文摘

客观的。探讨辅助的表达T17 (Th17细胞)/监管T细胞(Treg)患者外周血及相关细胞因子的不同类型的溃疡性结肠炎(UC)并分析其与疾病的相关性。方法。从2018年1月至2019年12月,53名患者被诊断为加州大学在我们医院的选择。根据医疗症状,他们被分为湿热的内部积累集团(n= 35)和spleen-kidney阳虚组(n= 18)。21岁健康志愿者被选为对照组。梅奥评分标准被用来确定病人的病情的严重程度。/ Treg Th17细胞的表达水平及相关细胞因子在外周血组之间的比较。皮尔森相关分析之间的关系的比例Th17 Treg细胞在溃疡性结肠炎患者的外周血和Th17 / Treg与梅奥的比例分数。结果。外周血Th17细胞比和Th17 / Treg比湿热的内部积累和spleen-kidney阳虚组高于对照组;Treg细胞比率是低于对照组;外周血Th17细胞比和Th17 / Treg比湿热的内部积累组高那些spleen-kidney阳虚组;和Treg细胞的比例低于spleen-kidney阳虚组( )。血清il - 6的表达水平,IL-17, il - 22生成和肿瘤坏死因子α在湿热的内部积累和spleen-kidney阳虚组高于对照组;il - 10和TGF -β低于对照组;血清il - 6的水平,IL-17 il - 22生成,肿瘤坏死因子-α在湿热的内部积累组高于spleen-kidney阳虚组;il - 10和TGF -β是低于spleen-kidney阳虚组( )。外周血Th17细胞比率和Th17 / Treg比率适度活跃时期集团和严重活动期组高于轻度活跃的时期集团;Treg细胞比率低于轻松活跃的时期集团;外周血Th17细胞比率和Th17 / Treg比率严重活动期组高于适度活跃时期集团;和Treg细胞的比例低于适度活跃的时期。皮尔森相关分析表明,Th17细胞的比例和Th17 / Treg UC患者的外周血与梅奥得分呈正相关(r= 0.762,r= 0.777, )。Treg与梅奥分数负相关(r=−0.790, )。结论。有差异的表达外周血Th17 / Treg细胞及相关细胞因子在UC患者不同的症状,和湿热内容是最重要的。比率越高Th17细胞在外周血和Th17 / Treg失衡的程度,Treg细胞的比例越低,和更严重的UC患者的条件,可以提供一个初步的定量依据中医分类UC的诊断和严重程度。

1。介绍

溃疡性结肠炎(UC)是一种慢性非特异性炎症性疾病,主要影响直肠和结肠粘膜1]。大多数病人有腹痛、腹泻、里急后重、和其他临床特征。溃疡性结肠炎和克罗恩病属于炎症性肠病(2]。病程长,条件是旷日持久,有时只要数年甚至数十年。其病理可以导致多个周边系统的参与,所以有更多的并发症。此外,当慢性炎症反复激怒,它也很快就发展到结直肠恶性病变,构成威胁患者的生活质量和生命安全3]。关于加州大学的发病机制,临床因素主要是对结肠粘膜上皮细胞分泌异常粘液糖蛋白,肠道黏膜通透性的变化,和抗原进入肠道黏膜,导致一系列的炎症和免疫反应变化,并进一步生产炎症介质和抗体,细胞因子、氧自由基,但其最终发病机理和原因仍需进一步研究4- - - - - -6]。目前,很多学者倾向于相信它可能与自身免疫系统,其中,T辅助细胞17 (Th17)监管T细胞(Treg),细胞因子是他们的发生和复发密切相关7]。加州大学属于中医“腹泻”的范畴。在中医辨证理论,加州大学的常见综合征类型包括实际综合征由湿热内部积累和缺陷综合症由spleen-kidney阳虚。在以前的研究中,已经有许多报道Th17 / Treg子组的角色在溃疡性结肠炎的发病机制,其中大部分集中在探索西方医学机制。本研究探讨Th17 / Treg细胞和相关因素的差异表达在UC患者不同中医症状及其相关疾病的状况,为了提供一个理论依据中医辨证的加州大学和临床治疗提供依据。有关详细信息,请参阅以下报告。

2。材料和方法

2.1。一般信息

从2018年1月至2019年12月,根据他们的医学症状,53例UC患者分为湿热内部积累集团(n= 35)和spleen-kidney阳虚组(n= 18)。另一个21岁健康志愿者被选为对照组。湿热的内部积累20国集团包括男性和15个女性。范围从23岁到59岁,平均(35.59±14.26)年。spleen-kidney阳虚组由10 8男性和女性。从24至60岁,平均(36.21±13.95)年。对照组由12个雄性和雌性9。年龄在20 - 58岁,平均(35.65±13.21)年。无统计差异在三组间基线信息( ),具有可比性。

2.2。入选标准

(1)符合相关的西医诊断的“炎症性肠病的诊断和治疗共识(2012年版)。”这意味着(我)持续或反复发作的腹泻、粘液脓,腹痛和便血,里急后重,和不同程度的全身症状;(2)病程超过4 w - 6 w;(3)可能有extraintestinal表现皮肤,粘膜,关节,等等;及(iv)诊断UC结肠镜检查是最重要的依据;在显微镜下,可以看出,肠道粘膜经常表面侵蚀和溃疡;有脓性分泌物,粘膜充血,水肿,血管纹理模糊;和从直肠病变出现连续和弥散分布。(2)符合有关中医诊断的“溃疡性结肠炎的诊断和治疗指南综合中西医”(2011年版)。其中,湿热内部积累综合症患者表现为淡黄色的肤色或淡黄色的巩膜,肮脏的嘴,黄色的尿液,黏液或血液和重口味的凳子上,白色和油腻的舌苔或黄色,厚,油腻的舌苔。 Patients with spleen-kidney yang deficiency syndrome manifested as pale complexion, low speech, anorexia, sore waist and knees, tinnitus, long and clear urine, difficult and hard stool, and blood in the stool. (3) Age was from 18 to 60 years. (4) No intestinal infections in the past 1 month. (5) No antibiotics and probiotics in the past 1 month. (6) The patient and family members agreed and signed the informed consent book.

2.3。排除标准

(1)传染性结肠炎等缺血性结肠炎、阿米巴痢疾,和菌痢;(2)肠穿孔等严重并发症,地方狭窄,和肠梗阻;(3)严重原发性疾病和精神疾病患者的肝、肾、造血系统,等等;(4)恶性肿瘤史的患者;(5)自身免疫性疾病或传染病患者在发病;(6)患者孕期和哺乳期;和(7)血液疾病在过去或正在使用骨髓抑制和/或刺激药物。

2.4。消除标准和下降

(1)病人不能使用标准药物治疗观察期间;(2)那些缺乏认知和表达功能的东西;和(3)那些无法判断其疗效观察期间。

2.5。研究方法

的比例Th17 Treg细胞在外周血检测通过流式细胞术;血清白介素(il - 6, IL-17 il - 22生成)、肿瘤坏死因子-α(肿瘤坏死因子-α)、il - 10、转化生长因子-β(TGF -β酶联免疫吸附试验)水平进行检测。操作方法是严格按照设备指令。提供的工具包是Epison(上海)生物技术有限公司有限公司

2.5.1。评价疾病的严重性

梅奥评分标准临床使用来确定病人的疾病的严重程度。梅奥分数主要是基于数量的排便,便血,内窥镜的变化,医生的综合评价。梅奥< 2分分为症状缓解期(n= 18),3 - 5分为轻度活动时期(n= 13),6到10分为适度活跃时期(n= 12),11 - 12分为严重活跃时期(n= 10)。

2.6。统计方法

使用SPSS 22.0软件的过程。测量数据被表示为( ±年代),方差分析是用于多组比较,t以及用于成对比较。皮尔森相关用于相关分析。计数数据被表示为一个率(%),和χ2测试分析被用于比较。 表明该数据具有统计上的显著差异。

3所示。结果

3.1。比较Th17 Treg细胞比率和Th17 / Treg比率在外周血不同的组

外周血Th17细胞比和Th17 / Treg比湿热的内部积累组和spleen-kidney杨虚证组高于对照组;Treg细胞比率是低于对照组;外周血Th17细胞比率和Th17 / Treg比率的湿热的内部积累组高于spleen-kidney阳虚组;和Treg细胞的比例低于spleen-kidney阳虚组( ),见图1。

(一)
(一)
(b)
(b)
图1
比较Th17 Treg细胞比率和Th17 / Treg比率在外周血不同组( ±年代)。(一)Th17 Treg细胞比率和(b) Th17 / Treg比率。其中,Th17细胞的比率在对照组,湿热的内部积累,和spleen-kidney阳虚组(3.52±0.54)%,(8.98±1.75)%,(7.25±1.66)%,分别;Treg细胞的比率(1.28±0.69)%,(0.86±0.33)%,(1.03±0.52)%,分别;Th17 / Treg比率(4.45±1.21),(10.75±2.81),分别为(9.02±2.77)。 表示与对照组比较, ; #表示与spleen-kidney阳虚组比较, 。
3.2。水平在不同组的比较Serum-Related细胞因子表达

血清il - 6的表达水平,IL-17, il - 22生成和肿瘤坏死因子α在湿热的内部积累和spleen-kidney阳虚组高于对照组;il - 10和TGF -β低于对照组;血清il - 6的水平,IL-17 il - 22生成,肿瘤坏死因子-α在湿热的内部积累组高于spleen-kidney阳虚组;il - 10和TGF -β是低于spleen-kidney阳虚组( ),见数据2和3。


图2
在不同的组(Th17-related细胞因子表达水平的比较 ±年代pg / ml)。对照组的il - 6表达水平,湿热的内部积累集团和spleen-kidney阳虚组(104.95±40.95)pg / ml, (289.32±84.26) pg / ml,和(192.28±92.13)pg / ml,分别;IL-17表达水平(6.98±2.25)pg / ml, (17.56±3.02) pg / ml,和(15.21±2.78)pg / ml,分别;il - 22生成表达水平(20.78±9.42)pg / ml, pg / ml (51.26±12.41), (39.23±9.36) pg / ml,分别;肿瘤坏死因子-α表达水平(10.13±1.61)pg / ml, (28.45±1.95) pg / ml,和(20.96±1.35)pg / ml,分别。 表示与对照组比较, ; #表示与spleen-kidney阳虚组比较, 。
(一)
(一)
(b)
(b)
图3
在不同的组(Treg-related细胞因子表达水平的比较 ±年代)。(a)和(b) TGF - il - 10的表达水平β表达水平。其中,il - 10的表达水平对照组,湿热的内部积累集团和spleen-kidney阳虚组(29.98±9.89)ng / ml, ng / ml(14.35±3.95)和(18.32±3.78)ng / ml,分别;TGF -β表达水平(1268.58±172.36)pg / ml, (932.56±203.16) pg / ml,和(1006.35±186.63)pg / ml,分别。 表示与对照组比较, ; #表示与spleen-kidney阳虚组比较, 。
3.3。比较的比例Th17 Treg细胞和Th17 / Treg比率在外周血活跃的UC组

外周血Th17细胞比率和Th17 / Treg比率在中度和重度的活跃阶段组高于轻微活动阶段的组织;Treg细胞比率低于轻微活动阶段的组织;外周血Th17细胞比率和Th17 / Treg比率严重活跃阶段组高于适度活跃组;和Treg细胞的比例低于中度活性基团( ),见图4。

(一)
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(b)
图4
比较Th17 Treg细胞比率和Th17 / Treg比率在外周血活跃UC组( ±年代)。(一)Th17 Treg活跃UC组之间细胞比率在外周血和(b) Th17 / Treg比率在活跃的UC组外周血。其中,Th17细胞比率的轻组活跃时期,适度活跃时期集团和严重活动期组(7.48±2.35)%,(8.18±2.45)%,(9.88±2.02)%,分别;Treg细胞比率(0.85±0.23)%,(0.71±0.18)%,(0.18±0.20)%,分别;Th17 / Treg比率(9.09±2.98),(11.12±3.26),分别为(12.36±3.66)。 表示比较的轻组活跃时期, ; #表明与适度活跃时期集团 。
3.4。Th17的比例之间的关系,Treg细胞在外周血和的比值Th17 / Treg和UC患者的条件

皮尔森相关分析表明,Th17细胞的比例和Th17 / Treg UC患者的外周血与梅奥得分呈正相关(r= 0.762,r= 0.777, )。Treg与梅奥分数负相关(r=−0.790, ),见图5。

(一)
(一)
(b)
(b)
(c)
(c)
图5
Th17的比例之间的关系,Treg细胞在外周血,Th17的比例/ Treg和UC患者的条件。(a)之间的相关性散点图Th17细胞比和梅奥的分数,(b)散点图之间的相关性Treg细胞比和梅奥的分数,和(c)散点图之间的相关性Th17 / Treg比和梅奥的分数。

4所示。讨论

加州大学目前比较难的一种疾病治疗胃肠病学,大部分是相关的多个因素,如遗传易感性,肠道粘膜免疫,环境,和肠道微生物8,9]。在中医辨证,加州大学的联合行动是由原始缺陷和表面的现实。从表面症状,病人开始入侵的疾病因为潮湿,但在根,病人开始因为脾脏虚弱的疾病。在此基础上,加州大学可以分为六个综合征类型。其中,湿热的实际综合症包括综合症综合症的内部积累和气血停滞不前;缺陷综合症包括脾胃不足综合征和spleen-kidney阳虚的综合症;和实际缺陷和夹杂物的综合征抑郁和脾虚肝的综合征。溃疡性结肠炎的中医证型评估基于相关临床指标和丰富中医辨证的具体内容是对疾病的中医治疗具有重要意义。

肠道粘膜免疫系统的一个重要机制,维护肠粘膜的体内平衡的环境。CD4+T细胞是一个不可或缺的重要组成部分。Th17细胞和Treg细胞是不同的细分CD4细胞分化+T细胞的刺激下不同抗原(10,11]。近年来,许多研究表明,Th17 / Treg外周血的失衡与UC的发病密切相关。外周血Th17细胞是帮手T从CD4细胞分化+T细胞,这是人类自身免疫性疾病密切相关(12]。il - 6的分泌,这是一个多效性的细胞因子与广泛的影响,可迅速产生的急性炎症,如肿瘤、创伤、感染、压力(13];IL-17分泌,这是一个关键细胞因子诱导炎症和参与炎症发生,导致发生的加州大学(14];分泌il - 22生成,这是一个细胞因子il - 10,它有一个双重角色的促进和抗炎症和加州大学的发病机制中起着重要的作用[15];和肿瘤坏死因子-α由系统性炎症细胞因子,调节分泌某些自身免疫性疾病的病理损伤(16]。外周血Treg细胞CD4细胞的一种+T细胞群和免疫调节功能,相反Th17细胞的炎症的影响;他们有抗炎症的影响17]。Treg细胞分泌抑制肠道炎症的抗炎因子il - 10和TGF -β(18]。Th17细胞和Treg细胞共同保持的平衡身体的免疫功能,在正常生理机能,Th17 / Treg比率处于一个平衡状态,Th17 / Treg比率不平衡,从而导致发生的加州大学(19]。

这项研究的结果表明,Th17细胞比率和Th17 / Treg比湿热内部积累的外周血组和spleen-kidney阳虚组高于对照组;Treg细胞的比例低于对照组;Th17细胞的比率和Th17 / Treg湿热内部积累组外周血的比率高于spleen-kidney阳虚组;Treg细胞的比率是低于spleen-kidney阳虚组。增加的原因是,Th17细胞在外周血和失衡Th17 / Treg Treg细胞的减少引起的溃疡性结肠炎的发病机制中发挥重要作用。湿热内部积累活跃阶段,患者更常见Th17细胞所介导的炎性细胞因子,当Th17细胞极度活跃,炎症因子的分泌增加,从而加重炎症反应(20.]。亚群的数量减少,功能下降减少分泌il - 10等各种抗炎的因素,所以它无法抑制炎症和保持身体的免疫平衡(21]。缺乏杨脾脏和肾脏更常见的缓解期,亚群的数量没有显著降低,在一定程度上扮演了一个负面的监管职责,但病人仍有异常的免疫功能,具体体现在Th17及相关细胞因子的表达水平外周血仍高于健康人。在这项研究中,外周血血清il - 6的表达水平,IL-17, il - 22生成和肿瘤坏死因子α在湿热的内部积累组和脾和肾阳虚组高于对照组;il - 10和TGF -β低于对照组;血清il - 6、IL-17 il - 22生成,肿瘤坏死因子-α在湿热的内部积累组高于spleen-kidney阳虚组;和血清il - 10和TGF -β在湿热的内部积累组低于spleen-kidney阳虚组。上述结果与结论是一致的。

这项研究表明,Th17细胞的比率和Th17 / Treg UC患者的外周血与条件呈正相关,和Treg细胞的比例负相关。在这个结果,比Th17细胞和外周血Th17 / Treg比率增加,Treg细胞减少的比率严重UC患者,Th17细胞的比率和Th17 / Treg比率在外周血与梅奥得分呈正相关,和Treg细胞的比例与梅奥分数负相关。这表明Th17 Treg细胞和资产的比例是与UC的严重程度有关,可作为其评价指标之一。因此,调节平衡Th17 / Treg细胞临床治疗UC的新想法。

总之,有差异的表达外周血Th17 / Treg细胞及相关细胞因子在UC患者不同的症状,和湿热的内容是最重要的。比率越高Th17细胞在外周血和Th17 / Treg失衡的程度,降低Treg细胞的比率和更严重的UC患者的状况。本研究可以提供一个初步的定量依据中医的诊断分类和加州大学的严重性,但是仍然存在缺点。例如,样本量太小,Th17 / Treg失衡的具体机制需要进一步的研究和探索。

数据可用性

主要数据支持这项研究的结果可以以合理的请求到相应的作者。

伦理批准

本研究已通过Qijiang医院的伦理委员会,重庆医科大学第一附属医院,重庆医科大学附属永川医院。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

作者的贡献

Jianhua Yu和蜀王都co-first作者。