文摘

的精油胡萝卜胡萝卜无性系种群。胡萝卜从葡萄牙,大量的乙酸香叶酯(29.0%),α蒎烯(27.2%),11αH-himachal-4-en-1βol(9.2%),评估其生物的潜力。抗菌活性对一些革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌,酵母,真菌,曲霉属真菌菌株。最低抑制浓度(MIC)和最小致死浓度(多层陶瓷)评估显示重大活动对革兰氏阳性细菌(麦克风= 0.32 - -0.64μL /毫升),新型隐球菌(0.16μL /毫升)和真菌(0.32 - -0.64μL /毫升)。细菌的抑制管形成和油的效果白色念珠菌生物膜也公布了。丝状形成的油抑制50%以上浓度低至0.04μL /毫升(麦克风/ 128)和生物膜的质量和减少细胞的可行性。油的抗氧化能力,由两个评估在chemico方法,是不相关的。不过,似乎表现出一些抗炎可能通过减少在LPS-stimulated巨噬细胞一氧化氮产量20%左右,没有减少巨噬细胞生存能力。此外,油安全性评估在角质细胞、肺泡上皮细胞、巨噬细胞、肝细胞。总的来说,石油在浓度低于0.64演示了一个安全性μL /毫升。目前的工作强调了生物活性的潜力d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜表明其工业剥削。

1。介绍

芳香和药用植物,如发现唇形科、伞形科的家庭,已经广泛应用于民间医药治疗一些疾病。其影响尤其与精油,广泛描述等生物活性属性抗氧化,抗炎,抗菌,抗菌的(1- - - - - -3]。

属的植物胡萝卜属l .(伞形科)主要生长在温带地区的欧洲,西亚,非洲。然而,一些物种被发现生长在北美和澳大利亚(4,5]。这个物种胡萝卜胡萝卜l,commonly known as carrot, is recognized worldwide due to its roots widely used for both food and medicinal purposes [6]。此外,种子植物精油也被描述为antihelmintic、抗菌、降血压药、利尿剂,在其他生物属性(4]。

该分类单元包括十一个高度多态、相关和interhybridized类群(7- - - - - -9),其中有些被广泛研究对其生物活性属性。然而,只有少数研究确定使用的亚种,需要考虑的一个非常重要的方面考虑到高可变性。例如,d .胡萝卜无性系种群。halophilus精油已经报道了其抗真菌特性对几个人类致病性真菌(7]。反过来,除了抗真菌的活动,d .胡萝卜无性系种群。gummifer精油也被描述为抗炎剂(10)而d .胡萝卜无性系种群。maritimus被指出是展示一个潜在的抗菌效应(11]。

关于亚种d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜,其精油的抗真菌作用之前报道(12]虽然显著抗真菌效果声称,背后的作用机制等影响评估。因此,在目前的研究中,除了油的抗真菌作用对几种酵母(假丝酵母菌株,新型隐球菌)、真菌(毛癣菌属spp。Epidermophyton,Microsporumspp。),曲霉属真菌紧张,我们也旨在阐明一个可能的作用方式尤其是白色念珠菌。,油的效果的抑制发芽管形成一个重要毒力因子,以及石油在预先形成生物膜的影响,被认为是。此外,其他生物属性的精油也评估,也就是说,抗菌,抗氧化,消炎,为了确定一个更广泛的生物活性的潜在的石油工业剥削。此外,考虑到缺乏细胞毒性研究这个亚种的精油和假定的兴趣开发植物性产品是用于人类或动物,植物精油对巨噬细胞的安全性(原始264.7),角化细胞(HaCaT),上皮肺泡细胞(A549),肝细胞(HepG2)也被评估。

2。材料和方法

2.1。精油分离和分析

成熟的伞形花序的种子d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜收集在塞拉达Lousa Coimbra(葡萄牙),2013年7月1日。凭证标本(Ligia萨尔格里罗78)是植物标本的沉积药房Coimbra的大学的教员。精油是通过hydrodistillation风干的伞形花序Clevenger类型装置根据欧洲药典(13]。石油分析进行了气相色谱法(GC)及气相色谱/质谱(GC / MS)。GC是惠普6890气相色谱仪(安捷伦科技,帕洛阿尔托,加州,美国)与惠普GC ChemStation启A.05.04数据处理系统,配备一个注射器和两个火焰离子化检测器(FID)。Graphpak分配器(安捷伦科技,零件号5021 - 7148)被用于同步采样两Supelco(美国Bellefonte Supelco Inc ., PA)熔融石英毛细管柱与不同的静止阶段:SPB-1(聚二甲硅氧烷;30米×0.20毫米身份证。,film thickness 0.20 μ米)和SupelcoWax-10(聚乙二醇;30米×0.20毫米身份证。,film thickness 0.20 μ米)。条件如下:烤箱温度程序:70 - 220°C (3°C /分钟),220°C(15分钟);喷油器温度:250°C;载气:氦,调整线速度的30厘米/秒;分割比例1:40;检测器温度:250°C。GC / MS分析惠普6890气相色谱仪装有HP1石英列(聚二甲硅氧烷;30米×0.25毫米身份证。,film thickness 0.25 μ米),界面的惠普质量选择检测器5973(美国安捷伦科技,帕洛阿尔托,CA)由惠普增强ChemStation软件,版本A.03.00。GC参数如上;界面温度为250°C;女士源温度为230°C;女士四极温度为150°C;电离能是70电动汽车;电离电流60μ一个;扫描范围是35 - 350μ4.51扫描/ s (14]。他们发现的挥发性化合物保留指数和质谱。保留指数,通过线性插值计算一系列的相对保留时间n烷烃,比较与验证样本数据库的生药学实验室教师的药房Coimbra的大学的。质谱与参考光谱比较从自制的图书馆或文献数据(15,16]。相对大量的单个组件计算基于GC峰值区域没有FID响应因子修正。

2.2。抗菌检测

石油的抗菌活性是评价针对革兰氏阳性菌株(枯草芽孢杆菌写明ATCC 6633,单核细胞增多性李斯特氏菌CBISA 3183,金黄色葡萄球菌写明ATCC 6538)和革兰氏阴性的(大肠杆菌写明ATCC 25922和鼠伤寒沙门氏菌写明ATCC 14028)。的最小抑制浓度(麦克风)和最小致死浓度(多层陶瓷)评估根据临床和实验室标准协会(CLSI)参考协议M07-A9 [17]。短暂,连续翻倍稀释的石油被准备在二甲亚砜(DMSO,σ生命科学,Sigma-Aldrich,密苏里州,美国)浓度从0.08到20μL /毫升。最近使用的每个应变文化准备细胞悬浮液(1 - 2×10⁵CFU /毫升)和细胞浓度被证实可行的指望穆勒辛顿琼脂(Oxoid,英国汉普郡)。所有测试都使用穆勒执行辛顿肉汤培养基和试管孵化耗氧在37°C 24 h,然后中等收入国家注册。评估多层陶瓷,20μL(肉汤被从每个负面管麦克风阅读后,穆勒辛顿琼脂平板培养,孵化如上所述。测试菌株的敏感性由参考化合物的使用,控制氨苄青霉素(丙烯酰胺BioChemika,书,瑞士)。所有测试都是在重复执行。麦克风和多层陶瓷价值被认为是当三个独立化验有相同的值。

2.3。抗真菌活性和作用机理分析

精油的抗菌性能进行了测试与三人假丝酵母参考菌株(白念珠菌写明ATCC 10231,c . tropicalis写明ATCC 13803,c . parapsilosis(写明ATCC 90018)和两个临床菌株c . kruseiH9和c . guilliermondiiMAT23);一个新型隐球菌参考菌株(c . neoformans摄影1078);四个皮肤真菌菌株(毛癣菌属石2794年摄影,t . mentagrophytesvar。interdigitale2958年摄影,t . verrucosum2992年摄影,Microsporum gypseum摄影2908);剩下的皮真菌临床孤立(t . mentagrophytesFF7,m .犬属FF1,Epidermophyton floccosumFF9);两个参考曲霉属真菌压力(答:尼日尔写明ATCC 16404和答:来自烟写明ATCC 46645);和一个曲霉属真菌压力从临床来源(答:flavusF44)。中等收入国家和多层陶瓷评估按照CLSI参考协议M27-A3 [18]和M38-A2 [19分别为酵母和丝状真菌,如前所述,Zuzarte et al。20.]。

阐明一个可能的作用机制的抗真菌作用,两个分析被认为是:抑制白念珠菌生殖管生物膜形成和破坏的预制,精油的存在。第一个试验是测试之前报道的平托et al。21]。胚管的比例决定细胞的数量显示菌丝至少只要芽生孢子的直径。细胞显示收缩点连接的母细胞菌丝,典型的假菌丝,被排除在外。结果显示三个独立决定的平均值±标准偏差。在预制精油的效果白念珠菌生物膜是用描述的方法评估Taweechaisupapong et al。22)做了一些调整。简单地说,一个循环SDA的文化白念珠菌成长为24小时37°C是悬浮在酵母蛋白胨葡萄糖(YPD)肉汤(蛋白胨酵母提取物1%,2%,和2%葡萄糖)和孵化24小时在37°C。然后,细胞被彻底洗两次与无菌PBS (pH值7.4)(KH 0.8%生理盐水、0.02%₂阿宝₄,0.31%的钠₂HPO₄h·12₂O, 0.02%氯化钾)。每个洗涤步骤之间,暂停提交10分钟离心3000 g。细胞密度是约1×10的调整⁶CFU /毫升,用血球计,然后100年μL最终悬挂的是添加到96 -微量滴定板和孵化24小时在37°C,形成生物膜。三个与PBS洗涤步骤,精油(1.25 -10μL / mL,准备在RPMI)被添加和孵化24 h,在37°C。正面和负面的控制被认为是使用无菌RPMI肉汤和接种RPMI肉汤,分别。生物膜质量量化使用结晶紫根据Raut et al。23]。使用XTT测定生物膜的可行性评估,作为描述组织et al。24)做了一些调整。简单地说,生物膜的形成和精油治疗后,介质被除去,生物膜与PBS彻底洗干净。XTT的解决方案(1毫克/毫升)甲萘醌丙酮(10毫米)添加到最终的浓度4μm . 100μL(这个解决方案增加了孵化为2 h后在黑暗中37°C。吸光度是观察到在490纳米和生物膜的可行性取决于比较处理样品的吸光度与未经处理的。结果显示三个独立的均值±标准差决定在重复执行。

2.4。抗氧化试验

精油的抗氧化性能测定使用两种不同的抗氧化试验,即2,2′-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic酸)(abt^•+)清除氧自由基吸收能力(ORAC)化验。abt的^•+执行清除试验根据再保险等描述的过程。25),做了一些调整。简单来讲,abt^•+股票的解决方案是由ABTS-NH的反应₄水溶液(7毫米)与2.45毫米钾过硫酸盐在黑暗中在室温下12 - 16 h。这个解决方案被稀释,直到吸光度在734纳米。确定清除活动,1毫升的abt^•+添加到100μ0.64 L(-20毫克/毫升精油在DMSO溶液。20分钟后,吸光度是阅读在734 nm分光光度计对空白(绝对乙醇)。样品的抗氧化能力表示为IC₅₀(μg / mL)和标准的化合物相比,Trolox (0.75 -12μg / mL)。数据显示为平均值±标准差是三个独立的化验。

氧自由基吸收进行了分析使用加勒特描述的方法等。26]略有修改。简单地说,150年μL(荧光素(10 nM)是用移液器吸取96孔板和25μL (Trolox (25 - 200μ0.32米)或样本(-10毫克/毫升磷酸盐缓冲剂)是补充道。这种混合物是孵化10分钟的37°C。在那之后,25μL (2, 2′-azobis (2-amidino-propane)盐酸盐(153毫米)被添加到每个除了消极的控制,其中包含25μL磷酸盐缓冲剂。荧光立即阅读在盘子里读者每1分钟,在60分钟。发射波长是设定在530/20 nm和激发波长在485/20 nm。曲线下的面积(AUC)确定所述其他地方(27]。结果,表示为Trolox等效(TE) / mg石油,显示为均值±标准差至少有三个独立的决定。

2.5。抗炎试验

精油的抗炎效应决定在chemico和在体外化验使用S-nitroso-N-acetyl-D L-penicillamine(提前),一氧化氮(NO)供体和通过评估没有释放的脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞,分别。

为在chemico浓度测定,一些石油(0.08 - -1.25μ0.9 L /毫升)孵化了μ临时解决方案(100毫米)的L endotoxin-free杜尔贝科的修改鹰介质(DMEM),在300年的最后一卷μL, 3 h。没有清除活动被量化评估中使用亚硝酸盐含量格里斯反应,正如前面提到的(10]。为在体外化验,原始264.7,鼠标进展期巨噬细胞细胞系写明ATCC (tib - 71),在DMEM培养补充10% (v / v) non-inactivated胎牛血清,3.02 g / L碳酸氢钠,100年μg / mL链霉素和100 U /毫升青霉素在37°C,在湿润的气氛中95%的空气和5%的公司₂。评价抗炎潜在的石油,巨噬细胞(0.3×10⁶细胞/)培养48-well微型板块和允许稳定12 h。这段时间后,细胞保持在与不同浓度培养基(控制)或preincubated精油的1 h,后来与LPS激活(1μg / mL) 24 h。一氧化氮是量化通过测量使用比色格里斯测定亚硝酸盐的积累(28]。

同时,细胞生存能力也决定使用刃天青方法所描述的里斯期等。29日]。代谢活跃细胞减少刃天青(蓝色)到resorufin(粉红色),因此减少染料的大小是与可行的细胞的数量。上述治疗后巨噬细胞、刃天青解决方案(0.125毫克/毫升)添加(1:10)在37°C和细胞进一步孵化30分钟在湿润的气氛中95%的空气和5%的有限公司₂。量化了使用ELISA酶标读者(SLT、奥地利)570海里,参考波长为620 nm。读控制执行为了排除非特异性的影响油刃天青(数据没有显示)。

2.6。毒理学资料

在几个哺乳动物细胞系细胞毒性进行了评价,即人类肝癌细胞HepG2,写明ATCC 77400号;人类的角化细胞细胞系HaCaT,获得DKFZ(海德堡);人类肺泡上皮细胞系A549,写明ATCC ccl - 185;和老鼠的进展单核巨噬细胞细胞系,前面提到的。

简而言之,生264.7 (0.6×10⁶/毫升),细胞HepG2 (0.5×10⁶细胞/毫升),HaCaT (0.2×10⁶细胞/毫升),A549 (0.2×10⁶细胞/毫升)细胞悬浮液被准备。然后,细胞培养在48-well微型板块在600年最后一卷μL 12 h和进一步培养与不同浓度(0.08至1.25μ精油的L /毫升),24 h。最后,60μL(刃天青(0.125毫克/毫升)添加和盘子培养30分钟(原始264.7),60分钟(HepG2和A549),和120分钟(HaCaT) 37°C,在湿润的气氛中95%的空气和5%的有限公司₂。细胞生存能力是由阅读570海里的吸光度与参考滤波器在620 nm反对消极的控制(细胞培养在缺乏石油)的ELISA酶标读者(SLT、奥地利)。读控制执行为了排除非特定的石油对刃天青(数据没有显示)。

2.7。统计分析

数据表示为平均值±标准平均误差(SEM)。统计学意义决定使用单向方差分析(方差分析),其次是Dunnett事后测试。统计分析软件(GraphPad软件)使用Prism 5.0。差异被认为是重要的。

3所示。结果与讨论

3.1。化学成分

的精油d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜得到从伞形花序收益率为0.9% (v / w)。成分表列出的石油1,根据他们的洗脱顺序聚二甲硅氧烷列。石油主要是由碳氢化合物组成的单萜(46.6%)和含氧单萜(29.5%),与乙酸香叶酯(29.0%)和α蒎烯(27.2%)是主要的组件。值得注意的是,这些化合物也被确定为主要成分的精油来自花伞形花序生长在另一个地区的同一物种的葡萄牙(Cantanhede) [12(37.9%),尽管定量差异蒎烯和乙酸香叶酯为15.0%)。反过来,在反对那项研究,d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜石油在此获得了大量的氧气含倍半萜烯(15.6%与2.5 - -3.1%),有11个αH-himachal-4-en-1βol的主要化合物。这个成分也被确定为主要化合物之一d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜意大利血统的石油从植物(12]。

3.2。抗菌活性

石油对革兰氏阳性菌株的抗菌潜力(枯草芽孢杆菌,单核细胞增多性李斯特氏菌,金黄色葡萄球菌)和革兰氏阴性的(大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌总结在表2。结果表明,石油更有效对抗革兰氏阳性细菌,用麦克风值在0.32到-0.64之间μL /毫升。革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌之间观察到的差异主要是由于不同的细胞壁结构,作为革兰氏阴性细菌的细胞壁组成的复杂得多的外膜亲水多糖链组成的,作为疏水屏障精油(30.]。

以前,从草精油的抗菌活性,开花,成熟的伞形花序的野生胡萝卜生长在波兰也测试(9]。尽管直接对比研究和现在不能被认为是由于使用不同的抗菌测试(琼脂稀释法与macrodilution汤方法),获得的油在前面的工作更有效对抗革兰氏阳性细菌(麦克风= 3 - 5μL /毫升)。这些差异可能是由于不同的化学成分(蒎烯、桧烯与 蒎烯和乙酸香叶酯),众所周知,桧烯没有抗菌活性的31日]。相反,使用的精油在此主要是乙酸香叶酯和丰富α蒎烯。这些化合物被检测其抗菌潜力和一些研究指出高抗菌活性α蒎烯(32,33乙酸香叶酯[]和疲软的活动30.),这可能证明石油的活动。然而,小的化合物也可能干扰抗菌活性,及其潜在影响不应丢弃。

3.3。抗真菌活性和机制的行动

精油的抗真菌活性,对人类和动物病原体提出了表3。一般来说,石油是更有效的反对新型隐球菌(麦克风= 0.16μL /毫升)和皮肤真菌菌株,麦克风从0.32到0.64不等μL /毫升。不管石油更有效对抗假丝酵母种虫害和曲霉属真菌spp。,它显示一个非常低的麦克风c . guilliermondii,类似于发现真菌(0.32μL / mL),因此建议一些特异性的石油的压力。总的来说,石油显示和抑制真菌的抑菌效果对大部分的压力测试以来MIC值是类似于多层陶瓷的。值得注意的是,石油的主要分离化合物中确定本研究,即乙酸香叶酯,α蒎烯、柠檬烯,之前也一直在评估潜在抗真菌。对真菌和乙酸香叶酯表现出良好的抗真菌的影响新型隐球菌;然而,它在抑制的增长疲软的表现假丝酵母菌株和曲霉属真菌spp。2,21]。同样的,α蒎烯显示抑制效果白念珠菌和新型隐球菌(34,35对皮肤真菌菌株)以及强有力的作用[36]。此外,平托et al。21)也表明这种化合物表现出强烈抑制真菌的抑菌活性,这种效果是卓越的假丝酵母和曲霉属真菌spp。一些作者也描述了抗真菌活性的柠檬烯对几种真菌菌株(36- - - - - -39]。因此,这些主要的活性化合物d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜精油可以负责这种油的抗真菌效果更高。

尽管研究的抗真菌活性d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜石油以前,行动潜在的这种影响的机制仍然未知。因此,在本研究中,我们试图说明可能的行动模式白念珠菌。选择两个化验,即抑制细菌生物膜管的形成和破坏的。

的影响subinhibitory精油的浓度的抑制作用白念珠菌芽管形成展示在表4。石油能够达到50%以上的丝状形成抑制浓度低至0.04μL /毫升(麦克风/ 128)。这很有趣,因为丝状形成(二态的过渡从酵母到丝状的形式)白念珠菌对毒性至关重要(40),看来丝状形成抑制本身是充分的治疗播散性念珠菌病(41]。麦克风之间的显著差异和filamentation-inhibiting浓度似乎表明,不同机制的行动可能会负责这两个生物效应。乙酸香叶酯的主要化合物d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜油,可以负责这个活动评估Zore et al。42]。这种化合物是高度有效的反对serum-induced形态发生(酵母菌丝的过渡形式白念珠菌写明ATCC 10231)只有73μg / mL造成63%抑制发芽管感应(42]。

数据1和2代表的精油的效果白念珠菌生物膜。结晶紫法量化生物量的生物膜染色用染料而XTT试验评估细胞生存能力通过分析形成水溶性晶体形成后线粒体代谢。结果表明,石油促进生物膜生物量的减少甚至为最低浓度测试(图1)。因此,结果表明,油能够干扰的生物膜通过减少附加的生物量的数量。关于生物膜细胞活力,浓度高于1.25μL /毫升也降低了细胞的生存能力(图2),影响生物膜的发展。注意,生物膜的形成是一种生存机制,导致微生物毒性和持久性43,44]以来,生物膜很难消除由于其高抗真菌抗性相比自由细胞。这些结果强调承诺antibiofilm活动为未来铺平道路转化研究传播的念珠菌病的治疗。

3.4。抗氧化剂的分析

抗氧化剂的分析使用abt精油进行了^•+清除和化验。表5总结了结果。看到,精油既不是良好的abt清道夫^•+(集成电路₅₀= 1924.25μg / mL),也不是一个好的peroxyl-induced氧化抑制剂(ORAC值为7.13μ摩尔/ TE /毫克石油)。比较目前的结果与他人相同的植物物种是不可能由于缺乏后者。

3.5。抗炎活性

化学没有清除方法具有两个特征;即,它允许评估的精油的抗氧化潜力测试逮捕这种激进的能力但还允许初步筛选抗炎的潜力,因为没有炎症的重要中介。图3总结了精油的没有清除活动。结果表明,精油没有清除活动对没有对所有的测试浓度(0.08 - -1.25μL /毫升)。为了深入探索是否精油调节没有生产,我们还使用了一个在体外模型组成的巨噬细胞炎症刺激toll样受体激动剂LPS受体4。数据4(一)和4 (b)总结没有释放,细胞的可行性LPS-stimulated巨噬细胞不同浓度处理的精油,分别。据我们所知,这是第一次报告的抗炎活性d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜。如图4(一)孵化有限合伙人的巨噬细胞,24 h,导致亚硝酸盐产量显著增加。考虑到石油的毒性呈现在图4 (b),抑制没有只考虑生产无毒浓度的石油。事实上,没有产量下降了19.04%,相对有限合伙人(),在不影响细胞的生存能力在0.64μL /毫升的石油。这些结果表明潜在的油的抗炎效果。尽管如此,进一步的实验在不同的促炎介质和信号转导途径应考虑确认此活动。

精油的主要成分,即乙酸香叶酯α蒎烯,可能占大多数的油的抗炎可能因为以前的研究已经指出他们的潜在抗炎(例如,45- - - - - -47])。

3.6。毒理学资料

精油是筛选的细胞毒性在一些哺乳动物细胞行来评估一个潜在的药物的应用d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜精油和聚集结果总结表6。可以推断,0.64的浓度μL /毫升诱发不同的细胞生存能力结果在所有研究的细胞系,巨噬细胞是最富有弹性的(细胞生存能力)和肝细胞最敏感(60.73%±6.51细胞生存能力)。另一方面,可以得出这样的结论:浓度低于0.64μL /毫升没有毒性,呈现研究的大多数细胞的安全性。低浓度的石油引发刃天青的增加减少,这可能表明增加代谢活动的细胞或细胞增殖。进一步的研究应该进一步探索这些结果。然而,它是重要的强调,没有先前进行的有关研究的细胞毒性效应d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜精油。然而,我们曾报道,乙酸香叶酯非常有害的细胞毒性的影响2]。

4所示。结论

这项研究允许一个更好的理解的生物活性d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜精油。结果表明,这种油有重大活动的抑制革兰氏阳性细菌,新型隐球菌和真菌。重要的是,石油也是有效的抑制细菌生物膜管的形成和预制白色念珠菌。尽管石油表现出没有相当大的反激进主义的活动,它减少了约20%没有释放LPS-stimulated巨噬细胞,这些细胞的浓度没有毒性。它是合理的得出浓度低于0.64μL /毫升呈现不同的人类细胞类型的安全性揭幕的精油治疗的潜在应用的目的,特别注重真菌感染与促炎状态有关。披露的作用机制和进一步的实验在活的有机体内测试是至关重要的,进一步支持的利益和安全d .胡萝卜无性系种群。胡萝卜精油。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

作者感谢Otilia维埃拉(Coimbra大学神经科学中心和细胞生物学,葡萄牙)提供原始264.7细胞系,尤金尼亚卡瓦略(Coimbra大学神经科学中心和细胞生物学,葡萄牙)的礼物HaCat细胞系,并不是主力Pedroso利马(Coimbra大学神经科学中心和细胞生物学,葡萄牙)对HepG2细胞线。