文摘

牛皮癣是一种自身免疫性炎症性疾病。疾病传播和诊断炎症介质和细胞的渗透到表皮。最近的理论发展都集中在诺司卡品的有效性(NOS)作为一个潜在的生物碱作为宝贵的治疗不同的疾病。在目前的研究中,psoriasis-like皮炎是诱导右边耳朵耳廓表面的男性Balb / c老鼠的局部应用咪喹莫特(IMQ)连续十天,这是对待诺司卡品(0.3,1,3,10% w / v)或氯倍他索0.05% (w / v)是一个积极的控制。耳的水平长度、厚度、严重的皮肤炎症,牛皮癣瘙痒,银屑病面积严重程度指数(PASI)得分,每日体重测量。在10^th天的研究,每只耳朵被追究炎症、纤维化,增殖,凋亡使用组织病理学(圆)和马森的三色的染色)和免疫组织化学(Ki67和p53染色)化验。此外,炎症生物标记物的水平表现为一个酶联免疫吸附试验(ELISA)。结果证实IMQ-induced牛皮癣连续五天。相比之下,诺司卡品显著降低耳朵长度、厚度、严重的皮肤炎症,牛皮癣瘙痒和体重,肿瘤坏死因子-α(肿瘤坏死因子-α)、转化生长因子-β(TGF -β)、移行细胞(IFN -γ)、白介素6 (il - 6)、IL-17和IL-23p19浓度的方式(P所有情况下< 0.001 - -0.05)。总的来说,局部诺司卡品显著改善牛皮癣的宏观和显微特征。然而,需要进一步的临床调查将影响到诊所。

1。介绍

炎症是由一系列事件定义一个感应阶段开始,进步最大的炎症,然后用一项决议结束阶段(1- - - - - -3]。急性炎症允许快速和完整的免疫激活,这是成功所必需的先天免疫防御(1- - - - - -4]。开始检测外源性和内源性表面受体引起的机械,化学,和生物诱导组织损伤,其次是招聘的效应细胞,也协调炎症反应由脂质和蛋白质炎症介质的释放5]。

牛皮癣是一种自身免疫性和慢性炎性疾病对重要的角化细胞的增殖和分化异常6]。炎症细胞的浸润及相关炎症介质特征的疾病导致严重到表皮血管系统的变化的真皮7]。患者通常描述身体表面的扩展,瘙痒,红斑,燃烧和出血的症状。这种疾病的发病率在全球范围内是由2 - 3%(世界上超过1.25亿人),这可能是最常见的自身免疫性皮肤病(8]。遗传和环境因素都是导致这种疾病(9]。在这方面,家庭历史一直在报道约30%的银屑病患者。这些病人也观察到多态性的基因调节血管生成和炎症(10,11]。的各种免疫细胞和表皮炎症和促炎细胞因子的生产加强在反恐领域的炎症和发展牛皮癣病变(12]。研究表明,CD4细胞⁺和CD8⁺t细胞在银屑病的发病机制发挥着基础性的作用,引发炎症,使炎症。

另一方面,t细胞在银屑病的重要作用已经被证明(13]。尽管这种疾病的确切发病机理尚未完全了解,越来越多的证据表明,白介素(IL) -23 / IL-17A对该病的发病机制产生重大影响。此外,一些研究已经证明,皮肤IL-17A生产的主要来源γδ通过刺激IL-23 - t细胞产生IL-17A [14]。许多炎性细胞因子,包括IL-23、IL-17A IL-20, il - 22生成时,摘要意思-β、白介素和肿瘤坏死因子-ɑ(肿瘤坏死因子-α),作为一个复杂的疾病发展(14]。咪喹莫特(IMQ), toll样受体的配体(通常)-7/8和强有力的免疫系统的激活剂,用于治疗生殖器和肛门疣(由人类乳头状瘤病毒引起的,人乳头状瘤病毒)选为牛皮癣实验设计(15,16]。在这方面,实验数据表明,IMQ导致人类皮炎类似于动物研究银屑病。这是证明IMQ用于治疗疣和角化病可以激活树突状细胞的活跃,等离子体树突细胞(髓样),自然杀伤(NK)细胞和T淋巴细胞产生干扰素(IFN)——炎症γ和IL-17 / IL-23分泌物(14]。实验验证该模型可能会为小说在牛皮癣病因治疗方法,目标上游过程(17]。由于使用这种药物在皮肤上的老鼠,它会导致髓的快速入口进入网站。事实上,这种药物的抗病毒和抗肿瘤活性主要由活化的tlr 7和TLR-8(表达的单核细胞、巨噬细胞和髓)(18]。尽管低剂量的甲氨蝶呤和其他建议每周用于治疗牛皮癣,很多这些药物不良反应报告,包括血液和胃肠道功能紊乱,如腹部不适、胃疼,恶心和呕吐,嗜睡19,20.]。因此,药物的使用,发现控制牛皮癣的严重程度与最少的副作用是一个优先考虑的治疗和缓解牛皮癣。

诺司卡品是一种苄基异喹啉生物碱,在黑暗的罂粟植物没有opioid-like不利影响(21- - - - - -23]。然而,据报道在多种肿瘤细胞抑制细胞增殖,甚至在许多耐药种类23- - - - - -25]。此外,诺司卡品已经证明是安全的和没有不良影响体液或细胞介导的免疫反应。连同其止咳药和antistroke影响,这些发现生成诺司卡品的兴趣建立其他角色。诺司卡品的药理学,以及它对细胞信号通路的影响,有丝分裂纺锤体,中心体聚集,以及它的使用作为一个抗疟药和止咳,及其特殊潜能作为治疗多囊卵巢综合症,中风,和各种恶性肿瘤,都详细(22,23]。此外,它已经表明,诺司卡品可以降低炎性细胞因子的水平,如2、TNF -α,il - 6不同在体外和在活的有机体内模型(22- - - - - -25]。因此,在这项研究中,我们试图评估局部管理的有效性诺司卡品IMQ-induced银屑病动物模型中与几个宏观(比如耳朵长度、厚度、严重的皮肤炎症,牛皮癣瘙痒,银屑病面积严重程度指数(PASI)得分,和体重),病理(苏木精和伊红,他走时,炎症和炎性细胞浸润的水平,和马森的三色的纤维化级别),免疫组织化学(ki - 67细胞增殖和p53的标记细胞凋亡的标志),和分子细胞因子的生产方法。

2。材料和方法

2.1。化学药品和试剂

诺司卡品粉(纯度99.5%)是分析品位和买FaranShimi®公司,哈马丹,伊朗。冷霜的商业等级和获得Farabi®公司,德黑兰,伊朗。除非另外注明,所有化学药品和试剂都从Sigma-Aldrich获得(圣路易斯,密苏里州,美国)。此外,5% w / w丙酸咪喹莫特乳膏补丁准备从Aldara梅达,瑞典。细胞因子的化学试剂特征和获得从eBioscience®公司(圣路易斯,密苏里州,美国)。酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒获得TNF -αTGF -β干扰素-γ、il - 10、il - 6、IL-17A IL-23p19。使用抗体进行免疫组织化学检查ki - 67蛋白(ZYTOMED)和p53蛋白(GenomeMe)基于设备的协议。

2.2。制备诺司卡品奶油

准备诺司卡品奶油的最低剂量(0.3% w / w), 300毫克的诺司卡品是光滑的2毫升的甘油,然后混合着冷霜,最后100 g的混合物。同样,进一步剂量的1%,3%和10% w / w诺司卡品奶油是用相同的方法和不同程度的诺司卡品。最后奶油有很好的稳定性和插图,是在一个光滑的一致性。

2.3。畜牧业和伦理语句

42男性天生的Balb / c老鼠(重达25.2±4.6 g)从医学院获得动物实验室、马什哈德大学医学科学,马什哈德,伊朗,然后随机分为六组的研究(n= 7 /组)。动物被关在笼子里在22±1°C和温度条件19-26°C,相对湿度70 - 70%,300勒克斯的光强度和接触12光/暗周期。所有的动物都可以免费获得食物和自来水。三个或四个每个笼子里的老鼠被安置在更好的条件下,测量了206×365×140毫米。此外,老鼠在研究开始前一周服水土。事实上,所有动物程序进行了符合美国国立卫生研究院的实验动物的使用和护理指导方针的机构的指导方针。此外,马什哈德大学医学伦理委员会批准了所有程序涉及动物基于动物实验和护理的政策(伦理批准代码:990587,批准日期:2020-09-07,批准ID: IR.MUMS.MEDICAL.REC.1399.463)。

2.4。牛皮癣归纳和实验协议

从第一天,诱发牛皮癣一定数量的5% w / w IMQ奶油(10毫克/厘米²皮肤)是用于在每组小鼠的右耳耳廓。日常照片拍摄记录改变皮肤损伤和PASI评分得分基于炎症、厚度、和发红的老鼠的耳朵耳廓。剂量的药物和治疗被用于十天。Balb / c老鼠分组如下。组我:假针灸组,每天局部冷霜应用程序作为车辆在右边耳朵耳廓。第二组:阴性对照组,收到5%的每日局部剂量IMQ奶油(10毫克/厘米²右耳耳廓上的皮肤)(左耳朵耳廓未经处理的内部控制),30分钟后收到每日局部冷霜,车辆,右边耳朵耳廓。第三组:积极组织,获得5%的每日局部剂量IMQ奶油右边耳朵耳廓(左耳朵耳廓未经处理的内部控制),30分钟后收到每日外用氯倍他索乳膏(0.05% w / w)在右边耳朵耳廓。第四组:NOS 0.3% w / w,收到5%的每日局部剂量IMQ奶油右边耳朵耳廓(左耳朵耳廓未经处理的内部控制),30分钟后收到了每日外用0.3% w / w诺司卡品奶油右边耳朵耳廓。V组:NOS 1% w / w,收到5%的每日局部剂量IMQ奶油右边耳朵耳廓(左耳朵耳廓未经处理的内部控制),30分钟后收到了每日外用1% w / w诺司卡品奶油右边耳朵耳廓。第六组:NOS 3% w / w,收到5%的每日局部剂量IMQ奶油右边耳朵耳廓(左耳朵耳廓未经处理的内部控制),30分钟后收到了每日外用3% w / w诺司卡品奶油右边耳朵耳廓。第七组:NOS 10% w / w,收到5%的每日局部剂量IMQ奶油右边耳朵耳廓(左耳朵耳廓未经处理的内部控制),30分钟后收到了每日外用10% w / w诺司卡品奶油右边耳朵耳廓。

所有剂量计算的基础上,初步研究的三倍增加剂量。实验过程的说明如表所示1。

2.5。评分严重的皮肤炎症

红斑的水平、厚度和缩放折磨耳朵耳廓表面被用来计算帕斯(银屑病面积和严重程度指数)的分数。四点量表,为每个老鼠帕斯计算(0 =没有;1 =轻微;2 =温和;3 =标记;4 =非常明显)。总分是衡量综合得分(缩放、红斑和厚度)。耳朵厚度和耳朵每天在两只耳朵长度测量与数字卡钳(BEC,中国)。这些因素的标准表皮生长和炎症的数量是衡量耳朵厚度的增加和炎症(26]。

2.6。行为测试IMQ-Induced银屑病发痒

小鼠适应舞台有机玻璃录音两次每次60分钟前被测试。此外,老鼠从上面记录60分钟后两个小时每个局部管理。快得抓布特被描述为一个或反复后爪运动旨在和触摸治疗区域,最后在脚趾舔或咬或种植后的爪子在地板上。梳理动作和后爪运动直接远离治疗区域(如耳挠)都没有算(27]。

2.7。评估小鼠的脾脏、耳朵和体重

的研究中,动物被牺牲,和组织解剖和保持在−70°C。这样,每个小鼠的脾脏和耳朵被孤立,称重,然后拍照,并存储在一个冰箱−70°C或10% v / v福尔马林做进一步检查。此外,脾脏和耳朵指数计算除以脾脏的重量或耳朵的老鼠的体重鼠标最后一天。

2.8。组织病理学检查

右耳耳廓被选为组织样本,然后在v / v neutral-buffered 10%福尔马林固定。样本分别放置在10% v / v Falcon-tube福尔马林,交付给病理学实验室。样本沉浸在石蜡块最后的厚度减少4μm。苏木精和伊红(圆),评估炎症和炎性细胞浸润水平)和马森的三色的(评估纤维化级别)染色为每个样本被认为是使用数码相机拍摄显微镜(28- - - - - -30.]。耳朵被认为是他走时,马森的三色的染色。

此外,脾脏和颈脊髓(同样的)也选择)染色的调查,包括炎症和细胞的渗透。用数码相机拍摄彩色组织显微镜(尼康,Eclipse E200)。耳朵耳廓的病理变化的各种组织包括:棘皮症,角化不全,增厚的皮下层。这些因素评价方法在清廉(0 =没有临床症状或改变,1 =局部炎症,2 =轻微炎症和组织损伤小鼠,3 =增加水平的炎症和组织破坏的右耳耳廓,脊髓和脾脏白细胞增加,4 =低增加表皮厚度和炎症,5 =中度炎症,耳朵耳廓厚度、和低角化不全6 =中度炎症,温和的耳朵耳廓厚度、表皮角化不全7 =增加炎症,耳朵耳廓厚度、表皮角化不全,和低分数的表皮增生8 =耳朵耳廓厚度和炎症,显著的区域坏死细胞液泡化,表皮角化不全,9 =耳朵耳廓厚度和炎症,角化不全的表皮层,10 =最大的炎症,炎症浸润和增加表皮增生和棘皮症)(26,31日]。

2.9。免疫组织化学检查

免疫组织化学(包含IHC) [32)的方法检测特异性抗原的组织,细胞,或特定阶段的细胞生命周期基于抗原抗体检测使用光学显微镜(33]。在目前的研究中,我们执行包含IHC检测ki - 67细胞增殖的一个标志和p53的标记细胞凋亡在右耳耳廓基于包的手册(32,33]。IHC-P协议的基本步骤如下:(1)修复和嵌入组织,(2)切割和安装部分,(3)deparaffinizing和补水的部分,(4)抗原检索,免疫组化染色(5),(6)对比染色(如果需要),(7)脱水和稳定安装介质,和(8)在显微镜下观察染色。这些因素是清廉的半定量的缩放(0 =没有改变从未经处理的耳朵到10 =最大)。

2.10。血清总蛋白测定方法

布拉德福德的蛋白质测定进行了量化每个样本中总蛋白浓度(2,3,34,35]。在这方面,首先,考马斯亮蓝g - 250染料(10毫克)溶解在50毫升乙醇96%。然后,磷酸85% v / v(10毫升)补充道,和溶液的体积增加到100毫升。此后,牛血清白蛋白(4毫克/毫升)的解决方案是准备作为标准曲线。之后,样本(20μ布拉德福德试剂(200 l)μl)添加到96孔酶标。最后,光吸收在595 nm标读5分钟后(2,3,28,35]。

2.11。细胞因子评估

老鼠的右耳耳廓切除并将其保持在−70°C评估皮肤组织中细胞因子的测量。皮肤是均质在4°C组织蛋白裂解缓冲。选择后,浮在表面的肿瘤坏死因子等细胞因子的浓度测量αTGF -β干扰素-γ、il - 10、il - 6、IL-17A IL-23p19。ELISA根据制造商的指示执行基于包的协议(2,3,28,35]。

2.12。统计分析

数据分析使用GraphPad棱镜®软件版本8 (GraphPad软件,圣地亚哥,CA),提出了基于参数或非参数的性质意味着±SD或中位数±范围(病理评分,包括棘皮症,角化不全,增厚的皮下,组织学评分),分别。正常测试参数数据,基于Kolmogorov-Smirnov和Bartlett的测试来评估方差的同质性。此后,对比组使用双向方差分析(方差分析),后跟一个Sidak的多重比较事后测试。重复测量双向方差分析是用以下Dunnett-T完成的₃多重比较事后临床测试的分数。分析了非参数数据利用克鲁斯卡尔-沃利斯和邓恩的事后多重比较测试。Brown-Forsythe测试也使用如果SD的平等不平等和统计测试组差异的基础上执行一个方差分析。值得注意的,当P值(P)≤0.05,0.01,和0.001被认为是统计学意义(2,3,28,35]。数据和统计分析符合实验设计上的建议,分析和数据共享,并表示在临床前药理学(36- - - - - -38]。的摘要统计分析如表所示2。

3所示。结果

3.1。诺司卡品对耳朵的影响厚度、红斑、鳞屑,和耳朵的长度

右耳耳廓的老鼠显示症状的红斑,缩放和增稠后几天开始IMQ政府(图1)。IMQ组(II), psoriasis-like症状的严重程度稳步上升,直到一天十比虚假的集团(数据1和2)。

我们的研究结果表明,IMQ 5%应用显著增加耳朵厚度比虚假的集团(P< 0.001,图2(一个))。相比之下,所有浓度的NOS (0.3, 1, 3, 10% w / w)显著和concentration-dependently减少了耳朵的厚度相比IMQ-treated单独组(P所有情况下< 0.001)。此外,厚度减少的趋势观察治疗组从第七天为0.3,1,3% w / w诺司卡品浓度(P< 0.001为所有的情况下,图2(一个)从第六天)和NOS 10% w / w (P< 0.001,图2(一个))。

结果还显示一个向上的趋势在所有组炎症和发红,第五天的牛皮癣归纳。这项研究表明,所有NOS含量减少的影响的红斑IMQ-treated相比单独组(P< 0.001为所有的情况下,图2 (b))。

尺度(0 - 4)表示焦点发炎和杰出的斑块的形成不同的群体由于皮肤上皮细胞的增生。得分范围从0到4是基于每个鼠标的红斑,缩放和增厚。我们的研究结果表明,不同浓度的应用NOS (0.3, 1, 3, 10% w / w)显著降低规模范围从第八天相比对照组(P< 0.001为所有的情况下,图2 (c))。然而,NOS 3% w / w (2.429±0.202,P< 0.001,图2 (c))和NOS 10% w / w (2.143±0.143,P< 0.001,图2 (c))显著减少的影响尺度从第七天治疗组(图2 (c))。

此外,我们的研究结果还表明,对照组收到IMQ的总分显著增加而虚假的集团(P< 0.001,图2 (d))。相反,不同浓度的应用NOS (0.3, 1, 3, 10% w / w)和克罗也明显减少了总分从第八天相比对照组(P< 0.001为所有的情况下,图2 (d))。

结果显示显著增加穗长在使用IMQ比虚假的集团(P< 0.001,图2 (e))。相比之下,不同浓度的应用NOS (0.3, 1, 3, 10% w / w)显著减毒的穗长第八天相比对照组(P< 0.001为所有的情况下,图2 (e))。

3.2。诺司卡品脾和体重的影响

结果表明,IMQ 5% w / w耳朵导致显著增加的体重比虚假的集团(P< 0.001,图3(一个))。然而,不同浓度的NOS(1、3和10% w / w)有意义和concentration-dependently减少了体重较对照组升高(P< 0.001到0.05在所有情况下,图3(一个))。

应用IMQ 5% w / w耳朵导致显著提升脾脏重量比虚假的集团(P< 0.001,图3 (b))。使用每个Clo (P< 0.05),号1% w / w (P< 0.01),号1% w / w (P< 0.001),号3% w / w (P< 0.001),或者NOS 10% w / w (P< 0.001)明显降低了提升脾脏重量与对照组相比(图3 (b))。

耳朵(图3 (c)(图)和脾脏3 (d))指标计算净重除以每一个受人尊敬的器官的体重。因此,两个耳朵(P< 0.001,图3 (c))、脾(P< 0.001,图3 (d))指数增加IMQ对照组相比虚假的组。实验,使用每个Clo或NOS (0.3, 1, 3, 10% w / w)明显降低了高架耳朵(P-0.01 < 0.001所有情况下,图3 (c))、脾(P< 0.001为所有的情况下,图3 (d))指数与对照组相比。

此外,图3 (e)每组代表脾的长度,包括:阴性对照组,B:积极组织,C:样本组IMQ加上0.3% w / w NOS, D:样本组IMQ加上1% w / w NOS, E:样本组IMQ加上3% w / w NOS, F:样本组IMQ加上10% w / w。此外,人物3 (f)显示脾正常的白髓和红髓异常在不同的组。

3.3。诺司卡品在抓挠行为的影响

自发的划痕发作不断IMQ-treated老鼠比在控制动物和稳步上升随着时间的推移而虚假的组(P< 0.001,图4(一))。瘙痒的速度组接收IMQ大幅增加,而这种速度显著增加两到五天,直到第五天在其最大的牛皮癣感应(图4(一))。在治疗明显减少瘙痒观察小鼠从第七天剂量的1% w / w (255.7±5.2), 3% w / w(248.5±4.5),和10% w / w NOS (196.2±29.2) (P< 0.001为所有的情况下,图4(一))。)染色脊髓部分显示标记与液泡化的细胞坏死的区域(图4 (b))。

3.4。诺司卡品对细胞因子的浓度的影响

ELISA分析被用来评估炎性细胞因子、炎症的必需品耳组织正常,IMQ-received, NOS治疗组。入耳式的皮肤样本IMQ-received老鼠,TNF水平α介导的细胞因子,特别是TGF -β、白介素、干扰素-γ、IL-17 IL-23p19,大大增加比虚假的集团(P< 0.001的所有情况下,数字5(一个)- - - - - -5 (h))。相比之下,不同浓度的NOS(1、3和10% w / w)显著和concentration-dependently TNF -有所下降αTGF -β干扰素-γ、白介素、干扰素-γ/ il - 10, IL-17A IL-23p19也增加了il - 10表达相比,对照组(P-0.05 < 0.001所有情况下,数字5(一个)- - - - - -5 (h))。

3.5。诺司卡品的影响在组织病理学检查

他走时,马森的三色的染色(数字6(一)和6 (b)为每个样本)的组织染色和数码相机拍摄显微镜(尼康,Eclipse E200)。染色片IMQ-treated右耳耳廓决心与表型的发现和PASI评分值。病理变化的各种组的耳朵耳廓棘皮症(图6 (c)),角化不全(图6 (d)(图)和增厚的皮下层6 (e))。这些因素进行半定量的清廉的规模(0 =从未经处理的耳朵没有变化;10 =最大)。

IMQ-treated老鼠的耳朵耳廓部分显示大幅增强棘皮症(P< 0.001,图6 (c))、角化不全(P< 0.001,图6 (d))和增厚的皮下层(P< 0.001,图6 (e))相比,对照组(数据6(一)和6 (b))。研究结果还表明,应用NOS (0.3, 1, 3, 10% w / w),或Clo显著降低棘皮症(P-0.01 < 0.001所有情况下,图6 (c)),角化不全(P-0.01 < 0.001所有情况下,图6 (d)),增厚的皮下层(P< 0.001为所有的情况下,图6 (e))与对照组相比。

3.6。诺司卡品的效果免疫组织化学检查

执行(包含IHC)免疫组织化学染色检测p53的标记细胞凋亡(图7(一))和ki - 67细胞增殖标记(图7 (b)基于光学显微镜的工具包的协议。积极提出了p53在皮下层被棕色的表皮细胞的细胞核。此外,积极ki - 67所示表皮和被棕色的表皮细胞的细胞核。此外,图7 (c)提出一个组织病理学评分检查组织的半定量的清廉的规模(0 =从未经处理的耳朵没有变化;10 =最大治疗耳朵的变化)。在这方面,我们发现组织学评分显著增加IMQ-control组相比,虚假的集团(P< 0.001,图7 (c))。相比之下,申请号(0.3,1,3,10% w / w)或Clo显著降低组织学评分较对照组(P< 0.001为所有的情况下,图7 (c))。

4所示。讨论

我们所知,这是第一个研究,评估了诺司卡品反对IMQ-induced鼠标模型的保护作用。结果,我们发现诺司卡品concentration-dependently并显著降低炎症和银屑病表现IMQ通过降低耳厚度和长度和调节细胞凋亡(p53)和细胞增殖(ki - 67)的因素。

因为牛皮癣患者的瘙痒症的患病率一直报道是60% - -90%,很多牛皮癣患者认为瘙痒是最恼人的症状(39,40),本研究也检查和显示显著的疗效结果诺司卡品的瘙痒IMQ诱导模型。符合目前的调查,大量研究评估银屑病患者的瘙痒症的患病率。不过,一般来说,只有集中治疗分子信号调查可以缓解瘙痒与牛皮癣有关(41]。牛皮癣是一种慢性炎症和自身免疫性疾病中上皮细胞增殖增加相对于正常皮肤(42]。甲氨蝶呤和氯倍他索对细胞增殖的影响(43),这些药物对免疫系统的影响,证明这些药物的有效性,在这期间有些病人可能是敏感的疾病长期治疗(44]。诺司卡品作为一个古老的药物具有重要的临床效果,包括止咳药属性和细胞增殖。因此,我们试图评估的有效性局部银屑病动物模型中的诺司卡品管理。这项研究的结果后,可以继续研究在人类阶段(45]。

结果表明,减少厚度和皮肤炎症发生在第七天诺司卡品的浓度。事实上,我们发现诺司卡品也可以减少纤维化和炎症的耳朵通过减少炎症介质(TNF -αTGF -β干扰素-γ、il - 6、IL-17 IL-23p19),增加il - 10是一种抗炎细胞因子,调节细胞凋亡(p53)和细胞增殖(ki - 67)的因素。目前的研究结果与其他研究结果一致,表明辣椒素显著地抑制皮肤炎症(局部管理46]。这个厚度的减少并没有显著的积极的对照组接受氯倍他索的第六天治疗,表明诺司卡品的局部形式的优越性在氯倍他索的应用程序。姜黄素的疗效也获得了类似的调查结果从6天的治疗在减少炎症和皮肤厚度psoriasis-induced老鼠(47]。

大量研究报道诺司卡品的强有力的和显著的抗氧化活性23,48在减少NF -]κB表达,导致细胞因子减少生产的t细胞(23,49,50]。目前,我们表明,诺司卡品显著抑制肿瘤坏死因子等炎性介质产品-α或干扰素γ。我们的证据表明,诺司卡品具有较高的抗氧化活性和大幅减少肿瘤坏死因子的转录-α信号指示,导致t细胞细胞因子的减少生产。结果表明,肿瘤坏死因子-α介导的细胞因子,TGF -β白介素、干扰素γ大大减少了诺司卡品治疗组比阳性对照组。我们的结果与先前的研究一致,指出诺司卡品的抗炎作用,主要是通过调节NF -κB信号通路在化疗药物23,51]。因此,诺司卡品治疗可以打动炎性细胞释放的细胞因子由于环境压力和压力激发了蛋白激酶(52]。在这方面,类似的研究表明,TLR-mediated TNF -α和一氧化氮(NO)在人类和小鼠巨噬细胞被抑制的生产溴化诺司卡品类似物(Br-nos和Red-Br-nos)细胞损伤的没有迹象表明(23]。溴化诺司卡品类似物也减少全身的细胞因子/趋化因子(non-TLR配体)无菌炎症(23,53]。

据报道,il - 10生产疗效一样常见anti-psoriatic治疗在一些细胞类型(54]。在这种背景下,目前的研究结果表明,治疗所有浓度的诺司卡品除了0.3% NOS增加il - 10的水平。此外,目前的研究结果表明高浓度的诺司卡品的有效性(10% w / w)在调节促炎细胞因子的表达。虽然确切的机制和信号通路在减少这些细胞因子还不确定的23,54),我们认为诺司卡品的抗增殖和抗炎作用通过抑制肿瘤坏死因子-行动α/干扰素γ,从而导致更严重的炎症和角化细胞增殖。这些发现与之前的研究不一致,Wannachawee配方的anti-psoriatic影响显著抑制肿瘤坏死因子-α和干扰素γ刺激IL-17A、il - 22生成和IL-23 HaCaT细胞分泌(26]。虽然诺司卡品的特定抗炎信号通路在牛皮癣感应是未定义的,根据目前的研究结果,我们建议诺司卡品的抗增殖和抗炎效应通过抑制肿瘤坏死因子-运营α/干扰素γ/ IL-23。

总之,尽管这次调查,能够很好的证明,诺司卡品可以被视为一个牛皮癣疾病和治疗药物的临床试验研究中被广泛评价。图8显示一个图形抽象的过程和可能的保护机制对IMQ-induced NOS psoriasis-like皮肤病变。

缩写

H和E:	苏木精和伊红
干扰素-γ:	干扰素-γ
il - 10:	白介素10
IL-17:	白介素17
IL-23p19:	白介素23 p19
il - 6:	白介素- 6
IMQ:	咪喹莫特
号:	诺司卡品
帕斯:	银屑病面积和严重程度指数
髓样:	血浆树突细胞
TGF -β:	转化生长因子-β
TLR:	toll样受体
肿瘤坏死因子-α:	肿瘤坏死因子-α。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从第一作者(F.N:行情)在合理的请求。

伦理批准

这项研究是在遵守道德标准进行的

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

的结果本文提出了从博士生项目和研究协议(990587年),由校长为研究财务支持,马什哈德大学医学科学、马什哈德、伊朗。