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赵Shao-Yang赵,欢欢,婷婷,萎萎,郝-郭, ”Bushen活血效果处方KK-Ay 2型糖尿病小鼠的认知功能障碍”,以证据为基础的补充和替代医学, 卷。2021年, 文章的ID6656362, 14 页面, 2021年。 https://doi.org/10.1155/2021/6656362
Bushen活血效果处方KK-Ay 2型糖尿病小鼠的认知功能障碍
Shao-Yang赵
,1,2
欢欢赵,3
婷婷郝,1
李萎萎,2
和
郝,郭1
1基本医疗科学研究所、西苑医院、中国中医科学院,北京100091,中国
2传统与西方医学的整合,研究工作室第一医院,北京大学,北京100034,中国
3营养部门,临沂人民医院,276000年临沂,中国
文摘
糖尿病患者认知障碍是2型糖尿病的常见并发症之一,可引起神经和大脑微血管损伤。Bushen活血处方(BSHX),一种中药,临床已用于治疗diabetes-induced认知障碍。然而,它的潜在机制仍不清楚。在这项研究中,KK-Ay糖尿病模型小鼠接种BSHX每天12周。体重、随机血糖(篮板)和空腹血糖(FBG)测量每4周。甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(hdl - c)、低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白),空腹血清胰岛素(鳍)和莫里斯水迷宫测试后12周的管理。那天牺牲,海马体是收集病理染色和先进的糖化终端产品(年龄)的分析来评估BSHX的神经保护作用。我们的研究结果表明,BSHX治疗显著改善2型糖尿病相关的侮辱,包括体重增加,血糖,TG,胰岛素水平,年龄,降低高密度脂蛋白胆固醇,空间记忆受损,神经损伤。此外,免疫印迹分析表明,增加表达的受体年龄(狂怒),诱导一氧化氮合酶(间接宾语),cyclooxygenase-2 (cox - 2)和激活核因子-κB (NF -κB)在海马体被BSHX治疗显著地抑制。这些结果表明,BSHX可以显著改善葡萄糖和脂类代谢障碍,减少海马组织的形态学变化,提高KK-Ay小鼠的认知功能。这些BSHX可能涉及监管保护作用的年龄/愤怒/ NF -κB信号通路。
1。介绍
2型糖尿病(T2DM)病人体内是一种代谢性疾病主要表现为长期的高血糖,这是受多种因素影响1]。一项调查显示,全球6.93亿人将在2045年罹患2型糖尿病(2]。在这种疾病的发生和发展过程中,代谢碳水化合物,脂类,蛋白质是不正常,导致长期损害等各种组织,肾、神经,cardiocerebral船,最终功能障碍和衰竭。糖尿病认知功能障碍是主要的慢性并发症之一。外国的流行病学调查显示,2型糖尿病认知功能障碍的风险提高40% (3,4]。糖尿病认知功能障碍已成为一个独立的危险因素(5]。糖尿病结合认知功能障碍最终会导致记忆障碍、认知功能障碍、失语、失用症和社会带来沉重的负担6- - - - - -11]。因此,糖尿病认知功能障碍的预防和治疗具有重要意义,提高2型糖尿病患者的预后和生活质量。
根据传统中医,糖尿病认知功能障碍的核心病机是肾虚证和血瘀。Bushen活血处方(BSHX),新制定的复方中药,是添加水蛭的基础上修改《尉缭Yanzong处方(表1)增加的功能促进血液循环,疏通络脉的基础上补肾脏。其临床应用证明,BSHX可以显著缓解患者的记忆力衰退除降糖效应(12- - - - - -15]。先前的研究已经报道,一些中药或单体在这个处方具有良好glucose-controlling和神经保护作用,枸杞可以不仅降低血糖,而且改善2型糖尿病小鼠的认知障碍(16- - - - - -19]。Icariside可以改善脑主要从事微循环障碍ischemia-reperfusion-induced,改善血液循环,减少神经元的损失,在海马的CA1区细胞凋亡沙鼠亚科(15),而hyperoside和schisandrinB可以抑制淀粉样蛋白的神经毒性β蛋白质(β)通过抑制线粒体凋亡通路的激活19,20.]。然而,改善BSHX对糖尿病认知功能障碍的影响仍缺乏系统的药效学评价。本研究的目的是探讨影响糖尿病患者认知障碍的BSHX自发性2型糖尿病动物模型:KK-Ay老鼠。
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2。材料和方法
2.1。材料
BSHX购买从北京Kangrentang药业有限公司有限公司(中国,北京)。BSHX的药用成分表中列出1。鱼精蛋白重组人胰岛素锌是礼来公司和公司(美国印第安纳州)。二甲双胍是购自上海施贵宝制药有限公司有限公司(上海,中国)。高脂肪食物的老鼠获得北京HFK生物科学有限公司有限公司(中国,北京)。正常饮食小鼠获得北京Keao Xieli饲料有限公司有限公司(中国,北京)。Stroke-physiological生理盐水来自北京双钩起重机制药有限公司有限公司(中国,北京)。老鼠超灵敏的胰岛素酶联免疫试剂盒是ALPCO(美国)。TUNEL试剂盒购买从罗氏集团(瑞士巴塞尔)。甘油三酯测定工具包(GPO-PAP)和总胆固醇测定工具包(COD-PAP)获得BioSino生物技术科技有限公司(中国,北京)。高密度脂蛋白胆固醇(hdl - c)和低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白)测定包购自南京建成有限公司有限公司(中国南京)。 AGEs ELISA kit was purchased from Andy Gene Biotechnology Co., Ltd. (Beijing, China). Nuclear extraction kit was obtained from KeyGEN Biotech Inc. (Nanjing, China). Primary antibodies for RAGE, iNOS, COX-2, p-NF-κB, NF -κB,兔免疫球蛋白g细胞获得信号技术(美国波士顿)。
2.2。高效液相色谱分析
指的是我们的研究小组的研究21],BSHX提取使用日本岛津公司突出液相色谱分析平台(日本京都)配备两个LC-20AT泵,一个CTO-20A柱温箱,一个DGU-20A5R脱气器,一个SIL-20A autosampler,和一个SPD20AD探测器。进行了色谱分离在AichromBond-AQ C18柱(250毫米×4.6毫米,5μm;亚伯工业有限公司、加拿大),保护Phenomenex®C18保护盒(3×4毫米,5μm;托兰斯、钙、美国)。ACN的流动相由含水甲酸(A)和0.1% (B)和交货1.0毫升/分钟以下梯度程序:0-35最小值,0 - 3% B;35 - 100分钟,3 - 22% B;100 - 115分钟,22 - 35% B;115 - 130分钟,35 - 35% B;130 - 140分钟,35 - 100% B;140 - 145分钟,40 - 100% B;和145 - 155分钟,100 - 100% b列保持在40°C。每次运行结束时,100%的交付执行系统reequilibration 14分钟。 The monitor wavelength was set at 235 nm, 254 nm, and 280 nm, respectively.
2.3。动物分组和药物管理局
所有动物实验符合欧盟指导方针(2010/63 /欧盟)和按照指南进行动物研究委员会机构批准后被北京大学动物保健和使用委员会的北京大学第一医院。
Twelve-week-old男性KK-Ay老鼠(N= 50),重- g,购自北京HFK生物科学有限公司有限公司(许可证号。SCXK (Jing) 2016 - 0005)。Twelve-week-old雄性C57BL / 6 j小鼠(N= 10),称量第23 - 25克,从北京购买重要河流实验动物科技有限公司有限公司(许可证号。SCXK (Jing) 2016 - 0001)。KK-Ay老鼠喂食高脂肪的饮食,和C57BL / 6 j小鼠喂养与一般的饮食。所有的动物都在动物的房间西苑医院,中国中医科学院。老鼠可以自由饮水,饲养了10天的情况下22±1°C,湿度40%±5%,和12 h光周期。血糖测定的葡萄糖氧化酶法。只有KK-Ay老鼠满足随机血糖的要求(篮板)≥11.1更易/ L或空腹血糖(FBG)≥7.0更易/ L作为DM样本。
老鼠被随机分为六组如下:(1)控制(未经处理的C57BL / 6 j小鼠);(2)模型(未经处理的小鼠KK-Ay);(3)低BSHX (KK-Ay小鼠接受0.5克/公斤BSHX);(4)介质BSHX (KK-Ay小鼠治疗1克/公斤BSHX);(5)高BSHX (KK-Ay小鼠治疗2 g / kg BSHX);和(6)二甲双胍(KK-Ay小鼠接受250毫克/公斤二甲双胍)。所有药物口服,每天0.1毫升/ 10 g为12周。对照组和模型组被给予相同体积的蒸馏水以同样的方式进行对比。
2.4。口服葡萄糖耐量试验(OGTT)
血从尾静脉的光纤光栅测量小鼠禁食8小时。后给予小鼠口服2克/公斤葡萄糖解决方案,在时间点的血糖水平30分钟(BG30), 60分钟(BG60),和120分钟(BG120)测定,所绘制的曲线。曲线下的面积(AUC)然后根据公式计算AUCg =(光纤光栅+ BG30)÷2 + (BG30 + BG60)×0.5×0.5÷2 + (BG60 + BG120)×1÷2。
2.5。胰岛素耐量试验(ITT)
血从尾静脉的光纤光栅检测小鼠禁食8小时。发现了老鼠的血糖水平在30分钟(BG30), 60分钟(BG60),和120分钟(BG120) 0.26 IU /公斤胰岛素腹腔内注射后,和所绘制的曲线。AUC是计算AUCg =(光纤光栅+ BG30)÷2 + (BG30 + BG60)×0.5×0.5÷2 + (BG60 + BG120)×1÷2。
2.6。空腹血清胰岛素(鳍)和血脂测试
浓度的鳍在小鼠的血液从尾静脉禁食8小时测试后使用商业ELISA试剂盒制造商的协议。浓度的总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的血清测定使用甘油三酯测定试剂盒(GPO-PAP)和总胆固醇测定试剂盒(COD-PAP),分别。高密度脂蛋白胆固醇(hdl - c)和低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白)血清中检测到与相应的分析工具根据制造商的协议。
2.7。莫里斯水迷宫测试(微波加工)
治疗12周后,空间和相关形式的学习和记忆被微波加工评估测试(22]。短暂,老鼠单独训练一个圆形池(120厘米直径和高度50厘米),充满了30厘米深的水在一个恒定的温度25±1°C。有一个平台(直径9厘米)的中心的四个象限的池。两侧墙的四个象限,明显彩色文件处理作为视觉位置提示。前2天,每个鼠标受到可见平台培训、平台的淹没在水面下1厘米,被一个标志表示。天3 - 5,隐藏平台进行培训的旗帜被培养小鼠的空间学习和记忆保持能力的平台。
老鼠找到平台的逃脱延迟测试5天。短暂,四个试验进行每个老鼠每天约1 h之间的时间间隔。在每个试验中,老鼠释放到池壁面临的水从4开始位置和允许定位水下平台最多120年代。老鼠没有找到这个平台在120年代是轻轻地引导平台,允许停留15秒。6天,平台被移除,探针试验进行记录目标象限中所花费的时间逃跑时平台放置和过境点的数量的初始位置平台。
2.8。苏木精和伊红染色())
生理盐水注入到小鼠麻醉通过左心室,其次是注入4%多聚甲醛固定。在收获后,大脑被修改保存在10%甲醛固定剂,嵌入在石蜡,切成4μ米厚片先后)染色法和光学观察病理变化。
2.9。尼氏小染色
石蜡切片脱蜡,debenzoled梯度酒精,用蒸馏水洗净。染色后在37°C 10分钟,用蒸馏水冲洗3次,样品被分化,使脱色95%和75%乙醇直到背景在显微镜下清楚。样本常规脱水和透明的密封和中性胶在光学显微镜下观察。
2.10。TUNEL染色
石蜡切片与4%多聚甲醛固定,用蒸馏水洗净在孵化前在37°C与蛋白质消化酶20分钟。TUNEL细胞凋亡工具包用于染色指导。
2.11。测量先进的糖化终端产品(年龄)
老鼠的海马组织收集后12周的治疗。年龄在海马体被检测到的浓度酶联免疫试剂盒(Andy基因生物技术有限公司,北京,中国)根据制造商的指示。
2.12。免疫印迹分析
与生理盐水灌注后麻醉老鼠transcardially通过左心室,大脑收集和细胞溶解里帕缓冲区(50 mM Tris-HCl, 300毫米氯化钠,0.5% tritonx - 100, 5毫米EDTA,和蛋白酶抑制剂的鸡尾酒)30分钟在冰上。细胞溶解产物离心机在13000 rpm和4°C 15分钟前确定由布拉德福德的蛋白质浓度测定。核和胞质蛋白提取核提取工具包(南京凯基生物生物技术有限公司,中国)根据制造商的指示。等量的蛋白质分离和sds - page,随后转移到聚偏二氟乙烯膜。这些墨迹被封锁在PBST 5%脱脂牛奶然后孵化主要抗体在一夜之间在4°C。之后,这些墨迹洗充分在PBST孵化和辣根peroxidase-labeled山羊anti-rabbit二级抗体室温1 h。洗屁股被发达国家增强化学发光底物和可视化Tanon 5200成像分析系统(Tanon科技有限公司、上海、中国)。
2.13。统计方法
所有数据都表示为平均值±标准偏差(SD)。单向方差分析(方差分析)和Bonferroni事后测试采用的统计分析。 被认为是具有统计学意义,然后呢 被认为是统计上非常重要。
3所示。结果
3.1。识别BSHX提取的组件
结合应用高效液相色谱法(HPLC)和质谱(HPLC-MS)分析BSHX提取的主要组成部分,共有114种化合物,包括43类黄酮(F1-F43), 28小分子酚酸(P1-P28), 17个肉桂酰聚胺类(A1-A17), 11个糖脂(G1-G11), 8脂肪酸(FA1-FA8), 4木质素(L1-L4), 2 semiterpene苷(t1 - t2), 1皂苷化合物(S1)。LC / ESI-IT-TOF-MSn分析结果表明,类黄酮BSHX主要是来自淫羊藿、肉桂酰聚胺类和糖脂主要是来源于枸杞,和小分子酚酸的主要来源Plantago种子,五角种子和覆盆子(图1和补充数据)。
(一)
(b)
(c)
3.2。BSHX有助于防止KK-Ay小鼠获得的体重
如表所示2,未经处理的小鼠KK-Ay体重明显多于C57BL / 6 j小鼠从一开始( 与C57BL / 6 j组),他们开发了肥胖在12周。BSHX KK-Ay白鼠的体重增长的速度比未经处理的KK-Ay老鼠(图2)。有统计差异之间的关于体重KK-Ay老鼠2 g / kg BSHX和未经处理的KK-Ay小鼠治疗8周后( 比KK-Ay组)。治疗12周后,小鼠的体重不同剂量的BSHX在统计学上不同于未经处理的小鼠KK-Ay ( 或 比KK-Ay组)。体重没有显著增加和维持在一个稳定水平的高BSHX (2 g / kg)组。
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数据表示为平均数±标准差(n= 10)。与C57BL / 6 j组。
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与KK-Ay组。 |
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每组小鼠的体重是检查每4周。数据被表示为平均数±标准差(n= 10)。 与C57BL / 6 j组。 , 与KK-Ay组。
3.3。BSHX抑制随机血糖(篮板)的增加
根据表3,模型组小鼠的篮板持续上升,明显不同于对照组( 对C57BL / 6 j组)。强饲法4周后,血糖显著增加模型组和治疗组,但没有差异每个治疗组和模型组。治疗8周后,小鼠的血糖水平在高BSHX (2 g / kg)组明显低于模型组( 比KK-Ay组)。BSHX (2 g / kg)显示二甲双胍降低血糖的类似的效果。连续用药12周后,血糖明显改善在这两种介质BSHX(1克/公斤)和高BSHX (2 g / kg)组( 与KK-Ay集团),高剂量的BSHX (2 g / kg)(图显示一个更好的效果3)。
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数据表示为平均数±标准差(n= 10)。与C57BL / 6 j组。与KK-Ay组。 |
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从小鼠尾静脉血样采集每组随机血糖检测每4周。数据被表示为平均数±标准差(n= 10)。 与C57BL / 6 j组。 与KK-Ay组。
3.4。BSHX降低空腹血糖(FBG)水平
强饲法8周后,小鼠的光纤光栅水平改善二甲双胍组和所有BSHX团体,特别是在中BSHX(1克/公斤)。强饲法12周后,小鼠的光纤光栅的水平在中BSHX(1克/公斤)和高BSHX (2 g / kg)组显著提高( 与KK-Ay集团),高剂量的BSHX (2 g / kg)也有类似的效果二甲双胍在减少光纤光栅级别(表4和图4)。
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数据表示为平均数±标准差(n= 10)。与C57BL / 6 j组。与KK-Ay组。 |
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从小鼠尾静脉血样采集每一组检测空腹血糖每4周。数据表示为平均数±标准差(n= 10)。 与C57BL / 6 j组。 与KK-Ay组。
3.5。BSHX改善葡萄糖耐量和胰岛素抵抗
每组的小鼠口服葡萄糖耐量测定后连续12周(图填喂法5(一个))。具体来说,高葡萄糖的解决方案是给每组小鼠。在前30分钟,所有小鼠的血糖水平增加,尤其是KK-Ay小鼠模型组。在接下来的30分钟,所有BSHX组的血糖水平开始下降,而模型组的见顶。120分钟后,血糖水平倾向于稳定在所有组。统计分析结果表明,AUC的OGTT介质BSHX(1克/公斤)组和二甲双胍组明显低于模型组( 或 比KK-Ay组)。然而,与模型组相比,AUC的低(0.5 g / kg)和高BSHX (2 g / kg)组下降,但无统计学差异。
(一)
(b)
显示在图5 (b),KK-Ay模型小鼠的血糖水平呈现不断增加的趋势,由于应激性高血糖后第一个30分钟内胰岛素注射。相比之下,小鼠的血糖水平在所有BSHX组,二甲双胍组在不同程度上降低在前30分钟。胰岛素注射60 - 120分钟后,老鼠的血糖水平在所有的群体逐渐减少并最终保持不变。此外,与模型组相比,所有BSHX团体,特别是媒介BSHX(1克/公斤)集团,有一个小得多的AUC ITT公司( 比KK-Ay组)。上述结果表明,12周BSHX管理局(尤其是1克/公斤)的剂量可以极大地改善胰岛素抵抗的老鼠。
3.6。BSHX会使鳍和促进血脂代谢水平
鳍、TC、TG、低密度和高密度脂蛋白胆固醇水平在小鼠中发现经过12周的填喂法。表5表明,鳍,TC、TG和低密度脂蛋白的水平KK-Ay小鼠模型组显著高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇水平相反( 或 对C57BL / 6 j组)。与模型组相比,二甲双胍组鳍水平显著降低( 比KK-Ay组)和减少BSHX组。TC、TG、低密度和高密度脂蛋白胆固醇,高剂量的BSHX (2 g / kg)显著降低TG和增加高密度脂蛋白胆固醇( 比KK-Ay组)。
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数据表示为平均数±标准差(n= 10)。
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与C57BL / 6 j组。
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与KK-Ay组。 |
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3.7。BSHX改善KK-Ay小鼠的认知功能
微波加工测试进行了研究空间和形式的小鼠学习和记忆有关。越狱延迟逐渐减少在所有组(图5天的培训6(一)和表6),下降率显著低于模型组比对照组从第三天( 对C57BL / 6 j组)。然而,与模型组相比,逃避的衰落延迟加快在中BSHX(1克/公斤)组在5天( 比KK-Ay组)。越狱延迟6天进一步证实BSHX(1克/公斤)显著改善记忆障碍,显示在图6 (b)和表6( 比KK-Ay组)。此外,逃避在其他BSHX集团也已经死去的延迟,但它们之间的区别和模型组没有明显不同。
(一)
(b)
(c)
(d)
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数据表示为平均数±标准差(n= 10)。时间,秒。与C57BL / 6 j组。
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与KK-Ay组。 |
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在调查试验(数字6 (c)和6 (d)),一个公认的测量空间学习和记忆保持,有大大减少平台过境点和一个更小的百分比的时间在目标象限模型组比对照组( 或 对C57BL / 6 j组)。老鼠的时间在中BSHX(1克/公斤)集团在目标象限远远超过在模型组( 比KK-Ay组)。前述的两个索引是提高在其他两个BSHX组(数字6 (c)和6 (d)),但没有观察到显著性差异。
3.8。BSHX减少海马组织的形态学变化
在海马神经元损伤,尤其是在糖尿病认知功能障碍的病理基础23- - - - - -27]。海马CA1锥体细胞的染色模式小鼠的控制模型,媒介BSHX(1克/公斤)组测量微波加工后测试(图7)。脑组织的)染色结果显示,C57BL / 6 j小鼠的海马神经元well-stained与完好结构紧密排列,而原子核KK-Ay模型小鼠海马神经元的固定和收缩放大细胞外空间和无序排列。在中BSHX(1克/公斤),海马神经元排列整齐,染色均匀,和神经损伤部分恢复(如黄色箭头所示)。尼氏小染色显示,尼氏小体在对照组是深蓝色,和细胞紧密排列。模型组神经元和周围水肿出现的细胞层数减少。此外,尼氏小体轻沾,朦胧地划定。在中BSHX(1克/公斤)组,观察神经元没有明显的水肿,细胞紧密排列,尼氏小体染色更均匀比模型组(如白色箭头所示)。此外,根据TUNEL染色的结果(可能污点凋亡细胞成深棕色),暗棕色海马CA1区神经元的模型组建议许多神经元凋亡。神经元在中BSHX(1克/公斤)组比模型组更轻染色,表明细胞凋亡是改善(如黑色箭头所示)。
(一)
(b)
(c)
3.9。BSHX抑制年龄的表达愤怒/ NF -κB信号通路
年龄中扮演重要角色的病态发展糖尿病认知障碍。首先,年龄在小鼠的海马的内容被ELISA检测。根据图8(一个)与对照组相比,模型组显著增加年龄的内容( 与C57BL / 6 j组)和媒介BSHX (1.0 g / kg)组显著减少年龄内容( 比KK-Ay组)。至于年龄(愤怒)的受体,它也极大地提高了模型组( 与C57BL / 6 j组),但BSHX(0.5克/公斤和1.0克/公斤)显著抑制其表达( 或 与KK-Ay集团)(图8 (b))。当年龄绑定到愤怒,他们可以激活NF -κB信号通路,产生炎症因素破坏神经元。因此,采用免疫印迹检测是否NF -κB信号通路被激活。如图8 (c)伊诺和cox - 2,两个重要的炎症蛋白在NF -κB信号通路,显著增加KK-Ay模型小鼠的大脑中( 与C57BL / 6 j组),而BSHX可以明显下调的表达这两个蛋白( 或 比KK-Ay组)。与此同时,显著增加磷酸化NF -κB级模型中观察组( 对C57BL / 6 j组)。BSHX治疗12周后,磷酸化NF -κB水平显著下降( 与KK-Ay集团)(图8 (d))。此外,免疫印迹分析表明,模型组引起的易位NF -κB从细胞质中p65核,这个过程明显被BSHX(1克/公斤,2 g / kg)治疗( 或 与KK-Ay集团的人物8 (e))。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
4所示。讨论
在这项研究中,自发突变KK-Ay模型小鼠2型糖尿病药物干预,以及BSHX的影响不同剂量的体重、血糖、血脂、胰岛素水平、行为认知,和2型糖尿病小鼠的大脑形态进行了分析。此外,BSHX药效学的评估。结果表明,体重、血糖、TG、TC、低密度和胰岛素水平的2型糖尿病KK-Ay小鼠模型组显著增加,而高密度脂蛋白胆固醇水平是相反的。这些结果表明,模型组小鼠显示高血糖,高血脂、胰岛素抵抗。微波加工测试还显示明显的学习和记忆障碍小鼠年龄在25周模型组。胃内的政府12周后,上述症状BSHX KK-Ay小鼠不同剂量处理的或与二甲双胍在不同程度上缓解和改善。这些结果符合前面的相关研究,我们小组(28]。
然而,不同剂量的BSHX有不同的影响。BSHX改善体重和血糖剂量依赖性的方式。在高BSHX (2 g / kg),血糖水平显著降低了填喂法后8周。更重要的是,2 g / kg BSHX实现相同的二甲双胍的降糖效果强饲法后12周。OGTT和ITT的结果不同。经过12周的管理、1克/公斤BSHX表现出更好的性能比2 g /公斤BSHX改善OGTT和ITT的老鼠。此外,鳍水平在中BSHX(1克/公斤)集团也低于低(0.5 g / kg)和高BSHX (2 g / kg)组。然而,二甲双胍是优于1克/公斤BSHX改善OGTT和ITT公司和只有二甲双胍能显著降低胰岛素水平。它建议应该采用二甲双胍治疗2型糖尿病患者在没有禁忌症的情况下。
血脂和胆固醇方面的,只有高剂量的BSHX (2 g / kg)可以显著降低TG和增加高密度脂蛋白胆固醇水平12周后胃内的管理。没有发现显著降低血脂和胆固醇的低(0.5 g / kg)和介质BSHX(1克/公斤)组,二甲双胍组。原因可能是服用二甲双胍单独并不足以减少2型糖尿病小鼠血脂在后期严重的条件。此外,KK-Ay老鼠总是喂高脂肪饲料没有饮食控制,导致持续高企的血脂水平。BSHX的高剂量,然而,可以降低脂质水平以来降脂成分的浓度高于低剂量和中等剂量BSHX。具体降脂组件需要进一步筛选和分离。在学习和记忆方面,第25周的微波加工试验表明,只有逃避延迟和保持时间在目标象限的老鼠在中BSHX(1克/公斤)组均明显改善,与模型组相比。原因可能是剂量的2 g / kg高于临床剂量。最初的组件显示显著的功效如此高的浓度高BSHX集团,他们产生了负面影响。具体的原因需要进一步的分析和研究。 The MWM test results reminded us that metformin should be used in combination with other drugs to improve cognitive impairment in T2DM patients. The pathomorphology of the mouse brain was observed through H&E staining, Nissl staining, and TUNEL staining. The results revealed that BSHX could improve the damage of hippocampal neurons in mice.
神经炎症机制发挥着至关重要的作用在二型糖尿病认知功能障碍的发展。抗炎治疗源于“炎症性理论”的2型糖尿病,在先进的糖化终端产品(年龄)发挥重要作用在炎症反应29日- - - - - -31日]。Kalninova等人发现炎症标记物的水平和年龄在2型糖尿病认知障碍患者和正常人的血通过高效液相色谱法(HPLC)和荧光分光光度法(32]。结果表明,年龄、水平il - 6,引发,TNF -α和单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1)等离子体的2型糖尿病患者显著高于正常对照组,表明可能存在年龄和神经炎症因素在2型糖尿病之间的关系。高级糖基化终端产品(年龄),非酶的糖基化的蛋白质或脂质,在等离子体、小胶质细胞、星形胶质细胞,海马,糖尿病患者的大脑33]。因此,一些研究人员怀疑,年龄可能参与2型糖尿病患者的大脑神经炎症,导致糖尿病认知功能障碍。人们已经发现,年龄和年龄受体(愤怒)巨噬细胞可能导致氧化应激和激活NF -κB通过增殖蛋白激酶(MAPK)信号通路(34,35]。此外,年龄可以绑定到愤怒和激活下游NF -κB信号通路,导致我的磷酸化κB -ɑ。的磷酸化κB -ɑ被泛素化降解,然后,NF -发布κ细胞质中的B是免费的并迅速转移到细胞核,它专门网站绑定到相应的基因转录和诱发炎症因子的表达,如细胞因子如白细胞介素- 6 (il - 6)和肿瘤坏死因子-ɑ(肿瘤坏死因子-ɑ)[36]。这些细胞因子诱导适应性免疫系统细胞的招募到中枢神经系统(35]。王等人研究了danshensu对2型糖尿病小鼠的学习和记忆丧失功能由年龄。结果表明,danshensu可能部分块磷酸化p38的表达增殖蛋白酶(p-p38) cyclooxygenase-2 (cox - 2)、NF -κB,愤怒和抑制肿瘤坏死因子的增加ɑ、il - 6和前列腺素E2 (PGE2),表明年龄可以调解的认知功能障碍2型糖尿病小鼠神经炎症引起的。符合上述报道,在这项研究中,我们发现BSHX不仅可以显著下调表达的年龄和愤怒也减少磷酸化水平的NF -κB,一氧化氮合酶(间接宾语),cox - 2在剂量依赖性的方式。这些结果表明BSHX可能通过抑制抵抗神经炎症激活的年龄/愤怒/ NF -κB信号通路。然而,具体的机制需要进一步的研究考虑到中药化合物通常施加的影响虽然多个通路和多个目标。
5。结论
BSHX可以显著改善葡萄糖和脂类代谢障碍,减少海马组织的形态学变化,提高KK-Ay小鼠的认知功能。BSHX的机制上面的作用可能与抑制活化的年龄/愤怒/ NF -κB信号通路。这项研究的结果为应用程序提供了药理学依据BSHX治疗糖尿病认知功能障碍。
缩写
| 年龄: | 高级糖化终端产品 |
| BSHX: | Bushen活血处方 |
| cox - 2: | Cyclooxygenase-2 |
| 光纤光栅: | 空腹血糖 |
| 鳍片: | 空腹血清胰岛素 |
| 高密度脂蛋白胆固醇: | 高密度脂蛋白胆固醇 |
| 高效液相色谱法: | 高效液相色谱法 |
| il - 6: | 白细胞介素- 6 |
| 伊诺: | 诱导一氧化氮合酶 |
| ITT公司: | 胰岛素耐量试验 |
| 密度: | 低密度脂蛋白胆固醇 |
| MAPK: | 增殖蛋白激酶 |
| 微波加工: | 莫里斯水迷宫 |
| NF -κB: | 核因子-κB |
| OGTT: | 口服葡萄糖耐量试验 |
| PGE2: | 前列腺素E2 |
| P-p38: | 磷酸化p38增殖蛋白酶 |
| 愤怒: | 受体的年龄 |
| 篮板: | 随机血糖 |
| 2型糖尿病: | 2型糖尿病 |
| TC: | 总胆固醇 |
| TG: | 总甘油三酸酯 |
| 肿瘤坏死因子-α: | 肿瘤坏死因子-α。 |
数据可用性
使用的数据集和分析在当前研究可从相应的作者。
伦理批准
所有动物实验符合欧盟指导方针(2010/63 /欧盟)和按照指南进行动物研究委员会机构批准后被北京大学动物保健和使用委员会的北京大学第一医院。
信息披露
Shao-Yang赵和欢欢赵视为co-first作者
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
Hao-Guo和李萎萎的构思和设计实验。Shao-Yang赵和欢欢赵进行实验,分析数据,并写了手稿。婷婷,李Hao-Guo,萎萎了摄政王/材料/分析工具。Shao-Yang赵和欢欢赵了同样的工作。所有作者都阅读和批准了手稿。
确认
这项工作得到了国家自然科学基金(批准号81530099)。
补充材料
辅助数据文件包括BSHX处方的主要组件和来源。(补充材料)
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