文摘
测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara,属于唇形科家庭,被广泛用作抗炎和抗肿瘤药物治疗不同的炎症和癌症。这项研究的目的。调查类黄酮的治疗效果和可能的机制的一部分测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara (RJFs)在急性肺损伤(ALI)引起的小鼠脂多糖(LPS)。材料和方法。老鼠口头管理与RJFs(6.4, 12.8,和25.6毫克/公斤)7天,每天连续,在有限合伙人的挑战。肺标本和支气管肺泡灌洗液(BALF)被孤立的组织病理学检查和生化分析。补充3 (C3)的血清水平的量化了夹心酶联免疫试剂盒。结果。RJFs显著减毒LPS-induced阿里通过减少炎症介质水平的产品(TNF -α、il - 6和il - 1β),并显著降低补体沉积与降低血清中C3水平,这是一起展出降低髓过氧化物酶(MPO)活性和一氧化氮(NO)和BALF中蛋白质浓度。结论。RJFs显著减弱LPS-induced阿里通过减少促炎介质的产品,减少补充的水平,减少自由基。
1。介绍
急性肺损伤(ALI)和更严重的形式,急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是重要的病理条件特别是在一些严重的传染性呼吸道疾病(1]。他们两人的特点是alveolar-capillary膜破坏,大量的白细胞浸润,并释放促炎介质,肺水肿与蛋白质的肺泡渗出液和气体交换的恶化,最后呼吸衰竭(2]。此外,ALI / ARDS的发病机制涉及到免疫损伤和补语的overactivation系统[3]。它报道,补3 (C3)是参与肺损伤,并抑制补体的激活可能是一种很有潜力的治疗策略4,5]。尽管最近的进步许多新的治疗策略,阿里仍然超过40%的死亡率6]。发展有效的代理仍然是急需的。
测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。植物属于Hara属测在家庭唇形科,作为传统草药几个世纪以来在中国较低的毒性(7]。民间医药,发现是有效的在感冒、发烧、肝炎、胃炎、乳腺炎,扁桃体炎,肝癌,乳腺癌8]。最近,其现代药理特性也报道,如抗菌和anti-ischemic属性(9,10]。主要的化合物,如毛地黄黄酮、quercetin-3-methylether芹黄素,luteolin-7-methylether,芦丁,槲皮素,异槲皮苷,glaucocalyxin, glaucocalyxin B, glaucocalyxin C, oleanic酸,和乌索酸,分离和鉴定,草(11- - - - - -13]。
在我们之前的研究中,乙醇提取的测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara被发现含有大量的黄酮类化合物;此外,十个黄酮类化合物被认为是anticomplementary代理在体外(11- - - - - -13]。然而,是否flavonoidsfractionof测粳稻var. glaucocalyx(格言)。Hara (RJFs)变弱LPS-induced阿里和可能的机制仍然未知。在目前的研究中,我们调查的治疗效果和可能机制的RJFs阿里LPS诱导的小鼠。
2。材料和方法
2.1。试剂
有限合伙人(大肠杆菌055:B5)从Sigma-Aldrich购买有限公司(圣路易斯,密苏里州,美国)。醋酸地塞米松(DXM)平板电脑(数量。H33020822)购自浙江仙居制药有限公司有限公司(杭州,浙江,中国)。小鼠肿瘤坏死因子-α、il - 6和il - 1βELISA试剂盒(B1007233数量)从上海购买王传福生物技术有限公司(上海,中国)。一氧化氮(NO)和bicinchoninic酸(BCA)蛋白质化验设备,髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒是购自南京建成生物工程研究所(南京、江苏、中国)。三氟乙酸是购自丙烯酰胺。β牛乳糖和β葡糖苷酶买来Sigma-Aldrich有限公司。硫酸多粘菌素B从Amresco购买。多克隆兔反C3c补充(rs - 0367 r)购买瑞琪生物科技有限公司、上海有限公司(上海,中国)。溶剂、乙腈和甲醇的高效液相色谱级从大肠默克(达姆施塔特,德国)和甲酸的纯度为96%在高效液相色谱中的应用也是年级(Tedia,美国)。水从Milli-Q获得水净化系统(微孔,贝德福德,妈,美国)。AB-8 Baoen买来大孔吸附树脂吸附技术有限公司有限公司(河北沧州,中国)。所有其他试剂是最高质量的。
2.2。RJFs的植物材料和制备
测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara是从百合网购买森林,桃山林业局,超载货车,中国黑龙江省,2008年10月。植物材料被Zhenyue王教授身份验证,黑龙江中医药大学,和凭证标本(081008号)沉积在药物学的植物标本,黑龙江中医药大学、黑龙江、p . r .中国。RJFs的提取和纯化进行了根据我们先前的研究。的叶子和茎干测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara(100克)在回流提取80% EtOH(1000毫升)2 h,重复两次。过滤后,结合80% EtOH提取物被蒸发在真空下干燥60°C。提取(0.32 g / mL)的解决方案是添加到列loading-treated AB-8大孔型树脂吸附在36 mL / min,然后用水洗摆脱极性杂质。RJFs EtOH列被筛选了60%,和洗脱溶液蒸发干燥60°C到黄色粉末。
2.3。通过经典途径互补活动
根据迈尔的修改方法14),致敏红细胞(EAs)是由2%的孵化绵羊红细胞(4.0×108细胞/毫升)与兔子anti-sheep根据红细胞抗体(1:1000)2 +(包含0.5毫米毫克2 +Ca和0.15毫米2 +)。样品溶解在根据2 +。豚鼠血清是用作补充来源。选择1:60稀释豚鼠血清轻快给高频溶解在缺乏补体抑制剂。总之,各种稀释的测试样品(200μ与200年L)涨跌互现μ豚鼠血清L, 200μL (EAs添加,然后混合是在37°C的环境中30分钟。不同的试验控制孵化在同一条件:(1)车辆控制:200μL 400年东亚峰会μL根据2 +;(2)100%溶菌作用:200μL 400年东亚峰会μL超纯水;(3)样本背景:200μL 400年每个样本的稀释μL根据2 +。反应混合物是离心机孵化后立即在4°C。上层清液的光密度测量在405 nm扫描(Labsystems龙)。研究结果表明在溶血抑制百分比。抑制溶菌作用(%)= 100−100×()÷。
2.4。超高效液相色谱-光谱法(UHPLC-MS) RJFs分析
UHPLC是安捷伦6540 accurate-mass Q-TOF LC / MS系统(美国安捷伦科技)。一个UPLC C18分析柱(2.1毫米×100毫米,1.7身份证μ美国水域m, ACQUITY UPLC本·)进行分离,再加上C18 precolumn 1.7(2.1毫米×5毫米,身份证μm, Van警卫队TM本·,水域,美国)在室温20°C。流动相是水的混合物(a)和乙腈(B),均包含0.1%甲酸,使用梯度洗脱(8分钟:25% 0分钟:5% B, B, 18分钟:75% B, 25分钟:100% B, 28分钟:100% B) 3分钟平衡回到5%的注射量是1μL,流量被设定为0.4毫升/分钟。质谱得到积极的模式,和源参数设置如下:气体温度300°C,气流8 L / min,喷雾器40 psi, Vcap 3500喷嘴电压()500年,Fragmentor 120。群众参考使用m / z121.0509(嘌呤)和922.0098 (hexakis phosphazine)。
参考化合物通过高效液相色谱法(> 95%)隔离用纯甲醇在我们实验室解决方案,和每个标准溶液的浓度如下:336年槲皮素μ308 g / mL,毛地黄黄酮μ143 g / mL,牡荆素μ336 g / mL,异槲皮苷μ500克/毫升,杯子μ克/毫升。然后股票准备校准解决方案的混合参考化合物,含有67.2μ61.6 g / mL槲皮素,μ28.6 g / mL木樨草素,μ67.2 g / mL牡荆素,μ100.0 g / mL异槲皮苷,μ克/毫升杯子。
数据分析进行安捷伦MassHunter工作站software-Qualitative分析(版本B.04.00、构建4.0.479.5 Service Pack 3,安捷伦科技,Inc . 2011)。这是应用在正离子模式下使用以下设置:提取限制2 - 20分钟的保留时间,峰值高度≥100项,电荷状态1,峰间距0.0025公差m / z+ 5.0 ppm;化合物的相对高度≥2.5%,绝对高度≥1000项;元素的C、H、O、N 3-60, 0 - 120, 0 30 0 30,分别生成公式。结果显示色谱峰(BPC的基地m / z范围100 - 950)。
2.5。Glaucocalyxin的内容(GLA),槲皮素,RJFs毛地黄黄酮的高效液相色谱(HPLC)分析
使用安捷伦高效液相色谱法定量分析了无穷1260系统YMC C18柱(4.6×250毫米,5μ米),执行高效液相色谱的流动相,这是50%的水的混合物(a)和50%甲醇(B),均包含0.1%甲酸。注射量是20μL和流量被设定为1.0毫升/分钟,和监控在230年达到顶峰,365海里。校准曲线由0.064 - -2.001毫克/毫升的杯子,0.063 - -2.206毫克/毫升槲皮素,0.063 - -2.006毫克/毫升毛地黄黄酮标准的解决方案。山峰被确定的保留时间与标准。分析一式三份。
2.6。在RJFs总类黄酮含量测定
总黄酮类化合物RJFs使用之前描述稍微修改过的比色法测定(15]。13毫升甲醇稀释样品溶液的混合纳米1毫升的5%2解决方案。6分钟后,1毫升10%的间变性大细胞淋巴瘤引起3的解决方案是添加和允许代表6分钟然后10毫升4%的氢氧化钠溶液被添加到混合,站了15分钟。混合物的吸光度测定在510 nm,毛地黄黄酮作为标准。
2.7。动物
雄性昆明小鼠,大约24 - 28 g,购买实验动物中心的东吴大学(苏州,江苏,中国)。老鼠放在一个特定的病原体自由状态和得到食物和水随意。实验室温度°C,相对湿度40 - 80%。在实验之前,老鼠可以适应实验环境至少3天。本研究实验协议所示动物伦理委员会批准东吴大学的学校。
2.8。ALI模型的建立和预防方案(16- - - - - -24]
RJFs地面和悬浮在蒸馏水中含有0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)政府老鼠。
小鼠随机分为7组():对照组,RJFs集团(RJFs治疗25.6毫克/公斤没有有限合伙人),模型(有限合伙人,2毫克/公斤)集团RJFs-pretreated组(RJFs为6.4、12.8和25.6毫克/公斤有限合伙人,职责),和积极的组织(DXM 5毫克/公斤)。
RJFs和RJFs-pretreated组收到RJFs特定剂量的胃内的注入,每个老鼠每天口服一次7天,连续。阳性组DXM只有7天。老鼠从控制模型,并积极组织获得了平等的体积蒸馏水代替RJFs。我们选择这些药物的剂量是根据我们的初步实验。7天,2 h RJFs和DXM治疗后,小鼠轻微麻醉以20%的聚氨酯(4毫升/公斤)腹腔内。然后,在实验小组,2毫克/公斤有限合伙人灌输气管内的(信息技术)在50岁μL NS诱导肺损伤。老鼠从控制和RJFs组50μL NS it滴注法没有有限合伙人。它花了5 - 6分钟/鼠标诱导肺损伤。动物很快从手术中恢复过来仅有轻微的不适感。
后6 h有限合伙人的挑战,每组小鼠的一半()是牺牲和收集血液样本(每个人大约是1毫升)。正确的肺被用来收集BALF、灌洗是0.8毫升的热压处理过的NS的三倍。左肺被用来获取肺W / D比率。后24 h有限合伙人的挑战,其余的老鼠牺牲。肺下叶的用于病理评估。上叶的肺被用来收集BALF。左肺是使用均质机均质。
2.9。没有和蛋白质分析
BALF收集如前所述。后6 h有限合伙人的挑战,老鼠被放血牺牲。BALF是通过气管内的滴剂,每个样本离心机(4°C, 1400 g×10 min)及其上层清液储存在−80°C的分析没有和蛋白质水平。没有的内容和蛋白质的上层清液BALF (6 h)被没有测量,BCA蛋白质化验用品严格按照制造商的指示。
2.10。肺W / D比率
老鼠被放血牺牲后6 h有限合伙人的挑战。左肺切除,涂抹干燥,称重获得“湿”的重量,然后放在烤箱在80°C 48 h获得“干”的重量。干的湿肺肺的比率计算评估组织水肿。
2.11。血清中补体3 (C3)分析
在有限合伙人挑战后6 h,老鼠的血液被收集。血液样本凝固在室温下10分钟然后离心机(4°C, 1400 g×20分钟),其上层清液(血清)存储在−80°C进行后续分析。血清中补体3水平的量化了夹心酶联免疫试剂盒,严格按照制造商的指示。
2.12。化验SOD和MPO活动
在有限合伙人挑战后24小时,左肺使用均质机均质,然后他们准备10%的肺组织匀浆。组织匀浆生成化验MPO活性,这是衡量MPO决心工具包使用商业上可用的试剂根据制造商的指示。匀浆然后离心机在1400 g×10分钟在4°C。得到的上层清液用于测定SOD活性。SOD活性表达为单位每毫克的蛋白质。
2.13。细胞因子分析
细胞因子TNF -的水平α、il - 6和il - 1β上层清液的BALF(24小时)量化夹心酶联免疫试剂盒在重复使用商用试剂,严格按照制造商的指示。
2.14。肺组织学的研究
老鼠牺牲后,下叶的肺组织立即被收获,甲醛固定在4%。然后肺组织脱水,嵌入在石蜡。石蜡切片苏木精和伊红染色(圆))根据常规染色法。图像是一个奥林巴斯显微镜下观察到的原始放大400倍。
检测的补充存款,5μ米部分deparaffinized,水化,孵化兔子反C3c一夜之间在4°C。片是可视化使用显色底物溶液3、3′-diaminobenzidine (DAB)。所有幻灯片应用消费级数码相机成像4500摄像头(尼康)匹配CX21显微镜(奥林巴斯)的原始放大400倍。
2.15。统计分析
所有的值被表示为均值±执行统计分析,时任单向方差分析(方差分析)。如果发现任何重大的改变,使用费舍尔的PLSD事后进行了比较。统计学意义是接受。
3所示。结果
3.1。化学分析RJFs
以前的研究已经表明测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara主要含有黄酮类和萜类化合物(11- - - - - -13]。AB-8大孔吸附树脂是用于黄酮类和二萜RJFs的浓缩。通过UHPLC-Q-TOF-MS分析,总共15截然分开色谱峰RJFs可以发现在BPC RJFs(图1)。质分析,五个山峰可以实现通过对比参考标准的保留数据和光谱女士。其他发现山峰被他们初步确认准确的质量数据相比,报道引用。RJFs主要含有黄酮类化合物。如表所示1峰,3、4、5、6、7、8、12、13、15初步确认是类黄酮和山峰9和14被初步确认是萜类化合物。在我们之前的研究中,我们分离了一些化合物如山峰1、3、5、9、13、14、15日(11- - - - - -13]。结果表明:杯子、槲皮素和毛地黄黄酮含量分别为2.90%,0.308%,和0.291%的RJFS,分别由高效液相色谱分析。RJFs总类黄酮含量12.90%的比色方法。
(一)
(b)
(c)
3.2。体外Anticomplementary RJFs的活动
如图2绵羊红细胞,RJFs显著抑制溶血诱导豚鼠血清(CP50=毫克/毫升)。
3.3。RJFs对肺的影响W / D比率,没有,BALF中总蛋白浓度的老鼠
如图3肺W / D比率,和总蛋白浓度明显高于BALF中被发现后,有限合伙人的挑战相比对照组(),而RJFs(25.6毫克/公斤)填喂法本身没有造成重大的改变。
(一)
(b)
(c)
(d)
与车辆治疗ALI模型组相比,预处理与RJFs显著降低没有和总蛋白浓度()BALF的老鼠(数字3 (b)和3 (c))。RJFs在12.8和25.6毫克/公斤显著降低肺W / D比率()(图3(一个))。DXM也显著降低肺W / D比,不,和总蛋白浓度。
3.4。RJFs对血清中C3生产LPS-Induced阿里
如图3 (d)后,C3水平明显高于有限合伙人的挑战相比对照组(),而RJFs(25.6毫克/公斤)填喂法本身没有造成重大的改变。与车辆治疗ALI模型组相比,预处理与RJFs显著降低C3水平(在小鼠的血清。RJFs在12.8和25.6毫克/公斤显著减少了C3水平()。DXM也显著降低了C3水平。
3.5。RJFs对SOD的影响和MPO活动LPS-Induced阿里的肺组织
如图4,有限合伙人的挑战导致显著降低SOD活性和MPO活性显著增加肺部与对照组相比),而RJFs(25.6毫克/公斤)填喂法本身没有造成重大的改变。
(一)
(b)
RJFs 12.8和25.6毫克/公斤显著增加SOD活性()(图4(一)在25.6毫克/公斤),而RJFs降低MPO活动()(图4 (b))。DXM也显著增加SOD活性和降低MPO活性。
3.6。RJFs对肿瘤坏死因子的影响α、il - 6和il - 1β生产BALF
如图5,有限合伙人显著增加TNF -α、il - 6和il - 1β生产与对照组相比),而RJFs(25.6毫克/公斤)填喂法本身没有造成重大的改变。
(一)
(b)
(c)
与车辆治疗ALI模型组相比,预处理与RJFs显著降低TNF -水平α小鼠的BALF中()(图5(一个))。RJFs在12.8和25.6毫克/公斤显著降低il - 6和il - 1的水平βBALF ()(数据5 (b)和5 (c))。DXM也显著降低TNF -α、il - 6和il - 1β生产。
3.7。RJFs对肺组织学的影响
每组的组织病理变化观察到组织化学染色)。肺组织病理学改变,如水肿,肺泡壁厚增加,炎症细胞聚集和肺出血模型组小鼠观察诱导气管内的有限合伙人。如图6在对照组,这些病变不明显刺激只有NS。预处理与RJFs明显改善肺部损伤。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
车辆治疗ALI模型组肺组织的免疫组织化学显示部分片状密集immunoperoxidase表明补充沉积。补充成批出现沉积,主要沉积在肺部组织。相比之下,在对照组小鼠小补沉积在肺部组织。预处理与RJFs显著降低补体沉积(图6)。
4所示。讨论
测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara被用作民间医药很长一段时间,主要包含二萜,类黄酮,和类固醇11- - - - - -13]。在我们之前的研究中,我们发现,类黄酮(芦丁,槲皮素、木樨草素等,isoquercetin等等)和苯基丙酸(如咖啡酸和咖啡酸乙烯酯)anticomplementary活动测试通过经典途径互补的活动,但二萜(如杯子)没有anticomplementary活动(13]。因此,RJFs准备研究,结果显示高anticomplementary展出活动。
UHPLC-Q-TOF-MS分析显示RJFs主要黄酮类化合物、萜类化合物较少,苯基丙酸。在这项研究中,我们表明,RJFs显著缓解LPS-induced阿里在老鼠身上的差别通过减少炎症介质的产生和对这些补充的水平。
有限合伙人,一个大的分子组成的脂类和多糖加入了共价键,是革兰氏阴性细菌外膜的主要组成部分,充当木糖醇,和抒发强烈的炎症和免疫反应的动物(18,19]。这是一个重要的肺损伤可诱导物用于阿里的调查20.- - - - - -22]。因此,动物模型的直接阿里是建立和使用it滴剂LPS的老鼠在我们的研究中。糖皮质激素可引起中性粒细胞和肺泡巨噬细胞,用于缓解呼吸道的临床治疗ALI / ARDS [23,24]。因此,DXM被用作积极控制评估的抗炎效率RJFs LPS-induced阿里。
在我们目前的调查,我们评估肺wet-to-dry重量比量化肺水肿的大小,这是一个典型症状的炎症和阿里的主要特点1,25,26]。这里,RJFs减少肺W / D比率,表明RJFs可以抑制浆液的泄漏进入肺组织和减弱肺水肿的发展。其他指标的上皮和内皮渗透性阿里,我们测量了BALF中总蛋白质含量(27]。正如所料,小鼠暴露于LPS BALF中蛋白质含量高,而被RJFs抑制。
没有已被证实在阿里LPS引起的病理生理学和发展,虽然它的角色在阿里的发病机制尚未明确阐明(28]。有限合伙人证明刺激伊诺的表情,没有生产过剩在许多肺细胞类型,包括肺内皮细胞、上皮细胞、巨噬细胞和中性粒细胞(29日]。在我们的实验中,RJFs降低BALF中没有的产品,这可能有助于改善炎症反应,减轻肺损伤。
氧化应激在LPS-induced阿里的发展起着重要的作用。MPO被中性粒细胞释放,这可能作为一个指数来反映激活,附着力,招募中性粒细胞在肺(30.]。中性粒细胞分泌细胞外介质中MPO,带来的积累H2O2cl和其他几个活性氧衍生品和导致氧化修饰的蛋白质或细胞结构(31日]。目前的研究表明LPS诱导的MPO活性显著增强小鼠肺实质LPS后挑战控制老鼠相比,表明一个重要招募中性粒细胞在肺实质。RJFs抑制肺实质MPO活性,并与降低BALF的中性粒细胞数量一致,表明RJFs抑制LPS-induced阿里的一种机制。SOD是一种酶,存在于细胞清除功能,其活动变化可能代表组织损伤的程度(32]。在这项研究中,RJFs增强SOD活性,表明RJFs可能有效地清除精子在LPS-induced阿里的炎症反应。
有限合伙人是诱发一些炎症和趋化细胞因子的生产。肿瘤坏死因子-α,主要源自巨噬细胞,损伤血管内皮细胞,提高渗透率,导致白细胞粘附,粒细胞脱粒,白细胞迁移到炎症的位置,和肺部病变(33,34]。促炎细胞因子TNF -α、il - 6和il - 1β出现在炎症反应的早期阶段,扮演关键角色在阿里,炎症的病理生理学和导致肺损伤的严重程度22,35]。高水平的肿瘤坏死因子-α、il - 6和il - 1βBALF中已经指出ALI / ARDS患者,和持久的促炎细胞因子在人类与阿里或脓毒症与更严重的结果[有关36]。根据BALF和血清中炎症介质的变化与LPS肺内的挑战之后在我们之前的研究中,我们选择检测BALF中炎症介质在24 h。在目前的研究中,LPS诱导的生产大量的TNF -α、il - 6和il - 1β小鼠的BALF中;RJFs降低TNF -α、il - 6和il - 1β分泌在24 h后有限合伙人的挑战。因此,RJFs可能防止LPS-induced阿里通过减少这些促炎细胞因子的生产。
肿瘤坏死因子的水平α、il - 6和il - 1β是由转录因子的激活NF -κB,免疫和炎症反应起着至关重要的作用37,38]。报道称,总类黄酮石香薷作用研究(MF)的叶子可以减弱小鼠肺部炎症LPS-induced阿里,阿里曼氏金融的保护作用可能与其抑制NF -相关κB和MAPK激活和,随后,引起显著减少炎性细胞浸润和炎性细胞因子分泌在肺组织(39]。此外,毛地黄黄酮抑制炎性介质表达通过阻断一种蛋白激酶/ NFκB通路在脂多糖引起的急性肺损伤40]。此外,木樨草素变弱的肺部炎症反应涉及能力抗氧化和抑制MAPK和NF -κB通路与endotoxin-induced小鼠急性肺损伤小鼠(41]。最重要的一部分RJFs类黄酮,因此,潜在的类黄酮素治疗急性肺损伤的机制也与NF -κB可能途径。
激活补体系统中扮演着重要角色在正常炎症反应损伤但当激活不当可能造成实质性的伤害。补系统由30多个血清和细胞蛋白质,包括积极的和消极的监管机构,联系三个生化级联,古典,替代和凝集素补充途径(42,43]。C3激活导致的最后共同通路导致膜的形成复杂的攻击(MAC, C5b-9) [44]。阿里的动物模型研究表明补充3水平的变化在阿里5]。预处理的野生型小鼠人性化眼镜蛇毒因子,它能灭活C3,多形核中性粒细胞(中性粒细胞)BAL细胞减少,减少C3沉积在肺4]。因此,补充3中扮演一个重要的角色在阿里激活补体系统。当我们发现C3-level的变化与LPS血清肺内的挑战之后,我们发现它在6小时显著增加。在这个研究中,血清中C3水平明显增加后6 h有限合伙人的挑战;24 h,然后,在肺组织部分的免疫组织化学显示overactivation沉积大量补充的补充治疗ALI模型组。RJFs显著降低补体沉积和血清中C3水平可能会导致肺损伤的衰减。我们认为补的抑制剂可能是潜在的辅助治疗LPS-induced阿里。
测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara作为传统草药几个世纪以来在中国较低的毒性(7]。在这项研究中,RJFs(25.6毫克/公斤)填喂法本身没有造成重大变化;因此,RJFs是有效的毒性较低,表明他们是一个潜在的治疗代理阿里。
5。结论
总之,RJFs减毒LPS-induced肺损伤,包括减少肺W / D比率,抑制蛋白质水平和BALF中没有生产过剩。此外,RJFs降低TNF -α、il - 6和il - 1β水平在阿里BALF老鼠。增加SOD活性和抑制肺组织中MPO活性也观察到在RJFs-pretreated阿里老鼠。组织学检查显示,RJFs显著改善肺损伤通过改善肺形态学和降低补体沉积。同时,RJFs明显降低血清中C3水平阿里老鼠。RJFs反对阿里的影响相关的抑制促炎介质的生产和减少补充的水平。
缩写
| RJ: | 测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara |
| RJFs: | 的类黄酮分数测粳稻var。glaucocalyx(箴言)。Hara |
| 有限合伙人: | 脂多糖 |
| 阿里: | 急性肺损伤 |
| BALF: | 的支气管肺泡灌洗液 |
| C3: | 补充3 |
| ELISA: | 酶联免疫吸附测定 |
| 肺W / D比率: | 肺Wet-to-Dry重量比 |
| MPO: | 髓过氧物酶 |
| SOD: | 超氧化物歧化酶 |
| BCA: | Bicinchoninic酸 |
| ARDS: | 急性呼吸窘迫综合征 |
| DXM: | 地塞米松 |
| 没有: | 一氧化氮 |
| 于: | 佛罗拿缓冲盐水 |
| 东亚峰会: | 致敏红细胞 |
| ): | 苏木精和伊红 |
| 杯子: | Glaucocalyxin一 |
| BPC: | 基地的色谱峰 |
| UHPLC-MS: | 超高效液相色谱-光谱法 |
| Q-TOF-MS: | 四极杆飞行时间串联质谱分析。 |
伦理批准
本研究获得动物伦理委员会的批准药学院在东吴大学,中国。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
作者承认中医学院的阿兰Ho先生,香港浸会大学,因为他的技术支持。这项工作是支持的经济对江苏省高校自然科学基金(没有。10 kjb350004),苏州应用基础研究项目(没有。SYS201206)和优先级的学术程序开发江苏高等教育机构(PAPD)。作者感谢香港李医生在复旦大学药理学系为她宝贵的建议来改善。