促进头发生长的影响Nelumbinis精液中提取抗氧化活性高

文摘

本研究调查了头发再生促进和预防脱发Nelumbinis精液(NS)提取的属性在体外和在活的有机体内。NS的影响在人类毛乳头细胞的增殖和迁移(hDPCs)测量在体外通过CCK-8和划痕迁移化验,之后NS也是量化的抗氧化活性。NS提取物被应用到后面7-week-old C57BL / 6小鼠3周监控头发生长模式和毛囊(高频)组织学。老鼠被分为三组:阴性对照组(NC);DMSO)、阳性对照组(电脑;3%米诺地尔)和实验组(NS提取1000 ppm)。此外,研究NS提取再生头发生长的分子机制,实时PCR用于分析因素与头发生长周期。NS提取被发现具有高的抗氧化性能由于其高黄酮含量和电子基的能力。此外,NS提取物浓度的方式增强hDPC扩散和迁移(15.63 -125 ppm)。的头发生长指数和增长领域NS组(2.81分,81%)14天是高于PC组(2.65分,68%)( )。此外,NS组的HFs中位于皮下组织深处,类似于PC组与发达的头发根。此外,mRNA表达VEGF和igf - 1高NS组PC组相比,而TGF -β1表达较低( )。我们的发现表明NS调节头发生长通过增加igf - 1和VEGF的表达而抑制TGF -β1。因此,我们的研究结果表明,NS提取物是一种很有前途的新脱发治疗源自天然物质,帮助促进头发的生长,防止脱发。

1。介绍

脱发是一种疾病,其特征是渐进性脱发的头皮和身体的其他部位。最近,有一个在全民脱发情况下迅速崛起。这是由于遗传因素,以及增加压力,改变饮食结构,与荷尔蒙相关的问题(1,2]。据韩国国家健康保险服务的发病率统计,患者治疗斑秃的数量比136248年增加了24.9%(男:69280;女:66968)到2010年的170149(男:92759;女:77390)2018年(3]。脱发的类型主要分为以下几类:雄性遗传脱发(AGA),女性型脱发(FPHL),斑秃(AA),产后休止期脱发,休止期脱发,和牵引性脱发4]。

目前,非那雄胺和米诺地尔是唯一药物食品和药物管理局(FDA)批准的预防脱发和促进头发的生长。非那雄胺是改善AGA通过抑制5的活动α还原酶II;,从而抑制睾酮(T)的转换,二氢睾酮(DHT)。另一方面,米诺地尔是一种血管舒张,增强头发的生长通过抑制hDPC凋亡[5,6]。然而,这些fda批准的药物与几个副作用包括勃起功能障碍、不孕、过敏性皮炎。因此,研究和开发新型治疗药物能够预防脱发和增强头发的生长是必要的。此外,这些努力应特别关注天然产品,这可能导致更少的或严重的副作用更少。

hDPCs,参与头发生长周期,位于底部的HFs和被包装的头发基质细胞。头发生长可以通过控制核扩散,监管部门和凋亡hDPCs通过活动的增长和抑制因素,如胰岛素样生长因子- 1 (igf - 1)、血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子-β1 (TGF -β1)。igf - 1被认为是代表头发生长因子,促进上皮细胞增殖和显著增加高频组织的长度7]。重要的是,这个因素也抑制毛发生长初期生长中期过渡(8]。VEGF是另一个因素,导致头发根部细胞的生长和分化,改善血液循环,增强血管内皮生长8,9]。因此,VEGF可防止脱发通过增加高频大小和头发厚度(10,11]。相反,TGF -β1导致毛囊矩阵的凋亡细胞,迅速进入生长期脱发。此外,不完整的毛囊再生导致生长期生长中期过渡,减少高频大小,导致薄和短头发12,13]。

Nelumbinis精液被删除的果皮干燥成熟的莲子。在中国,NS一直认为(即。,since ancient times) as an effective therapeutic agent due to its beneficial effects on the spleen, kidney, heart, and eyes [14]。根据最近的一项研究中,NS富含蛋白质,矿物质,和不饱和脂肪酸,以及提高人类健康的各种生物活性化合物如生物碱和黄酮类化合物。因此,NS是广泛用于食品和医药行业14,15]。NS主要用于治疗神经系统疾病,失眠,和postmenstrual抑郁症在妇女和报道抗病毒特性,以及肝保护剂,抗氧化,提高记忆力、抗炎作用16- - - - - -18]。

氧化应激是脱发的主要原因之一19]。以前的研究已经证明,天然植物抗氧化剂可以降低氧化应激(20.],NS被发现拥有强有力的抗氧化性能(14,15]。因此,我们假设NS将有效促进头发再生,防止脱发。一些研究正在评估NS提取的营养特性;但是,没有先前的研究系统NS的影响特征提取的头发生长周期。因此,我们的研究试图(1)评估NS提取hDPCs增殖和迁移的影响在体外和(2)描述NS促进头发生长的特性在活的有机体内使用C57BL / 6小鼠。此外,NS提取诱发毛发再生的分子机制进行评估通过测量各种头发生长-细胞因子的表达。

2。材料和方法

2.1。制备NS提取

NS提取从韩国购买植物提取物在韩国研究所生物科学和生物技术(大田、韩国)。甲醇(50%)是作为样品的提取溶剂,并溶解在二甲亚砜(DMSO)。

2.2。NS提取物的抗氧化活性

使用Folin-Ciocalteu总多酚含量测定的方法21]。简单地说,40μl (NS提取准备以50%甲醇浓度为0.2毫克/毫升是混合了50μl Folin-Ciocalteu的酚,然后添加到160年μl 10%的碳酸钠溶液在室温下3分钟后。混合物在室温下保持30分钟,之后吸光度测量在700 nm使用7315紫外分光光度计(JENWAY,斯塔福德郡,英国)。总多酚含量表示为毫克的没食子酸(GAE) / g。

确定总类黄酮含量,0.5毫升0.2毫克/毫升的溶解在ethanolic NS提取混合5毫升的二甘醇(Duksan纯化学物质、安山、韩国)。5分钟后在室温下,混合添加到0.5毫升1 n氢氧化钠(Duksan纯化学物质、安山、韩国)和孵化1小时37°C水浴。吸光度测量在420 nm使用7315紫外分光光度计(JENWAY,斯塔福德郡,英国)。总类黄酮含量表示为毫克的柚皮苷(东京透Kogyo有限公司,东京,日本)(NE) / g。

NS提取的DPPH清除活动评估是由布洛瓦(描述22),做了一些调整。短暂,0.5毫升的NS提取物稀释至0.2毫克/毫升是混合了3毫升的0.2毫米methanolic DPPH的解决方案。20分钟后在黑暗中在室温条件下,混合物的吸光度为517 nm使用7315紫外分光光度计(JENWAY,斯塔福德郡,英国)。电子基的能力(EDA)计算描述如下:

2.3。细胞培养

hDPCs获得细胞工程的起源(CEFO生物,首尔,韩国)。细胞生长在杜尔贝科的修改鹰的介质(DMEM) 1%的抗生素和10%胎牛血清的边后卫在37°C公司5%₂湿润的气氛。

2.4。CCK-8化验

CCK-8分析是用于确定细胞增殖。3×10 hDPCs被播种³细胞/密度在96孔酶标24 h公司5%₂和37°c . NS提取是7个不同稀释浓度(3.91,7.81,15.63,31.52,62.5,125,和250 ppm),细胞被允许增加10μ每个NS的l浓度24 h,描述在几个以前的脱发研究[10,23,24]。DMEM培养基,米诺地尔,特里同x - 100(σ)作为负控制(数控),积极控制(PC),分别和空白。板是治疗24 h公司5%₂和37°然后,10μl CCK-8解决方案(西格玛奥德里奇,圣路易斯,密苏里州,美国)被添加到每个好,和细胞培养4 h 37°c .吸光度测量在450 nm波长(测试)和650 nm(参考波长),微型板块分光光度计(美国时代多卷分光光度计系统、BioTek VT)。测量吸光度被用来确定细胞增殖如下:

2.5。抓迁移分析

开始迁移进行了分析中描述的一项研究[25]。4×10 hDPCs被播种⁴cell /密度在6-well盘子和增长到90%的融合DMEM包含10%的边后卫和1%青霉素。这些细胞被挠200年在一条直线μl吸管小费。细胞碎片被洗涤了杜尔贝科的磷酸盐(DPBS)。hDPCs是对待DMEM (NC -控制),米诺地尔10μM (PC,积极控制),15.63,31.25,62.5,125 ppm的NS提取物。孵化后24 h,划痕宽度的拍摄使用光学显微镜(徕卡DM500,位于德国)(40 x放大)。

2.6。实验动物

雄性C57BL / 6小鼠(还是)购买Dae-Han Biolink有限公司(Eumsung,来自韩国忠北韩)被允许适应为3周。老鼠被安置在笼子里23岁±1°C和55±5%的湿度,12 h光明与黑暗周期和免费的食物和水。所有实验协议遵循准则建立了实验室的管理和处理动物和被批准的机构Chung-Ang大学动物伦理委员会,韩国(登记号201900112)。21岁的老鼠(n= 7 /组)被随机分配到DMSO (NC) Nelumbinis精液(NS)提取物,3%米诺地尔(PC)治疗组。老鼠的背上刮动物快船队在7周的年龄。200年之后,μl DMSO, 200μl (NS提取(1000 ppm),或3%米诺地尔是日常管理的背侧皮肤使用刷3周,先前的研究中描述(23,24,26]。在21天,小鼠麻醉通过腹腔内注射1.2%的三溴乙醇获得背皮肤样品。

2.7。头发生长评价得分为每个分数和相对面积

比较每组毛发生长影响,背侧皮肤的照片用数码相机获得的老鼠在脱毛后的第14天。头发生长指数量化使用ImageJ程序(美国贝塞斯达对称破坏软件)。头发分数分为4个级别根据不同的背侧皮肤颜色的老鼠从0到3。得分为0表示没有头发的生长与粉色的皮肤颜色,1分表示,皮肤颜色是灰色,2分表示一些头发生长的外观(深灰色的肤色),3分表示头发完全生长(黑皮肤的颜色)。头发生长指数计算使用方程(3)通过测量头发生长的面积比面积,和面积比之和乘以每组的平均得分是(27]。因此,头发生长指数的最小值是0,最大值是3:

2.8。组织学分析

观察组织学改变NS提取应用程序后,组织与苏木精和伊红染色())。小鼠背部皮肤组织与中性10%福尔马林固定和嵌入在石蜡块使用组织Tek汽车TEC自动嵌入(樱花、旧金山、钙、美国)。所有4μ米的部分沾)使用幻灯片色料(Shandon Linistain GLX, Shandon Inc .,匹兹堡,PA,美国)。兽医病理学家检查组织的病理损伤。

2.9。实时聚合酶链反应对小鼠组织细胞因子分析

我们的研究评估的相对表达水平的细胞因子参与头发的生长。管理不同的治疗3周后测试,老鼠被牺牲了,他们的组织收集回来。然后,组织在裂解缓冲使用均质器。信使rna提取使用RNeasy迷你包(QLAGEN,德国)。一旦从背侧皮肤组织中提取总mRNA的C57BL / 6小鼠,通过逆转录互补脱氧核糖核酸合成。实时聚合酶链反应(rt - PCR)进行了使用Piko-real 96实时PCR系统(热费希尔科学有限公司;沃尔瑟姆,妈,美国;45周期在95°C为15秒,60°C为30秒,72°C 30秒)。表1总结了引物序列igf - 1、VEGF和TGF -β1。

2.10。统计分析

使用SPSS统计分析进行了版本25(美国芝加哥SPSS Inc .)。报告所有数据为平均值±标准错误(SE)。统计分析是通过单向方差分析(方差分析),并通过邓肯的多个范围意味着差异进行了分析测试。被定义为统计意义 。

3所示。结果

3.1。NS提取物的抗氧化活性

NS提取物的抗氧化活性显示在表中2。NS的总多酚含量为49.52±4.10毫克GAE / g提取重量,和NS的总类黄酮含量为82.80±4.01毫克NE / g提取物的重量。NS的EDA是78.81%。

3.2。NS提取物对人毛乳头细胞增殖的影响

图1显示了hDPC扩散的结果在不同的NS提取浓度。hDPCs服用一系列NS提取浓度(3.91,7.81,15.63,31.25,62.5,125,和250 ppm),之后,细胞增殖率孵化24小时后测量。3.91 ppm, 7.81 ppm NS提取暴露组表现出相似的细胞增殖率NC组(分别为101.3%和94.2%)当NC组的细胞增殖率调整到100%。除了15.63 ppm NS治疗,所有NS提取物(31.25 ppm, 62.5 ppm, 125 ppm, 250 ppm)导致细胞增殖率高于PC组(117.4%),达到119.1%,136.1%,144.5%,和124.0%,分别。特别是,62.5 ppm和125 ppm NS提取物表现出细胞增殖率明显高于PC组。

3.3。NS提取物对人类真皮乳头细胞迁移的影响

NS提取hDPCs迁移的影响使用迁移试验,测量和起跑线宽度的改变是转化为一个百分比(图2)。所有NS提取物组从15.63到125 ppm hDPCs迁移的增加与NC组相比。hDPCs的迁移是最活跃在125 ppm NS(203.8±11.2%)后PC组(253.0±7.0%),明显高于数控组。31.25 ppm, 62.5 ppm的NS治疗导致179.8±14.6%和173.2±3.7%迁移率,分别,因此被发现促进hDPC迁移与NC组( )。此外,15.63 ppm NS提取也呈现高迁移率比NC组(112.7±10.5%);然而,这种差异不显著。总体而言,迁移的hDPCs增加NS提取物的浓度增加,这与细胞增殖的CCK-8是相一致的。

3.4。视觉观察毛发生长

在视觉上确认头发生长模式后各组小鼠的背侧皮肤脱毛,背侧皮肤部分浅灰色在所有组7天,但观察组之间没有显著差异。第14天,头发生长在所有老鼠;然而,PC和NS提取组有一个暗比NC组和背侧皮肤颜色表现出更多的头发的生长。NS提取物组还发现有一个更广泛的区域的头发完全成长相比PC组。后21天,头发的生长是在所有组(图完成3)。

3.5。NS提取物对C57BL / 6小鼠毛发生长

计算所有组的头发生长后14天使用ImageJ程序(美国贝塞斯达对称破坏软件)(图4)、PC组(分数:2.65±0.05)和NS提取物组(分数:2.80±0.03)头发生长指数显著高于NC组(得分:1.96±0.65)。NS提取集团特别被发现有头发生长指数显著高于PC组。PC组表现出一个大约35%头发生长效应高于数控治疗,而NS提取组表现出数控治疗头发的生长效应高于43%。

此外,测量的面积后的每个鼠标根据上述0到3头发生长分数(图5数控的背区域集团)满2分(78.5%)最高( ),而NS提取组(19.2%)和PC组(30.4%)显示无显著差异。在头发生长分数3,头发的生长是完整的,头发的生长区域最高NS提取物组(80.7%),其次是PC组(67.5%)和NC组(8.9%),与NS提取物组明显高于其他组。

3.6。NS提取物对头发形态学的影响

组织学分析背侧皮肤组织进行调查的影响NS提取毛囊和头发的发展根基。局部治疗3周后,代表纵向部分背皮肤组织的老鼠与苏木精和伊红染色后(图分析6)。数控的毛囊组织主要位于真皮,和毛囊的发展是弱。这不同于PC组,被证实,毛囊是位于皮下组织深处,发根发展加快。毛囊的NS组位于皮下组织(即。,deeper than in the NC group) and appeared larger, resulting in the development of hair roots.

3.7。NS提取物对小鼠的细胞因子表达的影响背组织

确认hair-growth-promoting NS提取的影响,我们比较了信使rna表达水平的头发生长因子使用rt - pcr(图7)。所有基因表达水平相对于数控集团报道,这是调整到1.0来计算结果。VEGF mRNA表达的一个因素,改善血液循环,促进血管内皮细胞的生长和增强头发发根细胞的生长和分化,NS提取物组最高(1.66±0.22),这是统计不同于NC组( )。此外,VEGF mRNA的表达水平在NS中提取组大约是1.4倍,在PC组。igf - 1是一个重要的生长因子调节头发生长通过促进上皮细胞的增殖,增加毛囊组织的长度。在这项研究中,igf - 1的信使rna表达水平最高的NS提取组(1.28±0.04),其次是PC组(1.11±0.00)和NC组(1.00±0)( )。TGF -β1加速头发生长周期的过渡从生长期生长中期阶段和抑制毛囊的扩散和传播。TGF -的信使rna表达水平β1 PC组显著较低(0.53±0.04)和NS提取物组(0.52±0.09)比NC组(1.00±0)。没有显著区别PC组和NS组。

4所示。讨论

除了遗传因素外,脱发是由于过度的压力,营养不良,荷尔蒙失衡,衰老和伴随着减少毛囊大小和生长期毛囊(28- - - - - -30.]。目前,许多研究都是使用天然材料,进行中药和生物制药等,来确定治疗化合物能促进头发的生长,减少脱发(31日- - - - - -34]。而谷胱甘肽的活性和SOD等脱发患者的血液中发现脱发患者显著低,硫代巴比土酸活性物质(TBARS)的水平明显高于无脱发的患者(34]。据报道,由此产生的氧化应激可能导致脱发的原因(19]。然而,这些来源的氧化应激可以减少通过天然抗氧化剂的活性物质,如多酚、类黄酮、酚化合物,丰富的天然植物材料。减少氧化应激的能力来源于他们的能力消除自由基和活性氧代谢的平衡20.]。NS也被认为改善氧化应激的头皮脱发患者由于其总多酚和类黄酮含量高,以及它的高电子DPPH自由基清除活性(14,15]。Dlova和Ollengo35)报道,蒽醌类黄酮,丹宁酸,皂素,chrysophanol,芦荟大黄素,aloesin, aloenin,等,防止脱发,促进头发生长。在这些物质中,蒽醌、黄酮类、单宁和皂甙是主要的活性成分在NS (14]。尽管如此,很少有研究评估了头发生长和减少脱发NS提取的潜力。因此,我们的研究试图探讨NS的hair-growth-promoting属性提取在体外实验使用hDPCs和在活的有机体内实验采用C57BL / 6小鼠。

根据先前的研究,抗氧化物质抑制头发loss-promoting细胞因子活性,从而促进头发生长(34,36]。金的研究等。37)报道,平均40本地植物类黄酮含量为70毫克/ g。NS提取的黄酮含量大约是1.2倍。此外,本研究发现,NS提取的EDA是大约1.1倍的平均EDA价值74%的原生植物。亚莎et al。38)发现,大片apiculata根中提取,提取富含类黄酮和多酚化合物,有效减少氧化应激在老鼠的大脑。此外,临床前研究使用天然提取物的抗氧化活性,发现天然物质减少不仅氧化损伤,而且脱发通过促进头发生长因子的表达和参与cytokine-mediated炎症(39]。正如预期的那样,这项研究发现,NS提取物具有很强的抗氧化能力由于其黄酮含量高和EDA,这可能减少氧化损伤,导致脱发。

hDPCs构成了毛囊和连接到血管,为他们提供营养、激素、和其他生理分泌物质,如头发生长因子。这些分泌介质影响周围的毛囊细胞和组织并发挥重要作用在头发生长和超然19,40]。Driskell et al。41)报道,可以增强通过促进头发生长hDPCs和人类表皮角化细胞的增殖细胞(HaCaT)。这项研究的结果显示,细胞增殖和迁移往往随着NS提取物的浓度的增加而增加。值得注意的是,31.25 ppm的NS提取(即。,a relatively low concentration) resulted in a cell proliferation rate that was higher than that of minoxidil, the positive control. Previous studies have reported that plant extracts or compounds can be deemed nontoxic if cell proliferation rates exceed 85% upon their administration [23]。这两个天竺葵sibiricum提取和芒草sinensisvar。purpurascens提取导致细胞增殖率低于85%在156.3和62.5 ppm (24因此,分别),被认为是细胞毒性。同样,一个鼠尾草plebeia提取显著降低了细胞增殖率在125 ppm (26]。换句话说,大多数植物提取物已被发现在高浓度有毒;然而,NS提取物在这项研究中被发现是无毒浓度高达250 ppm,和细胞增殖率超过85%的测试浓度(3.91 -250 ppm)。因此,NS提取物被认为是无毒的,可能构成一个安全的治疗脱发。

在这项研究中,C57BL / 6小鼠选择分析促进头发生长,预防脱发。所有实验都发起测试老鼠7周大的时候,这是当头发周期进入静止期阶段。C57BL / 6小鼠表现出自发的脱发和,因此,作为代表实验动物在脱发的研究因为黑色素细胞只存在于他们的毛囊和黑色素合成与头发生长周期一致,可以评估仅仅通过观察皮肤颜色(42]。在测量所有组的头发生长指数14天,这是证实了NS提取组毛发生长指数高于PC组( )。此外,电脑集团在我们的研究中取得了68%的头发恢复,而NS提取组在同一时间达到81%。另一项研究报告称,政府的C57BL / 6小鼠草药导致头发生长指数1.7点(27]。此外,Saengbal-eum-II,草药具有hair-growth-promoting效果好,有高头发生长指数2.28点(43]。然而,NS达到增长指数2.81点,从而大大超过上述草的影响。因此,这些研究结果突出的优秀疗效NS提取物可以促进头发的生长,防止脱发。

HFs中是由数层细胞,头发外根鞘(ORS)和内根鞘(IRS),头发细胞,乳头状细胞(dpc)和生理组织再生中发挥重要作用。干细胞和dpc隆起地区的HFs连续头发周期的调节中起重要作用。这些HFs中经历生长期、生长中期和静止期阶段(1,2]。大部分静止期毛囊位于真皮,而生长期毛囊被发现只有在深层皮下组织(44]。我们的研究也证实了毛囊和头发的灯泡NS组大于提取的NC组。此外,NS提取的毛囊组织被发现位于深层皮下组织比数控组。这些结果表明,NS提取物通过加快促进头发生长静止期毛囊的生长期过渡。

毛乳头细胞来源于间充质细胞受到特定细胞因子的影响,以及影响毛乳头细胞调节头发的增长或变性通过释放生长因子或抑制剂的毛囊上皮细胞。超表达VEGF的外根鞘报道促进头发生长,促进毛囊周围血管的发展(45]。在这项研究中,VEGF mRNA表达在NS中提取组高于米诺地尔组。这些结果类似于一个评估的影响的研究天竺葵sibiricum提取在毛发生长23]。igf - 1的信使rna表达水平明显高于NS提取物组比PC组。转基因小鼠中igf - 1在他们的皮肤表现出高频快速成长比对照组。这个发现支持一项研究发现,莱伦氏综合症患者的头发,igf - 1缺陷、生长稀疏和经常落在额叶区域(45]。之前的研究表明,当TGF -的表达β1是增加,毛囊增生仍未完成和毛囊再生减少,导致瘦,短头发46]。本研究发现的mRNA表达TGF -β1在NS中提取组显著低于NC组,这与先前的研究一致的hair-growth-promoting效应鼠尾草平民提取并昆布属植物粳稻提取(26,47]。基于这些结果,我们证实了NS提取改善头发的生长,增加头发刺激细胞因子的表达VEGF和igf - 1等,同时也减少了TGF -的表达β1,抑制毛发生长。

5。结论

我们的研究结果证实,NS提取物促进头发生长提高hDPC扩散和迁移在体外。此外,头发生长指数和头发C57BL / 6小鼠增长领域和NS提取局部治疗3周增加远远超过minoxidil-treated老鼠。此外,毛囊的数量和位置被认为是生长期感应在NS类似的证据提取组相比,米诺地尔组。NS提取物治疗也增加了mRNA表达VEGF和igf - 1的细胞因子参与头发生长,减少TGF -的表达β1,毛发生长抑制剂。因此,NS提取物是一种很有前途的新脱发治疗源自天然物质可以用来促进头发的生长,防止脱发。

缩写

AA:	斑秃
将军:	雄性遗传脱发
DHT:	二氢睾酮
DMEM:	杜尔贝科修改鹰的媒介
DPBS:	杜尔贝科的磷酸盐
EDA:	电子基的能力
的边后卫:	胎牛血清
FPHL:	女性型脱发
GAE:	没食子酸当量
):	苏木精和伊红
HaCaT:	人类表皮角化细胞细胞
hDPCs:	人毛乳头细胞
HFs中:	毛囊
igf - 1:	胰岛素样生长因子- 1
国税局:	内根鞘
不:	柚皮苷等效
NS:	Nelumbinis精液
口服补液盐:	外根鞘
rt - pcr:	实时聚合酶链反应
师:	睾酮
TBARS:	硫代巴比土酸活性物质
TGF -β1:	转化生长因子-β1
VEGF:	血管内皮生长因子。

数据可用性

本研究的数据集用于支持这些发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

所有作者的构思和设计。可能早就公园和Guang-Ri金监督所有实验。可能居公园、Jae Hyun荣格和苏黄本进行了实验。可能早就公园和苏Hyun李写的手稿。李教授Bog-Hieu进行最后的编辑和校对修订后的手稿。所有作者阅读和批准这个手稿的最终版本。

确认

这项工作是支持的基础科学研究项目通过韩国国家研究基金会(NRF)由教育部、科学和技术(NRF - 2017 r1d1a1b03033507)。

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