 125μg / mL的展出活动。此外,如表所示4相比,卡拉胶表现出明显高于氢氧自由基活动L-ascorbic酸(81.140.73%)和底部钻具组合(77.930.70%)。
抗凝剂的研究分析了活动的APTT、PT化验表明,卡拉胶的抗凝机制抑制等离子体凝结释放的常规阶段凝固过程中凝血时间(表5)。角叉菜胶表现出更高的抗凝活性APTT (106.50 IU 25μg / mL)相比,PT测试(57.86单位在25岁μg / mL)表示抑制作用的途径。
卡拉胶分子受到小分子(配体)对接,抗氧化剂目标选为线粒体2-cys酶类(2 c0d)恶性疟原虫和人类的酶类的晶体结构6 (5 b6m)。−7千卡每摩尔的对接评分结果表明强烈的亲和力在复杂的分子,和交互图的3 d和2 d图表示5。选为抗菌目标蛋白质金黄色葡萄球菌tyrosyl-t RNA合成酶(1 jij)金黄色葡萄球菌促旋酶拓扑异构酶ⅱ(2 xct)与小分子表现出强烈的亲和力的复杂分子绑定得分最少的−6.894千卡/摩尔和与他们的互动网站(图表示6)。针对抗氧化活性的植物化学的利用使用汽车码头工具导致−−6 3.3千卡/摩尔分数与有约束力在体外验证,在我们的例子中,这是显示为−7千卡每摩尔使用滑翔对接,薛定谔(41]。抗凝目标蛋白质的晶体结构被选为凝血酶(5 e8e)从人类对卡拉胶,呈现出氨基酸交互SER546形成氢键的NH -集团、PO4形成氢键与O -集团对接−6.639分。结构说明了2 d和3 d交互地图袋结合位点(图7、表6)。角叉菜胶提取h . valentiae被发现有最高的杀灭幼虫活动反对埃及伊蚊(LC50= 99.675μg / mL;信用证90年= 491。453 mg / L(如图所示)8、表7)。海藻类的杀灭幼虫活动的幼虫埃及伊蚊决心海藻幼虫死亡率的抑制效应。海藻是一种天然产品,特别是,卤代萜烯可能利用改进的新杀灭幼虫的化合物和其原型杀虫代理。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(一)
(b)
(c)
4所示。讨论
目前研究甲醇提取的h . valentiae检测率,抗氧化,抗菌,抗凝剂in-silico分子对接和杀灭幼虫活动属性。提取效果的化合物的一个重要参数是用于筛选生物活性物质从红色海藻富含次生代谢物,潜在的抗氧化剂,抗菌和抗凝活动(42]。傅立叶变换红外光谱是最重要的工具之一,多糖及其光谱作业的官能团。酒精的地伸展和苯酚分子内氢键的振动吸收峰位置在3457.74厘米−1(43]。的吸收峰,享年2349岁。36 - 1687.22厘米−1可归因于碳氢键伸展和- C≡C -拉伸烷烃官能团,这可能证实了polymer-bound水是红色的海带多糖的特征(44]。这些吸收带被描述为提高分子链运动的激活。此外,吸收峰在1222.18 - -1030.72厘米−1对应于作业的官能团。切断延伸醇、羧酸、酯类和醚类脂甘油三酸酯和脂肪酸(45]。吸收峰的位置在1444.61厘米−1可归因于碳氢键对称拉伸烷烃。另一个特征峰920.72厘米−1可归因于C-O-C拉伸3 6-anhydro-L-galactose存在高硫酸多糖(42]。吸收峰650.30厘米−1硫酸是归因于- c≡碳氢键:碳氢键组炔烃。1030.72厘米−1对应的高分子量骨架硫酸D-galactans和卡拉胶的乐队h . valentiae(46]。这些吸收的氧气、氮气和摘要组织确认的存在多酚化合物,多糖,蛋白质,初级和次级代谢产物。
NMR光谱法是一种高效的技术确定海带多糖的结构特点47]。最近的报告表明,NMR光谱用于观察不同的角叉菜胶组件的存在表明转换3,6 -α-L-anhydrogalactose单位到其alditol衍生品异头包含质子μ和ν卡拉胶(48]。先前的研究说明的发生β-D-galactospectroscopic官能团的硫酸化多糖糖残基,在遵循的三糖树枝细菌多糖(49,50]。总的来说,文献报道Gracilaria有尾目的结构特点进行了分析β-D-galactos联系α- l - galactose-6-sulfate甲基或丙酮酸分子取代卡拉胶多糖(47,51]。这些报告表明α糖苷的山峰在卡拉胶骨干部分破碎(52]。核磁共振光谱对认识到多糖的构象也有用。
AFM是单分子光谱技术检测形态学结构的构象的多糖在AFM图像提供了一个完美的观察分子组装。AFM提供可视化、农业等不同类型的硫酸多糖(53),黄原胶(54)、卡拉胶(55],xyloglucan [56),果胶(57),阿糖基木聚糖(58),和淀粉59]。先前的文学功能化的AFM基于许多基本的食物系统的目的卡拉胶多糖(48]。类似的报告已经确定了结构的高度范围的食物残渣49]。基于研究结果,卡拉胶的纤维高度从地形上类似于从红色海藻硫酸多糖提取44]。大多数的结果从AFM分析回顾了功能食品的大分子聚合物(60]。因此,AFM纳米结构多糖的特点从不同的食品。聚合物的构象识别许多环境条件控制温度(61年]。
卡拉胶的潜在抗菌活性多糖h . valentiae衍生品是评估影响微生物病原体的E。粪和年代。葡萄球菌(克+ ve)E。杆菌和P。绿脓杆菌(克−ve)生物。抗菌活性显示是强烈反对生物耐多药病原体金黄色葡萄球菌和大肠粪(52]。此外,许多报道描述了抗菌潜在使用海藻提取物对各种致病菌如“强烈的影响大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠粪。这些致病细菌活动增强的生物刺激素药用价值的提高薄荷和罗勒对细菌的抗菌活性62年]。之前的报告分析了对细菌的抗菌活性Spatoglossum asperum生物和医药有用有价值的药物(50]。高度的抗菌活动潜在的生物医学应用,如药物输送、伤口愈合和组织工程。抗菌功能可以改善快速愈合通过一个障碍对微生物污染(63年]。
在目前的研究中,h . valentiae测试对致病性菌株antibiofilm活动潜在的报告揭示了甲醇提取物抑制生物膜的形成。根据这些报告,我们已经确定了生物膜活性的抑制马尾藻属和Halimeda gracillis海藻活动对抗菌素的病原体和antibiofilm活动对各种临床重要病原微生物(64年]。之前的文献报道,生物膜活动可以应用在不同的医疗预防各种biofilm-related感染(65年]。目前使用的生物膜病原体环保金属防污剂(66年]。总的来说,结果表明重大antibiofilm的潜力石莼以microbiocidal不同微生物的影响导致生龋齿的生物膜的形成对环境。它有用的临床研究需要完全提高antibiofilm和机械性能的新产品67年]。
多糖的抗氧化潜力的各种自由基清除能力更高的提取多酚和类黄酮含量,和他们有优秀的抗氧化活性68年]。抗氧化活性多酚含量可溶性高分数是观察到的沉淀。多酚和黄酮类化合物的高效的清除羟基自由基(64年]。多糖的抗氧化活性,可以从活性氧保护人类系统影响膜脂质等大分子蛋白质和DNA,导致人体的许多功能障碍。在最近的研究中,酚醛高甲醇提取物的内容h . valentiae这对总抗氧化活性筛选250μ克/毫升浓度。最高的总抗氧化活性存在甲醇沉淀h . valentiae(70.1±0.61%)。之前的文献报道显示最高的总抗氧化活性分离多糖Turbinaria圆锥体(246.6毫克AscAE / g)Gracilaria丝状(353.3 AscAE毫克/克)浒苔泥蜂(326.6毫克AscAE / g) (27]。类似的结果报道最高的总抗氧化活性发生在提取硫酸多糖海藻tenerrimum(22.0±06)(69年]。同样,研究报告总水提物的抗氧化活性松藻属sp显示85.53±0.25%的活动(70年]。结果显示,总抗氧化活性的多糖符合最高的抑制甲醇提取物的红色海藻。DPPH自由基清除潜在的抗氧化活性筛选是由于氢捐赠能力。自由基清除活性显示在甲醇提取从一个更高的价值H。valentiae(65.74±0.58%)。根据结果,最高的清除能力在场ethanolic沉淀美国属(78.3±0.25%)[64年]。多糖的抗氧化活性提取Undaria pinnatifida显示的最高抑制过氧化氢检测能力(71年]。在我们的研究中,硫酸组激活的发生硫酸异头碳的氢原子通过内容来吸附抗氧化表现出的清除能力海藻thunbergii(72年]。相同的其他结果表明,硫酸多糖抑制这些激进分子的形成影响的提取物昆布属植物粳稻(73年]。
结果表明,展出氢氧自由基形成确定硫酸多糖的清除活性显著高于提取物h . valentiae(65.72±0.60%)。氢氧自由基的结果揭示了生物分子损伤包括蛋白质、脱氧核糖核酸,多不饱和脂肪酸在人体细胞膜。这些成本必须导致包括癌症在内的各种感染的扩张(Undaria pinnatifida)[71年]。之前的文献报道表明,藻类多糖的硫酸组各种抗氧化活性的生物活性自由基清除(海藻thunbergii)[72年]。这些结果表明硫酸含量的抗氧化活性羟基自由基清除能力的一个重要来源(20.]。
目前的调查继续甲醇提取抗凝活性筛选。抗凝活动评估APTT、PT测定显示高抑制凝血剂的可溶性分数。APTT、PT测定证明的卡拉胶凝血抗凝机制。的甲醇沉淀h . valentiae抑制高APTT (106.50 IU 25μ57.86 g / mL)和PT (IU 25μg / mL)。卡拉胶的抗凝房地产评估使用人类血浆从健康的捐赠者。APTT试验中发现的结果表明,卡拉胶有更高的凝固特性。卡拉胶的抗凝剂的主要来源属性似乎可以antithrombic活动(16]。硫酸多糖的抗凝剂通路显示潜力在传播凝固时间,为技术更可能为他们的应用程序在制药行业药品(74年]。雷皮dermatan硫酸DS显示更高的抗凝活性皮肤DS如图所示的APTT、PT抗凝药物的兴趣可能有用的治疗。报告表明,较高含量的硫酸集团提出更高的促凝剂性质(75年]。
硫酸多糖是异构的天然聚合物中发现大量的海藻与广泛的治疗应用程序由于其化学结构和组成。减少炎症的化学物质的识别的重要性,因为炎症在疾病中发挥作用。Antiinflammation活动已经确定使用各种方法。结果在体外实验中,一些衍生品的卡拉胶寡糖比卡拉胶寡糖有更好的抗氧化活性,表明卡拉胶寡糖的化学改性可以改善他们的抗氧化活性76年]。这些研究的调查显示明显的意义,以及合成复杂分子氨基酸与键长描述在表交互7。角叉菜胶被剥削与抗菌、抗病毒和抗癌活性。当前的研究观察到显著的交互卡拉胶与多个目标造成具约7−−6千卡每摩尔绑定分数(28,77年]。
甲醇提取物的蚊虫杀灭幼虫的活动h . valentiae被发现在杀灭幼虫的活动比控制最高埃及伊蚊(LC50= 99.675μg / mL;信用证90年= 491.453 mg / L)。目前的调查集中在杀灭幼虫功效的潜在影响的发展h . valentiae对埃及伊蚊。基于观察到的结果扇藻南极光(LC50= 82.55毫克/毫升),海藻binderi(LC50= 160.07毫克/毫升,羽藻属pennata(LC50= 192.43毫克/毫升),甲醇提取有效得多埃及伊蚊杀灭幼虫的活动。该报告提供了大量的信息使用不同海藻提取的影响埃及伊蚊(78年]。Gracilaria丝状文献综述了杀灭幼虫对幼虫活动按蚊stephensi更高的抑制LC50= 0.255867和信用证90年= 3.434589 mg / L (27]。当前的蚊子活动研究报告中肠上皮细胞的损伤和细胞收缩海藻治疗幼虫按蚊stephensi和埃及伊蚊这是(LC50:58.34;信用证90年:114.91)。海藻提取物来自陆地的应用芳香和药用价值(64年]。Halimeda macroloba已经在文献中报道在过去(信用证吗50-1119.0;信用证90年-1890.3)和类似的石莼以(LC50-952.9;信用证90年-1830.4)和Caulerpa racemosa(LC50-886.0;信用证90年-1790.1)(79年]。相同的报告显示的活动对杀灭幼虫的活动Hypnea muciformis和扇藻gymnospora(80年]。根据负责杀灭幼虫的行动,结果证明使用海藻提取物具有较高的潜在的蚊子控制策略。
5。结论
本研究的结果表明,硫酸盐含量高的自然角叉菜胶衍生品更彻底的清除抗氧化和抗菌性能。角叉菜胶从红色海藻也被证明在体外抗凝功能,确认其在凝血途径的明确的角色。然而,还需要更多的研究来证实,海藻有高mosquitocidal未来的活动。此外,卡拉胶是评估计算使用滑翔ligand-molecular对接和抗菌的多个目标,抗氧化剂,抗凝活性。得分最少的绑定的显式的强烈的复杂分子之间的亲和力。然而,我们的潜在候选人需要进一步验证在活的有机体内临床试验模型和扩展它。
数据可用性
在这项研究中提出的数据都可以在请求从相应的作者。
的利益冲突
作者特此声明,他们没有利益冲突。
作者的贡献
本文研究的帮助下完成了作者之间的协作。概念是由点,后来,和B.B.; writing of the original manuscript was conducted by K.P and B.B.; methodology, data curation, and formal analysis were performed by K.P., K.P., and V.M.; molecular docking, software, and revision were conducted by M.A.; review and editing were carried out by V.A.M., N.A.A., and V.A.A.; organization of the working groups was conducted by B.B.; interpretation and review/revision were conducted by W.C., V.A.A., B.B., and A.M. All authors revised and approved the final article. Balamuralikrishnan Balasubramanian contributed equally to this work.
确认
作者感谢各自机构的支持。此外,作者是感激的权威的国际遗传工程和生物技术中心(ICGEB),新德里,进行计算分析。