化学分析和精油的抗氧化和抗菌活性艾negreil对耐药微生物

文摘

背景。艾negreil . (答:negrei)是一个属于家庭的药用和芳香植物菊科中更广泛的折叠中间阿特拉斯山脉,摩洛哥。材料和方法。本研究是探讨植物化学的成分和抗氧化,抗菌,抗真菌的活动艾negreil .精油。这种油被使用从新鲜植物原料中提取Clevenger装置。植物化学的成分,并用gc - ms为特征。抗氧化活性是评价包括DPPH使用不同的方法,β胡萝卜素漂白和总抗氧化能力。抗菌活性进行了测试和耐多药包括革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌中使用抑制区琼脂媒体和最低抑制浓度(MIC)生物分析。进行了抗真菌活性白色念珠菌,黑曲霉,黄曲霉,和尖孢镰刀菌用固体培养基测定。结果。精油的色谱特性答:negrei显示34化合物构成的存在99.91%的总精油。后者被发现有前途的抗氧化活性,如DPPH、使用的所有生物β-胡萝卜素漂白和总抗氧化能力。结果表明,我们对革兰氏阴性(植物油有强大的抗菌活性大肠杆菌57岁的大肠杆菌97年,k .肺炎,铜绿假单胞菌)和革兰氏阳性(金黄色葡萄球菌),所以最大抑制区和麦克风价值观18-37毫米和3.25 - 12.5毫克/毫升,分别。石油也显示抗真菌活性白色念珠菌,尖孢镰刀菌,和黑曲霉除了flavus物种。结论。在工作中表明,获得的结果答:negrei可以作为一个有价值的天然化合物的来源,可以用作新武器对抗自由基损伤和抗微生物。

1。介绍

草药已经成为更受欢迎的方式对抗疾病和生产制药药物(1- - - - - -3]。使用草药寻求潜在活性化合物已经被证明能促进科学输出(4]。许多合成药物来自天然来源包括药用植物可用于食品补充剂的形式,保健品,替代和补充疗法(5]。植物是天然物质的抗氧化潜力的重要来源(6]。现代药物在优先的发展有效的抗氧化物质从天然来源被应用在医学领域药物的目的(7]。天然抗氧化剂代理在食品行业得到充分考虑,以防止被自由基氧化变质的食物。这些代理一直放在优先考虑被用作替代合成抗氧化剂代理如叔丁基羟基茴香醚(BHA),丁羟甲苯(二叔丁基对甲酚)和tertbutylhydroquinone(特丁基对苯二酚)涉嫌严重的副作用包括致癌和毒性作用[8]。

物种之间的属艾用于传统药物治疗的目的是止痉挛治疗风湿病的,抗炎,抗菌,antihelminthics, antiveinous代理(9,10]。艾negreil是一个摩洛哥的土地上特有的药用植物,分布在该地区的一直延伸到穆卢耶盆地和折叠中间摩洛哥阿特拉斯山脉。这种植物是常用的摩洛哥传统药物治疗疾病,包括消化生殖道和皮肤感染用粉和注入形式(9- - - - - -11]。

抗菌素耐药性是一个现象,微生物进化策略来对抗药物计划攻击他们,这样细菌,这不是失败,继续发展有力地前所未有的(7]。几年前,抗菌素耐药性已经成为最大的问题之一,上覆岩层之间的卫生保健系统和被列为最大的挑战2019年由世界卫生组织(12]。

在这项研究中,研究了菌株属于耐药微生物等克雷白氏肺炎,绿脓杆菌,金黄色葡萄球菌,和大肠杆菌病原体。众所周知,这些物种可以耐多药13]。一些真菌物种研究工作属于耐药微生物,如干地亚spp,参与了超过90%的艾滋病患者的感染在一个更早的时间。干地亚种虫害已经开发了前所未有的抵抗由于过度使用合成药物抗真菌感染引起的这些微生物和仍然是一个最大的卫生负担(14]。

当前研究的目的是探讨植物化学的成分和抗氧化,抗菌,抗菌,抗真菌的活动答:negrei精油因为没有其他研究也尝试这一目标的时间写这篇文章。

2。材料和方法

2.1。选择和植物材料的识别

答:negrei是收获从中间折叠阿特拉斯在2019年6月,摩洛哥(2100、33.539648−3.894474)。认证是由一个植物学家,参照# BPRN / 04/18是沉积Sidi穆罕默德·本·阿卜杜拉大学植物标本的土耳其毡帽,摩洛哥。接下来,空中的部分答:negrei受到干燥在一个通风的地方十天之前提取。

2.2。提取精油

在目前的工作,从新鲜植物原料中提取石油使用Clevenger装置。总之,总共有200 g天线部分(叶子)之前被切成小块放入瓶750毫升蒸馏水。之后,整个解决方案是煮3 h最大化精油提取。精油产量是通过使用以下公式: 在%流值在哪里精油产量;米在克”是精油质量恢复;米在克植物原料质量。

2.2.1。油的植物化学的成分分析

有效的精油的植物化学的特性是通过使用非极性硅柱气相。实现这一目标,分析运行的操作条件如下:初始温度设置为40°C / 2分钟速度2°C /分钟,而最后和喷油器温度设置为260°C / 10分钟和250°C,分别。在这一分析,氦气作为车辆(1毫升/分钟)与“分离”模式注入。电离能和离子源温度70 eV - 200°C,分别扫描质量m / z是40 - 650不等。石油在己烷稀释溶剂(10:100)在注射1µl .化学鉴定是由使用保留指数(RI)以及与亚当斯数据库15]。

2.3。抗氧化活性

在这项研究中,油的抗氧化能力答:negrei是使用三个生物包括DPPH评估的,β胡萝卜素漂白,和总抗氧化能力16]。

2.3.1。DPPH自由基清除活性

DPPH生物测定进行了使用协议据贝克et al。17]。精油(EO)和积极控制(二叔丁基对甲酚)在不同浓度使用包括1 1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,1/128,1/256,1/512毫克/毫升。100年抗自由基活性混合µL的先前准备的浓度(EO和二叔丁基对甲酚)750µL (DPPH (0.004%)。之后,解决方案是在孵化环境温度30分钟前读吸光度。DPPH的清除能力表示为抑制百分比如下: π是抑制的百分比,一个0是DPPH没有样品的吸光度(控制)一个吸光度的DPPH样品。

2.3.2。总抗氧化能力测试(TAC)

TAC测试根据协议进行了报道,在前面的工作(18]。总之,25µL的样本测试(1毫克/毫升)与一毫升的试剂溶液混合构成的磷酸钠,硫酸和钼酸铵。接下来,整个解决方案被孵化的95°C 90分钟前使用分光光度计测量吸光度在695海里(18]。二叔丁基对甲酚和槲皮素被用作标准引用。mg EAA / g的TAC表达了他。

2.4。ß胡萝卜素漂白试验

这个试验进行研究,精油的抗氧化功效答:negrei使用协议在文献报道[19,20.]。总之,1毫升ß胡萝卜素氯仿的解决方案是添加到10µL的解决方案组成的亚油酸,80 100毫克的渐变。接下来,氯仿是检索使用真空旋转蒸发器之前添加25毫升的过氧化氢残留。后来,2.5毫升的混合添加到100年获得的µL的样本测试(1毫克/毫升),然后保持在水浴51°C 2 h。二叔丁基对甲酚作为标准参考(1毫克/毫升)。吸光度测量470海里。抗氧化能力计算抗氧化活性的比例相对于控制如下:

AA %是抗氧化性质的百分比,ABHT的吸光度是积极的控制,而AE的吸光度-控制。

2.5。抗菌活性

精油的抗菌活性的评估是根据之前报道的数据在其他地方(16]。的精油答:negrei测试与革兰氏阴性细菌吗绿脓杆菌,大肠杆菌作为:57;肺炎克雷伯菌,大肠杆菌作为:97和革兰氏阳性细菌(金黄色葡萄球菌(LM,FMP,费斯))。压力测试在当前的研究中是临床孤立的和已报告耐多药在早期研究报告(13,21,22]。细菌悬液是由新鲜的文化。为了实现这一目标,一些殖民地文化的无菌播种在0.9%的生理水的密度0.5麦克法兰,这对应于10⁷到10⁸CFU /毫升(23]。

使用纸片扩散法抗菌活性进行了研究。总之,10卷µL (答:negrei精油(1毫克/毫升)是用于测试目的,而氨苄青霉素1.68毫克/阀瓣和链霉素0.020毫克/阀瓣被用作药物在早期的作品[引用报道20.]。

的最小抑制浓度(麦克风)研究了使用采用微量测定[24]。总之,麦克风是评估通过采用方法96 -孔板。油的浓度在0.2%琼脂悬浮。浓度是通过连续稀释(25到0.02毫克/毫升)。最后,盘子被放置在37 C孵化18 h。接下来,添加20后细菌生长的可视化µL在5毫克/毫升三苯四唑井进一步孵化前30分钟在37°C (23]。

2.6。抗真菌活性精油艾negrei

研究油的抗真菌活性进行了使用四个真菌物种包括白色念珠菌写明ATCC 10231,黑曲霉(LBEAH / FS / 19),黄曲霉(LBEAH / FS / 18)尖孢镰刀菌(LBEAH / FS / 17)。磁盘扩散法被用来实现这一目标所描述的其他地方(25]。总之,培养皿与MEA培养基接种白念珠菌,答:尼日尔,a . flavus和病圃。接下来,绘画纸纸磁盘(直径6毫米)浸满10μL的精油放在培养皿表面在孵化前30°C在黑暗中。抑制直径,以及抑制百分比,决心48 h后的孵化白念珠菌后7天答:尼日尔,a . flavus和病圃(26,27]。

2.7。统计分析

结果被表示为一式三份的±SEM分析手段。使用方差分析测试进行了统计分析。一个显著差异在统计学上考虑< 0.05。

3所示。结果与讨论

3.1。精油的植物化学的化合物

结果表明,精油的产量答:negrei是1.2%。属的植物精油的比例最高艾被记录为艾属迦南(1.3%)和艾frigida(1.5%)。然而,空中的精油产量的一部分艾苦艾,艾biennis,艾dracunculus,和艾ludoviciana范围从0.3%到0.5%,低于答:negrei(28]。相比,这个收益率可以被认为是重要的一些工业利用的植物的精油如玫瑰(0.1 - -0.35%),迷迭香(1 - 2.5%)、薄荷(0.5 - -1%),橙花油(0.5 - -1%),薰衣草(0.8 - -2.8%),八角(1 - 3%),和百里香(2 - 2.75%)29日]。

精油的色谱分析答:negrei从中间折叠地图显示34挥发性的存在构成总数的99.91%精油从新鲜的材料(图中恢复过来1;表1)。化学特征分析表明,精油具有许多潜在的生物活性物质包括侧柏酮(29.02%)、2-bornanone(14.68%)、二十八烷(14.02%)桉油精(5.60%)、endoborneol (3.78%)、bicyclo (3.1.0) hexan-3-on(3.63%)、二十五烷(3.07%)、和莰烯(2.38%)。一些化合物中确定当前石油(β侧柏酮,α侧柏酮、冰片、樟脑、桉油酚1.8)也在接近植物物种包括识别艾herba-albal。,艾pontica L。,艾苦艾L。(25- - - - - -27]。侧柏酮作为主要元素研究石油已基本确认精油的植物药用食品和/或(30.]。

3.2。DPPH自由基清除活性

研究的结果表明,石油表现出一种强有力的DPPH自由基清除活性(IC50 = 0.0164±0.0011毫克/毫升)相比,二叔丁基对甲酚(0.0082±0.002毫克/毫升)(图2)。我们的石油与集成电路₅₀= 0.0164±0.0011毫克/毫升相对比发现石油提取艾dranculus生长在土耳其,显示集成电路₅₀= 100.200,400年和1000年µ克/毫升(31日),而艾草阿尔巴从西南突尼斯(IC₅₀= 50.00μg / mL) (32]。如表所示1,答:negrei精油含有更高的氧合单萜,这样它就可以被一个有前途的自由基清除剂(33]。

3.3。总抗氧化能力

在目前的研究工作,获得的结果表明,植物精油答:negrei有前途的总抗氧化能力值为867.71±30.21毫克/克相比,472.29±6.19毫克/克二叔丁基对甲酚和307.65±13.08毫克/克的槲皮素。它已经表明,精油的抗氧化活性化合物与羟基醇等功能密切相关,和酚类化合物30.,31日]。

3.4。ß胡萝卜素变色测试

提取物的抗氧化活性的评价通过使用不同的分析主要是进行比较的赞赏(34]。因此拟合ß胡萝卜素漂白方法被用来实现这一目标。后续的ß胡萝卜素氧化反应在石油和标准参考(二叔丁基对甲酚)是由测量的强度ß胡萝卜素颜色的波长470 nm。如图3,结果报告百分比显示答:negrei石油表现出有效的抑制能力(74.1428%)相比,二叔丁基对甲酚(100%)。测试表明,使用答:negrei石油是一个很好的氢供体,以便它能够被一种自由基清除剂,控制氧化(35]。

调查结果显示,在这工作答:negrei表现出很强的抗氧化能力,可能导致从侧柏酮作为主要化合物中发现用气相色谱-质谱分析研究了石油(36]。从这个意义上讲,侧柏酮(α和β)据报道,抗自由基活性报道其他地方(37]。这一工作获得的研究结果是一致的与其他报道(38),这表明从属精油艾显示抗氧化活性的DPPH和abt化验。许多作品之间的关系进行了研究植物化学的内容精油的抗氧化潜力。从这个意义上说,据报道,抗氧化能力密切相关的化学物质与羟基功能(39]。因此,石油在酚类化合物以及萜烯醇类可以有很强的抗氧化作用40]。根据获得的结果,精油艾物种表现出非常高的抗氧化功效甚至在最低浓度测试,这样我们就可以确认这个强有力的活动是由含氧单萜的丰富的石油。

3.5。精油的抗菌活性艾negrei

面对合成抗生素抗菌素耐药性的问题,很多工作了天然产物的抗菌能力包括某些植物的精油。在本研究中,抗菌的力量答:negrei精油测试与五个菌株包括大肠杆菌57,大肠杆菌97,k .肺炎,铜绿假单胞菌,和金黄色葡萄球菌耐多药细菌污染的高频率和致病性22]。在这项研究中,抗菌活性是评价通过抑菌圈直径(表2)和麦克风(表3)。获得的结果显示,我们的植物油有强大的抗菌活性大肠杆菌57,大肠杆菌97,k .肺炎,铜绿假单胞菌,和金黄色葡萄球菌以来的最大抑制区和麦克风价值观18-37毫米和1.56 - -12.5毫克/毫升,分别对这些物种(图4)。1.56µg / mL足以抑制的增长铜绿假单胞菌(革兰氏阴性),这是最敏感的研究石油紧随其后大肠杆菌大肠杆菌9日,57岁,k .肺炎(革兰氏阴性),6.25被完全抑制µ克/毫升。另一方面,金黄色葡萄球菌(克+)是严重抑制浓度为12.5µ克/毫升。所有菌株都发现耐抗生素除了进行测试金黄色葡萄球菌(克+)被发现高度敏感链霉素的抑菌圈直径9.32±0.84毫米和耐氨苄青霉素。石油的抗菌效果答:negrei可以解释的存在含氧单萜中确定石油特别是侧柏酮、桉油精,endoborneol, 2-bornanone,然后呢ß松油醇报道拥有有趣的药理作用(41]。这些发现证明了Kordali [31日),表明油更紧密的物种等艾santonicum和艾spicigera拥有高水平的具有生物活性的含氧单萜。另一方面,苦恼答:定主要由碳氢化合物单萜,显示弱抗菌活性等致病细菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌(42]。抗生素的抗菌效果,需要达到和与特定的目标网站。然而,抗菌剂经常中断是由于不同的机制的干预细菌,导致抗菌药物的失败,所以细菌继续发展强烈43]。低灵敏度的革兰氏阴性细菌对抗生素可能导致细胞壁外膜覆盖,这与通过脂多糖涂层疏水药物的扩散。精油从自然资源能够成功穿越细菌的细胞壁和细胞质膜诱导疾病的大分子(脂肪酸、多糖和磷脂)[44]。在这个工作中,精油答:negrei几乎接近活动与革兰氏阳性尽可能多的革兰氏阴性细菌。因此,我们可以确认精油答:negrei是一种强有力的武器对抗耐多药菌株。

测试结果表明,菌株获得的是耐抗生素氨苄青霉素和链霉素。这些结果按照调查在以前的文献[43显示的)肠杆菌属spp。金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌、肺炎,答:baumannii随着大肠杆菌太耐药病原体微生物。此外,压力测试在这个研究工作进行分类属于耐多药报道在以前的作品(38,40]。

3.6。抗真菌活性的石油答:negrei

关于在体外抗真菌活性的评价答:negrei精油、磁盘扩散法显示抗真菌活性的抑制百分比32.93±0.53%,33.80±1.27%和33.66±0.44病圃,答:尼日尔,和白念珠菌。然而,精油没有显示抗真菌活性答:flavus相比其他菌株。这些结果与调查其他协议(45),这表明,石油Borojoa patinoiCuatrec表现出抑制作用白念珠菌因为分享一些常见的化学物质。此外,许多研究将优先级天然产物尤其是真菌菌株包括控制精油病圃,答:尼日尔,a . flavus和白念珠菌(26]。一些流行病学研究已经进行表示,酵母感染假丝酵母负责许多疾病(46]。因此,从天然来源的使用替代治疗能服务社会以低成本控制真菌疾病。

之前报道的文献精油对真菌的作用机制表明,麝香草酚精油更高,和p-cymene穿透细胞诱导薄膜损伤(47,48]。报告的活动在这个工作符合单萜的化学成分,这是最可能对细胞膜的伤害负责。在以前的作品,据报道,麝香草酚的抑菌效果和p-cymene石油假丝酵母spp。,导致间接损害目标细菌的细胞质膜(49]。

4所示。结论

目前的工作旨在阐明化学成分和抗氧化,抗菌,抗真菌的精油的活动答:negrei在折叠中间地图集,摩洛哥。获得的结果表明,石油从研究植物丰富的潜在活性化合物。石油有强大的抗氧化、抗菌和抗真菌的活动。因此,石油答:negrei可以用来作为宝贵的自然源的进一步研究可能导致开发新武器对抗自由基损伤和抗微生物。

数据可用性

数据用于支持这些发现包含在这篇文章。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者扩展他们的感谢院长以来在沙特国王大学科研资助这项工作通过研究小组。(rg - 1441 - 360)。

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